板蓝根水溶性化学成分研究

物为首次从板蓝根中分

离得到,其 IA@F 相关关系见图 &)

图 0 化合物 4 的结构

表 0 化合物 4 的碳谱数据

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[7]

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第 !" 卷第 7 期

&#!# 年 7 月

中国实验方剂学杂志

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板蓝根为常用中药,始载于’神农本草经(,味

苦,性寒,有清热解毒$凉血利咽功能) 临床上常用

于治疗病毒性疾病及细菌感染性疾病,尤其在抗病

毒方面疗效确切

[! ]

; 板蓝根抗病毒作用相关的成分

主要集中在大极性部位,这与板蓝根临床应用以水

提物为主相符) 但目前板蓝根的抗病毒活性成分不 是十分清晰,为明确其抗菌和抗病毒疗效的有效成 分和物质基础,作者对板蓝根化学成分进行了系统 的研究) 本实验从大孔树脂 &#i $7#i 乙醇洗脱部

分中共分离得到 " 个化合物,根据理化性质和谱学 分 析 ( a_$

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IA@F$:B6AC$:CB6AC$等) 确定了它们的结构,分别 为:( n )6异落叶松树脂醇(!)$落叶松树脂醇6%6^6

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e6" 型显微熔点测定仪 ( 北京泰克仪器有限公

司)):CB6AC 测定用 d6O2X;W KF9AC )*)WV3 质谱仪, :B6AC 测定用 A

测定用 J4556&@ 自动旋光仪) 薄层色谱硅胶 HN

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和柱色谱硅胶(!## k &## 目,&## k 8## 目) 均为青岛 海洋化工厂产品) 大孔吸附树脂 IJ6&# 为天津海光 化工有限公司产品,F

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反相硅胶为日本 ‘AF 公司

产品,CV\Q;?V-KI6&# 为瑞士 JQ;X3;1

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板蓝根药材购于河北安国药材市场,经中国中

医科学院中药研究所生药室冯学锋副研究员鉴定为

十字花科植物菘蓝 N%/0*% *+#*@"0*2/ N2XW0 的根,标本 储存在中国中医科学院中药研究所)

5 提取分离

板蓝根药材 !# ]M,粉碎后用蒸馏水提取 & 次,

每次 & Q,合并提取液过滤,滤液上 IJ6&# 大孔吸附

树脂,依次用水,&#i ,7#i ,(7i 乙醇梯度洗脱,其

中 &#i 乙醇部分 &%8 M,7#i 乙醇部分 7’ M)&#i

乙醇浸膏用 $#i 乙醇回流提取 & 次,每次 ! Q,得

’’0 ’ M 浸膏,经硅胶柱色谱,三氯甲烷6甲醇梯度洗

脱得到 ! k &#! 个组分) 第 "$ 分中有白色晶体析

出,经 甲 醇 反 复 洗 涤 后 重 结 晶 得 化 合 物 8 (!%0 !

3M) )第 7 k ’ 流分合并经硅胶柱色谱,以二氯甲烷6

丙酮(丙酮比例从 # 增加至 %#i )为洗脱剂,其中第

!7 k &! 流分合并,经凝胶柱色谱纯化得化合物 %

(

&## 3M

); 第 8& k 8’ 流分合并,经正相$反相硅胶$

凝胶柱色谱纯化得化合物 7($0 $ 3M))7#i 乙醇浸

膏用甲醇回流提取 8 次,每次 ! Q,合并滤液得 &$0 8

M 浸膏,经硅胶柱色谱,三氯甲烷6甲醇梯度洗脱得 !

k &%! 个组分) 其中第 ’! k ’$ 流分合并,反复经硅

胶$凝胶柱色谱分离纯化得化合物 !(’# 3M))第 &%

k 87 流分合并,经硅胶柱色谱,三氯甲烷洗脱,第 %

和 7 流分合并,经硅胶$凝胶柱色谱纯化得化合物 "

(" 3M);第 (8 k !#% 流分合并,经硅胶$凝胶柱色谱

纯化得化合物 &(%# 3M))

T 结构鉴定

化合物 " 浅黄色不定型粉末,香草醛6浓硫酸

先显红色迅速变为黄色再渐渐变为蓝色):CB6AC

3 9 5

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E

,相对分子量为 !"! ,表明分子中含

有奇数个氮原子; 碳谱显示有 ( 个碳原子,化学位移

均在 !## \\3 以上,提示结构中含有苯环和双键;

*!’$0 # \\3 的 碳 信 号 提 示 有 醛 基 或 羧 基 取 代,

*!780 # \\3 的碳信号提示苯环上有羟基取代)

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个羟基和一个醛基取代)

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的氢为吲哚环上 & 位的氢,该氢直接相连的碳的化

学位移为

*!8(0 ! \\3)IA@F 谱上醛基氢 ( *(0 $(

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*!8(0 ! \\3

) 相关,由此确定醛基连

接在吲哚环的 8 位)

!

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接相连,那么羟基只能连接在 % 位或 $ 位上,IA@F

谱上羟基氢(

*!!0 % \\3

) 与 ( 位碳(

*!!70 8 \\3

) 相

关,说明羟基连接在 % 位上) 经上述推断确定化合

物 " 为 %6羟基686吲哚醛) 化合物 " 的碳谱数据与 86

吲哚醛的碳谱数据基本相似,两化合物的碳谱数据

""7"

第 !" 卷第 7 期

&#!# 年 7 月

中国实验方剂学杂志

FQ

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] 吴彦,孙建宁,张爱林,等0 黄连解毒汤有效部位对

实验性脑缺血的保护作用[S ]0 中药材,&##%,&$

(

7

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%

] 肖雁凌,陆付耳,徐丽君,等0 黄连解毒汤对 & 型糖

尿病大鼠血管内皮功能的影响[S ]0 中国中药杂志,

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(

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):

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7

] 方青,詹小萍,莫剑翎,等0 黄连解毒汤对 L[ 大鼠

的治疗作用及对细胞因子含量的影响[S ]0 中国中药

杂志,&##%,&(("): 7$70

[" ] 肖曾平,吉爱国0 老年痴呆的发病机制及治疗的研究

进展[S ]0 中国老年学杂志,&##’,&’(!): ((0

[$ ] 温丽萍0 老年性痴呆研究进展[S ]0 中西医结合心脑

血管杂志,&##’,"(’): (780

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[收稿日期] &##(6!#6!%

[基金项目] 中国中医科学院自选课题 5&$

[通讯作者] P 李春,OV=:(#!#)"%#!%%!!6&(’%; :63;

李霞

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,陈安家

!

,李春

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(

!0 山西医科大学药学院,太原 #8###!; &0 中国中医科学院中药研究所,北京 !##$##) [摘要] 目的:提取$分离$鉴定板蓝根水溶性化学成分) 方法:板蓝根水提取液上 IJ6&# 大孔吸附树脂,不同浓度乙醇梯

度洗脱,洗脱部分经硅胶$凝胶$反相硅胶柱色谱反复分离$纯化,利用波谱技术确定化合物的结构) 结果:从板蓝根水提取液

中分离得到 " 个化合物,分别鉴定为( n )6异落叶松树脂醇(!)$落叶松树脂醇6%6^6#6[6吡喃型葡萄糖苷(&)$落叶松树脂醇6%,

%s6二6^6#6[6吡喃型葡萄糖苷(8) $表告依春(%) $吲哚686乙腈6"6^6#6[6葡萄糖苷 ( 7 ) $%6羟基686吲哚醛 ( " ) ) 结论:化合物 ( " )

为首次从该植物中分离得到)

[关键词] 板蓝根; 水溶性化学成分; 生物碱

[中图分类号] G&’%0 ! [文献标识码] @ [文章编号] !##76((#8(&#!#)#76##"%6#% ’I&K(.O #$ X*I.J7O#9&M9. :".8(L*9 :#$OI(I&.$I ($ A*K(-

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对照,确

定该化合物为表告依春(V\

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) 以上数据与文献

[’]

对照基本一致,确

定 该 化 合 物 为 吲 哚686乙 腈6"6^6#6[6葡 萄 糖 苷

(

T?2=V686;1VW2T

)

[参考文献]

[! ] 国家 中 医 药 管 理 局’中 华 本 草(编 委 会0 中 华 本 草 [

0 第 8 分册0 上海: 上海科学技术出版社,!($$:

$#(0

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%

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S

0 中国药房,&##",!$(8):&8&0

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] 刘云海,吴立军,李华0 板蓝根化学成分研究[S ]0 沈 阳药科大学学报,&##&,!((&):(80

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物为首次从板蓝根中分

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图 0 化合物 4 的结构

表 0 化合物 4 的碳谱数据

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第 !" 卷第 7 期

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板蓝根为常用中药,始载于’神农本草经(,味

苦,性寒,有清热解毒$凉血利咽功能) 临床上常用

于治疗病毒性疾病及细菌感染性疾病,尤其在抗病

毒方面疗效确切

[! ]

; 板蓝根抗病毒作用相关的成分

主要集中在大极性部位,这与板蓝根临床应用以水

提物为主相符) 但目前板蓝根的抗病毒活性成分不 是十分清晰,为明确其抗菌和抗病毒疗效的有效成 分和物质基础,作者对板蓝根化学成分进行了系统 的研究) 本实验从大孔树脂 &#i $7#i 乙醇洗脱部

分中共分离得到 " 个化合物,根据理化性质和谱学 分 析 ( a_$

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e6" 型显微熔点测定仪 ( 北京泰克仪器有限公

司)):CB6AC 测定用 d6O2X;W KF9AC )*)WV3 质谱仪, :B6AC 测定用 A

测定用 J4556&@ 自动旋光仪) 薄层色谱硅胶 HN

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和柱色谱硅胶(!## k &## 目,&## k 8## 目) 均为青岛 海洋化工厂产品) 大孔吸附树脂 IJ6&# 为天津海光 化工有限公司产品,F

!’

反相硅胶为日本 ‘AF 公司

产品,CV\Q;?V-KI6&# 为瑞士 JQ;X3;1

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板蓝根药材购于河北安国药材市场,经中国中

医科学院中药研究所生药室冯学锋副研究员鉴定为

十字花科植物菘蓝 N%/0*% *+#*@"0*2/ N2XW0 的根,标本 储存在中国中医科学院中药研究所)

5 提取分离

板蓝根药材 !# ]M,粉碎后用蒸馏水提取 & 次,

每次 & Q,合并提取液过滤,滤液上 IJ6&# 大孔吸附

树脂,依次用水,&#i ,7#i ,(7i 乙醇梯度洗脱,其

中 &#i 乙醇部分 &%8 M,7#i 乙醇部分 7’ M)&#i

乙醇浸膏用 $#i 乙醇回流提取 & 次,每次 ! Q,得

’’0 ’ M 浸膏,经硅胶柱色谱,三氯甲烷6甲醇梯度洗

脱得到 ! k &#! 个组分) 第 "$ 分中有白色晶体析

出,经 甲 醇 反 复 洗 涤 后 重 结 晶 得 化 合 物 8 (!%0 !

3M) )第 7 k ’ 流分合并经硅胶柱色谱,以二氯甲烷6

丙酮(丙酮比例从 # 增加至 %#i )为洗脱剂,其中第

!7 k &! 流分合并,经凝胶柱色谱纯化得化合物 %

(

&## 3M

); 第 8& k 8’ 流分合并,经正相$反相硅胶$

凝胶柱色谱纯化得化合物 7($0 $ 3M))7#i 乙醇浸

膏用甲醇回流提取 8 次,每次 ! Q,合并滤液得 &$0 8

M 浸膏,经硅胶柱色谱,三氯甲烷6甲醇梯度洗脱得 !

k &%! 个组分) 其中第 ’! k ’$ 流分合并,反复经硅

胶$凝胶柱色谱分离纯化得化合物 !(’# 3M))第 &%

k 87 流分合并,经硅胶柱色谱,三氯甲烷洗脱,第 %

和 7 流分合并,经硅胶$凝胶柱色谱纯化得化合物 "

(" 3M);第 (8 k !#% 流分合并,经硅胶$凝胶柱色谱

纯化得化合物 &(%# 3M))

T 结构鉴定

化合物 " 浅黄色不定型粉末,香草醛6浓硫酸

先显红色迅速变为黄色再渐渐变为蓝色):CB6AC

3 9 5

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,相对分子量为 !"! ,表明分子中含

有奇数个氮原子; 碳谱显示有 ( 个碳原子,化学位移

均在 !## \\3 以上,提示结构中含有苯环和双键;

*!’$0 # \\3 的 碳 信 号 提 示 有 醛 基 或 羧 基 取 代,

*!780 # \\3 的碳信号提示苯环上有羟基取代)

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I) ,$0 &’(!I,W ,S m ’0 %,$0 ’ I5,"6I ),偶合常数和

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化合物分子式为 F

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个羟基和一个醛基取代)

!

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的氢为吲哚环上 & 位的氢,该氢直接相连的碳的化

学位移为

*!8(0 ! \\3)IA@F 谱上醛基氢 ( *(0 $(

\\3) 与 & 位碳(

*!8(0 ! \\3

) 相关,由此确定醛基连

接在吲哚环的 8 位)

!

I6DAG 谱显示 8 个芳香氢直

接相连,那么羟基只能连接在 % 位或 $ 位上,IA@F

谱上羟基氢(

*!!0 % \\3

) 与 ( 位碳(

*!!70 8 \\3

) 相

关,说明羟基连接在 % 位上) 经上述推断确定化合

物 " 为 %6羟基686吲哚醛) 化合物 " 的碳谱数据与 86

吲哚醛的碳谱数据基本相似,两化合物的碳谱数据

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第 !" 卷第 7 期

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中国实验方剂学杂志

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] 吴彦,孙建宁,张爱林,等0 黄连解毒汤有效部位对

实验性脑缺血的保护作用[S ]0 中药材,&##%,&$

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%

] 肖雁凌,陆付耳,徐丽君,等0 黄连解毒汤对 & 型糖

尿病大鼠血管内皮功能的影响[S ]0 中国中药杂志,

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(

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):

!$"$0

7

] 方青,詹小萍,莫剑翎,等0 黄连解毒汤对 L[ 大鼠

的治疗作用及对细胞因子含量的影响[S ]0 中国中药

杂志,&##%,&(("): 7$70

[" ] 肖曾平,吉爱国0 老年痴呆的发病机制及治疗的研究

进展[S ]0 中国老年学杂志,&##’,&’(!): ((0

[$ ] 温丽萍0 老年性痴呆研究进展[S ]0 中西医结合心脑

血管杂志,&##’,"(’): (780

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[收稿日期] &##(6!#6!%

[基金项目] 中国中医科学院自选课题 5&$

[通讯作者] P 李春,OV=:(#!#)"%#!%%!!6&(’%; :63;

李霞

!

,陈安家

!

,李春

&P

(

!0 山西医科大学药学院,太原 #8###!; &0 中国中医科学院中药研究所,北京 !##$##) [摘要] 目的:提取$分离$鉴定板蓝根水溶性化学成分) 方法:板蓝根水提取液上 IJ6&# 大孔吸附树脂,不同浓度乙醇梯

度洗脱,洗脱部分经硅胶$凝胶$反相硅胶柱色谱反复分离$纯化,利用波谱技术确定化合物的结构) 结果:从板蓝根水提取液

中分离得到 " 个化合物,分别鉴定为( n )6异落叶松树脂醇(!)$落叶松树脂醇6%6^6#6[6吡喃型葡萄糖苷(&)$落叶松树脂醇6%,

%s6二6^6#6[6吡喃型葡萄糖苷(8) $表告依春(%) $吲哚686乙腈6"6^6#6[6葡萄糖苷 ( 7 ) $%6羟基686吲哚醛 ( " ) ) 结论:化合物 ( " )

为首次从该植物中分离得到)

[关键词] 板蓝根; 水溶性化学成分; 生物碱

[中图分类号] G&’%0 ! [文献标识码] @ [文章编号] !##76((#8(&#!#)#76##"%6#% ’I&K(.O #$ X*I.J7O#9&M9. :".8(L*9 :#$OI(I&.$I ($ A*K(-

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) 以上数据与文献

$

对照,确

定该化合物为表告依春(V\

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) 以上数据与文献

[’]

对照基本一致,确

定 该 化 合 物 为 吲 哚686乙 腈6"6^6#6[6葡 萄 糖 苷

(

T?2=V686;1VW2T

)

[参考文献]

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0 第 8 分册0 上海: 上海科学技术出版社,!($$:

$#(0

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%

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S

0 中国药房,&##",!$(8):&8&0

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] 刘云海,吴立军,李华0 板蓝根化学成分研究[S ]0 沈 阳药科大学学报,&##&,!((&):(80

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