蛋白芯片检测系统在结核病临床诊断中的应用

中国误诊学杂志2008年9月第8卷第27期 ChinJMisdiagn,Sep2008Vol8No.276601

颤抖、瞳孔缩小、双肺湿口罗音,严重者昏迷等,全血胆碱酯酶(AchE)活力下降>50%或完全消失。

1.2 治疗方法 确认为有机磷类中毒后,立即给药并尽快洗胃,皮肤中毒者去污衣并清洗皮肤,首次足量应用胆碱酯酶复活剂和抗胆碱药。可用温水反复彻底地洗胃,不拘拟胃生理排空时间6h,在输液、导泻、利尿对症支持治疗基础上,治疗组用长托宁+氯解磷定,氯解磷定首次肌肉注射用量均先用1.5g,然后再根据病情变化追加剂量;长托宁肌肉注射:中度患者2~4mg,重度患者4~6mg。在给药0.5、1、2、4、6h后,根据病情,如中毒症状未明显消失和全血AchE活性低于50%时,可重复首次用药量的一半或酌情使用。中毒后12h如神志转清,见面部潮红,出汗、流诞停止,肌颤和肺部口罗音消失,双侧瞳孔3~5mm,全血AchE活性仍40%以下者,可再给予肌肉注射长托宁1~2mg,每12h1次,氯解磷定0.5g,中毒后24h全血AchE活性50%~60%,给予肌肉注射长托宁1mg、氯解磷定0.5g以维持长托宁化[1]。对照组应用阿托品和氯解磷定治疗,用量用法同传统用量用法。

1.3 长托宁化指标 口干、皮肤干燥和心率不低于正常或略快于正常,直到患者具备以下条件:(1)神志清醒,毒蕈碱样(M)症状、烟碱样(N)症状消失;(2)全血AchE活力恢复至≥60%;(3)停药观察24h后AchE活性仍≥60%时即为治愈,方可考虑出院[2,3]。

1.4 统计学处理 组间比较采用t检验,计量资料以-x±s表示。2 结果

两组患者治疗结果比较见表1。

-表1 两组患者治疗结果比较(x±s)

组别治疗组对照组

例数115110

(d)

4.0±2.9#8.0±5.8

(次)5.1±1.5#12.8±8.3

(min)4.1±1.96.1±1.1

(h)9±1.7#18±8.5

(h)12±8.5#26±14

综合征等现象,1例因有基础心脏疾病猝死,治愈率99.13%。对照组平均住院6~14d,12例出现反跳现象,反跳率10.91%。8例因脑水肿及呼吸衰竭或多脏器衰竭死亡,治愈率92.72%。两组患者神志转清时间、全血AchE活力恢复至60%以上的时间、中毒症状消失时间、住院时间比较,差异均有显著性(P

长托宁具有中枢和外周的抗M和抗N作用,而阿托品仅有中枢抗M作用,无明显抗N样作用,外周亦是如此。所以,长托宁能较全面地对抗外周和中枢神经系统中毒的M样和N样症状。而阿托品仅能较好地抗M样作用,对其他症状的作用较差或无明显作用,而且对M胆碱能受体亚型无选择性,导致疗效差和许多副反应同时出现。长托宁是有选择性作用的抗胆碱药物,可选择性作用于M胆碱能受体亚型M1、M3,但对M2、M4作用较弱或无明显作用,因此,不易出现心跳加快、瞳孔扩大及视力模糊等不良反应,所以较好和全面地对抗有机磷类农药中毒导致的因胆碱能亢进所致的一系列中毒症状,同时不良反应较少[4]。本资料显示长托宁具有作用快、持续时间长、用药量小、给药次数少等优点,治疗组无1例出现反跳、中间综合征、迟发性神经疾病等现象。【参考文献】

[1] 李红宇,赵淑萍.有机磷农药中毒长托宁和氯磷定的的合理应用研

究[J].中外健康文摘,2008,5(1):60-61.

[2] 南佳彦,高小雁,李惠玲,等.长托宁治疗急性有机磷农药中毒的临

床观察[J].西安交通大学学报(医学版),2006,27(6):106-108.[3] 秦丽杰.盐酸戊乙奎醚对急性有机磷农药中毒的疗效分析[J].医

学论坛杂志,2006,27(22):65.

[4] 曾繁忠.现代急性有机磷毒物中毒救治的理论与实践[M].北京:

军事医学科学出版社,2006:90-91.

收稿日期:2008-03-12;修回日期:2008-07-09  责任编辑:李新志

  注:与对照组比较,#P

  治疗组患者于住院3~7d痊愈出院,无1例出现反跳、中间

蛋白芯片检测系统在结核病临床诊断中的应用

王瑞,白广红,王敏,王西娣,陈美玲

摘要】 目的:评价结核分枝杆菌蛋白芯片对结核病的诊断价值。方法:应用结核分枝杆菌蛋白芯片法检测214例  【

结核病、54例非结核病患者血清中的结核抗体。结果:菌阳及菌阴肺结核中的阳性率分别是72.0%(54/75)和65.1%(54/83),两组之间差异无显著性(P>0.05)。肺结核及肺外结核的阳性率分别为68.4%(108/158)和60.7%(34/56),两组间差异也无显著性(P>0.05)。结论:结核分枝杆菌蛋白芯片对肺外结核和菌阴结核病有诊断价值。

【主题词】 蛋白质阵列分析;结核/诊断

【中图分类号】 R446.61    【文献标识码】 A    【文章编号】 1009-6647(2008)27-6601-02

  免疫金渗滤试验法(DIGFA)检测两种结核分支杆菌复合群(MTC)特异性抗原(38KD及LAM)抗体多见于报道[1-3]。但检测三种特异性抗原(16KD、38KD及LAM)抗体鲜见报道。本文利用蛋白芯片检测系统分别检测该三种特异性抗原相应抗

,体,评价其临床应用价值。1 对象和方法

1.1 对象 男148例,女120例,共268例。其中214例结核病患者均系本院、所住院及门诊患者。其中菌阳75例,菌阴活动性

6602中国误诊学杂志2008年9月第8卷第27期 ChinJMisdiagn,Sep2008Vol8No.27

过X线胸片检查、痰、尿、粪、胸水浅表淋巴结活检或抗酸杆菌涂片、培养检查,并经抗结核治疗3个月以上病灶有明显吸收而确诊。肺癌经细胞学或组织病理检查证实。

1.2 方法 空腹静脉血3ml,分离血清,待检。结核分枝杆菌抗体检测蛋白芯片试剂由南京大渊生物技术公司提供。批号为BPTTB01A20061201,按试剂盒说明书操作。设阳性、阴性及空白对照。结果由蛋白芯片阅读仪判读。1.3 统计学处理 SPSS软件卡方检验。2 结果

(1)结核组与非结核组的抗体检出率分别为66.4%(142/214)和3.7%(2/54),两组阳性检出率差异有显著性(P

表1 结核组与非结核组患者血清抗体检测结果

组别结核组非结核组合计

例数21454268

抗体阳性1422144

阳性率(%)

66.43.753.7

聚糖(LAM)均为结核菌特异性抗原,存在于结核杆菌复合群中。其中,脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)是结核菌细胞壁重要成分,具有较强的免疫原性。38kDa蛋白为结核菌和卡介苗的分泌抗原之一,在结核菌培养滤液中的浓度是牛分枝杆菌、BCG的10倍。16kDa蛋白抗原主要存在于结核菌的培养滤液中,目前16kDa的基因仅发现于结核分枝杆菌复合群,据此推测16kDa抗原是种特异性抗原。从理论上讲,结核分支杆菌三种特异性抗体的联合使用,可同时捕获三种特异性抗体,从而放大抗原抗体的免疫反应,提高检测的阳性率。本法用该三种特异性抗原诊断结核病的特异性96.3%,灵敏度为72.0%。据报道[4]用两种抗原诊断的灵敏度为63%,前者较后者的灵敏度高。提示三种特异性抗原联用确能提高诊断结核病的灵敏度。本法诊断肺外结核的灵敏度为57.1%。在目前肺外结核尚缺乏特异、敏感的诊断手段之时,本法不失为诊断肺外结核的首选方法。

蛋白芯片检测结核抗体是以微孔滤膜为载体,利用微阵列技术将纯化的结核菌三种抗原固定在同一膜片上,使抗原抗体反应在微孔滤膜上快速进行,从患者血清的分离到结果的分析和判定不超过5min,从而达到快速检测的目的。其与酶联免疫吸附法(ELISA)相比,特异性高、敏感性相当。且金标记物比酶稳定,冻干后可在室温下保存,优于ELISA法。因此,可用于结核病的快速诊断,特别是肺外结核及菌阴肺结核病的快速诊断。

  (2)蛋白芯片诊断菌阳肺结核及菌阴肺结核的敏感性分别为72.0%(54/75)和65.1%(54/83)。

中国误诊学杂志2008年9月第8卷第27期 ChinJMisdiagn,Sep2008Vol8No.276601

颤抖、瞳孔缩小、双肺湿口罗音,严重者昏迷等,全血胆碱酯酶(AchE)活力下降>50%或完全消失。

1.2 治疗方法 确认为有机磷类中毒后,立即给药并尽快洗胃,皮肤中毒者去污衣并清洗皮肤,首次足量应用胆碱酯酶复活剂和抗胆碱药。可用温水反复彻底地洗胃,不拘拟胃生理排空时间6h,在输液、导泻、利尿对症支持治疗基础上,治疗组用长托宁+氯解磷定,氯解磷定首次肌肉注射用量均先用1.5g,然后再根据病情变化追加剂量;长托宁肌肉注射:中度患者2~4mg,重度患者4~6mg。在给药0.5、1、2、4、6h后,根据病情,如中毒症状未明显消失和全血AchE活性低于50%时,可重复首次用药量的一半或酌情使用。中毒后12h如神志转清,见面部潮红,出汗、流诞停止,肌颤和肺部口罗音消失,双侧瞳孔3~5mm,全血AchE活性仍40%以下者,可再给予肌肉注射长托宁1~2mg,每12h1次,氯解磷定0.5g,中毒后24h全血AchE活性50%~60%,给予肌肉注射长托宁1mg、氯解磷定0.5g以维持长托宁化[1]。对照组应用阿托品和氯解磷定治疗,用量用法同传统用量用法。

1.3 长托宁化指标 口干、皮肤干燥和心率不低于正常或略快于正常,直到患者具备以下条件:(1)神志清醒,毒蕈碱样(M)症状、烟碱样(N)症状消失;(2)全血AchE活力恢复至≥60%;(3)停药观察24h后AchE活性仍≥60%时即为治愈,方可考虑出院[2,3]。

1.4 统计学处理 组间比较采用t检验,计量资料以-x±s表示。2 结果

两组患者治疗结果比较见表1。

-表1 两组患者治疗结果比较(x±s)

组别治疗组对照组

例数115110

(d)

4.0±2.9#8.0±5.8

(次)5.1±1.5#12.8±8.3

(min)4.1±1.96.1±1.1

(h)9±1.7#18±8.5

(h)12±8.5#26±14

综合征等现象,1例因有基础心脏疾病猝死,治愈率99.13%。对照组平均住院6~14d,12例出现反跳现象,反跳率10.91%。8例因脑水肿及呼吸衰竭或多脏器衰竭死亡,治愈率92.72%。两组患者神志转清时间、全血AchE活力恢复至60%以上的时间、中毒症状消失时间、住院时间比较,差异均有显著性(P

长托宁具有中枢和外周的抗M和抗N作用,而阿托品仅有中枢抗M作用,无明显抗N样作用,外周亦是如此。所以,长托宁能较全面地对抗外周和中枢神经系统中毒的M样和N样症状。而阿托品仅能较好地抗M样作用,对其他症状的作用较差或无明显作用,而且对M胆碱能受体亚型无选择性,导致疗效差和许多副反应同时出现。长托宁是有选择性作用的抗胆碱药物,可选择性作用于M胆碱能受体亚型M1、M3,但对M2、M4作用较弱或无明显作用,因此,不易出现心跳加快、瞳孔扩大及视力模糊等不良反应,所以较好和全面地对抗有机磷类农药中毒导致的因胆碱能亢进所致的一系列中毒症状,同时不良反应较少[4]。本资料显示长托宁具有作用快、持续时间长、用药量小、给药次数少等优点,治疗组无1例出现反跳、中间综合征、迟发性神经疾病等现象。【参考文献】

[1] 李红宇,赵淑萍.有机磷农药中毒长托宁和氯磷定的的合理应用研

究[J].中外健康文摘,2008,5(1):60-61.

[2] 南佳彦,高小雁,李惠玲,等.长托宁治疗急性有机磷农药中毒的临

床观察[J].西安交通大学学报(医学版),2006,27(6):106-108.[3] 秦丽杰.盐酸戊乙奎醚对急性有机磷农药中毒的疗效分析[J].医

学论坛杂志,2006,27(22):65.

[4] 曾繁忠.现代急性有机磷毒物中毒救治的理论与实践[M].北京:

军事医学科学出版社,2006:90-91.

收稿日期:2008-03-12;修回日期:2008-07-09  责任编辑:李新志

  注:与对照组比较,#P

  治疗组患者于住院3~7d痊愈出院,无1例出现反跳、中间

蛋白芯片检测系统在结核病临床诊断中的应用

王瑞,白广红,王敏,王西娣,陈美玲

摘要】 目的:评价结核分枝杆菌蛋白芯片对结核病的诊断价值。方法:应用结核分枝杆菌蛋白芯片法检测214例  【

结核病、54例非结核病患者血清中的结核抗体。结果:菌阳及菌阴肺结核中的阳性率分别是72.0%(54/75)和65.1%(54/83),两组之间差异无显著性(P>0.05)。肺结核及肺外结核的阳性率分别为68.4%(108/158)和60.7%(34/56),两组间差异也无显著性(P>0.05)。结论:结核分枝杆菌蛋白芯片对肺外结核和菌阴结核病有诊断价值。

【主题词】 蛋白质阵列分析;结核/诊断

【中图分类号】 R446.61    【文献标识码】 A    【文章编号】 1009-6647(2008)27-6601-02

  免疫金渗滤试验法(DIGFA)检测两种结核分支杆菌复合群(MTC)特异性抗原(38KD及LAM)抗体多见于报道[1-3]。但检测三种特异性抗原(16KD、38KD及LAM)抗体鲜见报道。本文利用蛋白芯片检测系统分别检测该三种特异性抗原相应抗

,体,评价其临床应用价值。1 对象和方法

1.1 对象 男148例,女120例,共268例。其中214例结核病患者均系本院、所住院及门诊患者。其中菌阳75例,菌阴活动性

6602中国误诊学杂志2008年9月第8卷第27期 ChinJMisdiagn,Sep2008Vol8No.27

过X线胸片检查、痰、尿、粪、胸水浅表淋巴结活检或抗酸杆菌涂片、培养检查,并经抗结核治疗3个月以上病灶有明显吸收而确诊。肺癌经细胞学或组织病理检查证实。

1.2 方法 空腹静脉血3ml,分离血清,待检。结核分枝杆菌抗体检测蛋白芯片试剂由南京大渊生物技术公司提供。批号为BPTTB01A20061201,按试剂盒说明书操作。设阳性、阴性及空白对照。结果由蛋白芯片阅读仪判读。1.3 统计学处理 SPSS软件卡方检验。2 结果

(1)结核组与非结核组的抗体检出率分别为66.4%(142/214)和3.7%(2/54),两组阳性检出率差异有显著性(P

表1 结核组与非结核组患者血清抗体检测结果

组别结核组非结核组合计

例数21454268

抗体阳性1422144

阳性率(%)

66.43.753.7

聚糖(LAM)均为结核菌特异性抗原,存在于结核杆菌复合群中。其中,脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)是结核菌细胞壁重要成分,具有较强的免疫原性。38kDa蛋白为结核菌和卡介苗的分泌抗原之一,在结核菌培养滤液中的浓度是牛分枝杆菌、BCG的10倍。16kDa蛋白抗原主要存在于结核菌的培养滤液中,目前16kDa的基因仅发现于结核分枝杆菌复合群,据此推测16kDa抗原是种特异性抗原。从理论上讲,结核分支杆菌三种特异性抗体的联合使用,可同时捕获三种特异性抗体,从而放大抗原抗体的免疫反应,提高检测的阳性率。本法用该三种特异性抗原诊断结核病的特异性96.3%,灵敏度为72.0%。据报道[4]用两种抗原诊断的灵敏度为63%,前者较后者的灵敏度高。提示三种特异性抗原联用确能提高诊断结核病的灵敏度。本法诊断肺外结核的灵敏度为57.1%。在目前肺外结核尚缺乏特异、敏感的诊断手段之时,本法不失为诊断肺外结核的首选方法。

蛋白芯片检测结核抗体是以微孔滤膜为载体,利用微阵列技术将纯化的结核菌三种抗原固定在同一膜片上,使抗原抗体反应在微孔滤膜上快速进行,从患者血清的分离到结果的分析和判定不超过5min,从而达到快速检测的目的。其与酶联免疫吸附法(ELISA)相比,特异性高、敏感性相当。且金标记物比酶稳定,冻干后可在室温下保存,优于ELISA法。因此,可用于结核病的快速诊断,特别是肺外结核及菌阴肺结核病的快速诊断。

  (2)蛋白芯片诊断菌阳肺结核及菌阴肺结核的敏感性分别为72.0%(54/75)和65.1%(54/83)。

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