痰标本的处理
1. 中和离心法（用于改良罗氏培养剂）
根据分枝杆菌细胞壁具有抗酸、碱的性质，使用NaOH 溶液作用于痰液，外加入N-acetyl-L-cystein （NALC ）作为消化剂，促使痰标本液化，然后接种于含有抗生素的液体培养基，以抑制被检标本中非分枝杆菌属细菌的生长，从而成功分离出样品中的分枝杆菌。
1） 实验试剂
（1） NaOH-NALC 前处理液①取4gNaOH ，溶于80ml 蒸馏水，待全部溶解后加蒸馏水定容至100ml 。
②取2.9g 枸橼酸钠加入100mL 蒸馏水配置备用。
③将①及②混合后高压蒸气灭菌，保存于2℃-8℃。
NaOH-NALC 前处理液：取0.25g NALC （Sigma; 美国），加50mL ③，此溶液须24小时内用完。
（2） PBS 磷酸盐缓冲液，PH 6.8（0.067 mol/L）
称取8g NaCl，0.2gKCl ，1.44gNa 2HPO 4和0.24gKH 2PO 4，溶于980mL 蒸馏水中，用盐酸调节溶液PH 值至6.8，加蒸馏水定容至1L ，高温高压蒸气灭菌。
（3）70%酒精
（4）5%来苏
2）操作步骤
（1）吸取约5mL （不超过10mL ）痰液加入带有螺旋帽的50mL 离心管中。
（2）加入与标本等量的NaOH-NALC 前处理液（不超过10mL ），盖紧盖子。
（3）漩涡振荡20s-1min 。如果痰液仍很粘稠，可多加入一些前处理液，并重复振荡。
（4）室温静置15-20min （请勿超过20min ，以防杀死结核菌）。
（5）加入PBS （PH 6.8）至45ml ，3000 g离心15min 。弃上清。
（6）加入1ml 左右PBS （PH 6.8），以制备成1-1.5ml 的悬浊液，处理后的标本可接种至MGIT 培养管进行液体培养，同时接种L-J 中性培养基进行固体培养。
2. 简单法（用于酸性罗氏培养剂）
消化液为4%NaOH：取4gNaOH ，溶于80ml 蒸馏水，待全部溶解后加蒸馏水定容至100ml 。
处理方法：
（1） 取痰标本，视标本性状加入1~2倍体积的4%NaOH于痰瓶中，拧紧螺旋
盖，涡旋振荡器上振荡1分钟，使痰液充分匀化，室温放置：自加入NaOH 消化液起，整个处理时间应在15~20分钟。
（2） 加入PBS （PH 6.8）至45ml ，3000 g离心15min 。弃上清。
（3） 加入0.5-1ml 左右PBS （PH 6.8），以制备成1-1.5ml 的悬浊液
痰标本的处理
1. 中和离心法（用于改良罗氏培养剂）
根据分枝杆菌细胞壁具有抗酸、碱的性质，使用NaOH 溶液作用于痰液，外加入N-acetyl-L-cystein （NALC ）作为消化剂，促使痰标本液化，然后接种于含有抗生素的液体培养基，以抑制被检标本中非分枝杆菌属细菌的生长，从而成功分离出样品中的分枝杆菌。
1） 实验试剂
（1） NaOH-NALC 前处理液①取4gNaOH ，溶于80ml 蒸馏水，待全部溶解后加蒸馏水定容至100ml 。
②取2.9g 枸橼酸钠加入100mL 蒸馏水配置备用。
③将①及②混合后高压蒸气灭菌，保存于2℃-8℃。
NaOH-NALC 前处理液：取0.25g NALC （Sigma; 美国），加50mL ③，此溶液须24小时内用完。
（2） PBS 磷酸盐缓冲液，PH 6.8（0.067 mol/L）
称取8g NaCl，0.2gKCl ，1.44gNa 2HPO 4和0.24gKH 2PO 4，溶于980mL 蒸馏水中，用盐酸调节溶液PH 值至6.8，加蒸馏水定容至1L ，高温高压蒸气灭菌。
（3）70%酒精
（4）5%来苏
2）操作步骤
（1）吸取约5mL （不超过10mL ）痰液加入带有螺旋帽的50mL 离心管中。
（2）加入与标本等量的NaOH-NALC 前处理液（不超过10mL ），盖紧盖子。
（3）漩涡振荡20s-1min 。如果痰液仍很粘稠，可多加入一些前处理液，并重复振荡。
（4）室温静置15-20min （请勿超过20min ，以防杀死结核菌）。
（5）加入PBS （PH 6.8）至45ml ，3000 g离心15min 。弃上清。
（6）加入1ml 左右PBS （PH 6.8），以制备成1-1.5ml 的悬浊液，处理后的标本可接种至MGIT 培养管进行液体培养，同时接种L-J 中性培养基进行固体培养。
2. 简单法（用于酸性罗氏培养剂）
消化液为4%NaOH：取4gNaOH ，溶于80ml 蒸馏水，待全部溶解后加蒸馏水定容至100ml 。
处理方法：
（1） 取痰标本，视标本性状加入1~2倍体积的4%NaOH于痰瓶中，拧紧螺旋
盖，涡旋振荡器上振荡1分钟，使痰液充分匀化，室温放置：自加入NaOH 消化液起，整个处理时间应在15~20分钟。
（2） 加入PBS （PH 6.8）至45ml ，3000 g离心15min 。弃上清。
（3） 加入0.5-1ml 左右PBS （PH 6.8），以制备成1-1.5ml 的悬浊液