嗜热链球菌部分生物学特性研究

・・４２

中国奶牛・２００７年第８期

嗜热链球菌部分生物学特性研究

陈芳，靳亚平

（西北农林科技大学动物科技学院，杨陵７１２１００）

中图分类号：Ｑ９３９．１１＋７

文献标识码：Ｂ

文章编号：１００４－４２６４（２００７）０８－００４２－０２

摘要：对嗜热链球菌采用六种不同培养基、不同培养温度（３７℃、４２℃、４５℃）和培养基不同酸碱度（ｐＨ６．５、ｐＨ６．８、

ｐＨ７．０）进行培养，对其在不同条件下的生长状态进行了研究，得出嗜热链球菌的最佳培养温度为４２℃，最适酸碱度

为ｐＨ６．８，最佳培养基为乳酸菌培养基。关键词：嗜热链球菌；温度；酸碱度；营养物质

嗜热链球菌（Ｓ．ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ，Ｓ．ｔ）作为一种对人体有明显食疗作用的有益菌，它的开发利用一直得到国内外乳品界的高度重视。嗜热链球菌不但是一种很好的发酵剂，也是微生物法检测牛奶中抗生素残留的常用菌种之一。本文就嗜热链球菌的部分生物学特性进行了试验研究，以期为实际应用中嗜热链球菌的保存和传代提供参考。

原料：蛋白胨、蔗糖、酵母膏、葡萄糖、琼脂、ＮａＣｌ，

ＫＨ２ＰＯ４和吐温－８０等均为市售，西红柿汁为自制。１．２

仪器与设备

恒温培养箱（上海跃进医疗器械厂生产，型号：ＰＹＸ－

ＤＨＳ－３５×４０），冰箱，高压蒸气灭菌锅（上海医用仪器生

产厂生产），超净工作台，显微镜，酸度计等。

１材料与方法１．１材料

菌种：嗜热链球菌为西北农林科技大学动物科技学院家畜生殖内分泌实验室分离保存。收稿日期：２００７－０３－２９

作者简介：陈芳（１９６７－），女，陕西乾县人，硕士研究生。

通讯作者：靳亚平（１９６６－），男，陕西宝鸡人，教授，博士生导师，主要从

事家畜生殖内分泌学研究。

１．３方法

１．３．１不同培养基的制备１．３．１．１乳清培养基的制备

配方：乳清５００ｍＬ，蒸馏水５００ｍＬ，胰蛋白胨５ｇ，葡萄糖１ｇ，酵母膏２．５ｇ，琼脂粉２０ｇ，ｐＨ６．５［１］。

乳清的制备：新鲜牛奶１Ｌ加热至沸腾，冷却后加入１２ｍｏｌ／Ｌ的ＨＣｌ少许，边加入边搅拌，直到牛奶凝结成絮状，过滤后即得乳清，再用１２ｍｏｌ／Ｌ的ＮａＯＨ调ｐＨ至６．５即可。培养基制备方法按文献［２］进行。

饲料；饲养工具要专用；做好消毒工作，每周更换一种消毒液，对牛舍环境进行消毒，一天一次，一周后改为每周一次即可；对被污染的粪尿及病死牛作无害化处理，以防止疾病继续传播。

此，从心、肝、肺分离的细菌均为Ｄ型。

４小结

４．１本次临产母牛突然发病和死亡，从新鲜病料中分

离到魏氏梭菌强毒株，确定魏氏梭菌为牛猝死的病原。

４．２该菌不仅侵害肠道，而且侵害实质器官，细菌繁

殖产生毒素引起动物死亡，一般药物和抗生素不能中和毒素，因此没有治疗效果，所以应以预防为主。

４．３魏氏梭菌广泛存在于自然界以及正常的动物肠道

中，普遍认为过多的精饲料（即高蛋白、过多淀粉）是引起本病的主要诱因之一。

５防治措施建议

５．１采取紧急措施防止疾病传播，加强牛的饲养管理，

立即更换饲料，搞好环境卫生，饲槽内剩料要及时清理；做好紧急灭鼠工作；发现病牛立即隔离治疗；注意饲料饮水卫生等，不喂发霉、变质、污染、有毒和刺激性大的

５．２治疗

５．２．１马上对牛群进行疫苗的紧急免疫接种，皮下注射５ｍＬ，注射后２周可产生免疫力。

５．２．２对初生２４ｈ内的犊牛肌肉注射１０％氟苯尼考注射液，每次２ｍＬ，连续使用３ｄ。

５．２．３对已发病的牛口服喹乙醇，２ｇ／ｋｇ体重，２次／ｄ，连用４ｄ，同时肌肉注射１０％氟苯尼考２ｍＬ，连用４ｄ，同

时注射破伤风抗毒素。

参考文献

［１］廖延雄．兽医微生物实验诊断手册［Ｍ］，北京：中国农业出版

社，１９９５，３９５－３９８．□

中国奶牛・２００７年第８期

・４３・

１．３．１．２

Ｅｌｌｉｋｅｒ琼脂培养基的制备

配方：胰蛋白胨２０ｇ，蔗糖５ｇ，酵母提取物５ｇ，ＮａＣｌ４ｇ，明胶２．５ｇ，乙酸钠１．５ｇ，葡萄糖５ｇ，抗坏血酸０．５ｇ，乳糖

５ｇ，琼脂１５ｇ，蒸馏水１Ｌ；ｐＨ６．８。制备方法按文献［２］进行。１．３．１．３

改良ＩＲＩＥ培养基

配方（％）：胰胨０．５，酵母膏０．２５，乳糖１，琥珀酸钠

１，ＫＨ２ＰＯ４０．２，Ｋ２ＨＰＯ４０．２，琼脂１．５，加蒸馏水至１００；ｐＨ６．８［３］。制备方法同上。

１．３．１．４改良Ｍ１７琼脂培养基

配方［４］：胰蛋白胨５ｇ，鱼蛋白胨５ｇ，牛肉膏５ｇ，酵母浸膏２．５ｇ，抗坏血酸０．５ｇ，硫酸镁０．２５ｇ，甘油１０ｇ，乳糖３ｇ，ＫＨ２ＰＯ４０．２ｇ，Ｋ２ＨＰＯ４０．５ｇ，琼脂１１ｇ，蒸馏水

１０００ｍＬ；ｐＨ６．８。制备方法同上。１．３．１．５

Ｓ培养基

配方（％）：牛肉浸膏０．５，酵母浸膏０．２５，蔗糖２．５，维生素Ｃ０．２，乳清６．０，柠檬酸三铵０．４，七水磷酸镁０．０１，琼脂１．５，加蒸馏水至１００；ｐＨ７．０。

制备方法同上［５］。１．３．１．６乳酸菌培养基

配方：酵母膏７．５ｇ，蛋白胨７．５ｇ，葡萄糖１０ｇ，

ＫＨ２ＰＯ４２ｇ，西红柿汁１００ｍＬ，吐温－８００．５ｍＬ，蒸馏水９００ｍＬ；ｐＨ６．８。配制方法同上［６］。１．３．１．７改良ＩＲＩＥ液体培养基

配方（％）：蛋白胨１，酵母膏０．５，乳糖１，琥珀酸钠２，ＫＨ２ＰＯ４０．２，Ｋ２ＨＰＯ４０．２。制备方法为，将上述原料按标准分别称量后放入三角瓶中，加蒸馏水１００ｍＬ，加热并搅拌至完全溶解，调ｐＨ至６．８，分装于１８ｍｍ×８ｍｍ试管中，每个试管２￣３ｍＬ，试管加塞后高压灭菌（１１５℃，１５ｍｉｎ），备用。１．３．２菌种的复苏

将４℃冰箱中保存的嗜热链球菌菌种，无菌操作接种到改良ＩＲＩＥ液体培养基中，３７℃培养２４ｈ，取菌液１ｍＬ加ＩＲＩＥ液体培养基９ｍＬ，３７℃培养６ｈ后备用。１．３．３不同培养基的接种

取已活化的菌液１ｍＬ，用灭菌蒸馏水依次稀释１０１、１０２、１０３、１０４、１０５倍，取稀释１０５倍的菌液０．１ｍＬ分

别滴于不同培养基上，使菌液在平板培养基上分布均匀，每种培养基涂２个平皿，倒置于恒温培养箱中，

３７℃培养７２ｈ，每２４ｈ观察记录一次不同培养基平皿上

嗜热链球菌的生长情况及菌落形态，７２ｈ后统计菌落

数，相同培养基上的菌落数以平均值为准记数。

１．３．４嗜热链球菌在不同酸碱度和不同温度条件下的活菌数测定

制备初始ｐＨ不同（ｐＨ６．５、ｐＨ６．８、ｐＨ７．０）的固

体乳酸菌培养基平皿，采用平板计数法，将活化好的嗜热链球菌菌液进行１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６倍稀释，取

稀释倍数为１０６的菌液０．１ｍＬ在无菌条件下均匀涂布至不同ｐＨ的乳酸菌培养基中，各２个重复。将涂好菌液的平皿分别在不同温度（３７℃、４２℃、４５℃）下培养，４８

ｈ后，统计平板上生长的菌落数，乘以稀释倍数，再乘以１０，即为每毫升菌液中所含有的活菌数（ｃｆｕ／ｍＬ），ｐＨ和

温度相同的２个重复以平均值为准。

２结果

２．１

不同培养基上Ｓ．ｔ的生长状况

６种固体培养基每种２个重复，不同培养基上嗜热

链球菌２４￣７２ｈ的生长状况及最终菌落数见表１。

表１

不同培养基上嗜热链球菌生长情况

培养基不同时间生长情况（ｈ）

平均菌落数（个）

２４４８７２乳清培养基

－－＋１０２Ｅｌｌｉｋｅｒ琼脂培养基－－＋７１改良ＩＲＩＥ培养基－－＋１２３改良Ｍ１７琼脂培养基

－－＋８９Ｓ培养基－＋＋１６８乳酸菌培养基

＋

＋

＋

６９３

注：“－”表示未长菌；“＋”

表示长菌。由表１可以看出，乳酸菌培养基２４ｈ就长出了嗜热链球菌，生长速度最快，菌数量最多，而其他培养基上嗜热链球菌的生长比较差，所以在培养和保存嗜热链球菌时应选用乳酸菌培养基较好。

２．１

Ｓ．ｔ在不同温度和ｐＨ条件下的活菌数

Ｓ．ｔ在不同温度和ｐＨ条件下的活菌数见表２。随

着温度的升高和ｐＨ的增大，Ｓ．ｔ活菌数随之相应增加，４２℃、ｐＨ６．８时活菌数最多，平均达到１．１０５×

１０９ｃｆｕ／Ｌ。

表２Ｓ．ｔ在不同温度和ｐＨ条件下的活菌数

不同条件下活菌数温度（℃（ｃｆｕ／ｍＬ）

）

ｐＨ６．５ｐＨ６．８ｐＨ７．０３７７．１×１０８８．６×１０８７．８×１０８７．３×１０８８．４×１０８８．１×１０８４２８．８×１０８１．０５×１０９９．６×１０８８．２×１０８１．１６×１０９９．２×１０８４５

７．９×１０８１．１１×１０９９．１×１０８９．４×１０８

９．８×１０８

８．９×１０８

３讨论与分析

３．１嗜热链球菌与人类的关系密切，用嗜热链球菌和

保加利亚乳酸杆菌混合培养发酵的乳酸饮品能补充人体肠道内的有益菌，维持肠道的微生态平衡，且含有易于吸收的营养素，具有抑制腐败菌、提高消化率、防癌及预防一些传染病等功效，并能为食品提供芳香风味，使食品拥有良好的质地［７］。嗜热链球菌又是近年用微生

・・４４

中国奶牛・２００７年第８期

低温清洗剂在奶源基地的应用

张亚东，王吉宏

（内蒙古伊利实业集团股份有限公司原奶事业部，呼和浩特

中图分类号：ＴＵ２６６＋２

文献标识码：Ｂ

０１００８０）

文章编号：１００４－４２６４（２００７）０８－００４４－０２

在挤奶管道的清洗中，清洗剂的主要作用是清除挤奶装置内表面附着的奶渣，为了达到这个目的，清洗剂需要满足：（１）将奶渣粘附着的表面松开，让松开的奶渣悬浮于溶液中，防止这些奶渣再次粘到设备的其他地方，防止形成奶垢层；（２）尽量减少对挤奶设备表面（如橡胶件）的有害作用；（３）使用简单、安全，不含任何会影响牛奶质量的物质；（４）环保。

我国奶源基地现有奶站约１００００多座，在奶站挤奶设备的日常清洗过程中，清洗剂对水温要求一般均在７０℃以上，由于各种因素的影响，尤其在北方，清洗时的温度往往达不到规定要求，致使挤奶设备清洗效果不理想，影响了原料奶的质量。在这种情况下，我们在奶源基地推广使用低温清洗液，预使用低温清洗液清洗时水温要求控制在３５￣５５℃，达到了与使用传统清洗剂相同或更好的清洗效果。

１．１脂类的清洗

温度与ｐＨ值是影响残留奶中脂类清除干净与否

１清洗剂的主要作用及原理

的关键因素。乳脂的固化温度为３５℃，所以清洗液的温

收稿日期：２００７－０７－０３

物法检测牛奶中抗生素残留的首选菌种之一［８］，所以近年来对乳酸菌的研究越来越多，本文对嗜热链球菌的部分生物学特性进行了研究，得出嗜热链球菌的最佳培养基为乳酸菌培养基，最适培养温度为４２℃，培养基最适酸碱度为ｐＨ６．８。

度在整个循环过程中都应该在３８℃以上，如果温度低得出的嗜热链球菌的最适培养温度和最适酸碱度均与嗜热链球菌的生物学特性一致。另外，在本次试验中发现，嗜热链球菌菌液稀释时要用灭菌蒸馏水，不能用生理盐水，盐水会降低嗜热链球菌的生理活性，影响试验结果，其原因有待进一步的研究。

参考文献

３．２嗜热链球菌没有分解淀粉和大分子碳水化合物的

酶系，因此，不能利用大分子物质作碳源，能利用的碳源主要是葡萄糖等单糖和一些寡糖，所以本试验中乳酸菌培养基中的碳源为葡萄糖。嗜热链球菌体内的蛋白酶活性通常较弱甚至缺乏必要的蛋白酶，因此，最适于它们的氮源是蛋白质水解产物，所以本试验中乳酸菌培养基中的氮源为酵母膏和蛋白胨，这与叶淑红等的研究相一致。

［９］

［１］佟潇．酸奶中嗜热链球菌的分离和鉴定［Ｊ］．中国乳品工业，２００４，３２（４）：２５－２７．

［２］李健强，李六金．兽医微生物学实验实习指导［Ｍ］．西安：陕西科

学技术出版社，１９９９．

［３］李锦子，行曙光，马杰，等．嗜热链球菌培养条件的研究［Ｊ］．微生

物学通报，１９９６，２３（３）：１３８－１４０．

［４］曹文海，任国谱．嗜热链球菌的检验培养基（Ｍ１７）的改良［Ｊ］．中

国乳业，２００６，（１）：４６－４８．

３．３嗜热链球菌与其他细菌相比，对营养的要求比较

［５］周家春．乳酸菌菌种的简便分离和培养［Ｊ］．食品科学，１９９８，１９

（１）：３９－４１．

严格、复杂，在培养的过程中除了要求供给适量的水氨基酸、肽类分、碳源、氮源之外，还需要加入维生素、等生长辅助因子，因此在培养基中加入适量的西红柿汁可以促进嗜热链球菌的生长。西红柿汁不仅能为嗜热链球菌提供碳源，而且含有嗜热链球菌生长不可缺少的核苷酸和矿物质，营养丰富，能促进嗜热链球菌的生长，这与田洪涛等的报道一致。

［１０］

［６］陈芳，靳亚平．奶制品中有益菌的分离鉴定［Ｊ］．黑龙江畜牧兽

医，２００７，（３）．

［７］丁红辉，张梅，李晓柠．优化条件检测乳酸菌的应用优势［Ｊ］．饮

料工业，２００６，９（４）：６－７．

［８］白建，黄素珍．纯牛奶中抗菌药物残留的检测［Ｊ］．乳业科学与技

术，２００６，１１６（１）：１５－１７．

［９］叶淑红，何连芳，张或，等．乳酸菌的发酵条件及其对发酵胡萝

卜汁风味的影响［Ｊ］．食品科学，２００５，２６（５）：１２７－１３０．

３．４嗜热链球菌不但具有复杂的营养要求，同时它们

也耐酸和嗜热，与其他细菌相比，它们能产生大量的乳酸，能在较低ｐＨ的基质中和较高温度下生长，本试验

［１０］田洪涛，贾英民，马雯，等．嗜热链球菌促生长物质研究及增

殖培养基优化筛选［Ｊ］．食品科学，２００２，２３（５）：６０－６２．□

・・４２

中国奶牛・２００７年第８期

嗜热链球菌部分生物学特性研究

陈芳，靳亚平

（西北农林科技大学动物科技学院，杨陵７１２１００）

中图分类号：Ｑ９３９．１１＋７

文献标识码：Ｂ

文章编号：１００４－４２６４（２００７）０８－００４２－０２

摘要：对嗜热链球菌采用六种不同培养基、不同培养温度（３７℃、４２℃、４５℃）和培养基不同酸碱度（ｐＨ６．５、ｐＨ６．８、

ｐＨ７．０）进行培养，对其在不同条件下的生长状态进行了研究，得出嗜热链球菌的最佳培养温度为４２℃，最适酸碱度

为ｐＨ６．８，最佳培养基为乳酸菌培养基。关键词：嗜热链球菌；温度；酸碱度；营养物质

嗜热链球菌（Ｓ．ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ，Ｓ．ｔ）作为一种对人体有明显食疗作用的有益菌，它的开发利用一直得到国内外乳品界的高度重视。嗜热链球菌不但是一种很好的发酵剂，也是微生物法检测牛奶中抗生素残留的常用菌种之一。本文就嗜热链球菌的部分生物学特性进行了试验研究，以期为实际应用中嗜热链球菌的保存和传代提供参考。

原料：蛋白胨、蔗糖、酵母膏、葡萄糖、琼脂、ＮａＣｌ，

ＫＨ２ＰＯ４和吐温－８０等均为市售，西红柿汁为自制。１．２

仪器与设备

恒温培养箱（上海跃进医疗器械厂生产，型号：ＰＹＸ－

ＤＨＳ－３５×４０），冰箱，高压蒸气灭菌锅（上海医用仪器生

产厂生产），超净工作台，显微镜，酸度计等。

１材料与方法１．１材料

菌种：嗜热链球菌为西北农林科技大学动物科技学院家畜生殖内分泌实验室分离保存。收稿日期：２００７－０３－２９

作者简介：陈芳（１９６７－），女，陕西乾县人，硕士研究生。

通讯作者：靳亚平（１９６６－），男，陕西宝鸡人，教授，博士生导师，主要从

事家畜生殖内分泌学研究。

１．３方法

１．３．１不同培养基的制备１．３．１．１乳清培养基的制备

配方：乳清５００ｍＬ，蒸馏水５００ｍＬ，胰蛋白胨５ｇ，葡萄糖１ｇ，酵母膏２．５ｇ，琼脂粉２０ｇ，ｐＨ６．５［１］。

乳清的制备：新鲜牛奶１Ｌ加热至沸腾，冷却后加入１２ｍｏｌ／Ｌ的ＨＣｌ少许，边加入边搅拌，直到牛奶凝结成絮状，过滤后即得乳清，再用１２ｍｏｌ／Ｌ的ＮａＯＨ调ｐＨ至６．５即可。培养基制备方法按文献［２］进行。

饲料；饲养工具要专用；做好消毒工作，每周更换一种消毒液，对牛舍环境进行消毒，一天一次，一周后改为每周一次即可；对被污染的粪尿及病死牛作无害化处理，以防止疾病继续传播。

此，从心、肝、肺分离的细菌均为Ｄ型。

４小结

４．１本次临产母牛突然发病和死亡，从新鲜病料中分

离到魏氏梭菌强毒株，确定魏氏梭菌为牛猝死的病原。

４．２该菌不仅侵害肠道，而且侵害实质器官，细菌繁

殖产生毒素引起动物死亡，一般药物和抗生素不能中和毒素，因此没有治疗效果，所以应以预防为主。

４．３魏氏梭菌广泛存在于自然界以及正常的动物肠道

中，普遍认为过多的精饲料（即高蛋白、过多淀粉）是引起本病的主要诱因之一。

５防治措施建议

５．１采取紧急措施防止疾病传播，加强牛的饲养管理，

立即更换饲料，搞好环境卫生，饲槽内剩料要及时清理；做好紧急灭鼠工作；发现病牛立即隔离治疗；注意饲料饮水卫生等，不喂发霉、变质、污染、有毒和刺激性大的

５．２治疗

５．２．１马上对牛群进行疫苗的紧急免疫接种，皮下注射５ｍＬ，注射后２周可产生免疫力。

５．２．２对初生２４ｈ内的犊牛肌肉注射１０％氟苯尼考注射液，每次２ｍＬ，连续使用３ｄ。

５．２．３对已发病的牛口服喹乙醇，２ｇ／ｋｇ体重，２次／ｄ，连用４ｄ，同时肌肉注射１０％氟苯尼考２ｍＬ，连用４ｄ，同

时注射破伤风抗毒素。

参考文献

［１］廖延雄．兽医微生物实验诊断手册［Ｍ］，北京：中国农业出版

社，１９９５，３９５－３９８．□

中国奶牛・２００７年第８期

・４３・

１．３．１．２

Ｅｌｌｉｋｅｒ琼脂培养基的制备

配方：胰蛋白胨２０ｇ，蔗糖５ｇ，酵母提取物５ｇ，ＮａＣｌ４ｇ，明胶２．５ｇ，乙酸钠１．５ｇ，葡萄糖５ｇ，抗坏血酸０．５ｇ，乳糖

５ｇ，琼脂１５ｇ，蒸馏水１Ｌ；ｐＨ６．８。制备方法按文献［２］进行。１．３．１．３

改良ＩＲＩＥ培养基

配方（％）：胰胨０．５，酵母膏０．２５，乳糖１，琥珀酸钠

１，ＫＨ２ＰＯ４０．２，Ｋ２ＨＰＯ４０．２，琼脂１．５，加蒸馏水至１００；ｐＨ６．８［３］。制备方法同上。

１．３．１．４改良Ｍ１７琼脂培养基

配方［４］：胰蛋白胨５ｇ，鱼蛋白胨５ｇ，牛肉膏５ｇ，酵母浸膏２．５ｇ，抗坏血酸０．５ｇ，硫酸镁０．２５ｇ，甘油１０ｇ，乳糖３ｇ，ＫＨ２ＰＯ４０．２ｇ，Ｋ２ＨＰＯ４０．５ｇ，琼脂１１ｇ，蒸馏水

１０００ｍＬ；ｐＨ６．８。制备方法同上。１．３．１．５

Ｓ培养基

配方（％）：牛肉浸膏０．５，酵母浸膏０．２５，蔗糖２．５，维生素Ｃ０．２，乳清６．０，柠檬酸三铵０．４，七水磷酸镁０．０１，琼脂１．５，加蒸馏水至１００；ｐＨ７．０。

制备方法同上［５］。１．３．１．６乳酸菌培养基

配方：酵母膏７．５ｇ，蛋白胨７．５ｇ，葡萄糖１０ｇ，

ＫＨ２ＰＯ４２ｇ，西红柿汁１００ｍＬ，吐温－８００．５ｍＬ，蒸馏水９００ｍＬ；ｐＨ６．８。配制方法同上［６］。１．３．１．７改良ＩＲＩＥ液体培养基

配方（％）：蛋白胨１，酵母膏０．５，乳糖１，琥珀酸钠２，ＫＨ２ＰＯ４０．２，Ｋ２ＨＰＯ４０．２。制备方法为，将上述原料按标准分别称量后放入三角瓶中，加蒸馏水１００ｍＬ，加热并搅拌至完全溶解，调ｐＨ至６．８，分装于１８ｍｍ×８ｍｍ试管中，每个试管２￣３ｍＬ，试管加塞后高压灭菌（１１５℃，１５ｍｉｎ），备用。１．３．２菌种的复苏

将４℃冰箱中保存的嗜热链球菌菌种，无菌操作接种到改良ＩＲＩＥ液体培养基中，３７℃培养２４ｈ，取菌液１ｍＬ加ＩＲＩＥ液体培养基９ｍＬ，３７℃培养６ｈ后备用。１．３．３不同培养基的接种

取已活化的菌液１ｍＬ，用灭菌蒸馏水依次稀释１０１、１０２、１０３、１０４、１０５倍，取稀释１０５倍的菌液０．１ｍＬ分

别滴于不同培养基上，使菌液在平板培养基上分布均匀，每种培养基涂２个平皿，倒置于恒温培养箱中，

３７℃培养７２ｈ，每２４ｈ观察记录一次不同培养基平皿上

嗜热链球菌的生长情况及菌落形态，７２ｈ后统计菌落

数，相同培养基上的菌落数以平均值为准记数。

１．３．４嗜热链球菌在不同酸碱度和不同温度条件下的活菌数测定

制备初始ｐＨ不同（ｐＨ６．５、ｐＨ６．８、ｐＨ７．０）的固

体乳酸菌培养基平皿，采用平板计数法，将活化好的嗜热链球菌菌液进行１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６倍稀释，取

稀释倍数为１０６的菌液０．１ｍＬ在无菌条件下均匀涂布至不同ｐＨ的乳酸菌培养基中，各２个重复。将涂好菌液的平皿分别在不同温度（３７℃、４２℃、４５℃）下培养，４８

ｈ后，统计平板上生长的菌落数，乘以稀释倍数，再乘以１０，即为每毫升菌液中所含有的活菌数（ｃｆｕ／ｍＬ），ｐＨ和

温度相同的２个重复以平均值为准。

２结果

２．１

不同培养基上Ｓ．ｔ的生长状况

６种固体培养基每种２个重复，不同培养基上嗜热

链球菌２４￣７２ｈ的生长状况及最终菌落数见表１。

表１

不同培养基上嗜热链球菌生长情况

培养基不同时间生长情况（ｈ）

平均菌落数（个）

２４４８７２乳清培养基

－－＋１０２Ｅｌｌｉｋｅｒ琼脂培养基－－＋７１改良ＩＲＩＥ培养基－－＋１２３改良Ｍ１７琼脂培养基

－－＋８９Ｓ培养基－＋＋１６８乳酸菌培养基

＋

＋

＋

６９３

注：“－”表示未长菌；“＋”

表示长菌。由表１可以看出，乳酸菌培养基２４ｈ就长出了嗜热链球菌，生长速度最快，菌数量最多，而其他培养基上嗜热链球菌的生长比较差，所以在培养和保存嗜热链球菌时应选用乳酸菌培养基较好。

２．１

Ｓ．ｔ在不同温度和ｐＨ条件下的活菌数

Ｓ．ｔ在不同温度和ｐＨ条件下的活菌数见表２。随

着温度的升高和ｐＨ的增大，Ｓ．ｔ活菌数随之相应增加，４２℃、ｐＨ６．８时活菌数最多，平均达到１．１０５×

１０９ｃｆｕ／Ｌ。

表２Ｓ．ｔ在不同温度和ｐＨ条件下的活菌数

不同条件下活菌数温度（℃（ｃｆｕ／ｍＬ）

）

ｐＨ６．５ｐＨ６．８ｐＨ７．０３７７．１×１０８８．６×１０８７．８×１０８７．３×１０８８．４×１０８８．１×１０８４２８．８×１０８１．０５×１０９９．６×１０８８．２×１０８１．１６×１０９９．２×１０８４５

７．９×１０８１．１１×１０９９．１×１０８９．４×１０８

９．８×１０８

８．９×１０８

３讨论与分析

３．１嗜热链球菌与人类的关系密切，用嗜热链球菌和

保加利亚乳酸杆菌混合培养发酵的乳酸饮品能补充人体肠道内的有益菌，维持肠道的微生态平衡，且含有易于吸收的营养素，具有抑制腐败菌、提高消化率、防癌及预防一些传染病等功效，并能为食品提供芳香风味，使食品拥有良好的质地［７］。嗜热链球菌又是近年用微生

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低温清洗剂在奶源基地的应用

张亚东，王吉宏

（内蒙古伊利实业集团股份有限公司原奶事业部，呼和浩特

中图分类号：ＴＵ２６６＋２

文献标识码：Ｂ

０１００８０）

文章编号：１００４－４２６４（２００７）０８－００４４－０２

在挤奶管道的清洗中，清洗剂的主要作用是清除挤奶装置内表面附着的奶渣，为了达到这个目的，清洗剂需要满足：（１）将奶渣粘附着的表面松开，让松开的奶渣悬浮于溶液中，防止这些奶渣再次粘到设备的其他地方，防止形成奶垢层；（２）尽量减少对挤奶设备表面（如橡胶件）的有害作用；（３）使用简单、安全，不含任何会影响牛奶质量的物质；（４）环保。

我国奶源基地现有奶站约１００００多座，在奶站挤奶设备的日常清洗过程中，清洗剂对水温要求一般均在７０℃以上，由于各种因素的影响，尤其在北方，清洗时的温度往往达不到规定要求，致使挤奶设备清洗效果不理想，影响了原料奶的质量。在这种情况下，我们在奶源基地推广使用低温清洗液，预使用低温清洗液清洗时水温要求控制在３５￣５５℃，达到了与使用传统清洗剂相同或更好的清洗效果。

１．１脂类的清洗

温度与ｐＨ值是影响残留奶中脂类清除干净与否

１清洗剂的主要作用及原理

的关键因素。乳脂的固化温度为３５℃，所以清洗液的温

收稿日期：２００７－０７－０３

物法检测牛奶中抗生素残留的首选菌种之一［８］，所以近年来对乳酸菌的研究越来越多，本文对嗜热链球菌的部分生物学特性进行了研究，得出嗜热链球菌的最佳培养基为乳酸菌培养基，最适培养温度为４２℃，培养基最适酸碱度为ｐＨ６．８。

度在整个循环过程中都应该在３８℃以上，如果温度低得出的嗜热链球菌的最适培养温度和最适酸碱度均与嗜热链球菌的生物学特性一致。另外，在本次试验中发现，嗜热链球菌菌液稀释时要用灭菌蒸馏水，不能用生理盐水，盐水会降低嗜热链球菌的生理活性，影响试验结果，其原因有待进一步的研究。

参考文献

３．２嗜热链球菌没有分解淀粉和大分子碳水化合物的

酶系，因此，不能利用大分子物质作碳源，能利用的碳源主要是葡萄糖等单糖和一些寡糖，所以本试验中乳酸菌培养基中的碳源为葡萄糖。嗜热链球菌体内的蛋白酶活性通常较弱甚至缺乏必要的蛋白酶，因此，最适于它们的氮源是蛋白质水解产物，所以本试验中乳酸菌培养基中的氮源为酵母膏和蛋白胨，这与叶淑红等的研究相一致。

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３．３嗜热链球菌与其他细菌相比，对营养的要求比较

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（１）：３９－４１．

严格、复杂，在培养的过程中除了要求供给适量的水氨基酸、肽类分、碳源、氮源之外，还需要加入维生素、等生长辅助因子，因此在培养基中加入适量的西红柿汁可以促进嗜热链球菌的生长。西红柿汁不仅能为嗜热链球菌提供碳源，而且含有嗜热链球菌生长不可缺少的核苷酸和矿物质，营养丰富，能促进嗜热链球菌的生长，这与田洪涛等的报道一致。

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３．４嗜热链球菌不但具有复杂的营养要求，同时它们

也耐酸和嗜热，与其他细菌相比，它们能产生大量的乳酸，能在较低ｐＨ的基质中和较高温度下生长，本试验

［１０］田洪涛，贾英民，马雯，等．嗜热链球菌促生长物质研究及增

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