多糖衍生化方法的比较
刚开始接触多糖研究时，那时候的感觉真的是两眼一片黑。最先面临的就是如何对糖进行衍生化。查了非常多的中外文献，发现大家的方法无论是试剂还是具体的环节都不太一样，那时候我的那个晕！所以，现在想把我做着方面的经验分享一下，也许可以帮到一些和我最初状况相像的人。
我们国内一般有以下几种衍生化方法：1、东北师大为代表的，用三甲基硅烷作为衍生化试剂。2、最常见的，以吡啶，乙酸酐为乙酰化试剂。3、先用硼氢化钠还原生成糖醇，再以吡啶、乙酸酐乙酰化。4、先用硼氢化钠还原生成糖醇，再以1-甲基咪唑、乙酸酐乙酰化。下面我就讲讲这些方法的优缺点。
第一种，使用面不大，所以如果你想拿你的数据与别人比较或参考时，会不太方便。很多文献上的衍生化方法都是乙酰化。 第二种，使用面广，乙酰化效果好，所以才常用不衰的吧。但是有个致命的缺点，就是出来的异构体多。比如Glc 用这种方法乙酰化后，就不是一个峰而是两个以上，这对定量带来了很大的干扰。还有一个缺点就是怕水，所以要在绝对无水上多花很多步骤和功夫，这会造成糖样的损失或干扰。常做实验的人都知道，实验步骤能简化就简化，越复杂的步骤越容易出岔子。
第三种，先还原成糖醇就避免了第二种方法的异构体干扰，但是由于还原的时候是带水的（硼氢化钠是水溶液），赶水的效果直接影响到乙酰化的效果。所以这方面要非常注意。
第四种，最突出的特点是可以在水溶液中将糖乙酰化而且没有异构体的干扰，定量非常方便，可以说是克服了第二种和第三种方法的缺点。既不需要反反复复的去水步骤，产生的每一种糖峰都是唯一的。定量极容易又准确。所以我觉得这个方法值得推荐。 但是，有一点要提醒大家，如果你做的糖里有明显的糖醛酸成分，那么就要慎用带还原步骤的乙酰化方法。因为糖醛酸会被还原产生对应的单糖，会对组分的定量产生干扰。
另外，还有一点体会就是，做甲基化推荐用第二种方法乙酰化。理由：先前的甲基化已经是无水环境了，正好顺水推舟；挂上了甲基，想异构体好象也不那么容易了；这种方法乙酰化效果好，对于微量的甲基化分析最适合。
以上就是我的体会总结，希望可以帮助一些人。战友们，加油！学习了，多谢！
再请教一下：
现在的乙酸酐管理很严格了，不容易买到，我想将普鲁兰多糖乙酰化，能用其他的乙酰化试剂吗？楼主能否推荐一下？我也不知道替代药品是什么。据我所知，好想没有更好的乙酰化方法。大家都为化学药品管制苦恼呢，因为后面的甲基化试剂更难买。自我感觉帖子不错，申请加分！乙酰化试剂有很多，可以尝试乙酸五氟苯酯、乙酸对硝基苯酯用用。没有见过报道，只有乙酸酐便宜。或者可以用乙酰氯，DMAc -吡啶溶剂系统。
参考文献
[Synthesis and properties of pullulan acetate. Thermal properties, biodegradability, and a semi-clear gel formation in organic solvents]
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多糖衍生化方法的比较
刚开始接触多糖研究时，那时候的感觉真的是两眼一片黑。最先面临的就是如何对糖进行衍生化。查了非常多的中外文献，发现大家的方法无论是试剂还是具体的环节都不太一样，那时候我的那个晕！所以，现在想把我做着方面的经验分享一下，也许可以帮到一些和我最初状况相像的人。
我们国内一般有以下几种衍生化方法：1、东北师大为代表的，用三甲基硅烷作为衍生化试剂。2、最常见的，以吡啶，乙酸酐为乙酰化试剂。3、先用硼氢化钠还原生成糖醇，再以吡啶、乙酸酐乙酰化。4、先用硼氢化钠还原生成糖醇，再以1-甲基咪唑、乙酸酐乙酰化。下面我就讲讲这些方法的优缺点。
第一种，使用面不大，所以如果你想拿你的数据与别人比较或参考时，会不太方便。很多文献上的衍生化方法都是乙酰化。 第二种，使用面广，乙酰化效果好，所以才常用不衰的吧。但是有个致命的缺点，就是出来的异构体多。比如Glc 用这种方法乙酰化后，就不是一个峰而是两个以上，这对定量带来了很大的干扰。还有一个缺点就是怕水，所以要在绝对无水上多花很多步骤和功夫，这会造成糖样的损失或干扰。常做实验的人都知道，实验步骤能简化就简化，越复杂的步骤越容易出岔子。
第三种，先还原成糖醇就避免了第二种方法的异构体干扰，但是由于还原的时候是带水的（硼氢化钠是水溶液），赶水的效果直接影响到乙酰化的效果。所以这方面要非常注意。
第四种，最突出的特点是可以在水溶液中将糖乙酰化而且没有异构体的干扰，定量非常方便，可以说是克服了第二种和第三种方法的缺点。既不需要反反复复的去水步骤，产生的每一种糖峰都是唯一的。定量极容易又准确。所以我觉得这个方法值得推荐。 但是，有一点要提醒大家，如果你做的糖里有明显的糖醛酸成分，那么就要慎用带还原步骤的乙酰化方法。因为糖醛酸会被还原产生对应的单糖，会对组分的定量产生干扰。
另外，还有一点体会就是，做甲基化推荐用第二种方法乙酰化。理由：先前的甲基化已经是无水环境了，正好顺水推舟；挂上了甲基，想异构体好象也不那么容易了；这种方法乙酰化效果好，对于微量的甲基化分析最适合。
以上就是我的体会总结，希望可以帮助一些人。战友们，加油！学习了，多谢！
再请教一下：
现在的乙酸酐管理很严格了，不容易买到，我想将普鲁兰多糖乙酰化，能用其他的乙酰化试剂吗？楼主能否推荐一下？我也不知道替代药品是什么。据我所知，好想没有更好的乙酰化方法。大家都为化学药品管制苦恼呢，因为后面的甲基化试剂更难买。自我感觉帖子不错，申请加分！乙酰化试剂有很多，可以尝试乙酸五氟苯酯、乙酸对硝基苯酯用用。没有见过报道，只有乙酸酐便宜。或者可以用乙酰氯，DMAc -吡啶溶剂系统。
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[Synthesis and properties of pullulan acetate. Thermal properties, biodegradability, and a semi-clear gel formation in organic solvents]
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