微生物量碳的测定
一、培养
新鲜采完后在冰箱4摄氏度下冷藏,最好不要超过一个月。土样过2mm筛,取70g左右的土放在白色塑料瓶内250ml,瓶口用保鲜膜包裹,并捅好几(建议5-6个)个孔,然后将塑料瓶放入培养箱中进行培养。培养箱温度需要调至18摄氏度。培养箱内每次需要加入NaOH 和水(两个400ml烧杯)每层都要放置,培养箱最下面放置水,用来吸收微生物释放的碳并且保持土样的湿润程度。
二、试剂配制:
1. 0.5M K2SO4(华大,批次很重要)
称87g试剂加入1L大烧杯中,加水至700ml,用电炉加热溶解。然后转液至用1L容量瓶定容。一个样需要称4个10g(两个熏蒸、两个未熏蒸),每个10g需要40ml。即一个样需要160ml K2SO4。用于浸提有机碳。
2.NaOH
20g左右放入500ML烧杯中,加水至500ML。比较粗糙,不需要容量瓶定容。
3.氯仿
熏蒸前半小时进行氯仿提纯,需要80ml,加入等量的蒸馏水,提纯三次。然后放入两个50ml烧杯中。烧杯中加入无水CaCl2和6-10个防暴沸珠。
4.滤纸
11cm定量滤纸,提前折好,每个样4张。
三、试验步骤
1. 熏蒸:
每个样称两个10g分别放入两个铝盒中,然后放入真空干燥箱内。同时在干燥箱内放入提纯好的氯仿和NaOH。(氯仿要放在外面)。先将抽气泵打开,关上放气阀(抽气泵的排气管需要放到窗外),再打开真空干燥箱开关。到0.08左右,氯仿沸腾,先关上真空干燥箱开关,再关抽气泵。将熏蒸好的土样分别放入小绿瓶中。
2. 未熏蒸:
每个样称两个10g,分别放入小绿瓶中。
3. 加液过滤:
用加液器在每个小绿瓶中加入40ml K2SO4。185转震荡30-40分钟,然后静止30-1小时,然后用11cm定量滤纸,过滤后如果不及时测定就放冰柜冰冻保存。
4. 测定
用TOC测定。
5. 测定含水量
培养完的土样含水量。用小铝盒放烘箱里105摄氏度,八小时。
微生物量碳的测定
一、培养
新鲜采完后在冰箱4摄氏度下冷藏,最好不要超过一个月。土样过2mm筛,取70g左右的土放在白色塑料瓶内250ml,瓶口用保鲜膜包裹,并捅好几(建议5-6个)个孔,然后将塑料瓶放入培养箱中进行培养。培养箱温度需要调至18摄氏度。培养箱内每次需要加入NaOH 和水(两个400ml烧杯)每层都要放置,培养箱最下面放置水,用来吸收微生物释放的碳并且保持土样的湿润程度。
二、试剂配制:
1. 0.5M K2SO4(华大,批次很重要)
称87g试剂加入1L大烧杯中,加水至700ml,用电炉加热溶解。然后转液至用1L容量瓶定容。一个样需要称4个10g(两个熏蒸、两个未熏蒸),每个10g需要40ml。即一个样需要160ml K2SO4。用于浸提有机碳。
2.NaOH
20g左右放入500ML烧杯中,加水至500ML。比较粗糙,不需要容量瓶定容。
3.氯仿
熏蒸前半小时进行氯仿提纯,需要80ml,加入等量的蒸馏水,提纯三次。然后放入两个50ml烧杯中。烧杯中加入无水CaCl2和6-10个防暴沸珠。
4.滤纸
11cm定量滤纸,提前折好,每个样4张。
三、试验步骤
1. 熏蒸:
每个样称两个10g分别放入两个铝盒中,然后放入真空干燥箱内。同时在干燥箱内放入提纯好的氯仿和NaOH。(氯仿要放在外面)。先将抽气泵打开,关上放气阀(抽气泵的排气管需要放到窗外),再打开真空干燥箱开关。到0.08左右,氯仿沸腾,先关上真空干燥箱开关,再关抽气泵。将熏蒸好的土样分别放入小绿瓶中。
2. 未熏蒸:
每个样称两个10g,分别放入小绿瓶中。
3. 加液过滤:
用加液器在每个小绿瓶中加入40ml K2SO4。185转震荡30-40分钟,然后静止30-1小时,然后用11cm定量滤纸,过滤后如果不及时测定就放冰柜冰冻保存。
4. 测定
用TOC测定。
5. 测定含水量
培养完的土样含水量。用小铝盒放烘箱里105摄氏度,八小时。