乳酸含量（lacticacid，LA）试剂盒使用说明
微量法
注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定货号：BC2235规格：100管/48样产品说明：
乳酸是生物体代谢过程中重要的中间产物，与糖代谢、脂类代谢、蛋白质代谢及细胞内能量代谢密切相关，乳酸含量是评估糖元代谢的和有氧代谢的重要指标。乳酸在乳酸脱氢酶的作用下生成丙酮酸，同时使NAD+还原生成NADH和H+，H+传递给PMS生成的PMSH2还原INT生成红色物质，在530nm处有特征吸收峰。自备实验用品及仪器
天平、研钵、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、恒温水浴锅。试剂组成和配制
提取液：液体110mL×1瓶，4℃保存。试剂一：液体3mL×1瓶，4℃保存。试剂二：液体5mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：粉剂×1支，-20℃避光保存。临用前加入0.6mL蒸馏水充分溶解。试剂四：粉剂×1瓶，4℃避光保存。临用前加6mL蒸馏水充分溶解。试剂五：粉剂×1支，30mg，4℃避光保存。标准品：液体1mL×1支，4℃保存。
显色液：临用前根据用量按照提取液（V）：试剂三（V）：试剂四（V）：试剂五（m）=1：0.3：3：15（mg）的比例充分混匀。
操作步骤：一、样本处理
1. 组织：按照质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g，加入1mL
提取液）加入提取液，冰浴匀浆后于4℃，12000g离心10min，取上清测定。
2. 细胞：按照细胞数量（10个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细
胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；于4℃，12000g离心10min，取上清测定。3. 血清：直接测定。二、测定操作
空白管
样品（μL ）标准品（μL ）H2O （μL ）试剂一（μL ）试剂二（μL ）显色液（μL ）
4060100
60304060
406090
样品对照管
10
样品测定管
10
1060304060
40601090
标准对照管
标准测定管
4
充分混匀，于37℃反应30min ，于微量石英比色皿/96孔板，空白管调零，测定530nm 处吸光值，分别记为A1，A2，A3，A4，△A 样=A2-A1；△A 标=A4-A3
注意：空白管、标准对照管和标准测定管只需测定一次三、计算公式
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下1. 按照蛋白含量计算
LA含量（μmol/mgprot）=△A样÷△A标×C标÷Cpr =2×△A样÷△A标÷Cpr 2. 按照样本质量计算
LA含量（μmol/g）=△A样÷△A标×C标÷W =2×△A样÷△A标÷W 3. 按照细胞数量计算
LA含量（μmol/10cell）=△A样÷△A标×C标÷细胞数量=2×△A样÷△A标÷细胞数量
4. 按照液体体积计算
LA含量（μmol/mL）=△A样÷△A标×C标=2×△A样÷△A标C标：标准品浓度，2mmol/Lb. 用96孔板测定的计算公式如下1. 按照蛋白含量计算
LA含量（μmol/mgprot）=△A样÷△A标×C标÷Cpr =2×△A样÷△A标÷Cpr 2. 按照样本质量计算
LA含量（μmol/g）=△A样÷△A标×C标÷W =2×△A样÷△A标÷W 3. 按照细胞数量计算
LA含量（μmol/10cell）=△A样÷△A标×C标÷细胞数量=2×△A样÷△A标÷细胞数量
4. 按照液体体积计算
LA含量（μmol/mL）=△A样÷△A标×C标=2×△A样÷△A标C标：标准品浓度，2mmol/L；W：样本质量，g/mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL注意事项：
1. 空白管、标准对照管、标准测定管只需做一次。
2. 若吸光值超过2，请进行适当的稀释后再进行测定，并在计算公式中乘以稀释倍数。3. 最低检出限为1.8μmol/L。
4
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乳酸含量（lacticacid，LA）试剂盒使用说明
微量法
注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定货号：BC2235规格：100管/48样产品说明：
乳酸是生物体代谢过程中重要的中间产物，与糖代谢、脂类代谢、蛋白质代谢及细胞内能量代谢密切相关，乳酸含量是评估糖元代谢的和有氧代谢的重要指标。乳酸在乳酸脱氢酶的作用下生成丙酮酸，同时使NAD+还原生成NADH和H+，H+传递给PMS生成的PMSH2还原INT生成红色物质，在530nm处有特征吸收峰。自备实验用品及仪器
天平、研钵、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、恒温水浴锅。试剂组成和配制
提取液：液体110mL×1瓶，4℃保存。试剂一：液体3mL×1瓶，4℃保存。试剂二：液体5mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：粉剂×1支，-20℃避光保存。临用前加入0.6mL蒸馏水充分溶解。试剂四：粉剂×1瓶，4℃避光保存。临用前加6mL蒸馏水充分溶解。试剂五：粉剂×1支，30mg，4℃避光保存。标准品：液体1mL×1支，4℃保存。
显色液：临用前根据用量按照提取液（V）：试剂三（V）：试剂四（V）：试剂五（m）=1：0.3：3：15（mg）的比例充分混匀。
操作步骤：一、样本处理
1. 组织：按照质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g，加入1mL
提取液）加入提取液，冰浴匀浆后于4℃，12000g离心10min，取上清测定。
2. 细胞：按照细胞数量（10个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细
胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；于4℃，12000g离心10min，取上清测定。3. 血清：直接测定。二、测定操作
空白管
样品（μL ）标准品（μL ）H2O （μL ）试剂一（μL ）试剂二（μL ）显色液（μL ）
4060100
60304060
406090
样品对照管
10
样品测定管
10
1060304060
40601090
标准对照管
标准测定管
4
充分混匀，于37℃反应30min ，于微量石英比色皿/96孔板，空白管调零，测定530nm 处吸光值，分别记为A1，A2，A3，A4，△A 样=A2-A1；△A 标=A4-A3
注意：空白管、标准对照管和标准测定管只需测定一次三、计算公式
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下1. 按照蛋白含量计算
LA含量（μmol/mgprot）=△A样÷△A标×C标÷Cpr =2×△A样÷△A标÷Cpr 2. 按照样本质量计算
LA含量（μmol/g）=△A样÷△A标×C标÷W =2×△A样÷△A标÷W 3. 按照细胞数量计算
LA含量（μmol/10cell）=△A样÷△A标×C标÷细胞数量=2×△A样÷△A标÷细胞数量
4. 按照液体体积计算
LA含量（μmol/mL）=△A样÷△A标×C标=2×△A样÷△A标C标：标准品浓度，2mmol/Lb. 用96孔板测定的计算公式如下1. 按照蛋白含量计算
LA含量（μmol/mgprot）=△A样÷△A标×C标÷Cpr =2×△A样÷△A标÷Cpr 2. 按照样本质量计算
LA含量（μmol/g）=△A样÷△A标×C标÷W =2×△A样÷△A标÷W 3. 按照细胞数量计算
LA含量（μmol/10cell）=△A样÷△A标×C标÷细胞数量=2×△A样÷△A标÷细胞数量
4. 按照液体体积计算
LA含量（μmol/mL）=△A样÷△A标×C标=2×△A样÷△A标C标：标准品浓度，2mmol/L；W：样本质量，g/mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL注意事项：
1. 空白管、标准对照管、标准测定管只需做一次。
2. 若吸光值超过2，请进行适当的稀释后再进行测定，并在计算公式中乘以稀释倍数。3. 最低检出限为1.8μmol/L。
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