细菌:细菌是原核生物界中的一类单细胞微生物,他们的个体小,形态与结构简单。
菌落:某单个细菌在适合生长的固体培养基表面或内部,在适宜的条件中,经过一定时间的培养,生长繁殖出巨大数量的菌体,形成一个肉眼可见的有一定形态的独立群体称~
原生质体:革兰阳性菌经溶菌酶或青霉素处理后,可完全出去细胞壁,形成仅由细胞膜抱住细胞质的菌体,称为原生质体。(原生质体是细菌经人工处理的不能分裂的细胞。)
原生质球:用溶菌酶等作用革兰阴性菌,仅能除去细胞壁内层的肽聚糖,形成仍有外膜层包裹的菌体,称为原生质球。
细菌L 型:指细菌自发、或经诱导形成的遗传稳定的细胞壁缺陷菌株。
质粒:在核糖体DNA 以外,游离的小型双股DNA 分子。
荚膜:某些细菌在一定营养条件下向细胞壁表面分泌的一层松散、透明、粘液状或胶质状的物质。 芽孢:某些革兰氏阳性菌在一定环境条件下,可在菌体内形成一个圆形或卵圆形的休眠体。
LPS (脂多糖):为革兰阴性细菌所特有,位于外膜的最表面,厚8~10nm ,由类脂A 、核心多糖、侧链多糖组成。
细菌生长曲线:细菌接种到定量的液体培养基中,并置于适宜的温度中,定时取样测定细胞数量,以培养时间为横座标,以菌数为纵座标作图,得到的一条反映细菌在整个培养期间菌数变化规律的曲线。 细菌培养基: 是人工配制的基质,含有细菌生长繁殖所必须的营养物质。培养基制后,通常要经过灭菌处理。
细菌生化试验:细菌在含有一定化合物的培养基中生长后,由于细菌的分解和合成作用,可以使该化合物转化为其他产生,细菌产物的性质可随细菌的种类不同而有差别,可借助生化学方法检测出来,这种方法称为~~
热源质:许多细菌,特别是革兰氏阴性菌,能产生一种多糖物,注入人和动物体内,会引起发热反应,称为~
杀菌作用:某些物质或因素所具有的在一定条件下杀死微生物的作用。
抑菌作用:某些物质或因素所具有的抑制微生物生长与繁殖的作用。
抗菌作用:反映某些药物具有的抑制或杀灭微生物的作用。
灭菌:杀灭物体上所有微生物的方法,包括杀灭细菌芽孢,霉菌包子在内的全部病原微生物和非病原微生物。
消毒:杀灭物体上病原微生物的方法,仅要求达到消除传染性的目的而对非病原微生物及其芽孢、孢子并不严格要求全部杀死。
防腐:阻止或抑制物品上微生物生长繁殖的方法,微生物不一定死亡。
无菌法:防止微生物进入人体或其他物品的操作方法。
巴氏消毒法:以较低温度杀灭液态食品中的病原菌或特定微生物,而又不严重损害其营养成分的风味的消毒方法。
抗生素:某些微生物在代谢过程中产生的一类能抑制或杀死另一些微生物的物质。
细菌素:是某种细菌产生的一种具有杀菌作用的蛋白质,只能作用于与他同中不同菌株的细菌以及与它亲缘关系相近的细菌。
病原菌(pathogen):指那些导致机体发病的细菌,是一群高度特化了的微生物,为了自身的生存,已适应而且必须在宿主生物体内持续存在或增殖,又是可造成宿主发病。
条件致病菌(记有哪些菌):正常情况下不致病,在某些情况改变的特殊情况下可以致病的细菌。如大肠杆菌。
感染(infection):指病原微生物在宿主体内持续存在或增殖,引起不同程度的病理过程。
发病:表示病原微生物感染后,对宿主造成明显的损害。
菌群失调:菌群由于某种原因使正常菌群的种类、数量和比例发生大幅度的改变,导致机体生态失去平衡。
细菌致病性:一定种类的病原菌在一定的条件下,能在宿主体内引起感染的能力。
细菌毒力(virulent):是病原致病菌强弱程度称之,同一细菌的不同菌株其毒力不同。
侵袭力:病原菌在机体内增殖,突破机体防御屏障,内化作用,繁殖和扩散的能力。
内化作用:指某些细菌黏附于细胞表面后,能进入吞噬细胞或非吞噬细胞内部的过程。
类毒素(toxoid):外毒素在0.4%甲醛溶液作用下,经过一段时间可以脱毒,但仍保留原有抗原原性。 抗毒素(antitoxm):外毒素具有良好的免疫原性,可以刺激机体产生特异性抗体而使机体具有免疫保护作用,这种抗体称为。
无菌动物(GF ):就是指不携带任何微生物的动物。
无特定病原体动物(SPF ):不存在某些的特定的具有病原性或潜在病原性微生物的动物
潜伏感染:一种病毒的持续性感染状态,原发感染后,病毒基因存在于一定的 组织或细胞中,并不能产生感染性病毒,也不出现临床症状。
败血症:有致病菌侵入血液循环,并在其中生长繁殖、产生毒素而引起的全生性严重感染。临床表现为法人、严重毒血症、皮疹瘀点、肝脾肿大和白细胞数增高等。
基因组:细菌的基因组位于核体,由两条环状双螺旋DNA 长链组成,控制细菌的遗传变异,是遗传的主要物质基础。
质粒(plasmid ): 是细菌染色体的遗传物质,多为环状双螺旋DNA 分子,可自身复制,随宿主菌分裂传到子代菌体。
转位因子:是一类独特的DNA 片段,不依赖于 同源性重组可以在细菌的基因组中从一个位置转移到另一个位置,也称为条约基因或移动基因。
毒力岛: 指病原菌的某个或某些独立基因群,分子结构呵功能有别于细菌基因组,但位于细菌基因组之内,因此称之为“岛”。
(细菌) 基因突变:细菌遗传物质结构发生突然而稳定的改变,导致细菌性状的遗传变异。
转 化: 供体菌裂解游离的DNA 片段被受体菌直接摄取,使受体获得新的遗传性状的过程。
接 合: 是两个完整的细菌细胞通过性菌毛直接接触,由供体细菌将质粒DNA 转移给受体细菌的过程,具有方向性。
转 导: 以温和噬菌体为媒介,把供体菌的DNA 小片段携带到受菌体中,通过交换和整合,使受菌体获得供菌体的部分遗传性状。
感受态: 是指细胞能从环境中接受转化因子的这一生态,处于感受态的细菌,其吸收DNA 的能力比一般细菌大1000倍。感受态可产生也可消失,它的出现受菌株的遗传特性、生理状态(如菌龄等)、培养环境等的影响。
溶原性转换:温和噬菌体感染其宿主后,噬菌体基因整合于基因组中,寄主的性状发生突变,它是一种表面上与转导相似但本质上不同的特殊现象。
菌株(strain ):是不同来源的某一种细菌的纯培养物。同种细菌可有许多菌株,其主要性状完全相同,次要性状则可稍有差异。
霉菌:凡是生长在营养基质上,能形成绒毛状、蜘蛛网状或絮状菌丝的真菌,均为霉菌。
菌丝:真菌的孢子以出芽的方式繁殖。在环境适宜的情况下由孢子长出芽管,逐渐延长呈丝状,每根单一的细丝称为菌丝
真菌的双相性:有些真菌因环境条件的改变而改变,称为真菌的双相性。
SPA :(葡萄球菌蛋白A )是一种单链多肽,与肽聚糖共价结合。
CAMP 试验:血平板上先接种一条金黄色葡萄球菌的划线垂直接种乳汁或分离的培养物,原来不溶血或溶血不明显的无乳链球菌,在有金黄色葡萄球菌产物存在时,呈明显的β型溶血。借此可区别无乳链球菌、乳房链球菌。CAMP 试验并不是特异的,C 、F 、G 群的某些链球菌株在试验中也可出现阳性现象。
1、什么是微生物和兽医微生物?
微生物:是个体最小的生物,结构简单,肉眼看不到的微小低等生物的总称。
兽医微生物:在微生物学一般理论基础上研究微生物与动物疾病的关系,并利用微生物学与免疫学的知识和技能来诊断、防止动物的疾病和人畜共患传染病,保障人类的食品安全与卫生,保障畜牧业生产,保障动物的健康及生态环境免于破坏。
2、简述微生物的特点
A 体积小,面积大;B 吸收多,转化快;C 生长旺,繁殖快;D 适应强,变异频;E 分布广,种类多。
2、细菌的测量单位;形态以及根据形态将细菌分为几种类型?
测量单位:微米(um )根据形态可分为3种类型:球状,杆状,螺旋状
球菌:双球菌,链球菌,葡萄球菌,四联球菌,八叠球菌
杆菌:球杆菌,分枝杆菌,环死梭杆菌,单杆菌,双杆菌,链杆菌
螺形菌:1,孤菌(霍乱孤菌),2,螺菌(鼠咬热螺菌)
7,革兰染色的机制及意义
机制:结果为阴性(紫色)和阳性(红色)两大类,与细菌细胞壁的结构组成有关。细菌经结晶紫初染和碘液媒染之后,所有细菌都染上不溶于水的结晶紫与碘的复合物,呈深紫色;阳菌的细胞壁含脂类较多,当以95%乙醇脱色时,脂类被乙醇溶去,而肽聚糖少,且交联疏松,不易收缩,在细胞壁中形成的孔隙较大,复合物极易被乙醇溶解洗脱,最后被红色的染料复染成红色;阴菌与阳菌相反,复合物不能脱出,经红色染料复染后仍为紫色。
{(碱)结晶染色→碘媒染→酒精脱色→①可脱为G+②不脱为G —}
作用:在鉴别细菌和选择抗菌物质方面具有重要意义
磷壁酸功能:①是特异的表面抗原;②维持细胞膜上一些酶的活性;③对宿主细胞有粘附作用;④为噬菌体提供特异的吸附受体
革兰氏阳性菌的细胞壁的主要成分:肽聚糖、特有脂多糖(LPS )。
脂多糖(LPS )功能:①是类毒素的主要毒性成分,发挥多种生物学效应;②具有种、型特异性;③LPS
2+ 2+有粘附Mg Ca 等阳离子的作用;④是噬菌体在细胞表面的特异性吸附受体
6,芽孢的结构,功能及对外界环境抵抗力强的原因?
⑴结构:坚实,含水量少,折光性强,多层而且致密,含特有的吡啶二羧酸(DPA)
⑵功能:①有鉴别意义;②保种;③作为灭菌参数
⑶原因:①结构多层致密,具有厚膜,各种理化因子不易透入;②含水量少,蛋白质受热不易变性;③芽孢内含有一种特有的吡啶二羧酸(dpa ),与钙结合形成的复合物能提高芽孢的耐热性和抗氧化能 力);④芽孢内含有一类特殊蛋白质称为酸溶性芽孢小蛋白(SASPs ),与芽孢芯髓内的DNA 紧密结合,使之免受辐射、干燥、高温等破坏。
8,可作为细菌分类和/或鉴别依据的形态与构造有哪些?
⑴形态鉴定:球形菌,杆菌和螺形菌;⑵结构鉴定:细胞壁,如用革兰氏染色法;⑶特殊结构鉴定:荚膜,芽孢,鞭毛和菌毛。作为细菌分类和鉴定的一种依据:不同细菌裂殖后的菌体外形和排列方式 2,细菌细胞物质交换方式有哪些?各自特点是什么?
①单纯扩散:也叫被动扩散,不需要能量,无特异性或者选择性,速度较慢,细胞内外溶质浓度一旦达到平衡,扩散便停止,不是物质运输的主要方式。
②促进扩散:具有特异性和选择性,也不需要能量
③主动运输:需要特异性的载体蛋白,需要能量
④基团转位:需要特异性的载体蛋白,需要能量
3、细菌细胞的代谢特点
⑴细菌生长繁殖速度极快,超过动物细胞的10~100倍。
⑵细菌利用各种化合物作为能源的能力远远强于动物细胞。
⑶细菌对营养物质的需求比动物细胞更为多种多样。
⑷细菌可利用超常流水线式生产的方式生成大分子物质。
⑸细菌能产生诸如肽聚糖,脂多糖,磷壁酸等特殊结构物质。
5、细菌群体生长曲线的特征
(一)迟缓期:菌体增大,代谢活跃,合成并积累所需酶系统;RNA 含量增加,DNA 量不变,细菌数不增加;(二)对数期:活菌数以几何增数快速生长;形态、染色性、生理特性较典型;对外界环境抗菌药物等作用较为敏感;此期细菌均为活菌,且生命力旺盛;此期细菌宜作形态、染色、生化反应、药物敏感等试验研究和保存菌种;病原菌致病力最强(三)稳定期:细菌繁殖速度下降,死亡数逐渐上升,理论繁殖速度与死亡速度相等,新繁殖的活菌数与死菌数大致平衡;因营养物质的消耗,酸性及其他代谢产物的积蓄,ph 值下降,离子强度及氧化还原电势改变;该期细菌的形态及生理性状常有改变,革兰阳性菌此时可染成阴性。(四)衰亡期:繁殖速度下降,细菌开始大量死亡,死菌数超过活菌数,总数减少,如不移植到新的培养基,最终可能全部死亡;细菌形态变化;生理上趋于停止。
7、细菌呼吸的类型:需氧型、微氧型、兼性厌氧性、专性厌氧性、厌氧性
8、简述细菌培养基的分类?
按营养组成:基础培养基和营养培养基
按状态差异:固体培养基、半固体培养基、液体培养基
按功能差异:鉴别培养基、选择培养基、厌氧培养基
3、列举常用的消毒方法(分物理、化学和生物方法)
一.物理方法:A .弱杀伤类。如冷冻、干燥、可见光;B .强杀作类。如热力、紫外线、超声波;C .机械除菌,如冲洗
二.化学方法:A .使蛋白质变性;B .损伤细胞膜;C .干扰细菌的酶系统和代谢;D .改变酶的功能
三.生物方法:抗生素、植物杀菌素、细菌素、噬菌体
4、湿热灭菌与干热灭菌效果哪一种好?为什么?
在相同温度下,湿热灭菌最常用,湿热的效力比干热灭菌好。
原因:①热蒸汽对细胞成分的破坏作用更强;②热蒸汽比热空气穿透力强;③蒸汽潜热大,当气体转变为液体时可放出大量热量,故可迅速提高灭菌物体的温度
5、试述各种热力灭菌方法的特点、用途和方法。
⑴火焰灭菌:用火焰直接灼烧杀死物体中全部微生物的方法,分为灼烧和焚烧。灼烧是直接用火焰灭菌,焚烧是直接点燃火在焚烧炉内焚烧。
⑵热空气灭菌:利用干热灭菌器,以干热空气进行灭菌的方法,适用于高温下不损坏,不变质,不蒸发的物品。
⑶红外线灭菌:利用红外线烤箱灭菌,无需空气传到,可使照射物体表面迅速升温但不均匀,用于医疗器械的灭菌。
4、菌群失调的原因?
①长期使用抗生素、放射性核素、激素等;②感染、慢性消耗性疾病使免疫功能下降;③因手术或器械性检查使局部免疫受损,有利细菌侵入
6、细菌毒力增强与减弱的方法?
增强:目前可采用分子生物学技术该找毒力基因,达到增强毒力的目的。
减弱:①长时间在体外连续培养 ②在高温最适生长温度条件下培养 ③在含有特殊化学物质的培养基中培养 ④在特殊气体条件下培养 ⑤通过非易感动物、极硬工程的方法
8、构成毒力的因素有哪些?
许多细菌的毒力因子受环境因素的调节,仅在某些特定的条件下才能表达,对细菌有调节作用的环境条件包括:温度、铁离子及钙离子浓度、渗透压、PH 、含氧量等。
温度,是许多细菌重要的调节信号,特别是对自然生存环境温度低于宿主温度的细菌
铁,不仅是细菌必需的生长因子,而且对细菌毒力因子的表达也其调节作用
钙,对耶尔森菌Yops 的表达有调节作用
渗透压,霍乱弧菌的毒力及菌毛的表达有调节作用
2、概述细菌遗传变异的物质基础?
细菌的遗传物质为DNA ,细菌遗传的物质基础有:基因组、质粒、转位因子、毒力岛。细菌的基因组是细菌染色体呵染色体以外遗传物质所携带基因的总称; (其它定义见上)
3、质粒有哪些主要特点及类型?
①质粒具有自我复制能力;②质粒具有转移性,可通过接合、转化或转导等方式在细菌间转移;③质粒可自行丢失或人工消除;④质粒可分为相容性和不相容性;⑤质粒DNA 所编码的基因产物赋予细菌某些性状特征,如致育性、耐药性、致病性、某些生化特性等。
按物质受控程度分:紧密型质粒、松弛型质粒
按编码的基本产物赋予细菌某些特征分:F 质粒(致育质粒)R 质粒、Col 质粒、Vi 质粒(毒力质粒) 按转移特性分:接合性质粒、非接合性质粒
4、试述细菌变异的类型和方法?
在人工或自然条件下,细菌的基因发生了改变,使相应的性状也发生了变化,并可以遗传下去,称为遗传性变异。
⑴基因突变:按其发生改变范围的大小分为
染色体畸变:指染色体的一大段发生了变化,它包括染色体结构上的缺失、重复、插入、易位和导致。 点突变:是相应基因上的DNA 链中一个或少数几个核苷酸对的改变,包括核苷酸对的置换,进一步分为转换、颠换及移码。
⑵基因转移:供体细菌间接或直接地将部分遗传物质单向传递给受体细菌,从而导致受体细菌发生基因重组的现象,称为基因转移。
方法:基因突变(自发突变、人工诱变);基因转移(转化、转导、接合、原生质体融合和传染)。
5、在自然条件下细菌的基因转移重组主要方式有哪几种?
基因转移重组的主要:转化、转导、接合、原生质体融合和传染。
6、何谓转导?转导有哪些类型?
以温和噬菌体为媒介,把供体菌的DNA 小片段携带到受菌体中,通过交换和整合,使受菌体获得供菌体的部分遗传性状。分为普遍性转导和局限性转导。
8、什么是细菌分类的基本单位?根据什么指标来确定?
细菌的分类单元与动植物一样,也有纲、目、科、属、种,但最重要、最基本的单元是中,其次为属。 分类的主要依据是其表型特征,即形态、染色、培养、细胞壁结构、生理生化及抗原性的特征。
9、细菌命名
细菌的命名依据是“国际细菌命名法规”的规定,学名用拉丁文,遵循“双名法”. 即每一种细菌的拉丁文名称与动植物名称一样,由种名和属名两部分构成,属名在前,种名在后,属名地一个字母必须答谢,其余均应消协,计时种名以人名或地名命名的,种名头一个字母也用小写。整个属名及种名在出版物中应排成泄题。中文译名与拉丁名正好相反,种名在前,属名在后。
4、菌丝体按功能分类:营养菌丝:起吸收营养作用;气生菌丝:可分化成为繁殖菌丝
5、简述真菌的致病性
A 致病性真菌性感染: 主要是一些外源性感染,可造成皮肤、皮下和全身性感染。B 机会致病性真菌感染: 主要是内源性感染,致病性不强。C 真菌变态反应性疾病: 本身不治病,但污染空气时,可引起接触性皮炎等疾病。D 真菌性中毒: 有些真菌在粮食或饲料上生长,产生毒素,人、畜食用后可导致急性或慢性中毒。E 致肿瘤:某些真菌产物与肿瘤的发生有着密切关系。
8. 真菌的繁殖方式和繁殖结构
繁殖方式:有性繁殖和无性繁殖 繁殖结构:孢子(有性、无性)、配子。
5、原核生物与真核生物的主要区别是什么?
原核细胞无核膜和刻仁,有类似于细胞核功能的核区(3分)。真核细胞有完整的细胞核,有核膜核仁
12. 革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌细胞壁结构差异的生物学意义
1) 与染色有关:G+菌的细胞壁致密、肽聚糖厚,脂含量低,酒精不容易透入;G-菌的细胞壁疏松、肽聚糖薄,外膜、脂蛋白、脂多糖脂含量极高,酒精容易透入。细胞内结合染液中的结晶紫-碘的复合物容易被酒精溶解而脱色。(2分)
2) 与细菌对药物的敏感性有关:主要结构基础是肽聚糖。G+菌的细胞壁对青霉素、溶菌酶敏感,青霉素可抑制肽聚糖四肽侧链与甘氨酸5联桥之间的联结,而干扰肽聚糖的合成;溶菌酶杀菌机理是水解肽聚糖N-乙酰葡萄糖胺和N-乙酰胞壁酸之间的β-1,4糖苷键。G-菌的细胞壁肽聚糖少,有外膜保护,对化学药物有抵抗力,对多种抗生素敏感性低,青霉素作用效果差。
3) 与细菌致病性有关:G-菌的细胞壁含有磷酸脂多糖(LPS ),其中的脂类A 是其主要毒性成分。
4) 与抗原性有关:G-菌细胞壁磷酸脂多糖(LPS )中的特异性多糖具有抗原性,属于O 抗原,依其可对细菌进行分群、分型。(1.5分)
16、什么叫培养基?制备培养基的一般程序有哪些?
用人工的方法将细菌所需要的营养物质调配在一起用于培养细菌的人工养料。 称量、加热、溶解、调酸碱度、过滤、分装。
影响细菌生长繁殖的因素有哪些?
(1)营养物质:A 水分:细菌的新陈代谢需要充足的水,游离水作为新陈代谢的主要溶剂。B 含碳化合物:糖类(牛肉膏)C 含氮化合物:Pr (蛋白质)D 矿物质:生长因子、气体。
(2)温度:病原菌的最适宜生长温度为37℃。
(3)PH :最适 7.2-7.6, 所以往往需要在培养基内加入一定的缓冲剂。
(4)渗透压:例如:盐腌的原理(防腐)、盐提高食品中的渗透压,细菌不能生长,
细菌的分离培养:
1、细菌的生长表现:在固体培养基上生长为菌落。表现:大小、形态、透明度、隆起度、度、湿润度,表面光滑、粗糙、有无光泽。在液体培养基:所有细菌能在其扩散生长。 表现:浑浊、沉淀、形成菌环、细菌膜等。
2、细菌的分离:用人工培养方法将细菌从病料或某一个菌落移植到新的培养基中培养分离出来,称细菌的分离。
免疫学诊断:1、凝集试验 2、沉淀试验 3、补体结合试验
微生物变异的实际应用:了解微生物的变异,在传染病的诊断与防治方面有重要意义。
1、诊断方面:细菌发生变异后,结构、形态等与正常不同。诊断时注意,以免发生误诊。
2、预防方面:用人工变异方法,获得抗原性良好,毒力减弱的菌株或毒株,制造疫苗。
3、治疗方面:耐药菌株的出现,要求用药针对性要强,做药物敏感实验。
病毒
传染性核酸:在些病毒去除其囊膜和衣壳,裸露的DNA 或RNA 注入易感细胞内也能引起感染,并产生完整的病毒颗粒。这样的核酸称为传染性核酸。
结构蛋白: 构成一个形态成熟的有感染性的病毒颗粒所必需的蛋白质。
非结构蛋白: 指由病毒基因组编码的,在病毒复制或基因表达调控过程中具有一定功能,但不结合于病毒颗粒中的蛋白质。
感染比: 指在一个系统中感染病毒的细胞数与细胞总数之比。
隐蔽期: 在病毒感染细胞之后的一个短时间内,病毒完全消失,甚至在细胞内也找不到传染性的病毒颗粒,直至感染数小时后子代病毒出现为止,这一阶段为隐蔽期。
病毒的一步生长曲线:定量描述烈性噬菌体生长规律的实验曲线称为一步生长曲线。
内含子: 是断裂基因中外显子之间的间隔序列,可参与前体RNA 的转录,但其转录的RNA 序列于转录后的加工中被切除,不包括于成熟的RNA 分子中。
外显子: 在断裂基因中,转录成熟RNA 中相应序列的DNA 片段。
病毒受体:能识别病毒并介导病毒的特异性吸附、穿入和脱壳的细胞表面的一个特殊位点,是宿主细
胞表面的特殊结构,多为糖蛋白。
(病毒)基因重组:指两种不同但通常密切相关的两种病毒同时感染同一细胞时, 在其核酸复制过程中发生的核苷酸片段的交换。
细胞病变(CPE ):指感染病毒所导致的细胞损伤,简写CPE 。(大多数动物病毒感染敏感细培养能引起其显微表现的改变,即产生致细胞病变)
原代细胞:动物组织经胰蛋白酶等消化、分散,获得的单个细胞,再生长于培养器皿中。
二倍体细胞株:将长成的原代细胞消化分解成单个细胞,继续培养传代,其细胞染色体数与原代细胞一样,仍为二倍体。
传代细胞系:在体外可无限分裂的细胞,亦称为无限制传代。
聚合酶链式反应(PCR ):扩增样品中的DNA 量和富集众多DNA 分子中的一个特定的DNA 序列的一种技术。
2. 病毒的特点(基本特征)
A . 病毒只含有一种核酸,DNA 或RNA ;B . 病毒是严格的细胞内寄生微生物;C . 病毒没有核糖体和转移RNA ,也无蛋白质合成所需的酶;D . 病毒不能长大和分裂繁殖,只能由其核酸通过生物合成进行装配增殖;E . 病毒对一般抗生素和作用于微生物代谢的药物不敏感;F . 极大多数病毒对干扰素敏感;G .有些病毒的核酸能整合入宿主染色体DNA 中诱发潜伏性感谢染。
4. 病毒复制周期过程:
①吸附 ②穿入与脱壳 ③生物合成 ④组装与释放。
5. 病毒鸡胚培养法、动物接种法、细胞培养法的用途和优缺点
(一):病毒鸡胚培养法 优点:① 经济 ②简便 ③鸡胚易得 缺点:① 有些鸡胚带有母源抗体 ②可能带有病毒 ③很多病毒在鸡胚中不生长
(二):动物接种法 优点:可保持病毒原来的致病力;简单,容易达到目的 缺点:动物个体有差异,影响实验结果;有些动物受保护部能拿来做实验;可用于试验的动物数量有限。
(三):细胞培养方 优点:(1) 细胞的生理特性基本一致;(2)对病毒的感染性一致;(3)没有实验动物的个体差异;(4)可重复性好。 缺点:①有些细胞一般不分裂,很难获得二倍体的细胞株②有的细胞对分离野毒不敏感,有潜在危机。
7. 病毒的分离与鉴定的基本过程
①病料的采集和准备 ②病毒的分离和培养 ③病毒的形态学观察 ④病毒的理化特性测定 ⑤病毒的血清学鉴定 ⑥病毒的分子学鉴定
8聚合酶链式反应(PCR )的基本原理
根据GenBank 中病毒保守序列设计PCR 引物,以待测病毒核酸为模版,在DNA 聚合酶作用下,经变性、退火、延伸等基本步骤,经多次循环,最后获得扩增的目的基因片段,经凝胶电泳可检测目的片段的大小。扩增的片段克隆后或直接进行DNA 测序,结果与一直病毒序列对比,即可得出结论。 病毒有何特点?病毒衣壳的功能是什么?
(1)无细胞结构。(2)严格寄生生活。(3)增殖的方式为复制。(4)对抗生素不敏感。(5)结构简单。功能:保护,与病毒的致病与关
病毒对宿主细胞的致病作用。
1、破坏细胞:引起动物细胞代谢障碍和变性(CPU ,包涵体形成,溶酶体的破坏,红细胞凝集与溶解)
2、细胞融合:感染细胞的过程中,硬气引起动物细胞的细胞膜相互融合,形成多核巨细胞或感染细胞与未感染细胞相互融合,引起病毒向正常细胞的扩散。
3、细胞转化:病毒的DNA 与宿主细胞的DNA 整合,从而改变宿主细胞遗传消息的过程,称为转化。这种转化后的细胞在机体内可能形成肿瘤。 如:疱疹病毒(MD ,牛传鼻,鸡传喉) 腺病毒(EDS ) 反转录病毒(白血病)
4、免疫异常:病毒吸附于动物正常细胞上,引起机体的免疫异常。(改变机体细胞表面的抗原性,激发变态反应发生)
对宿主机体的致病作用:(1)病毒直接破坏机体的结构。(2)病毒的代谢产物对机体的致病作用。 毒力变异:增强与减弱的变异:
(一)增强毒力的变异:在实验室,可使所保存的菌种或毒种通过易感动物,以保持或恢复其毒力。
(二)减弱毒力的变异:病原菌毒力可自发减弱。如:在传染病流行末期所分得的病原株,毒力常较弱小。人工减弱病原菌的毒力,在菌苗制作上有重要意义,
细菌:细菌是原核生物界中的一类单细胞微生物,他们的个体小,形态与结构简单。
菌落:某单个细菌在适合生长的固体培养基表面或内部,在适宜的条件中,经过一定时间的培养,生长繁殖出巨大数量的菌体,形成一个肉眼可见的有一定形态的独立群体称~
原生质体:革兰阳性菌经溶菌酶或青霉素处理后,可完全出去细胞壁,形成仅由细胞膜抱住细胞质的菌体,称为原生质体。(原生质体是细菌经人工处理的不能分裂的细胞。)
原生质球:用溶菌酶等作用革兰阴性菌,仅能除去细胞壁内层的肽聚糖,形成仍有外膜层包裹的菌体,称为原生质球。
细菌L 型:指细菌自发、或经诱导形成的遗传稳定的细胞壁缺陷菌株。
质粒:在核糖体DNA 以外,游离的小型双股DNA 分子。
荚膜:某些细菌在一定营养条件下向细胞壁表面分泌的一层松散、透明、粘液状或胶质状的物质。 芽孢:某些革兰氏阳性菌在一定环境条件下,可在菌体内形成一个圆形或卵圆形的休眠体。
LPS (脂多糖):为革兰阴性细菌所特有,位于外膜的最表面,厚8~10nm ,由类脂A 、核心多糖、侧链多糖组成。
细菌生长曲线:细菌接种到定量的液体培养基中,并置于适宜的温度中,定时取样测定细胞数量,以培养时间为横座标,以菌数为纵座标作图,得到的一条反映细菌在整个培养期间菌数变化规律的曲线。 细菌培养基: 是人工配制的基质,含有细菌生长繁殖所必须的营养物质。培养基制后,通常要经过灭菌处理。
细菌生化试验:细菌在含有一定化合物的培养基中生长后,由于细菌的分解和合成作用,可以使该化合物转化为其他产生,细菌产物的性质可随细菌的种类不同而有差别,可借助生化学方法检测出来,这种方法称为~~
热源质:许多细菌,特别是革兰氏阴性菌,能产生一种多糖物,注入人和动物体内,会引起发热反应,称为~
杀菌作用:某些物质或因素所具有的在一定条件下杀死微生物的作用。
抑菌作用:某些物质或因素所具有的抑制微生物生长与繁殖的作用。
抗菌作用:反映某些药物具有的抑制或杀灭微生物的作用。
灭菌:杀灭物体上所有微生物的方法,包括杀灭细菌芽孢,霉菌包子在内的全部病原微生物和非病原微生物。
消毒:杀灭物体上病原微生物的方法,仅要求达到消除传染性的目的而对非病原微生物及其芽孢、孢子并不严格要求全部杀死。
防腐:阻止或抑制物品上微生物生长繁殖的方法,微生物不一定死亡。
无菌法:防止微生物进入人体或其他物品的操作方法。
巴氏消毒法:以较低温度杀灭液态食品中的病原菌或特定微生物,而又不严重损害其营养成分的风味的消毒方法。
抗生素:某些微生物在代谢过程中产生的一类能抑制或杀死另一些微生物的物质。
细菌素:是某种细菌产生的一种具有杀菌作用的蛋白质,只能作用于与他同中不同菌株的细菌以及与它亲缘关系相近的细菌。
病原菌(pathogen):指那些导致机体发病的细菌,是一群高度特化了的微生物,为了自身的生存,已适应而且必须在宿主生物体内持续存在或增殖,又是可造成宿主发病。
条件致病菌(记有哪些菌):正常情况下不致病,在某些情况改变的特殊情况下可以致病的细菌。如大肠杆菌。
感染(infection):指病原微生物在宿主体内持续存在或增殖,引起不同程度的病理过程。
发病:表示病原微生物感染后,对宿主造成明显的损害。
菌群失调:菌群由于某种原因使正常菌群的种类、数量和比例发生大幅度的改变,导致机体生态失去平衡。
细菌致病性:一定种类的病原菌在一定的条件下,能在宿主体内引起感染的能力。
细菌毒力(virulent):是病原致病菌强弱程度称之,同一细菌的不同菌株其毒力不同。
侵袭力:病原菌在机体内增殖,突破机体防御屏障,内化作用,繁殖和扩散的能力。
内化作用:指某些细菌黏附于细胞表面后,能进入吞噬细胞或非吞噬细胞内部的过程。
类毒素(toxoid):外毒素在0.4%甲醛溶液作用下,经过一段时间可以脱毒,但仍保留原有抗原原性。 抗毒素(antitoxm):外毒素具有良好的免疫原性,可以刺激机体产生特异性抗体而使机体具有免疫保护作用,这种抗体称为。
无菌动物(GF ):就是指不携带任何微生物的动物。
无特定病原体动物(SPF ):不存在某些的特定的具有病原性或潜在病原性微生物的动物
潜伏感染:一种病毒的持续性感染状态,原发感染后,病毒基因存在于一定的 组织或细胞中,并不能产生感染性病毒,也不出现临床症状。
败血症:有致病菌侵入血液循环,并在其中生长繁殖、产生毒素而引起的全生性严重感染。临床表现为法人、严重毒血症、皮疹瘀点、肝脾肿大和白细胞数增高等。
基因组:细菌的基因组位于核体,由两条环状双螺旋DNA 长链组成,控制细菌的遗传变异,是遗传的主要物质基础。
质粒(plasmid ): 是细菌染色体的遗传物质,多为环状双螺旋DNA 分子,可自身复制,随宿主菌分裂传到子代菌体。
转位因子:是一类独特的DNA 片段,不依赖于 同源性重组可以在细菌的基因组中从一个位置转移到另一个位置,也称为条约基因或移动基因。
毒力岛: 指病原菌的某个或某些独立基因群,分子结构呵功能有别于细菌基因组,但位于细菌基因组之内,因此称之为“岛”。
(细菌) 基因突变:细菌遗传物质结构发生突然而稳定的改变,导致细菌性状的遗传变异。
转 化: 供体菌裂解游离的DNA 片段被受体菌直接摄取,使受体获得新的遗传性状的过程。
接 合: 是两个完整的细菌细胞通过性菌毛直接接触,由供体细菌将质粒DNA 转移给受体细菌的过程,具有方向性。
转 导: 以温和噬菌体为媒介,把供体菌的DNA 小片段携带到受菌体中,通过交换和整合,使受菌体获得供菌体的部分遗传性状。
感受态: 是指细胞能从环境中接受转化因子的这一生态,处于感受态的细菌,其吸收DNA 的能力比一般细菌大1000倍。感受态可产生也可消失,它的出现受菌株的遗传特性、生理状态(如菌龄等)、培养环境等的影响。
溶原性转换:温和噬菌体感染其宿主后,噬菌体基因整合于基因组中,寄主的性状发生突变,它是一种表面上与转导相似但本质上不同的特殊现象。
菌株(strain ):是不同来源的某一种细菌的纯培养物。同种细菌可有许多菌株,其主要性状完全相同,次要性状则可稍有差异。
霉菌:凡是生长在营养基质上,能形成绒毛状、蜘蛛网状或絮状菌丝的真菌,均为霉菌。
菌丝:真菌的孢子以出芽的方式繁殖。在环境适宜的情况下由孢子长出芽管,逐渐延长呈丝状,每根单一的细丝称为菌丝
真菌的双相性:有些真菌因环境条件的改变而改变,称为真菌的双相性。
SPA :(葡萄球菌蛋白A )是一种单链多肽,与肽聚糖共价结合。
CAMP 试验:血平板上先接种一条金黄色葡萄球菌的划线垂直接种乳汁或分离的培养物,原来不溶血或溶血不明显的无乳链球菌,在有金黄色葡萄球菌产物存在时,呈明显的β型溶血。借此可区别无乳链球菌、乳房链球菌。CAMP 试验并不是特异的,C 、F 、G 群的某些链球菌株在试验中也可出现阳性现象。
1、什么是微生物和兽医微生物?
微生物:是个体最小的生物,结构简单,肉眼看不到的微小低等生物的总称。
兽医微生物:在微生物学一般理论基础上研究微生物与动物疾病的关系,并利用微生物学与免疫学的知识和技能来诊断、防止动物的疾病和人畜共患传染病,保障人类的食品安全与卫生,保障畜牧业生产,保障动物的健康及生态环境免于破坏。
2、简述微生物的特点
A 体积小,面积大;B 吸收多,转化快;C 生长旺,繁殖快;D 适应强,变异频;E 分布广,种类多。
2、细菌的测量单位;形态以及根据形态将细菌分为几种类型?
测量单位:微米(um )根据形态可分为3种类型:球状,杆状,螺旋状
球菌:双球菌,链球菌,葡萄球菌,四联球菌,八叠球菌
杆菌:球杆菌,分枝杆菌,环死梭杆菌,单杆菌,双杆菌,链杆菌
螺形菌:1,孤菌(霍乱孤菌),2,螺菌(鼠咬热螺菌)
7,革兰染色的机制及意义
机制:结果为阴性(紫色)和阳性(红色)两大类,与细菌细胞壁的结构组成有关。细菌经结晶紫初染和碘液媒染之后,所有细菌都染上不溶于水的结晶紫与碘的复合物,呈深紫色;阳菌的细胞壁含脂类较多,当以95%乙醇脱色时,脂类被乙醇溶去,而肽聚糖少,且交联疏松,不易收缩,在细胞壁中形成的孔隙较大,复合物极易被乙醇溶解洗脱,最后被红色的染料复染成红色;阴菌与阳菌相反,复合物不能脱出,经红色染料复染后仍为紫色。
{(碱)结晶染色→碘媒染→酒精脱色→①可脱为G+②不脱为G —}
作用:在鉴别细菌和选择抗菌物质方面具有重要意义
磷壁酸功能:①是特异的表面抗原;②维持细胞膜上一些酶的活性;③对宿主细胞有粘附作用;④为噬菌体提供特异的吸附受体
革兰氏阳性菌的细胞壁的主要成分:肽聚糖、特有脂多糖(LPS )。
脂多糖(LPS )功能:①是类毒素的主要毒性成分,发挥多种生物学效应;②具有种、型特异性;③LPS
2+ 2+有粘附Mg Ca 等阳离子的作用;④是噬菌体在细胞表面的特异性吸附受体
6,芽孢的结构,功能及对外界环境抵抗力强的原因?
⑴结构:坚实,含水量少,折光性强,多层而且致密,含特有的吡啶二羧酸(DPA)
⑵功能:①有鉴别意义;②保种;③作为灭菌参数
⑶原因:①结构多层致密,具有厚膜,各种理化因子不易透入;②含水量少,蛋白质受热不易变性;③芽孢内含有一种特有的吡啶二羧酸(dpa ),与钙结合形成的复合物能提高芽孢的耐热性和抗氧化能 力);④芽孢内含有一类特殊蛋白质称为酸溶性芽孢小蛋白(SASPs ),与芽孢芯髓内的DNA 紧密结合,使之免受辐射、干燥、高温等破坏。
8,可作为细菌分类和/或鉴别依据的形态与构造有哪些?
⑴形态鉴定:球形菌,杆菌和螺形菌;⑵结构鉴定:细胞壁,如用革兰氏染色法;⑶特殊结构鉴定:荚膜,芽孢,鞭毛和菌毛。作为细菌分类和鉴定的一种依据:不同细菌裂殖后的菌体外形和排列方式 2,细菌细胞物质交换方式有哪些?各自特点是什么?
①单纯扩散:也叫被动扩散,不需要能量,无特异性或者选择性,速度较慢,细胞内外溶质浓度一旦达到平衡,扩散便停止,不是物质运输的主要方式。
②促进扩散:具有特异性和选择性,也不需要能量
③主动运输:需要特异性的载体蛋白,需要能量
④基团转位:需要特异性的载体蛋白,需要能量
3、细菌细胞的代谢特点
⑴细菌生长繁殖速度极快,超过动物细胞的10~100倍。
⑵细菌利用各种化合物作为能源的能力远远强于动物细胞。
⑶细菌对营养物质的需求比动物细胞更为多种多样。
⑷细菌可利用超常流水线式生产的方式生成大分子物质。
⑸细菌能产生诸如肽聚糖,脂多糖,磷壁酸等特殊结构物质。
5、细菌群体生长曲线的特征
(一)迟缓期:菌体增大,代谢活跃,合成并积累所需酶系统;RNA 含量增加,DNA 量不变,细菌数不增加;(二)对数期:活菌数以几何增数快速生长;形态、染色性、生理特性较典型;对外界环境抗菌药物等作用较为敏感;此期细菌均为活菌,且生命力旺盛;此期细菌宜作形态、染色、生化反应、药物敏感等试验研究和保存菌种;病原菌致病力最强(三)稳定期:细菌繁殖速度下降,死亡数逐渐上升,理论繁殖速度与死亡速度相等,新繁殖的活菌数与死菌数大致平衡;因营养物质的消耗,酸性及其他代谢产物的积蓄,ph 值下降,离子强度及氧化还原电势改变;该期细菌的形态及生理性状常有改变,革兰阳性菌此时可染成阴性。(四)衰亡期:繁殖速度下降,细菌开始大量死亡,死菌数超过活菌数,总数减少,如不移植到新的培养基,最终可能全部死亡;细菌形态变化;生理上趋于停止。
7、细菌呼吸的类型:需氧型、微氧型、兼性厌氧性、专性厌氧性、厌氧性
8、简述细菌培养基的分类?
按营养组成:基础培养基和营养培养基
按状态差异:固体培养基、半固体培养基、液体培养基
按功能差异:鉴别培养基、选择培养基、厌氧培养基
3、列举常用的消毒方法(分物理、化学和生物方法)
一.物理方法:A .弱杀伤类。如冷冻、干燥、可见光;B .强杀作类。如热力、紫外线、超声波;C .机械除菌,如冲洗
二.化学方法:A .使蛋白质变性;B .损伤细胞膜;C .干扰细菌的酶系统和代谢;D .改变酶的功能
三.生物方法:抗生素、植物杀菌素、细菌素、噬菌体
4、湿热灭菌与干热灭菌效果哪一种好?为什么?
在相同温度下,湿热灭菌最常用,湿热的效力比干热灭菌好。
原因:①热蒸汽对细胞成分的破坏作用更强;②热蒸汽比热空气穿透力强;③蒸汽潜热大,当气体转变为液体时可放出大量热量,故可迅速提高灭菌物体的温度
5、试述各种热力灭菌方法的特点、用途和方法。
⑴火焰灭菌:用火焰直接灼烧杀死物体中全部微生物的方法,分为灼烧和焚烧。灼烧是直接用火焰灭菌,焚烧是直接点燃火在焚烧炉内焚烧。
⑵热空气灭菌:利用干热灭菌器,以干热空气进行灭菌的方法,适用于高温下不损坏,不变质,不蒸发的物品。
⑶红外线灭菌:利用红外线烤箱灭菌,无需空气传到,可使照射物体表面迅速升温但不均匀,用于医疗器械的灭菌。
4、菌群失调的原因?
①长期使用抗生素、放射性核素、激素等;②感染、慢性消耗性疾病使免疫功能下降;③因手术或器械性检查使局部免疫受损,有利细菌侵入
6、细菌毒力增强与减弱的方法?
增强:目前可采用分子生物学技术该找毒力基因,达到增强毒力的目的。
减弱:①长时间在体外连续培养 ②在高温最适生长温度条件下培养 ③在含有特殊化学物质的培养基中培养 ④在特殊气体条件下培养 ⑤通过非易感动物、极硬工程的方法
8、构成毒力的因素有哪些?
许多细菌的毒力因子受环境因素的调节,仅在某些特定的条件下才能表达,对细菌有调节作用的环境条件包括:温度、铁离子及钙离子浓度、渗透压、PH 、含氧量等。
温度,是许多细菌重要的调节信号,特别是对自然生存环境温度低于宿主温度的细菌
铁,不仅是细菌必需的生长因子,而且对细菌毒力因子的表达也其调节作用
钙,对耶尔森菌Yops 的表达有调节作用
渗透压,霍乱弧菌的毒力及菌毛的表达有调节作用
2、概述细菌遗传变异的物质基础?
细菌的遗传物质为DNA ,细菌遗传的物质基础有:基因组、质粒、转位因子、毒力岛。细菌的基因组是细菌染色体呵染色体以外遗传物质所携带基因的总称; (其它定义见上)
3、质粒有哪些主要特点及类型?
①质粒具有自我复制能力;②质粒具有转移性,可通过接合、转化或转导等方式在细菌间转移;③质粒可自行丢失或人工消除;④质粒可分为相容性和不相容性;⑤质粒DNA 所编码的基因产物赋予细菌某些性状特征,如致育性、耐药性、致病性、某些生化特性等。
按物质受控程度分:紧密型质粒、松弛型质粒
按编码的基本产物赋予细菌某些特征分:F 质粒(致育质粒)R 质粒、Col 质粒、Vi 质粒(毒力质粒) 按转移特性分:接合性质粒、非接合性质粒
4、试述细菌变异的类型和方法?
在人工或自然条件下,细菌的基因发生了改变,使相应的性状也发生了变化,并可以遗传下去,称为遗传性变异。
⑴基因突变:按其发生改变范围的大小分为
染色体畸变:指染色体的一大段发生了变化,它包括染色体结构上的缺失、重复、插入、易位和导致。 点突变:是相应基因上的DNA 链中一个或少数几个核苷酸对的改变,包括核苷酸对的置换,进一步分为转换、颠换及移码。
⑵基因转移:供体细菌间接或直接地将部分遗传物质单向传递给受体细菌,从而导致受体细菌发生基因重组的现象,称为基因转移。
方法:基因突变(自发突变、人工诱变);基因转移(转化、转导、接合、原生质体融合和传染)。
5、在自然条件下细菌的基因转移重组主要方式有哪几种?
基因转移重组的主要:转化、转导、接合、原生质体融合和传染。
6、何谓转导?转导有哪些类型?
以温和噬菌体为媒介,把供体菌的DNA 小片段携带到受菌体中,通过交换和整合,使受菌体获得供菌体的部分遗传性状。分为普遍性转导和局限性转导。
8、什么是细菌分类的基本单位?根据什么指标来确定?
细菌的分类单元与动植物一样,也有纲、目、科、属、种,但最重要、最基本的单元是中,其次为属。 分类的主要依据是其表型特征,即形态、染色、培养、细胞壁结构、生理生化及抗原性的特征。
9、细菌命名
细菌的命名依据是“国际细菌命名法规”的规定,学名用拉丁文,遵循“双名法”. 即每一种细菌的拉丁文名称与动植物名称一样,由种名和属名两部分构成,属名在前,种名在后,属名地一个字母必须答谢,其余均应消协,计时种名以人名或地名命名的,种名头一个字母也用小写。整个属名及种名在出版物中应排成泄题。中文译名与拉丁名正好相反,种名在前,属名在后。
4、菌丝体按功能分类:营养菌丝:起吸收营养作用;气生菌丝:可分化成为繁殖菌丝
5、简述真菌的致病性
A 致病性真菌性感染: 主要是一些外源性感染,可造成皮肤、皮下和全身性感染。B 机会致病性真菌感染: 主要是内源性感染,致病性不强。C 真菌变态反应性疾病: 本身不治病,但污染空气时,可引起接触性皮炎等疾病。D 真菌性中毒: 有些真菌在粮食或饲料上生长,产生毒素,人、畜食用后可导致急性或慢性中毒。E 致肿瘤:某些真菌产物与肿瘤的发生有着密切关系。
8. 真菌的繁殖方式和繁殖结构
繁殖方式:有性繁殖和无性繁殖 繁殖结构:孢子(有性、无性)、配子。
5、原核生物与真核生物的主要区别是什么?
原核细胞无核膜和刻仁,有类似于细胞核功能的核区(3分)。真核细胞有完整的细胞核,有核膜核仁
12. 革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌细胞壁结构差异的生物学意义
1) 与染色有关:G+菌的细胞壁致密、肽聚糖厚,脂含量低,酒精不容易透入;G-菌的细胞壁疏松、肽聚糖薄,外膜、脂蛋白、脂多糖脂含量极高,酒精容易透入。细胞内结合染液中的结晶紫-碘的复合物容易被酒精溶解而脱色。(2分)
2) 与细菌对药物的敏感性有关:主要结构基础是肽聚糖。G+菌的细胞壁对青霉素、溶菌酶敏感,青霉素可抑制肽聚糖四肽侧链与甘氨酸5联桥之间的联结,而干扰肽聚糖的合成;溶菌酶杀菌机理是水解肽聚糖N-乙酰葡萄糖胺和N-乙酰胞壁酸之间的β-1,4糖苷键。G-菌的细胞壁肽聚糖少,有外膜保护,对化学药物有抵抗力,对多种抗生素敏感性低,青霉素作用效果差。
3) 与细菌致病性有关:G-菌的细胞壁含有磷酸脂多糖(LPS ),其中的脂类A 是其主要毒性成分。
4) 与抗原性有关:G-菌细胞壁磷酸脂多糖(LPS )中的特异性多糖具有抗原性,属于O 抗原,依其可对细菌进行分群、分型。(1.5分)
16、什么叫培养基?制备培养基的一般程序有哪些?
用人工的方法将细菌所需要的营养物质调配在一起用于培养细菌的人工养料。 称量、加热、溶解、调酸碱度、过滤、分装。
影响细菌生长繁殖的因素有哪些?
(1)营养物质:A 水分:细菌的新陈代谢需要充足的水,游离水作为新陈代谢的主要溶剂。B 含碳化合物:糖类(牛肉膏)C 含氮化合物:Pr (蛋白质)D 矿物质:生长因子、气体。
(2)温度:病原菌的最适宜生长温度为37℃。
(3)PH :最适 7.2-7.6, 所以往往需要在培养基内加入一定的缓冲剂。
(4)渗透压:例如:盐腌的原理(防腐)、盐提高食品中的渗透压,细菌不能生长,
细菌的分离培养:
1、细菌的生长表现:在固体培养基上生长为菌落。表现:大小、形态、透明度、隆起度、度、湿润度,表面光滑、粗糙、有无光泽。在液体培养基:所有细菌能在其扩散生长。 表现:浑浊、沉淀、形成菌环、细菌膜等。
2、细菌的分离:用人工培养方法将细菌从病料或某一个菌落移植到新的培养基中培养分离出来,称细菌的分离。
免疫学诊断:1、凝集试验 2、沉淀试验 3、补体结合试验
微生物变异的实际应用:了解微生物的变异,在传染病的诊断与防治方面有重要意义。
1、诊断方面:细菌发生变异后,结构、形态等与正常不同。诊断时注意,以免发生误诊。
2、预防方面:用人工变异方法,获得抗原性良好,毒力减弱的菌株或毒株,制造疫苗。
3、治疗方面:耐药菌株的出现,要求用药针对性要强,做药物敏感实验。
病毒
传染性核酸:在些病毒去除其囊膜和衣壳,裸露的DNA 或RNA 注入易感细胞内也能引起感染,并产生完整的病毒颗粒。这样的核酸称为传染性核酸。
结构蛋白: 构成一个形态成熟的有感染性的病毒颗粒所必需的蛋白质。
非结构蛋白: 指由病毒基因组编码的,在病毒复制或基因表达调控过程中具有一定功能,但不结合于病毒颗粒中的蛋白质。
感染比: 指在一个系统中感染病毒的细胞数与细胞总数之比。
隐蔽期: 在病毒感染细胞之后的一个短时间内,病毒完全消失,甚至在细胞内也找不到传染性的病毒颗粒,直至感染数小时后子代病毒出现为止,这一阶段为隐蔽期。
病毒的一步生长曲线:定量描述烈性噬菌体生长规律的实验曲线称为一步生长曲线。
内含子: 是断裂基因中外显子之间的间隔序列,可参与前体RNA 的转录,但其转录的RNA 序列于转录后的加工中被切除,不包括于成熟的RNA 分子中。
外显子: 在断裂基因中,转录成熟RNA 中相应序列的DNA 片段。
病毒受体:能识别病毒并介导病毒的特异性吸附、穿入和脱壳的细胞表面的一个特殊位点,是宿主细
胞表面的特殊结构,多为糖蛋白。
(病毒)基因重组:指两种不同但通常密切相关的两种病毒同时感染同一细胞时, 在其核酸复制过程中发生的核苷酸片段的交换。
细胞病变(CPE ):指感染病毒所导致的细胞损伤,简写CPE 。(大多数动物病毒感染敏感细培养能引起其显微表现的改变,即产生致细胞病变)
原代细胞:动物组织经胰蛋白酶等消化、分散,获得的单个细胞,再生长于培养器皿中。
二倍体细胞株:将长成的原代细胞消化分解成单个细胞,继续培养传代,其细胞染色体数与原代细胞一样,仍为二倍体。
传代细胞系:在体外可无限分裂的细胞,亦称为无限制传代。
聚合酶链式反应(PCR ):扩增样品中的DNA 量和富集众多DNA 分子中的一个特定的DNA 序列的一种技术。
2. 病毒的特点(基本特征)
A . 病毒只含有一种核酸,DNA 或RNA ;B . 病毒是严格的细胞内寄生微生物;C . 病毒没有核糖体和转移RNA ,也无蛋白质合成所需的酶;D . 病毒不能长大和分裂繁殖,只能由其核酸通过生物合成进行装配增殖;E . 病毒对一般抗生素和作用于微生物代谢的药物不敏感;F . 极大多数病毒对干扰素敏感;G .有些病毒的核酸能整合入宿主染色体DNA 中诱发潜伏性感谢染。
4. 病毒复制周期过程:
①吸附 ②穿入与脱壳 ③生物合成 ④组装与释放。
5. 病毒鸡胚培养法、动物接种法、细胞培养法的用途和优缺点
(一):病毒鸡胚培养法 优点:① 经济 ②简便 ③鸡胚易得 缺点:① 有些鸡胚带有母源抗体 ②可能带有病毒 ③很多病毒在鸡胚中不生长
(二):动物接种法 优点:可保持病毒原来的致病力;简单,容易达到目的 缺点:动物个体有差异,影响实验结果;有些动物受保护部能拿来做实验;可用于试验的动物数量有限。
(三):细胞培养方 优点:(1) 细胞的生理特性基本一致;(2)对病毒的感染性一致;(3)没有实验动物的个体差异;(4)可重复性好。 缺点:①有些细胞一般不分裂,很难获得二倍体的细胞株②有的细胞对分离野毒不敏感,有潜在危机。
7. 病毒的分离与鉴定的基本过程
①病料的采集和准备 ②病毒的分离和培养 ③病毒的形态学观察 ④病毒的理化特性测定 ⑤病毒的血清学鉴定 ⑥病毒的分子学鉴定
8聚合酶链式反应(PCR )的基本原理
根据GenBank 中病毒保守序列设计PCR 引物,以待测病毒核酸为模版,在DNA 聚合酶作用下,经变性、退火、延伸等基本步骤,经多次循环,最后获得扩增的目的基因片段,经凝胶电泳可检测目的片段的大小。扩增的片段克隆后或直接进行DNA 测序,结果与一直病毒序列对比,即可得出结论。 病毒有何特点?病毒衣壳的功能是什么?
(1)无细胞结构。(2)严格寄生生活。(3)增殖的方式为复制。(4)对抗生素不敏感。(5)结构简单。功能:保护,与病毒的致病与关
病毒对宿主细胞的致病作用。
1、破坏细胞:引起动物细胞代谢障碍和变性(CPU ,包涵体形成,溶酶体的破坏,红细胞凝集与溶解)
2、细胞融合:感染细胞的过程中,硬气引起动物细胞的细胞膜相互融合,形成多核巨细胞或感染细胞与未感染细胞相互融合,引起病毒向正常细胞的扩散。
3、细胞转化:病毒的DNA 与宿主细胞的DNA 整合,从而改变宿主细胞遗传消息的过程,称为转化。这种转化后的细胞在机体内可能形成肿瘤。 如:疱疹病毒(MD ,牛传鼻,鸡传喉) 腺病毒(EDS ) 反转录病毒(白血病)
4、免疫异常:病毒吸附于动物正常细胞上,引起机体的免疫异常。(改变机体细胞表面的抗原性,激发变态反应发生)
对宿主机体的致病作用:(1)病毒直接破坏机体的结构。(2)病毒的代谢产物对机体的致病作用。 毒力变异:增强与减弱的变异:
(一)增强毒力的变异:在实验室,可使所保存的菌种或毒种通过易感动物,以保持或恢复其毒力。
(二)减弱毒力的变异:病原菌毒力可自发减弱。如:在传染病流行末期所分得的病原株,毒力常较弱小。人工减弱病原菌的毒力,在菌苗制作上有重要意义,