・药物研究－
ＤｒｕｇＲｅｓｅｏｒｃｈ
中ｌ虱绉越
ＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ
２０１２年７月５日第２１卷第１３期
Ｖ０１．２１，Ｎｏ
１３，Ｊｕｌｙ
５．２０１２
羟丙基一ｌｊｌ一环糊精包合对穿心莲内酯的增溶作用
马海涛
（浙江省绍兴市人民医院，浙江绍兴３１２０００）
摘要：目的研究羟丙基一Ｂ一环糊精（ＨＰ—Ｂ—ＣＤ）包舍对穿心莲内酯（ＡＮＤ）溶解度和溶出度的增强作用。方法以ＨＰ—Ｂ—ＣＤ为栽体，分别采用研磨法、超声波法和共沉淀法制备ＡＮＤ的ＨＰ—Ｂ—ＣＤ包合物，测定其溶出度和溶解度。并与ＡＮＤ原药、ＡＮＤ争ＨＰ—Ｂ—ＣＤ的物理混合物的溶出性能进行比较。结果ＡＮＤ与ＨＰ一１３一ＣＤ形成了包舍物．ＨＰ一１３一ＣＤ可使ＡＮＤ溶解度增加５５．４倍。结
论ＨＰ—Ｂ—ＣＤ极大地增加了ＡＮＤ的溶解度和溶出度。
关键词：穿心莲内酯；羟丙基一Ｂ一环糊精；包舍物；相溶解度；溶出度
中图分类号：ＴＱ４６１；Ｒ２８４．１；Ｒ２８２．７１
文献标识码：Ａ
文章编号：１００６—４９３１（２０１２）１３—００１０—０３
Ｃｏｍｐｌｅｘａｔｉｏｎｗｉｔｌｌ
Ｓｔｕｄｙ
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ＳｏｌｕｂｉｌｉｔｙｏｆＡｎｄｒｏｇｒａｐｈｏｌｉｄｅｂｙＩｔｓ
Ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｐｙｌ—Ｂ—Ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ
ＭａＨａｉｔａｏ
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ｇｈｅｊｉａ８９，Ｓｈａｏｘｉｎｇ，Ｚｈｅｆｉａｎｇ，Ｃｈｉｎａ
ｗａｔｅｒ
３１２０００Ｊ
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ
Ｔｈｅｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ
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ｓｏｌｕｂｌｅｄｒｕｇｋｔｈｉｓ
ａｎｄｒｏｇｒａｐｈｏｌｉｄｅ（ＡＮＤ）ｂｙｉｔｓｃｏｍｐｌｅｘａｆｉｏｎｗｉｔｈｈｙｄｒｏｘ・ＨＰ—ｐ—ＣＤ
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ｗｏｒｄ＃：ａｎｄｒｏｇｒａｐｈｏｌｉｄｅ；ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｐｙｌ—Ｂ—ｃｙｅｌｅｄｅｘｔｒｉｎ；ｉｎｃｌｕｓｉｏｎｃｏｍｐｌｅｘｅｓ；ｐｈａｓｍｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ；ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ
穿心莲内酯（ａｎｄｒｏｇｒａｐｈｏｌｉｄｅ，ＡＮＤ，Ｍｒ为３５０。４５ｇ／ｒｅｅｌ）为爵床科植物穿心莲ＡｎｄｒｏｇｒａｐｈｉｓｐａｎｉｃｕｌａｔａＮｅｅｓ中提取的二萜内酯类化合物”。Ｊ。研究证实其具有抗菌、抗病毒、增强免疫等作用，临床上广泛用于治疗上呼吸道感染、细黹性痢疾等感染性疾病”－４１。目前，ＡＮＤ主要有片剂和胶囊剂两种剂型，但因其在水中溶解度较小（２５℃时为４６．３肛ｇ／ｍＬ）【ＩＩｉ致体内的生物利用度低。本研究中毛要以羟丙基一Ｂ一环糊精（ＨＰ一１３一ＣＤ）为包合材料，用研磨法、超声法和共沉淀法制备ＡＮＤ的包合物，以提高ＡＮＤ
的溶解度和溶出度。
代度为０．６６，江苏一鸣精细化工有限公司）；ＡＮＤ（成都欧康植化科技有限公司）；乙醇（浙江杭州大方化学试剂厂）；十二烷基硫酸钠（ＳＤＳ，天津市博迪化工有限公司）；试验用水为蒸馏水。
２方法与结果
２．１
环糊精包合物及物理混合物的制备
研磨法：按物质的量之比１：１称取药物ＡＮＤ和ＨＰ—Ｂ—ＣＤ适量，加入２倍蒸馏水，将ＨＰ—Ｂ—ＣＤ磨匀，分次加入ＡＮＤ．置研钵中充分磨成糊状。于４０℃干燥，过８０目筛即得。平行制备３
份。
１仪器与试药
￥５２型紫外分光光度计（上海棱光技术有限公司）；ＲＣＺ一８Ａ型智能药物溶出仪（天津大学精密仪器厂）；ＴＨＺ—Ｃ型恒温振荡器（江苏太仓市实验设备厂）。ＨＰ—Ｂ—ＣＤ（Ｍｒ为１
４０２
４０
超声波法：在ＨＰ—Ｂ—ＣＤ饱和水溶液加入ＡＮＤ（物质的量之比ｌ：１），混合后立即超声６ｈ，用０．４５Ｉｘｍ的微孔滤膜过滤，于ａｃ干燥，过８０目筛即得。平行制备３份。
共沉淀法：按物质的量之比１：ｉ称取适量ＡＮＤ和ＨＰ～Ｂ一
ｇ／ｍｏｌ，取
，’’ｍｍｍ，＇●●＇＇＇’＇，，＇●●ｍｍ●’’，，ｍｍ●●，’’＇＇’’’＇’＇，，ｍｍ’’＇’’＇ｍ，，＇’，＇’’＇’●ｍｍｍ，’’’’ｍｍｍ，
依达拉奉注射液的含量与０ｈ相比为９５．７１％，基本能保持有效
含量；超过３ｈ后，依达拉奉注射液受光线等影响较大，含量下降
下降”１；光线、离子等的影响。根据试验结果，建议Ｉｌ缶床使用依达拉奉注射液时采用现配现用的原则。
作者简介：韦敏（１９７５一），女，副主任药师，硕士研究生，主要从事新药的临床应用监测及药物合理应用方面的研究，（电子信
箱）ｗｅｉｍｉｎｌ９７５＠１２６．ｃｏｒｎ。参考文献：
【１】韦敏，肖亿．ＲＰ—ＨＰＬＣ法刹定人血清中依这扛奉的浓度［Ｊ１．中
国药房，２００７，１８（８）：５９０—５９１．
ｆ２】陆妙．硫普罗宁注射液与常用葡萄糖注射液配伍的稳定性考察【Ｊ】．
中国医院药学杂志，２００８．２８（１５）：１
３１ｔ—ｌ３１２．
较多，已不能供临床治疗使用；在监测的８ｈ内抗生素的含量变化基本符合规定要求。
３讨论
将某种主要治疗药物与抗生素在大输液中配伍应用进行静脉滴注治疗临床疾病，是临床上常见的给药方式。了解配伍后药物的稳定性变化情况，对于指导临床合理用药、提高用药安全性具有重要意义ＩｚＩ。本试验结果表明，依达拉奉注射液与头孢他啶、头孢曲松、头孢呋辛、头孢拉定、头孢噻肟钠配伍应用＋在３ｈ内其外观、ｐＨ及含量均符合要求，配伍时间超过３ｈ对依达拉奉注射液含量影响甚大，已不能供临床治疗所用。药物含量下降的主要原因一般有：药物本身在输液中不稳定；配伍抗生素与药物发生络合等致使药物结构发生变化；输液通道的吸附造成药物含量
ＪＤ
【３】李元春，王世岭。阎兴占，等．药液终端过滤器滤膜及输液器时常用
静注药物吸附作用的试验研究【Ｊ］．中国生物医学工程学报，２０００。１９
（２）：２２８．
（收稿日期：２０１１—０９—１３）
万方数据
２０１２年７月５日第２１卷第１３期
垡！鬯丝竺竺竺！竺型竺垒２竺丝！型
中Ｉ虱茄世
・药物研究・
型兰尘尘型二：耋尘．，一！，
ＣＤ，加５ｍＬ乙醇超声使ＡＮＤ溶解．６０℃保温，慢速滴人３０ｍＬ
６０℃的ＨＰ—Ｂ—ＣＤ水溶液中，搅拌３０ｍｉｎ，室温下磁力搅拌２４
ｈ，
用０．４５ｐ．ｍ的微ｉＬ滤膜过滤，于４０℃于燥，过８０目筛即得。平行
制备３份。
物理混合物的制备：按物质的量之比Ｉ：１称取上述相同量的ＡＮＤ和ＨＰ一１３一ＣＤ在研钵中均匀混合，过８０目筛。
２．２
ＡＮＤ含量测定方法的建立
检测波长选择：精密称取ＡＮＤ７．５ｍｇ．置１０００ｍＬ容量瓶中，用１％ＳＤＳ溶解并定容，摇匀，按照紫外分光光度法在２００．
４００
ｒｉｍ波长范围内扫描。结果在２２３一波长处有最大吸收，且
ＨＰ一１３一ＣＤ不干扰ＡＮＤ的测定。故选择２２３ｎｍ为检测波长。标准曲线绘制：精密称取ＡＮＤ，以１％ＳＤＳ为溶剂配制ＡＮＤ
标准溶液．质量浓度范围为２．９４～２９．４ｐ．ｇ／ｍＬ。以Ｉ％ＳＤＳ为空白，用紫外分光光度计于２２３ｎｍ波长处测定吸光度。以穿心莲内酯的质量浓度（Ｃ，峭／ｍＬ）为纵坐标、吸收值（Ａ）为横坐标进行线
性回归，得阔归方程Ｃ＝２７．６Ａ一０．２２（砰＝０．９９９８）。
精密度试验：精密吸取标准溶液进行日内、日间分析（ｒｔ＝５）。结果日内ＲＳＤ为０．８６％，日间ＲＳＤ为０．９８％，符合精密度
小于２％的要求。
回收率试验：分别精密称取药物ＡＮＤ８．０，１０．０，１２．０ｍｇ（相当于舳％，１００％，１２０％），置１
０００
ｍＬ量瓶中，分别按比例加入
空白辅料ＨＰ一８一ＣＤ，加适量１％ＳＤＳ溶解并定容至刻度，混
匀，用０．４５Ｆｍ微孔滤膜过滤，在２２３ｎｍ波长处测定吸光度，根
据标准曲线方程计算其含量，计算平均回收率。结果８０％，１００％，１２０％的回收率分别为（１００．６２±０．９８）％，（９９．７３±
０．８１）％，（９９．４３４－１．０４）％，硒Ｄ分别为０．９８％，ｏ－８１％，１．０４％
回收率均符合麟Ｄ＜２％的要求Ｉ“。
２．３包合率测定
精密称取２．１项下制备的ＡＮＤ包合物１０哗，置１００ｍＬ量瓶中，加入ｌ％ＳＤＳ充分溶解，定容至刻度。用０．４５ｖａｎ的微孔滤膜
过滤，以１％ＳＤＳ为空白，在２２３ｎｍ波长处测定吸光度，根据标
准曲线计算ＡＮＤ含量，并计算包合率（％）＝【包合物含药量／投药量】×１００％。结果研磨法、超声法、共沉淀法所得的包合物产率分别为８９．８％，８２．４％，８４．３％。试验证明，制备工艺不同，包合物产率也不同。２．４相溶解度测定
称取２５０ｒｎｇＡＮＤ８份，分别置５０ｍＬ量瓶中．加入１０ｍＬ不
同浓度（０～５０ｍｍｏｌ／Ｌ）的ＨＰ—Ｂ—ＣＤ溶液。将悬浮液在（３７
４－
１）℃，１２０ｒ／ｒａｉｎ避光振荡７ｄ。用０．４５ｌａｍ微孔滤膜过滤，将滤液
用蒸馏水稀释，在２２３ｎｍ波长处测定紫外吸收值，计算其ＡＮＤ
溶解度。以ＨＰ—Ｂ—ＣＤ浓度为横坐标、ＡＮＤ溶解度为纵坐标绘
制相溶解度曲线，判断其包合类型，并计算其稳定常数缸。Ｋｓ＝ｓｌｏｐｅ／Ｓｏ（１一ｓ／ｏｐｅ），其中ｓｏ是ＡＮＤ在３７℃时不存在ＨＰ—Ｂ—ＣＤ时的浓度．ｓ／ｏｐｅ是斜率。此公式适用于形成１：１包合物时计算其稳定常数。ＡＮＤ：ＨＰ一１３一ＣＤ体系的相溶解度见图Ｉ。可见，在浓度０—５０ｍｍｏｌ／Ｌ范围内，ＡＮＤ的溶解度随着溶液中ｌｉｐ一１３一ｃＤ浓度的增加而增加。ＡＮＤ：ＨＰ—Ｂ—ｃＤ体系的相溶解度曲线为＿ＡＬ型”Ｉ，由稳定常数公式得稳定常数缸：ｔ为１．３４×ｆｌｙＬ／ｔｏｏｌ。
在５０ｍｍｏｌ／Ｌ的ＨＰ一１３一ＣＤ溶液中，ＡＮＤ的溶解度比在水中的
溶解度增加了５５．４倍。
２．５溶出度测定
分别称取ＡＮＤ与２．１项下各方法制得的包合物及其物理混
万方数据
穿４莲
６）
ｌｉｐ—Ｂ—ＣＤ浓度／ｒｅｔｏｏｌ・Ｌ
０
１０
２０
３０
４０
５０
图１
３７℃水中ＡＮＤ：ＨＰ—Ｂ—ＣＤ体系的相溶解度图（Ⅱ＝３）
合物．参照２００５年版《中国药典（二部）》溶出度测定方法１“，以Ｉ％ＳＤＳ溶液为介质，在（３７．０４－０．５）℃以５０ｒ／ｒａｉｎ的速度搅拌，
分别于Ｉ，２，４，６，８，１２，１６，３０ｍｉｎ时取样５ｍＬ，并及时补充等量
３７℃的Ｉ％ＳＤＳ溶液，用０．４５“ｍ微孔滤膜过滤（自取样至过滤
３０
ｓ内完成），将滤液适当稀释．用紫外分光光度法在２２３ｎｍ波
长处测定，计算ＡＮＤ的累积溶出百分率（％）＝（已溶出ＡＮＤ的量／样品中ＡＮＤ的实际含量）×１００％。结果见图２。可见，原药的溶出速率最慢，其次是物理混合物，其他各种环糊精包合物的溶出速率都要快得多，说明ＨＰ一８一ＣＤ包合可显著地增加ＡＮＤ的溶出速率。与原药和物理混合物相比，包合物的溶出速率有了大幅度提高。ＡＮＤ原药的溶出速率极慢，３０ｒａｉｎ时溶出率为５２．５％。所有的二元体系都在一定程度上提高了ＡＮＤ的溶出度，物理混合物３０ｒａｉｎ时ＡＮＤ的溶出率为５７．０％，这是因为ＨＰ—Ｂ—ＣＤ增加了ＡＮＤ的吸湿性，使其在水中的溶出速率加快。几种方法制备的ＨＰ—Ｂ—ＣＤ包合物可以极大增加ＡＮＤ的溶出速率，用研磨法、超声法和共沉淀法所制得的包合物在１％ＳＤＳ溶液中３０ｒａｉｎ时的溶出率分别为９３．９％，８３．４％和８９．４％。这３种包合方法所制得的包合物反应比较完全，大部分ＡＮＤ和ＨＰ—Ｂ—ＣＤ
已形成包合物。
—●ＡＮＤ
●一物理混合物＿。．研磨法－△一超声法
。共沉淀法
０５１０
１５２０
２５３０
图２ＡＮＤ、物理混合物及ＨＰ—Ｂ—ＣＤ包合物的溶出曲线（ｎ＝３）
通过比较包合物与ＡＮＤ及其物理混合物的溶解度和溶出度可知，ＨＰ一１３一ＣＤ极大地增加了ＡＮＤ的溶解度和溶出度，因此ＨＰ—Ｂ—ＣＤ是一种理想的包合载体，比Ｂ—ＣＤ和ＳＢＥ—Ｂ—ＣＤ
的增溶效果均好“’，利用它改善难溶性药物ＡＮＤ的溶解度是一
种行之有效的方法。参考文献：
【ｌ】Ｓａｍｙ
ＲＰ，Ｔｈｗｉｎ
ＭＭ。ＧｏｐａｌａｋｒｉｓｈｎａｋｏｎｅＰ．Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ
ａｎｄｃｌｉｎｉｃａｌ
ｕ∞ｏｆＡｎｄｒｏｇｒａｐｈｉｓｐａｎｉｃｕｌａｔａ［Ｊ］．ＮａｔＰｒｏｄＣｏｍｍｕｎ，２００７，
２：６０７—６１８．
【２】ＳｉｎｇｈａＰＫ，Ｒｏｙ
Ｓ．ＤｅｙＳ．Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅａｃｔｉｖｉｔｙ０ｆ
ａｎｄｒｏｇｒａｐｈｏｌｉｄｅ
ａｎｄ
ａｒａｂｉｎｏｇａｌａｃｔａｎｐｒｏｔｅｉｎｓｆｒｏｍＡｎｄｒｏｇｒａｐｈｉｓ
ｐａｎｉｃｕｌａｔａＮｅｅｓ．ａｇａｉｎｓｔ
ｅｔｈａｎｏｌ—ｉｎｄｕｃｅｄ
ｔｏｘｉｃｉｔｙ
ｉｎ
ｍｉｃｅ［Ｊ】．ＪＥｔｈｎｏｐｈａｎｎａｃｏｌ，２００７，１１１（１）：
１３—２ｌ
３讨论
・药物研究・
ＤｒｕｇＲｅｓｅａｒｃｈ
中目蔼堪
Ｃｈｉｎａ
２０１２年７月５日第２１卷第１３期
Ｖ０１．２１．Ｎｏ．１３．Ｊｕｈ
５．２０１２
Ｐｈａｒｍａｃｅｕ出口豇
卷柏中穗花杉双黄酮化学对照品的制备方法・
刘朋朋，刘勇，刘永刚，蔡伟。张宏桂
（北京中医药大学中药学院，北京１００１０２）
摘要：目的研究从卷柏中分离穗花杉双黄酮化学对照品的制备方法与分析技术。方法采用溶剂和色谱方法从卷柏中分离、纯化、制备穗花杉双黄酮对照品，以紫外、红外光谱、质谱、氢谱和碳谱鉴定结构，以薄层色谱法、高效液相色谱法进行纯度检查。结果制得的穗花杉双黄酮经薄层色谱法检查无杂质斑点，经高效液相色谱法检测纯度迭９８．５％以上。结论所建立的分离、纯化方法简便，成本低。
关键词：卷柏；稳花杉双黄酮；对照品
中图分类号：Ｒ２８，１；１７，２８２．７１
文献标识码：Ａ
文章编号：１００６—４９３１（２０１２）１３—００１２—０２
Ｓｅｌａｇｉｎｅｌｌａ
ＰｒｅｐａｒａｔｉｏｎＭｅｔｈｏｄｏｆＣｈｅｍｉｃａｌＲｅｆｅｒｅｎｃｅＡｍｅｎｔｏｆｌａｖｏｎｅｆｒｏｍ
Ｔａｍａｒｉｓｃｉｎａ（Ｂｅａｕｖ．）Ｓｐｒｉｎｇ
ＬｉｕＰｅｎｇｐｅｎｇ，ＬｉｕＹｏｎｇ，ＬｉｕＹｏｎｇｇａｎｇ，ＣａｉＷｅｉ，Ｚｈａｎｇ
ｌ
Ｈｏｎｇｇｕｉ
１００１０２）
ＳｅｌａｇｉｎｅＵａａｎｄ
ｃｈｒｏ．
Ｃｏｌｌｅｇｅ砖ＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｗｉＭ，ＢｅｆｊｉｎｇＵｎｉｗｒｓｉｔｙ母Ｔｒａｄａｗｎａｌ
ａｎｄａｎａｌｙｓｉｓ
Ｃｈｉｎｅｓｅ
Ｍｅｄｗｉｎｅ，Ｂｅｒｉｎｇ。Ｃｈｉｎａ
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ
Ｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄ
Ｔｈｅ
ｃｈｅｍｉｃａｌｂｙ
ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｏｆ
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ｃｈｅｍｉｃＭｒｅｆｅｒｅｎｃｅａｍｅｎｔｏｆｌａｖｏｎｅｆｒｏｍ
ａｎｄｐｕｒｉｆｉｅｄｐｕｒｉｔｙ
ｗａｓ
ｔａｍａｒｉｓｃｉｎａ（Ｂｅａｕｖ．）Ｓｐｒｉｎｇ．Ｍｅｔｈｏｄｓ
ｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，ｗｈｉｃｈ
ｓ｜ｒｕｃｌｕｒｅ
ｗａｓ
ｒｅｆｅｒｅｎｃｃａｍｅｎｔｏｆｌａｖｏｎｅｉｓｏｌａｔｅｄ
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ｓｏｌｖｅｎｔ
ｂｙ
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ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ
ｎｏ
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ｓｐｏｔ．ＴｈｅＨＰＬＣ
ｉｎｄｉｃａｔｅｓｔｈａｔ
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ａｎａｌｙｚｅｄＴＬＣ，ＨＰＬＣ．Ｒｅｓｕｌｔｓ
Ｔｈｅ
Ｔｈｅ‘Ⅱ￡ｓｈｏｗｅｓｔｈｅａｍｅｎｔｏｆｌａｖｏｎｅｈａｓｍｏｔｈｏｄ
ｉｍｐｕｒｉｔｙ
ｐｕｒｉｔｙｒｅａｃｈｅｓ９８．５％ａｂｏｖｅ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ
ｏｆｉｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｆｏｒａｍｅｎｔｏｆｌａｖｏｎｅ
ｒｅｐｏｒｔｅｄｉｎｔｈｉｓｐａｐｅｒｉｓｓｉｍｐｌｅａｎｄｅｃｏｎｏｍｉｃａｌ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｓｄａｇｉｎｅｌｌａ
ｔａｍａｒｉｓｃｉｎａ（Ｂｅａａｖ．）Ｓｐｒｉｎｇ；ｃｈｅｍｉｃａｌｒｅｆｅｒｅｎｃｅａｍｅｎｔｏｆｌａｖｏｎｅ；ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ
２方法与结果
卷柏为卷柏科植物卷柏Ｓｅｌａｇｉｎｅｌｌａｔａｍａｒｉｓｃｉｎａ（Ｂｅａｕｖ．）Ｓｐｒｉｎｇ
或垫状卷柏Ｓｅｌａｇｉｎｅｌｌａｐｕｈ，ｉｎａｔｅ（Ｈｏｏｋ．ｅｔＧｒｅｙ．）Ｍａｘｉｍ的干燥全草，具有活血通经之功效，为２０１０年版《中国药典（一部）》所收载Ｉ。Ｉ。卷柏属植物的主要化学成分为双黄酮类化合物，其次是生物碱、苯丙素类化台物等。穗花杉双黄酮（ａｍｅｎｔｏｆｌａｖｏｎｅ）为卷柏药材化学检验的对照品和质量控制的指标成分…，具有多种生理活性，如抗肿瘤、抗炎、抗菌、血管舒张等”。１。文献报道的穗花杉双黄酮制备方法是采用制备液相分离”１，成本较高，对仪器要求也较高。本研究中采用相对优化的穗花杉双黄酮制备方法，报道如下。１仪器与试药
Ａｇｉｌｅｎ一８４５３型紫外一可见分光光度计；Ａｇｉｌｅｎ
ＬＣ—ＭＳＤ
２．１提取与分离
本研究使用了中试规模的ＴＤ型中药提取装置（单批最大处
理量２０ｋｇ）提取药材。取卷柏药材５０妇，用粉碎机粉碎成直径小于１ｃｍ的颗粒，分３次装人２００Ｌ中药提取罐，每次１６．７ｋｇ。加入１６０Ｌ９５％乙醇，先浸泡１２ｈ，再在７５℃下回流提取１．５ｈ，残渣再用７０％乙醇回流提取１ｈ。提取液抽人真空浓缩罐，在５０℃、真空度０．０７ＭＰａ下回收溶剂，得到浸膏５．５奴。浸膏加少量温水
混悬后，依次分别用石油醚、乙酸乙酯萃取直至水层溶液薄层色
谱法（ＴＬＣ）基本检测不到目标物，浓缩乙酸乙酯层得萃取物。萃取
纫ｔ硅胶柱层析进行分离，乙酸乙酯萃取物用少量甲酵溶解．与等质量的１６０～２００目硅胶拌匀、５５℃烘干后分２次干法装入已
压实的层析柱（‘ｐ３０ｃｍ×３５ｃｍ的不锈钢层析柱）。经过试验筛选，
ＸＣＴ—ｐｌｕｓ质谱仪；ＢｒｕｋｅｒＡｖａｎｅｅＤＲＸ一５００型核磁共振仪；Ｘ一５型显微熔点测定仪；Ｗａｔｅｒｓ１５２５型高效液相色谱仪：Ｂｒｅｅｚｅ２色谱工作站，在线脱气机，手动进样器，Ｗａｔｅｒｓ２４８９型紫外可见检
测器；色谱柱为ＤｉａｍｏｓｉｌＣｌａ柱（２５０ｔｎｎｌ×４．６ｍｍ，５ｐｍ）；ＫＱ５００ＤＢ型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；高速万
确定洗脱剂为石油醚一乙酸乙酯一甲醇（５０：１０：１）。结合色带情况收集流分，收集液点板后合并有目标物的流分，减压回收溶剂后低温析出淡黄色沉淀，即为穗花杉双黄酮粗品。沉淀依次用适鼍脱水乙酸乙酯、甲醇超声溶解后过滤，各重复１次。经多次试验证明，丙酮为最佳鼋结晶溶剂。粗黄酮经脱水丙酮结晶、重结晶，５５℃干燥后得淡黄色穗花杉双黄酮纯品。
２．２
能粉碎机（天津泰斯特仪器有限公司）；ＴＤ低温微型提取浓缩机组ｆ瑞安天众医药化工机械公司）；‘Ｐ３０
ｃｍ×３５
ｃｍ的不锈钢层析
柱（实验室自制）。薄层色谱及柱色谱用硅胶（青岛海洋化工厂）；色谱纯甲醇（Ｃａｌｉｐｕｒｅ进１：３分装），其他所用试剂均为分析纯；卷柏药材购自河北安国中药材市场，经北京中医药大学张贵君教授
鉴定为Ｓｅｌａｇｉｎｅｌｌａｔａｍａｒｉｓｃｉｎａ（Ｂｅａｕｖ．）Ｓｐｒｉｎｇ的干燥全草。
结构鉴定
穗花杉双黄酮对照品为淡黄色晶体（丙酮），熔点为２９８～３００℃，
易溶于热甲醇、丙酮。３６５ｎｎｌ紫外灯下１０％硫酸一乙醇试液显
・国家“十一五”科技支撑计划项目，项目编号：２００９ＺＸ０９３０８—００１—１—６；国家自然科学基金资助项目，项目编号：３０８７０２６２。
【３］Ｐｏｏｌｓｕｐ
Ｎ，Ｓｕｔｈｉｓｉｓａｎｇ
Ｃ，ＰｒａｌｈａｎｔｕｒａｒｕｇＳ，Ｃｔ
ａ１．Ａｎｄｍｇｒａｐｈｉｓｐａｎｉｃｕｌａｔａ
ｔｒａｃｔ
１５１刘文薨．药物分析【Ｍ】．第５版．北京：人民卫生出版社．２００５：８０—８１．
１６
ｉｎｔｈｅｓｙｍｐｔｏｍａｔｉｃｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｕｎｃｏｍｐｌｉｃａｔｅｄｕｐｐｅｒｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙｆｅｅｌｉｏｎ：ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃｒｅｖｉｅｗｏｆ
ｉｎ—
Ｊ国家药典委员会．中华人民共和国药典（二部）【Ｍ】，北京：化学工业
出版社．２０１｝５：附录１４一附录７５．
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【４】ｌｍｒｅｔａｇｏｙｅｎａＭＩ，ＴｏｂａｒＪＡ，Ｇｏｎ２ｌｄｅｚ
ｆｅｔｅｓ
ｗｉｔｈ
Ｔ
【７】Ｄｅｌ
ＰＡ，ｅｔ
ａ１．Ａｎｄｍｇｍｐｈｏｌｉｄｅ
ｉｎｔｅｒ－
ｅｎ—
Ｖａｌｌｃ
ＥＭＭ．Ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎｓａｎｄ
ｔｈｅｉｒ∞：ａ
ｒｅｖｉｅｗ［Ｊ】．Ｐ＇ｌ＇ｏｃｅｓｓ
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ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００４。３９（９）：ｌ０３３—１０４６．
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Ｅｘｐ
ａｕｔｏｉｍｍａｎｅ１８】应国烽，陈梅莉．不同种类环糊精对穿心莲内酯的增溶效应研究【Ｊ１．
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ｏｅｐｈａｌｏｍｙｅｌｉｔｉｓｉｎｔｈｅ３６６—３７２．
ｍｏｕｓｅｌＪＪ．Ｊ
Ｐｈａｒｍａｅｏｌ
Ｔｈｅｒ．２００５，３１２（Ｉ）：
（收稿日期：２０ｌｌ一帖一２６；修回日期：２０１１—１２—１４）
万方数据
・药物研究－
ＤｒｕｇＲｅｓｅｏｒｃｈ
中ｌ虱绉越
ＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ
２０１２年７月５日第２１卷第１３期
Ｖ０１．２１，Ｎｏ
１３，Ｊｕｌｙ
５．２０１２
羟丙基一ｌｊｌ一环糊精包合对穿心莲内酯的增溶作用
马海涛
（浙江省绍兴市人民医院，浙江绍兴３１２０００）
摘要：目的研究羟丙基一Ｂ一环糊精（ＨＰ—Ｂ—ＣＤ）包舍对穿心莲内酯（ＡＮＤ）溶解度和溶出度的增强作用。方法以ＨＰ—Ｂ—ＣＤ为栽体，分别采用研磨法、超声波法和共沉淀法制备ＡＮＤ的ＨＰ—Ｂ—ＣＤ包合物，测定其溶出度和溶解度。并与ＡＮＤ原药、ＡＮＤ争ＨＰ—Ｂ—ＣＤ的物理混合物的溶出性能进行比较。结果ＡＮＤ与ＨＰ一１３一ＣＤ形成了包舍物．ＨＰ一１３一ＣＤ可使ＡＮＤ溶解度增加５５．４倍。结
论ＨＰ—Ｂ—ＣＤ极大地增加了ＡＮＤ的溶解度和溶出度。
关键词：穿心莲内酯；羟丙基一Ｂ一环糊精；包舍物；相溶解度；溶出度
中图分类号：ＴＱ４６１；Ｒ２８４．１；Ｒ２８２．７１
文献标识码：Ａ
文章编号：１００６—４９３１（２０１２）１３—００１０—０３
Ｃｏｍｐｌｅｘａｔｉｏｎｗｉｔｌｌ
Ｓｔｕｄｙ
ｏｎ
ＳｏｌｕｂｉｌｉｔｙｏｆＡｎｄｒｏｇｒａｐｈｏｌｉｄｅｂｙＩｔｓ
Ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｐｙｌ—Ｂ—Ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ
ＭａＨａｉｔａｏ
ｆＳｈａｏｘｉｎｇＰｅｏｐｌｅ’ｌＨｏｓｐｉｔａｌｍ
ｇｈｅｊｉａ８９，Ｓｈａｏｘｉｎｇ，Ｚｈｅｆｉａｎｇ，Ｃｈｉｎａ
ｗａｔｅｒ
３１２０００Ｊ
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ
Ｔｈｅｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ
ａｎｄｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ
ｏｆｐｏｏｒｌｙ
ｓｏｌｕｂｌｅｄｒｕｇｋｔｈｉｓ
ａｎｄｒｏｇｒａｐｈｏｌｉｄｅ（ＡＮＤ）ｂｙｉｔｓｃｏｍｐｌｅｘａｆｉｏｎｗｉｔｈｈｙｄｒｏｘ・ＨＰ—ｐ—ＣＤ
ｗａ８
ｙｐｍｐｙｌ—ｐ—ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｆｉｎ（ＨＰ—ｐ—ＣＤ）ｗｅｒｅｉｎｖｅｓｈｇａｔｅｄ．Ｍｅｔｈｏｄｓ
ｃｏｍｐｌｅｘｅｓｏｆＡＮＤｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｒｅｓｕｌｔ
ｗｅｒｅ
ｓｔｕｄｙ
ｕｓｅｄ
ａ８
ｓｏｔｕｂｉｌｉｚｉｎｇａｇｅｎｔ．Ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ
ｉｎｃｌｕｓｉｏｎｃｏｍｐｌｅｘｅｓ
ｗａｓ
ｐｒｅｐａｒｅｄｗｉｔｈ
ｂｙ
ｅＯ—ｇｒｏｕｎｄｉｎｇ，ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃａｎｄｅｏ—ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄ．ＴｈｅａｌｏｎｅａｎｄｔｈｅｉｒｐｈｙｓｉｃａｌＡＮＤａｎｄ
ｃａｎ
ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎｏｆＡＮＤ
ｗｉｔｈ
ａｎｄｃｏｍｐａｒｅｄ
ｔｈａｉ
ｄｒｕｇ
ｍｉｘｔｕｒｅ．Ｆｕｒｔｈｅｒ。ｂｉｎａｒｙ
１：１
ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ
ｓｙｓｔｅｍｓｏｆ
ＨＰ—Ｂ—ＣＤ．Ｒｅｓｕｌｔｓｏｆ
ＡＮＤＷｕｓｅｎｈａｎｃｅｄ
ｅｖｉｄｅｎｔｌｙ．
Ｔｈｅ
ｂｙ
ｓｈｏｗｅｄＨＰ—Ｂ—ＣＤａｎｄ
ｆｏｒｍ
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ｒａｔｅ
ｃｏｍｐｌｅｘａｎｄｔｈｅ
ｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ
５５．４ｔｉｍｅｓ．ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＫｅｙ
Ｔｈｅ
ｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ
ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎｏｆＡＮＤｗ∞ｉｎｃｒｅａｓｅｄｂｙＨＰ—Ｂ—ＣＤｉｎｃｌｕｓｉｏｎｅｏｍｐｌｅｘａｔｉｏｎ
ｗｏｒｄ＃：ａｎｄｒｏｇｒａｐｈｏｌｉｄｅ；ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｐｙｌ—Ｂ—ｃｙｅｌｅｄｅｘｔｒｉｎ；ｉｎｃｌｕｓｉｏｎｃｏｍｐｌｅｘｅｓ；ｐｈａｓｍｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ；ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ
穿心莲内酯（ａｎｄｒｏｇｒａｐｈｏｌｉｄｅ，ＡＮＤ，Ｍｒ为３５０。４５ｇ／ｒｅｅｌ）为爵床科植物穿心莲ＡｎｄｒｏｇｒａｐｈｉｓｐａｎｉｃｕｌａｔａＮｅｅｓ中提取的二萜内酯类化合物”。Ｊ。研究证实其具有抗菌、抗病毒、增强免疫等作用，临床上广泛用于治疗上呼吸道感染、细黹性痢疾等感染性疾病”－４１。目前，ＡＮＤ主要有片剂和胶囊剂两种剂型，但因其在水中溶解度较小（２５℃时为４６．３肛ｇ／ｍＬ）【ＩＩｉ致体内的生物利用度低。本研究中毛要以羟丙基一Ｂ一环糊精（ＨＰ一１３一ＣＤ）为包合材料，用研磨法、超声法和共沉淀法制备ＡＮＤ的包合物，以提高ＡＮＤ
的溶解度和溶出度。
代度为０．６６，江苏一鸣精细化工有限公司）；ＡＮＤ（成都欧康植化科技有限公司）；乙醇（浙江杭州大方化学试剂厂）；十二烷基硫酸钠（ＳＤＳ，天津市博迪化工有限公司）；试验用水为蒸馏水。
２方法与结果
２．１
环糊精包合物及物理混合物的制备
研磨法：按物质的量之比１：１称取药物ＡＮＤ和ＨＰ—Ｂ—ＣＤ适量，加入２倍蒸馏水，将ＨＰ—Ｂ—ＣＤ磨匀，分次加入ＡＮＤ．置研钵中充分磨成糊状。于４０℃干燥，过８０目筛即得。平行制备３
份。
１仪器与试药
￥５２型紫外分光光度计（上海棱光技术有限公司）；ＲＣＺ一８Ａ型智能药物溶出仪（天津大学精密仪器厂）；ＴＨＺ—Ｃ型恒温振荡器（江苏太仓市实验设备厂）。ＨＰ—Ｂ—ＣＤ（Ｍｒ为１
４０２
４０
超声波法：在ＨＰ—Ｂ—ＣＤ饱和水溶液加入ＡＮＤ（物质的量之比ｌ：１），混合后立即超声６ｈ，用０．４５Ｉｘｍ的微孔滤膜过滤，于ａｃ干燥，过８０目筛即得。平行制备３份。
共沉淀法：按物质的量之比１：ｉ称取适量ＡＮＤ和ＨＰ～Ｂ一
ｇ／ｍｏｌ，取
，’’ｍｍｍ，＇●●＇＇＇’＇，，＇●●ｍｍ●’’，，ｍｍ●●，’’＇＇’’’＇’＇，，ｍｍ’’＇’’＇ｍ，，＇’，＇’’＇’●ｍｍｍ，’’’’ｍｍｍ，
依达拉奉注射液的含量与０ｈ相比为９５．７１％，基本能保持有效
含量；超过３ｈ后，依达拉奉注射液受光线等影响较大，含量下降
下降”１；光线、离子等的影响。根据试验结果，建议Ｉｌ缶床使用依达拉奉注射液时采用现配现用的原则。
作者简介：韦敏（１９７５一），女，副主任药师，硕士研究生，主要从事新药的临床应用监测及药物合理应用方面的研究，（电子信
箱）ｗｅｉｍｉｎｌ９７５＠１２６．ｃｏｒｎ。参考文献：
【１】韦敏，肖亿．ＲＰ—ＨＰＬＣ法刹定人血清中依这扛奉的浓度［Ｊ１．中
国药房，２００７，１８（８）：５９０—５９１．
ｆ２】陆妙．硫普罗宁注射液与常用葡萄糖注射液配伍的稳定性考察【Ｊ】．
中国医院药学杂志，２００８．２８（１５）：１
３１ｔ—ｌ３１２．
较多，已不能供临床治疗使用；在监测的８ｈ内抗生素的含量变化基本符合规定要求。
３讨论
将某种主要治疗药物与抗生素在大输液中配伍应用进行静脉滴注治疗临床疾病，是临床上常见的给药方式。了解配伍后药物的稳定性变化情况，对于指导临床合理用药、提高用药安全性具有重要意义ＩｚＩ。本试验结果表明，依达拉奉注射液与头孢他啶、头孢曲松、头孢呋辛、头孢拉定、头孢噻肟钠配伍应用＋在３ｈ内其外观、ｐＨ及含量均符合要求，配伍时间超过３ｈ对依达拉奉注射液含量影响甚大，已不能供临床治疗所用。药物含量下降的主要原因一般有：药物本身在输液中不稳定；配伍抗生素与药物发生络合等致使药物结构发生变化；输液通道的吸附造成药物含量
ＪＤ
【３】李元春，王世岭。阎兴占，等．药液终端过滤器滤膜及输液器时常用
静注药物吸附作用的试验研究【Ｊ］．中国生物医学工程学报，２０００。１９
（２）：２２８．
（收稿日期：２０１１—０９—１３）
万方数据
２０１２年７月５日第２１卷第１３期
垡！鬯丝竺竺竺！竺型竺垒２竺丝！型
中Ｉ虱茄世
・药物研究・
型兰尘尘型二：耋尘．，一！，
ＣＤ，加５ｍＬ乙醇超声使ＡＮＤ溶解．６０℃保温，慢速滴人３０ｍＬ
６０℃的ＨＰ—Ｂ—ＣＤ水溶液中，搅拌３０ｍｉｎ，室温下磁力搅拌２４
ｈ，
用０．４５ｐ．ｍ的微ｉＬ滤膜过滤，于４０℃于燥，过８０目筛即得。平行
制备３份。
物理混合物的制备：按物质的量之比Ｉ：１称取上述相同量的ＡＮＤ和ＨＰ一１３一ＣＤ在研钵中均匀混合，过８０目筛。
２．２
ＡＮＤ含量测定方法的建立
检测波长选择：精密称取ＡＮＤ７．５ｍｇ．置１０００ｍＬ容量瓶中，用１％ＳＤＳ溶解并定容，摇匀，按照紫外分光光度法在２００．
４００
ｒｉｍ波长范围内扫描。结果在２２３一波长处有最大吸收，且
ＨＰ一１３一ＣＤ不干扰ＡＮＤ的测定。故选择２２３ｎｍ为检测波长。标准曲线绘制：精密称取ＡＮＤ，以１％ＳＤＳ为溶剂配制ＡＮＤ
标准溶液．质量浓度范围为２．９４～２９．４ｐ．ｇ／ｍＬ。以Ｉ％ＳＤＳ为空白，用紫外分光光度计于２２３ｎｍ波长处测定吸光度。以穿心莲内酯的质量浓度（Ｃ，峭／ｍＬ）为纵坐标、吸收值（Ａ）为横坐标进行线
性回归，得阔归方程Ｃ＝２７．６Ａ一０．２２（砰＝０．９９９８）。
精密度试验：精密吸取标准溶液进行日内、日间分析（ｒｔ＝５）。结果日内ＲＳＤ为０．８６％，日间ＲＳＤ为０．９８％，符合精密度
小于２％的要求。
回收率试验：分别精密称取药物ＡＮＤ８．０，１０．０，１２．０ｍｇ（相当于舳％，１００％，１２０％），置１
０００
ｍＬ量瓶中，分别按比例加入
空白辅料ＨＰ一８一ＣＤ，加适量１％ＳＤＳ溶解并定容至刻度，混
匀，用０．４５Ｆｍ微孔滤膜过滤，在２２３ｎｍ波长处测定吸光度，根
据标准曲线方程计算其含量，计算平均回收率。结果８０％，１００％，１２０％的回收率分别为（１００．６２±０．９８）％，（９９．７３±
０．８１）％，（９９．４３４－１．０４）％，硒Ｄ分别为０．９８％，ｏ－８１％，１．０４％
回收率均符合麟Ｄ＜２％的要求Ｉ“。
２．３包合率测定
精密称取２．１项下制备的ＡＮＤ包合物１０哗，置１００ｍＬ量瓶中，加入ｌ％ＳＤＳ充分溶解，定容至刻度。用０．４５ｖａｎ的微孔滤膜
过滤，以１％ＳＤＳ为空白，在２２３ｎｍ波长处测定吸光度，根据标
准曲线计算ＡＮＤ含量，并计算包合率（％）＝【包合物含药量／投药量】×１００％。结果研磨法、超声法、共沉淀法所得的包合物产率分别为８９．８％，８２．４％，８４．３％。试验证明，制备工艺不同，包合物产率也不同。２．４相溶解度测定
称取２５０ｒｎｇＡＮＤ８份，分别置５０ｍＬ量瓶中．加入１０ｍＬ不
同浓度（０～５０ｍｍｏｌ／Ｌ）的ＨＰ—Ｂ—ＣＤ溶液。将悬浮液在（３７
４－
１）℃，１２０ｒ／ｒａｉｎ避光振荡７ｄ。用０．４５ｌａｍ微孔滤膜过滤，将滤液
用蒸馏水稀释，在２２３ｎｍ波长处测定紫外吸收值，计算其ＡＮＤ
溶解度。以ＨＰ—Ｂ—ＣＤ浓度为横坐标、ＡＮＤ溶解度为纵坐标绘
制相溶解度曲线，判断其包合类型，并计算其稳定常数缸。Ｋｓ＝ｓｌｏｐｅ／Ｓｏ（１一ｓ／ｏｐｅ），其中ｓｏ是ＡＮＤ在３７℃时不存在ＨＰ—Ｂ—ＣＤ时的浓度．ｓ／ｏｐｅ是斜率。此公式适用于形成１：１包合物时计算其稳定常数。ＡＮＤ：ＨＰ一１３一ＣＤ体系的相溶解度见图Ｉ。可见，在浓度０—５０ｍｍｏｌ／Ｌ范围内，ＡＮＤ的溶解度随着溶液中ｌｉｐ一１３一ｃＤ浓度的增加而增加。ＡＮＤ：ＨＰ—Ｂ—ｃＤ体系的相溶解度曲线为＿ＡＬ型”Ｉ，由稳定常数公式得稳定常数缸：ｔ为１．３４×ｆｌｙＬ／ｔｏｏｌ。
在５０ｍｍｏｌ／Ｌ的ＨＰ一１３一ＣＤ溶液中，ＡＮＤ的溶解度比在水中的
溶解度增加了５５．４倍。
２．５溶出度测定
分别称取ＡＮＤ与２．１项下各方法制得的包合物及其物理混
万方数据
穿４莲
６）
ｌｉｐ—Ｂ—ＣＤ浓度／ｒｅｔｏｏｌ・Ｌ
０
１０
２０
３０
４０
５０
图１
３７℃水中ＡＮＤ：ＨＰ—Ｂ—ＣＤ体系的相溶解度图（Ⅱ＝３）
合物．参照２００５年版《中国药典（二部）》溶出度测定方法１“，以Ｉ％ＳＤＳ溶液为介质，在（３７．０４－０．５）℃以５０ｒ／ｒａｉｎ的速度搅拌，
分别于Ｉ，２，４，６，８，１２，１６，３０ｍｉｎ时取样５ｍＬ，并及时补充等量
３７℃的Ｉ％ＳＤＳ溶液，用０．４５“ｍ微孔滤膜过滤（自取样至过滤
３０
ｓ内完成），将滤液适当稀释．用紫外分光光度法在２２３ｎｍ波
长处测定，计算ＡＮＤ的累积溶出百分率（％）＝（已溶出ＡＮＤ的量／样品中ＡＮＤ的实际含量）×１００％。结果见图２。可见，原药的溶出速率最慢，其次是物理混合物，其他各种环糊精包合物的溶出速率都要快得多，说明ＨＰ一８一ＣＤ包合可显著地增加ＡＮＤ的溶出速率。与原药和物理混合物相比，包合物的溶出速率有了大幅度提高。ＡＮＤ原药的溶出速率极慢，３０ｒａｉｎ时溶出率为５２．５％。所有的二元体系都在一定程度上提高了ＡＮＤ的溶出度，物理混合物３０ｒａｉｎ时ＡＮＤ的溶出率为５７．０％，这是因为ＨＰ—Ｂ—ＣＤ增加了ＡＮＤ的吸湿性，使其在水中的溶出速率加快。几种方法制备的ＨＰ—Ｂ—ＣＤ包合物可以极大增加ＡＮＤ的溶出速率，用研磨法、超声法和共沉淀法所制得的包合物在１％ＳＤＳ溶液中３０ｒａｉｎ时的溶出率分别为９３．９％，８３．４％和８９．４％。这３种包合方法所制得的包合物反应比较完全，大部分ＡＮＤ和ＨＰ—Ｂ—ＣＤ
已形成包合物。
—●ＡＮＤ
●一物理混合物＿。．研磨法－△一超声法
。共沉淀法
０５１０
１５２０
２５３０
图２ＡＮＤ、物理混合物及ＨＰ—Ｂ—ＣＤ包合物的溶出曲线（ｎ＝３）
通过比较包合物与ＡＮＤ及其物理混合物的溶解度和溶出度可知，ＨＰ一１３一ＣＤ极大地增加了ＡＮＤ的溶解度和溶出度，因此ＨＰ—Ｂ—ＣＤ是一种理想的包合载体，比Ｂ—ＣＤ和ＳＢＥ—Ｂ—ＣＤ
的增溶效果均好“’，利用它改善难溶性药物ＡＮＤ的溶解度是一
种行之有效的方法。参考文献：
【ｌ】Ｓａｍｙ
ＲＰ，Ｔｈｗｉｎ
ＭＭ。ＧｏｐａｌａｋｒｉｓｈｎａｋｏｎｅＰ．Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ
ａｎｄｃｌｉｎｉｃａｌ
ｕ∞ｏｆＡｎｄｒｏｇｒａｐｈｉｓｐａｎｉｃｕｌａｔａ［Ｊ］．ＮａｔＰｒｏｄＣｏｍｍｕｎ，２００７，
２：６０７—６１８．
【２】ＳｉｎｇｈａＰＫ，Ｒｏｙ
Ｓ．ＤｅｙＳ．Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅａｃｔｉｖｉｔｙ０ｆ
ａｎｄｒｏｇｒａｐｈｏｌｉｄｅ
ａｎｄ
ａｒａｂｉｎｏｇａｌａｃｔａｎｐｒｏｔｅｉｎｓｆｒｏｍＡｎｄｒｏｇｒａｐｈｉｓ
ｐａｎｉｃｕｌａｔａＮｅｅｓ．ａｇａｉｎｓｔ
ｅｔｈａｎｏｌ—ｉｎｄｕｃｅｄ
ｔｏｘｉｃｉｔｙ
ｉｎ
ｍｉｃｅ［Ｊ】．ＪＥｔｈｎｏｐｈａｎｎａｃｏｌ，２００７，１１１（１）：
１３—２ｌ
３讨论
・药物研究・
ＤｒｕｇＲｅｓｅａｒｃｈ
中目蔼堪
Ｃｈｉｎａ
２０１２年７月５日第２１卷第１３期
Ｖ０１．２１．Ｎｏ．１３．Ｊｕｈ
５．２０１２
Ｐｈａｒｍａｃｅｕ出口豇
卷柏中穗花杉双黄酮化学对照品的制备方法・
刘朋朋，刘勇，刘永刚，蔡伟。张宏桂
（北京中医药大学中药学院，北京１００１０２）
摘要：目的研究从卷柏中分离穗花杉双黄酮化学对照品的制备方法与分析技术。方法采用溶剂和色谱方法从卷柏中分离、纯化、制备穗花杉双黄酮对照品，以紫外、红外光谱、质谱、氢谱和碳谱鉴定结构，以薄层色谱法、高效液相色谱法进行纯度检查。结果制得的穗花杉双黄酮经薄层色谱法检查无杂质斑点，经高效液相色谱法检测纯度迭９８．５％以上。结论所建立的分离、纯化方法简便，成本低。
关键词：卷柏；稳花杉双黄酮；对照品
中图分类号：Ｒ２８，１；１７，２８２．７１
文献标识码：Ａ
文章编号：１００６—４９３１（２０１２）１３—００１２—０２
Ｓｅｌａｇｉｎｅｌｌａ
ＰｒｅｐａｒａｔｉｏｎＭｅｔｈｏｄｏｆＣｈｅｍｉｃａｌＲｅｆｅｒｅｎｃｅＡｍｅｎｔｏｆｌａｖｏｎｅｆｒｏｍ
Ｔａｍａｒｉｓｃｉｎａ（Ｂｅａｕｖ．）Ｓｐｒｉｎｇ
ＬｉｕＰｅｎｇｐｅｎｇ，ＬｉｕＹｏｎｇ，ＬｉｕＹｏｎｇｇａｎｇ，ＣａｉＷｅｉ，Ｚｈａｎｇ
ｌ
Ｈｏｎｇｇｕｉ
１００１０２）
ＳｅｌａｇｉｎｅＵａａｎｄ
ｃｈｒｏ．
Ｃｏｌｌｅｇｅ砖ＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｗｉＭ，ＢｅｆｊｉｎｇＵｎｉｗｒｓｉｔｙ母Ｔｒａｄａｗｎａｌ
ａｎｄａｎａｌｙｓｉｓ
Ｃｈｉｎｅｓｅ
Ｍｅｄｗｉｎｅ，Ｂｅｒｉｎｇ。Ｃｈｉｎａ
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ
Ｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄ
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ｃｈｅｍｉｃａｌｂｙ
ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｏｆ
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ｃｈｅｍｉｃＭｒｅｆｅｒｅｎｃｅａｍｅｎｔｏｆｌａｖｏｎｅｆｒｏｍ
ａｎｄｐｕｒｉｆｉｅｄｐｕｒｉｔｙ
ｗａｓ
ｔａｍａｒｉｓｃｉｎａ（Ｂｅａｕｖ．）Ｓｐｒｉｎｇ．Ｍｅｔｈｏｄｓ
ｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，ｗｈｉｃｈ
ｓ｜ｒｕｃｌｕｒｅ
ｗａｓ
ｒｅｆｅｒｅｎｃｃａｍｅｎｔｏｆｌａｖｏｎｅｉｓｏｌａｔｅｄ
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ｏｆｉｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｆｏｒａｍｅｎｔｏｆｌａｖｏｎｅ
ｒｅｐｏｒｔｅｄｉｎｔｈｉｓｐａｐｅｒｉｓｓｉｍｐｌｅａｎｄｅｃｏｎｏｍｉｃａｌ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｓｄａｇｉｎｅｌｌａ
ｔａｍａｒｉｓｃｉｎａ（Ｂｅａａｖ．）Ｓｐｒｉｎｇ；ｃｈｅｍｉｃａｌｒｅｆｅｒｅｎｃｅａｍｅｎｔｏｆｌａｖｏｎｅ；ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ
２方法与结果
卷柏为卷柏科植物卷柏Ｓｅｌａｇｉｎｅｌｌａｔａｍａｒｉｓｃｉｎａ（Ｂｅａｕｖ．）Ｓｐｒｉｎｇ
或垫状卷柏Ｓｅｌａｇｉｎｅｌｌａｐｕｈ，ｉｎａｔｅ（Ｈｏｏｋ．ｅｔＧｒｅｙ．）Ｍａｘｉｍ的干燥全草，具有活血通经之功效，为２０１０年版《中国药典（一部）》所收载Ｉ。Ｉ。卷柏属植物的主要化学成分为双黄酮类化合物，其次是生物碱、苯丙素类化台物等。穗花杉双黄酮（ａｍｅｎｔｏｆｌａｖｏｎｅ）为卷柏药材化学检验的对照品和质量控制的指标成分…，具有多种生理活性，如抗肿瘤、抗炎、抗菌、血管舒张等”。１。文献报道的穗花杉双黄酮制备方法是采用制备液相分离”１，成本较高，对仪器要求也较高。本研究中采用相对优化的穗花杉双黄酮制备方法，报道如下。１仪器与试药
Ａｇｉｌｅｎ一８４５３型紫外一可见分光光度计；Ａｇｉｌｅｎ
ＬＣ—ＭＳＤ
２．１提取与分离
本研究使用了中试规模的ＴＤ型中药提取装置（单批最大处
理量２０ｋｇ）提取药材。取卷柏药材５０妇，用粉碎机粉碎成直径小于１ｃｍ的颗粒，分３次装人２００Ｌ中药提取罐，每次１６．７ｋｇ。加入１６０Ｌ９５％乙醇，先浸泡１２ｈ，再在７５℃下回流提取１．５ｈ，残渣再用７０％乙醇回流提取１ｈ。提取液抽人真空浓缩罐，在５０℃、真空度０．０７ＭＰａ下回收溶剂，得到浸膏５．５奴。浸膏加少量温水
混悬后，依次分别用石油醚、乙酸乙酯萃取直至水层溶液薄层色
谱法（ＴＬＣ）基本检测不到目标物，浓缩乙酸乙酯层得萃取物。萃取
纫ｔ硅胶柱层析进行分离，乙酸乙酯萃取物用少量甲酵溶解．与等质量的１６０～２００目硅胶拌匀、５５℃烘干后分２次干法装入已
压实的层析柱（‘ｐ３０ｃｍ×３５ｃｍ的不锈钢层析柱）。经过试验筛选，
ＸＣＴ—ｐｌｕｓ质谱仪；ＢｒｕｋｅｒＡｖａｎｅｅＤＲＸ一５００型核磁共振仪；Ｘ一５型显微熔点测定仪；Ｗａｔｅｒｓ１５２５型高效液相色谱仪：Ｂｒｅｅｚｅ２色谱工作站，在线脱气机，手动进样器，Ｗａｔｅｒｓ２４８９型紫外可见检
测器；色谱柱为ＤｉａｍｏｓｉｌＣｌａ柱（２５０ｔｎｎｌ×４．６ｍｍ，５ｐｍ）；ＫＱ５００ＤＢ型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；高速万
确定洗脱剂为石油醚一乙酸乙酯一甲醇（５０：１０：１）。结合色带情况收集流分，收集液点板后合并有目标物的流分，减压回收溶剂后低温析出淡黄色沉淀，即为穗花杉双黄酮粗品。沉淀依次用适鼍脱水乙酸乙酯、甲醇超声溶解后过滤，各重复１次。经多次试验证明，丙酮为最佳鼋结晶溶剂。粗黄酮经脱水丙酮结晶、重结晶，５５℃干燥后得淡黄色穗花杉双黄酮纯品。
２．２
能粉碎机（天津泰斯特仪器有限公司）；ＴＤ低温微型提取浓缩机组ｆ瑞安天众医药化工机械公司）；‘Ｐ３０
ｃｍ×３５
ｃｍ的不锈钢层析
柱（实验室自制）。薄层色谱及柱色谱用硅胶（青岛海洋化工厂）；色谱纯甲醇（Ｃａｌｉｐｕｒｅ进１：３分装），其他所用试剂均为分析纯；卷柏药材购自河北安国中药材市场，经北京中医药大学张贵君教授
鉴定为Ｓｅｌａｇｉｎｅｌｌａｔａｍａｒｉｓｃｉｎａ（Ｂｅａｕｖ．）Ｓｐｒｉｎｇ的干燥全草。
结构鉴定
穗花杉双黄酮对照品为淡黄色晶体（丙酮），熔点为２９８～３００℃，
易溶于热甲醇、丙酮。３６５ｎｎｌ紫外灯下１０％硫酸一乙醇试液显
・国家“十一五”科技支撑计划项目，项目编号：２００９ＺＸ０９３０８—００１—１—６；国家自然科学基金资助项目，项目编号：３０８７０２６２。
【３］Ｐｏｏｌｓｕｐ
Ｎ，Ｓｕｔｈｉｓｉｓａｎｇ
Ｃ，ＰｒａｌｈａｎｔｕｒａｒｕｇＳ，Ｃｔ
ａ１．Ａｎｄｍｇｒａｐｈｉｓｐａｎｉｃｕｌａｔａ
ｔｒａｃｔ
１５１刘文薨．药物分析【Ｍ】．第５版．北京：人民卫生出版社．２００５：８０—８１．
１６
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ｆｅｔｅｓ
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Ｔ
【７】Ｄｅｌ
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Ｖａｌｌｃ
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Ｅｘｐ
ａｕｔｏｉｍｍａｎｅ１８】应国烽，陈梅莉．不同种类环糊精对穿心莲内酯的增溶效应研究【Ｊ１．
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ｍｏｕｓｅｌＪＪ．Ｊ
Ｐｈａｒｍａｅｏｌ
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（收稿日期：２０ｌｌ一帖一２６；修回日期：２０１１—１２—１４）
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