６７３
【方法测定】
［文章编号］１００４—８６８５（２０００）０６—０６７３—０１
邻苯三酚自氧化法测定ＳＯＤ活性
李永利张焱
（河南省卫生防疫站郑州４５０００３）
［中图分类号３０６５７．３２（文献标识码３Ｂ
ＳＯＤ活性是ＳＯＤ型食品、化妆品效能的前提，ＳＯＤ的测定方法主要分为化学法和免疫法。用本方法测定ＳＯＤ活性具有灵敏、准确、简单、快速等优点。
一次光密度值共测４ｍｉｎ，求出邻苯三酚的自氧化速率ＯＤ“／ｍｉｎ。同时用１０ｍｍｏｌ／Ｌ的盐酸做空白试验ａ
（２）ＳＯＤ活性测定：取ｐＨ８．２的Ｔｒｉｓ—ＨＣｌ一ＥＤＴＡ缓冲液４．５ｍ！于ｌＯｍｌ比色管中，２５。Ｃ恒温１０ｍｉｎ，加入已恒温至
１材料与方法１．１试剂和仪器
（１）邻苯三酚溶液：用１０ｍｍｏｌ／Ｌ的盐酸溶液配制成４５ｍｍｏｌ／Ｌ的溶液，此溶液须临用现配。
（２）Ｔｒｉｓ—ＨＣｌ—ＥＤＴＡ缓冲液：配制５０ｍｍｏｌ／Ｌ的Ｔｒｉｓ—ＨＣＩ缓冲液，内含ｌｍｍｏｌ／Ｌ的ＥＤＴＡ溶液，调ｐＨ为８．２
（３）ＷＦＺ８００－－Ｄ３型紫外可见分光光度计（北京二分）。１．２样品
取样品１０９（精确至０．００１）。用水浸泡或溶解定容至１００ｍｌ过滤，取滤液备用。
１．３１．３．１
２５℃的样品溶液１０ｍｌ，迅速混匀，于３２５ｎｍ波长测定密度值，３０ｓ测一次，测４ｍｉｎ，求出光密度值变化速率ＯＤｎ／ｍｉｎ。
（３）计算：
］ＯＤＡ－掣ＯＤＢ
２结果与讨论
２．２
酶活力（Ｕ／ｍ１）
飙×瓦ｎ
ｖ１一反应液总体积，ｍｌｖ：一测定样品体积，ｍｌｎ一样品稀释液倍数
０ＤＡ一邻苯三酚的自氧化速率。ＯＤｎ一样品光密度值变化速率。
方法
方法原理：邻苯三酚在酸性环境中稳定。但在弱碱性环
境中会发生自氧化反应，邻苯三酚在自氧化时只接受一个电子生成超氧阴离子自由基（０：＋０。一），并在其自氧化过程中以一定速率产生有色中间产物，ＳＯＤ可以将Ｏ：一歧化分解成ＨｚＯｚ和０：，从而抑制了邻苯三酚的自氧化速率。
２．１样品溶液有少许颜色对本试验没有干扰。
用本方法连续测定同一ＳＯＤ型口服液共计６次，测定结
２０ｚ－＋２Ｈ＋磐Ｈ２０２＋ｏ。
由此可以依据ＳＯＤ分解Ｏｚ一的能力而间接推算ＳＯＤ的活性（每分钟反应液中ＳＯＤ抑制５０％反应速率时即为ＳＯＤ活力单位）。
１．３．２试验方法：
（１）邻苯三酚自氧化速率的测定，取ｐＨ８．２的Ｔｒｉｓ—ＨＣｌ一ＥＤＴＡ缓冲液４．５ｍｌ于１０ｍｌ比色管中，于２５℃恒温１０ｍｉｎ，再加入２５℃恒温的４５ｍｍｏｌ／Ｌ的邻苯三酚溶液ｌＯ，ｕｌ，混匀后迅速于ｌｃｍ石英比色杯３２５ｎｍ波长测光密度值，每隔３０ｓ测
果为（Ｕ／ｍ１）：８５０土１０．５９，尺ＳＤ＝１．２５。用同样方法测定了ＳＯＤ酶稀释液酶活力单位相当于１０００Ｕ／ｍｌ，回收率为
９８．１％。
２．３使用本方法分析速度快，干扰少，特异性强，ＳＯＤ最低检
测浓度可达ｌＯ－１０～１０ｒ１１ｍｏｌ／Ｌ。
参考文献
ｌ戴有盛，等．食品的生化与营养．北京：科学出版社，１９９４：２１２２胡学智，张惠荪，等译．酶法食品分析．上海科学技术文献出版社
１９８０：８１
（２０００…０５一】５收稿）
万方数据
邻苯三酚自氧化法测定SOD活性
作者：作者单位：刊名：英文刊名：年，卷(期)：被引用次数：
李永利， 张焱
河南省卫生防疫站,郑州,450003
中国卫生检验杂志
CHINESE JOURNAL OF HEALTH LABORATORY TECHNOLOGY2000,10(6)36次
参考文献(2条)
1.戴有盛 食品的生化与营养 19942.胡学智;张惠荪 酶法食品分析 1980
本文读者也读过(5条)
1. 许雅娟.赵艳景.胡虹.XU Ya-juan.ZHAO Yan-jing.HU Hong 邻苯三酚自氧化法测定超氧化物歧化酶活性的研究[期刊论文]-西南民族大学学报（自然科学版）2006,32(6)
2. 万军.黄国钧.周霞 邻苯三酚自氧化法测定SOD活性中检测波长的优化[期刊论文]-安徽农业科学2010,38(14)3. 张中林.陈立欣 用邻苯法三酚测定大蒜中超氧化物歧化酶活性[期刊论文]-卫生职业教育2007,25(3)
4. 廖展如.陈文学.艾常春.万平.刘合力.汪明 邻苯三酚自氧化法适于测定SOD活性吗?[期刊论文]-华中师范大学学报(自然科学版)2003,37(1)
5. 孙雪奇.陈齐英.别小琳 邻苯三酚自氧化法测定SOD活性中测定波长的选择[期刊论文]-华西药学杂志2004,19(5)
引证文献(38条)
1.武夷岩茶茶多酚的体外抗氧化作用[期刊论文]-武夷学院学报 2009(2)2.大蒜中SOD的提取研究[期刊论文]-化学与生物工程 2005(10)
3.万军.黄国钧.周霞 邻苯三酚自氧化法测定SOD活性中检测波长的优化[期刊论文]-安徽农业科学 2010(14)4.孙希云.刘宁.陈波.孟宪军 马齿苋总黄酮抗氧化性质的研究[期刊论文]-沈阳农业大学学报 2006(1)5.孙桂玲.孟磊.何华红.张相年.赵树进 大蒜超氧化物歧化酶分离方法的研究[期刊论文]-中药材 2006(12)6.阿祥仁.张鑫生 利舒康胶囊对高原地区中老年人氧自由基代谢指标的影响[期刊论文]-中国老年学杂志 2005(10)7.张贵生 镧对鲤鱼五种组织超氧化物歧化酶同工酶及酶活性的影响[期刊论文]-四川动物 2008(4)8.张贵生 稀土元素对鲤鱼肝胰脏多种酶及MDA含量的影响[期刊论文]-生物技术 2008(2)9.卜春文 鹅血中SOD、IgG的提取工艺研究[期刊论文]-食品科技 2004(5)
10.李学俊.舒志明.李仕生.李虎威.秦宝福 淋浆水中SOD提取工艺研究[期刊论文]-安徽农业科学 2011(36)11.张贵生 镧暴露对鲤鱼脑和肌肉中酶和脂质过氧化水平的影响[期刊论文]-水生生物学报 2008(4)12.李书倩.辛广.戴亚东.刘长江 白灵菇多糖抗氧化性质的研究[期刊论文]-鞍山师范学院学报 2007(2)13.侯振建.王帅领.余军锁 活性花粉酒的研制[期刊论文]-酿酒 2004(3)
14.原龙.王新.杨平 大蒜中超氧化物歧化酶提取工艺的研究[期刊论文]-西安工程大学学报 2009(1)15.张贵生.朱道玉 镧长期暴露对鲤鱼的毒性影响研究[期刊论文]-中国饲料 2008(10)
16.苏传福.罗莉.李芹.文华.汪福保 硒对草鱼抗氧化功能及组织结构的影响[期刊论文]-西南师范大学学报(自然科学版) 2008(5)
17.耿晓修.丁诗华.孙翰昌.廖品福.张涛 六价铬对草鱼肝脏SOD和GSH-Px活力的影响[期刊论文]-西南农业大学学报（自然科学版） 2006(2)
18.杨华.周小苗.方亚东.郭纯.龚银.曹杏芝 大蒜SOD酶的分离纯化和肝素修饰[期刊论文]-湖南农业科学 2011(13)19.陈世彪.李莉.李海涛 柑橘黄酮体外清除活性氧自由基作用的研究[期刊论文]-安徽农业科学 2010(9)
20.徐玲玲.张均平.邵邻相.张耀斌.毕洁琼.巩菊芳 大豆磷脂对老龄大鼠学习记忆及抗氧化能力的影响[期刊论文]-浙江师范大学学报（自然科学版） 2010(2)
21.印君.尹宗宁 超氧化物歧化酶的固定及其活性检测[期刊论文]-中国生物制品学杂志 2009(7)22.张贵生 镧对鲤鱼肾和鳃抗氧化性和酯酶同工酶的影响[期刊论文]-生态学杂志 2008(8)
23.赵文宝.张珍.郭建华.金晶 牦牛血中超氧化物歧化酶提取工艺研究[期刊论文]-甘肃农业大学学报 2010(1)24.刘晓红.李向东.刘婷.周帼萍 热变性法提纯猪血SOD的工艺优化[期刊论文]-武汉工业学院学报 2008(1)25.陈田飞.吴大洋.李春峰 家蚕冷冻精液超氧化物歧化酶(SOD)活性分析[期刊论文]-蚕学通讯 2004(4)26.吴红松 三聚氰胺对鲤鱼组织SOD、POD和MDA含量的影响[期刊论文]-动物医学进展 2012(5)
27.李鸿梅.郭平.倪鹏.冯永巍.徐力.张学忠 玉米蛋白粉制备玉米肽脱脂及水解工艺研究[期刊论文]-吉林农业大学学报 2006(3)
28.张瑞东.迟玉杰.陈晨.阮长青 蛋清蛋白酶解物抗氧化与血管紧张素转换酶抑制活性的研究[期刊论文]-营养学报 2010(4)
29.汪福保.罗莉.张桂众.颜忠.刘本祥 Fe、Zn、Cu不同组合对岩原鲤生长、体组成和血清生化指标的影响[期刊论文]-淡水渔业 2009(4)
30.陈晨.迟玉杰.刘丽 蛋清的蛋白酶解物清除自由基能力的研究[期刊论文]-营养学报 2009(5)
31.王文博.孙建光.徐晶 螺旋藻产品活性物质检测与免疫功能研究[期刊论文]-中国食品卫生杂志 2011(1)32.李志明.陈青.金启安.唐超.温海波.彭正强 高温对椰心叶甲啮小蜂保护酶系活性的影响[期刊论文]-热带作物学报 2010(6)
33.蔡英卿.赖钟雄.沈金山.陈义挺.李国清.林玉玲.郑文炉 余甘子各器官超氧化物歧化酶活性的测定[期刊论文]-热带作物学报 2006(4)
34.王文博.孙建光.徐晶 螺旋藻产品活性物质检测与免疫功能研究[期刊论文]-中国食品卫生杂志 2011(1)35.陈青.卢芙萍.徐雪莲.卢辉.经福林.彭正强 椰心叶甲耐热性初步研究[期刊论文]-热带作物学报 2012(1)36.蔡英卿.赖钟雄.徐丽珠.陈义挺.陈怀宇.庄卫东.林文忠.林玉玲 龙眼各营养器官SOD活性的测定分析[期刊论文]
-河北林果研究 2006(4)
37.侯建平 中药黄芪有效成分的抗氧化活性及其对益生菌促生作用的研究[学位论文]硕士 200538.王学军 自组装分子印迹聚合物制备及其水相识别的研究[学位论文]博士 2007
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６７３
【方法测定】
［文章编号］１００４—８６８５（２０００）０６—０６７３—０１
邻苯三酚自氧化法测定ＳＯＤ活性
李永利张焱
（河南省卫生防疫站郑州４５０００３）
［中图分类号３０６５７．３２（文献标识码３Ｂ
ＳＯＤ活性是ＳＯＤ型食品、化妆品效能的前提，ＳＯＤ的测定方法主要分为化学法和免疫法。用本方法测定ＳＯＤ活性具有灵敏、准确、简单、快速等优点。
一次光密度值共测４ｍｉｎ，求出邻苯三酚的自氧化速率ＯＤ“／ｍｉｎ。同时用１０ｍｍｏｌ／Ｌ的盐酸做空白试验ａ
（２）ＳＯＤ活性测定：取ｐＨ８．２的Ｔｒｉｓ—ＨＣｌ一ＥＤＴＡ缓冲液４．５ｍ！于ｌＯｍｌ比色管中，２５。Ｃ恒温１０ｍｉｎ，加入已恒温至
１材料与方法１．１试剂和仪器
（１）邻苯三酚溶液：用１０ｍｍｏｌ／Ｌ的盐酸溶液配制成４５ｍｍｏｌ／Ｌ的溶液，此溶液须临用现配。
（２）Ｔｒｉｓ—ＨＣｌ—ＥＤＴＡ缓冲液：配制５０ｍｍｏｌ／Ｌ的Ｔｒｉｓ—ＨＣＩ缓冲液，内含ｌｍｍｏｌ／Ｌ的ＥＤＴＡ溶液，调ｐＨ为８．２
（３）ＷＦＺ８００－－Ｄ３型紫外可见分光光度计（北京二分）。１．２样品
取样品１０９（精确至０．００１）。用水浸泡或溶解定容至１００ｍｌ过滤，取滤液备用。
１．３１．３．１
２５℃的样品溶液１０ｍｌ，迅速混匀，于３２５ｎｍ波长测定密度值，３０ｓ测一次，测４ｍｉｎ，求出光密度值变化速率ＯＤｎ／ｍｉｎ。
（３）计算：
］ＯＤＡ－掣ＯＤＢ
２结果与讨论
２．２
酶活力（Ｕ／ｍ１）
飙×瓦ｎ
ｖ１一反应液总体积，ｍｌｖ：一测定样品体积，ｍｌｎ一样品稀释液倍数
０ＤＡ一邻苯三酚的自氧化速率。ＯＤｎ一样品光密度值变化速率。
方法
方法原理：邻苯三酚在酸性环境中稳定。但在弱碱性环
境中会发生自氧化反应，邻苯三酚在自氧化时只接受一个电子生成超氧阴离子自由基（０：＋０。一），并在其自氧化过程中以一定速率产生有色中间产物，ＳＯＤ可以将Ｏ：一歧化分解成ＨｚＯｚ和０：，从而抑制了邻苯三酚的自氧化速率。
２．１样品溶液有少许颜色对本试验没有干扰。
用本方法连续测定同一ＳＯＤ型口服液共计６次，测定结
２０ｚ－＋２Ｈ＋磐Ｈ２０２＋ｏ。
由此可以依据ＳＯＤ分解Ｏｚ一的能力而间接推算ＳＯＤ的活性（每分钟反应液中ＳＯＤ抑制５０％反应速率时即为ＳＯＤ活力单位）。
１．３．２试验方法：
（１）邻苯三酚自氧化速率的测定，取ｐＨ８．２的Ｔｒｉｓ—ＨＣｌ一ＥＤＴＡ缓冲液４．５ｍｌ于１０ｍｌ比色管中，于２５℃恒温１０ｍｉｎ，再加入２５℃恒温的４５ｍｍｏｌ／Ｌ的邻苯三酚溶液ｌＯ，ｕｌ，混匀后迅速于ｌｃｍ石英比色杯３２５ｎｍ波长测光密度值，每隔３０ｓ测
果为（Ｕ／ｍ１）：８５０土１０．５９，尺ＳＤ＝１．２５。用同样方法测定了ＳＯＤ酶稀释液酶活力单位相当于１０００Ｕ／ｍｌ，回收率为
９８．１％。
２．３使用本方法分析速度快，干扰少，特异性强，ＳＯＤ最低检
测浓度可达ｌＯ－１０～１０ｒ１１ｍｏｌ／Ｌ。
参考文献
ｌ戴有盛，等．食品的生化与营养．北京：科学出版社，１９９４：２１２２胡学智，张惠荪，等译．酶法食品分析．上海科学技术文献出版社
１９８０：８１
（２０００…０５一】５收稿）
万方数据
邻苯三酚自氧化法测定SOD活性
作者：作者单位：刊名：英文刊名：年，卷(期)：被引用次数：
李永利， 张焱
河南省卫生防疫站,郑州,450003
中国卫生检验杂志
CHINESE JOURNAL OF HEALTH LABORATORY TECHNOLOGY2000,10(6)36次
参考文献(2条)
1.戴有盛 食品的生化与营养 19942.胡学智;张惠荪 酶法食品分析 1980
本文读者也读过(5条)
1. 许雅娟.赵艳景.胡虹.XU Ya-juan.ZHAO Yan-jing.HU Hong 邻苯三酚自氧化法测定超氧化物歧化酶活性的研究[期刊论文]-西南民族大学学报（自然科学版）2006,32(6)
2. 万军.黄国钧.周霞 邻苯三酚自氧化法测定SOD活性中检测波长的优化[期刊论文]-安徽农业科学2010,38(14)3. 张中林.陈立欣 用邻苯法三酚测定大蒜中超氧化物歧化酶活性[期刊论文]-卫生职业教育2007,25(3)
4. 廖展如.陈文学.艾常春.万平.刘合力.汪明 邻苯三酚自氧化法适于测定SOD活性吗?[期刊论文]-华中师范大学学报(自然科学版)2003,37(1)
5. 孙雪奇.陈齐英.别小琳 邻苯三酚自氧化法测定SOD活性中测定波长的选择[期刊论文]-华西药学杂志2004,19(5)
引证文献(38条)
1.武夷岩茶茶多酚的体外抗氧化作用[期刊论文]-武夷学院学报 2009(2)2.大蒜中SOD的提取研究[期刊论文]-化学与生物工程 2005(10)
3.万军.黄国钧.周霞 邻苯三酚自氧化法测定SOD活性中检测波长的优化[期刊论文]-安徽农业科学 2010(14)4.孙希云.刘宁.陈波.孟宪军 马齿苋总黄酮抗氧化性质的研究[期刊论文]-沈阳农业大学学报 2006(1)5.孙桂玲.孟磊.何华红.张相年.赵树进 大蒜超氧化物歧化酶分离方法的研究[期刊论文]-中药材 2006(12)6.阿祥仁.张鑫生 利舒康胶囊对高原地区中老年人氧自由基代谢指标的影响[期刊论文]-中国老年学杂志 2005(10)7.张贵生 镧对鲤鱼五种组织超氧化物歧化酶同工酶及酶活性的影响[期刊论文]-四川动物 2008(4)8.张贵生 稀土元素对鲤鱼肝胰脏多种酶及MDA含量的影响[期刊论文]-生物技术 2008(2)9.卜春文 鹅血中SOD、IgG的提取工艺研究[期刊论文]-食品科技 2004(5)
10.李学俊.舒志明.李仕生.李虎威.秦宝福 淋浆水中SOD提取工艺研究[期刊论文]-安徽农业科学 2011(36)11.张贵生 镧暴露对鲤鱼脑和肌肉中酶和脂质过氧化水平的影响[期刊论文]-水生生物学报 2008(4)12.李书倩.辛广.戴亚东.刘长江 白灵菇多糖抗氧化性质的研究[期刊论文]-鞍山师范学院学报 2007(2)13.侯振建.王帅领.余军锁 活性花粉酒的研制[期刊论文]-酿酒 2004(3)
14.原龙.王新.杨平 大蒜中超氧化物歧化酶提取工艺的研究[期刊论文]-西安工程大学学报 2009(1)15.张贵生.朱道玉 镧长期暴露对鲤鱼的毒性影响研究[期刊论文]-中国饲料 2008(10)
16.苏传福.罗莉.李芹.文华.汪福保 硒对草鱼抗氧化功能及组织结构的影响[期刊论文]-西南师范大学学报(自然科学版) 2008(5)
17.耿晓修.丁诗华.孙翰昌.廖品福.张涛 六价铬对草鱼肝脏SOD和GSH-Px活力的影响[期刊论文]-西南农业大学学报（自然科学版） 2006(2)
18.杨华.周小苗.方亚东.郭纯.龚银.曹杏芝 大蒜SOD酶的分离纯化和肝素修饰[期刊论文]-湖南农业科学 2011(13)19.陈世彪.李莉.李海涛 柑橘黄酮体外清除活性氧自由基作用的研究[期刊论文]-安徽农业科学 2010(9)
20.徐玲玲.张均平.邵邻相.张耀斌.毕洁琼.巩菊芳 大豆磷脂对老龄大鼠学习记忆及抗氧化能力的影响[期刊论文]-浙江师范大学学报（自然科学版） 2010(2)
21.印君.尹宗宁 超氧化物歧化酶的固定及其活性检测[期刊论文]-中国生物制品学杂志 2009(7)22.张贵生 镧对鲤鱼肾和鳃抗氧化性和酯酶同工酶的影响[期刊论文]-生态学杂志 2008(8)
23.赵文宝.张珍.郭建华.金晶 牦牛血中超氧化物歧化酶提取工艺研究[期刊论文]-甘肃农业大学学报 2010(1)24.刘晓红.李向东.刘婷.周帼萍 热变性法提纯猪血SOD的工艺优化[期刊论文]-武汉工业学院学报 2008(1)25.陈田飞.吴大洋.李春峰 家蚕冷冻精液超氧化物歧化酶(SOD)活性分析[期刊论文]-蚕学通讯 2004(4)26.吴红松 三聚氰胺对鲤鱼组织SOD、POD和MDA含量的影响[期刊论文]-动物医学进展 2012(5)
27.李鸿梅.郭平.倪鹏.冯永巍.徐力.张学忠 玉米蛋白粉制备玉米肽脱脂及水解工艺研究[期刊论文]-吉林农业大学学报 2006(3)
28.张瑞东.迟玉杰.陈晨.阮长青 蛋清蛋白酶解物抗氧化与血管紧张素转换酶抑制活性的研究[期刊论文]-营养学报 2010(4)
29.汪福保.罗莉.张桂众.颜忠.刘本祥 Fe、Zn、Cu不同组合对岩原鲤生长、体组成和血清生化指标的影响[期刊论文]-淡水渔业 2009(4)
30.陈晨.迟玉杰.刘丽 蛋清的蛋白酶解物清除自由基能力的研究[期刊论文]-营养学报 2009(5)
31.王文博.孙建光.徐晶 螺旋藻产品活性物质检测与免疫功能研究[期刊论文]-中国食品卫生杂志 2011(1)32.李志明.陈青.金启安.唐超.温海波.彭正强 高温对椰心叶甲啮小蜂保护酶系活性的影响[期刊论文]-热带作物学报 2010(6)
33.蔡英卿.赖钟雄.沈金山.陈义挺.李国清.林玉玲.郑文炉 余甘子各器官超氧化物歧化酶活性的测定[期刊论文]-热带作物学报 2006(4)
34.王文博.孙建光.徐晶 螺旋藻产品活性物质检测与免疫功能研究[期刊论文]-中国食品卫生杂志 2011(1)35.陈青.卢芙萍.徐雪莲.卢辉.经福林.彭正强 椰心叶甲耐热性初步研究[期刊论文]-热带作物学报 2012(1)36.蔡英卿.赖钟雄.徐丽珠.陈义挺.陈怀宇.庄卫东.林文忠.林玉玲 龙眼各营养器官SOD活性的测定分析[期刊论文]
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37.侯建平 中药黄芪有效成分的抗氧化活性及其对益生菌促生作用的研究[学位论文]硕士 200538.王学军 自组装分子印迹聚合物制备及其水相识别的研究[学位论文]博士 2007
本文链接：http://d.g.wanfangdata.com.cn/Periodical_zgwsjyzz200006016.aspx