华西药学杂志
2008, 23(6) ζ683～684
W C J ・P S
白芷中香豆素类成分的提取
郑翠英, 夏艳姣, 徐超群
610041)
1
2
33
(1. 成都中医药大学, 四川成都610075; 2. 四川大学华西药学院, 四川成都610041; 3. 四川省中医药科学院, 四川成都
摘要:目的 优选白芷中香豆素类成分的提取工艺。方法 以欧前胡素转移率为指标, 采用单因素、正交试验的方法, 优化提取工艺参数。结果 选用渗滤法提取, 60%乙醇浓度、浸泡6h 、6倍量溶媒提取的提取效果最佳。结论 渗滤法简单且效率高, 适用于白芷中香豆素类成分的提取。关键词:白芷; 欧前胡素; 香豆素; 渗滤法中图分类号:R284
文献标识码:A
文章编号:1006-0103(2008) 06-0683-02
Extracti on of cou mar i n s i n Rad i x A ngelicae D ahu ricae
ZHENG Cui -ying , X IA Yan 2jiao , XU Chao -qun
1
2
23
(1. Chengdu U niversity of T raditional Chinese M edicine, Chengdu 610075, China; 2. W est China School of Phar m acy, S ichuan U niversi 2ty, Chengdu 610041, China; 31S ichuan A cade m y of Chinese M edicine Sciences, Chengdu 610041, China )
Abstract:O BJECT I VE To op ti m ize the extractive p r ocess of cou marins in Radix A ngelicae D ahuricae . M ETHOD Peulustrin translati on efficiency was chosen as index . The op ti m al conditi ons were studied one -fact or test as well as orthogonal design . RESU L TS The op ti m al para meters of percolati on method were as 6hours as di pp ing ti m e, 6ti m es as s olvent consu mp ti on . CO NCL US I O N The percolati or of A ngelicae D ahuricae for its si m p le and high effectiveness 1
Key words:Radix A ngelicae D ; on method CLC nu m ber:R284en t code :A
Arti cle I D :1006-0103(2008) 06-0683-02
白芷为伞形科植物白芷A ngelica dahurica (Fisch 1ex Hoff m. ) Benth 1et Hook . f . 或杭白芷A ngel 2ica dahurica (Fisch . ex Hoff m. ) Benth 1et Hook . f . var .
for m osana (Boiss . ) Shan et Yuan 的干燥根; 具有散
产基地) ; 乙腈为色谱纯; 水为纯净水; 其余试剂为分析纯。112含量测定方法
11211 色谱条件 采用Agilent C 18色谱柱(150mm ×416mm, 5μm ) ; 检测波长为300n m; 流动相为乙腈--1
水(57ζ43) ; 流速为1m l ・m in ; 柱温为25℃。理论
风除湿、通窍止痛、消肿排脓的功效; 临床上用于感冒头痛、眉棱骨痛、鼻塞、鼻渊、牙痛、疮疡肿痛的治疗。白芷中主要成分为香豆素类、挥发油类成分。其中香豆素类成分如白欧前胡素、氧化前胡素、异欧前胡素等的含量约为01221%～11221%的提取方法常采用95%乙醇提取定含量
[3, 4]
[2]
[1]
板数应不低于3×10。
11212 溶液的制备 精密称取8149mg 欧前胡素
3
。白芷
对照品, 加甲醇溶解并定容至25m l 量瓶中, 作为贮备液。精密量取此液2m l 于10m l 量瓶中, 加甲醇定容, 作为对照品溶液。精密吸取2m l 各乙醇浓度的提取液置10m l 量瓶中, 加相应提取溶剂定容, 过滤, 作为供试品溶液。
11213 测定方法 分别精密吸取2、4、6、8、10μl
, 提取工艺设计
水平不太合理, 提取成本较高。因此, 采用HP LC 测
, 并对提取工艺进行了优化。
1 实验部分
111 仪器与试药
1200高效液相色谱系统(美国Agilent ) ; CQ -25超声波清洗仪(中船总公司) 。欧前胡素对照品(中国药品生物制品检定所, 批号:110826-200511) ; 白芷药材(四川省遂宁市白芷药材G AP 生
基金项目:国家“十一五”科技支撑计划重点项目(编号2007BAQ00161)
对照品溶液, 进样测定, 记录峰面积。以峰面积为纵坐标、进样量为横坐标进行回归, 得回归方程为:Y =357127X +1103(r =019999) , 其线性范围为011363～016816μg 。精密吸取5μl 供试品溶液, 按
“11211”项色谱条件连续进样6次, 测定欧前胡素
作者简介:郑翠英(1983-) , 女, 正攻读中药学专业的硕士学位。E -mail:zhengcuiying2006@1631com 3通讯作者(Corres pondent author ) , E -mail:chaoqun_xu@sina 1com
684 华西药学杂志
表2 正交试验结果
Table 2 Results of O rthogona l test
No 1123456789
A [***********]93465105
2
2
2
第23卷
的峰面积积分值。计算得RSD =0117%(n =6) , 表
明仪器精密度良好。精密称取欧前胡素对照品适量, 加入已知欧前胡素含量的样品中, 按照样品测定方法测定, 回收率为99165%～104148%, 平均回收率为102113%。113 白芷的提取方法与结果11311 乙醇浓度的考察 分别称取约2g 白芷细粉, 共5份, 精密称定, 置25m l 量瓶中, 分别加20%、40%、60%、80%、95%乙醇至近刻度处, 超声1h, 冷至室温。以同浓度乙醇稀释至刻度, 测定含
B [***********]132245111
C [***********]141335181
D [***********]161211170
Translati on /%[***********][***********]587170
[***********][***********]087172
Su m /%[***********][***********][***********]
Ⅰ
ⅡⅢ
3×K
l
量, 计算转移率。各乙醇浓度的欧前胡素转移率分
别为27179%、74192%、85135%、87114%、85166%。提取率随乙醇浓度的增加而增加, 但当乙醇浓度达60%后, 提取率变化不大。
11312 提取方法的考察 分别称取约50g 白芷细
[***********][***********][***********]4597714157
表3 方差分析
Table 3 Ana lysis of var i a nce
S ource A B C
l
v
M S
F
P
粉2份, 精密称定。1份采用12倍量60%乙醇回流提取(4h ×3) 。另1份采用12倍量60%乙醇超声1h 。另取约50g 白芷粗粉1份, 加60%乙醇浸泡6h, 以3m ・l m in 速度进行渗滤提取, 得12倍量渗滤
-1
[***********]621545
22211
[***********][1**********]97
[***********]185695
D (relative accuracy ) 97714157
94, (液。测定提取液的含量, 计算转移率。在上述条件下, 欧前胡素的转移率分别为84192166%, 11313 g , 加60%乙醇浸泡6h, 。当渗滤量到达2、4、6、8、10、12倍量时, 分别取样测定。上述条件下, 欧
提取方法的考察结果表明, 渗滤法优于超声和
回流提取法, 渗滤法提取的工艺参数采用正交试验进行优化。
含量测定时, 曾采用精密量取提取液、低温蒸干后甲醇溶解残渣的方法制备供试品溶液。结果显示, 在甲醇溶解、转移过程中会造成有效成分的损失。因此, 采用提取液稀释后进行测定, 操作简便、结果可靠。
文中试验将白芷细粉进行回流法与超声法提取, 目的在于提高欧前胡素的提取率; 而采用渗滤法, 细粉则易堵塞渗滤筒, 因此, 采用粗粉进行提取, 方便操作, 也符合渗滤法的提取特点和要求。参考文献:
[1] 张富强, 聂红, 韦艺, 等1白芷的化学与药理研究进展[J ]1南
前胡素的转移率分别为60179%、85126%、91178%、92158%、94171%、94199%, 可见提取率随溶媒量的增加而增加。当溶媒量达到6倍量时, 溶媒用量增加, 提取率增加不显著。11314 正交试验设计 以白芷中欧前胡素的转移率为考察指标, 取白芷粗粉进行正交试验。主要因素为乙醇浓度(A ) 、浸泡时间(B ) 、溶媒用量(C ) , 选
4
择L 9(3) 正交表进行试验。因素水平见表1。
查方差分析表, 得F 0101(2, 11) =7121, 因素A 与因素C 有显著性差异, 因素B 无显著性差异, 其影响因素大小为A >C >B 。由直观分析可以看出, 最佳提取工艺为A 3B 1C 3(表2) , 方差分析见表3。11315 验证试验 按“11314”项下确定的优化工艺参数, 进行3次重复试验, 得欧前胡素的平均转移率为
表1 因素水平表
Table 1 Factors and levels of the orthogona l desi gn Levels 123
A /%204060
B /h61224
C /ti m es 246
京中医药大学学报, 2002, 18(3) :190-192.
[2] 梁明金, 杨广德, 贺浪冲, 等1白芷中欧前胡素的提取方法研
究[J ].中成药, 2000, 22(12) :829-8311
[3] 中华人民共和国国家药典委员会. 中国药典[S].一部. 北京:
化学工业出版社, 2005. 89.
[4] 刘萍. HP LC 法测定白芷中提取挥发油前后欧前胡素含量
[J ].实用中医药杂志, 2004, 20(8) :470.
收稿日期:2008-01
华西药学杂志
2008, 23(6) ζ683～684
W C J ・P S
白芷中香豆素类成分的提取
郑翠英, 夏艳姣, 徐超群
610041)
1
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(1. 成都中医药大学, 四川成都610075; 2. 四川大学华西药学院, 四川成都610041; 3. 四川省中医药科学院, 四川成都
摘要:目的 优选白芷中香豆素类成分的提取工艺。方法 以欧前胡素转移率为指标, 采用单因素、正交试验的方法, 优化提取工艺参数。结果 选用渗滤法提取, 60%乙醇浓度、浸泡6h 、6倍量溶媒提取的提取效果最佳。结论 渗滤法简单且效率高, 适用于白芷中香豆素类成分的提取。关键词:白芷; 欧前胡素; 香豆素; 渗滤法中图分类号:R284
文献标识码:A
文章编号:1006-0103(2008) 06-0683-02
Extracti on of cou mar i n s i n Rad i x A ngelicae D ahu ricae
ZHENG Cui -ying , X IA Yan 2jiao , XU Chao -qun
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(1. Chengdu U niversity of T raditional Chinese M edicine, Chengdu 610075, China; 2. W est China School of Phar m acy, S ichuan U niversi 2ty, Chengdu 610041, China; 31S ichuan A cade m y of Chinese M edicine Sciences, Chengdu 610041, China )
Abstract:O BJECT I VE To op ti m ize the extractive p r ocess of cou marins in Radix A ngelicae D ahuricae . M ETHOD Peulustrin translati on efficiency was chosen as index . The op ti m al conditi ons were studied one -fact or test as well as orthogonal design . RESU L TS The op ti m al para meters of percolati on method were as 6hours as di pp ing ti m e, 6ti m es as s olvent consu mp ti on . CO NCL US I O N The percolati or of A ngelicae D ahuricae for its si m p le and high effectiveness 1
Key words:Radix A ngelicae D ; on method CLC nu m ber:R284en t code :A
Arti cle I D :1006-0103(2008) 06-0683-02
白芷为伞形科植物白芷A ngelica dahurica (Fisch 1ex Hoff m. ) Benth 1et Hook . f . 或杭白芷A ngel 2ica dahurica (Fisch . ex Hoff m. ) Benth 1et Hook . f . var .
for m osana (Boiss . ) Shan et Yuan 的干燥根; 具有散
产基地) ; 乙腈为色谱纯; 水为纯净水; 其余试剂为分析纯。112含量测定方法
11211 色谱条件 采用Agilent C 18色谱柱(150mm ×416mm, 5μm ) ; 检测波长为300n m; 流动相为乙腈--1
水(57ζ43) ; 流速为1m l ・m in ; 柱温为25℃。理论
风除湿、通窍止痛、消肿排脓的功效; 临床上用于感冒头痛、眉棱骨痛、鼻塞、鼻渊、牙痛、疮疡肿痛的治疗。白芷中主要成分为香豆素类、挥发油类成分。其中香豆素类成分如白欧前胡素、氧化前胡素、异欧前胡素等的含量约为01221%～11221%的提取方法常采用95%乙醇提取定含量
[3, 4]
[2]
[1]
板数应不低于3×10。
11212 溶液的制备 精密称取8149mg 欧前胡素
3
。白芷
对照品, 加甲醇溶解并定容至25m l 量瓶中, 作为贮备液。精密量取此液2m l 于10m l 量瓶中, 加甲醇定容, 作为对照品溶液。精密吸取2m l 各乙醇浓度的提取液置10m l 量瓶中, 加相应提取溶剂定容, 过滤, 作为供试品溶液。
11213 测定方法 分别精密吸取2、4、6、8、10μl
, 提取工艺设计
水平不太合理, 提取成本较高。因此, 采用HP LC 测
, 并对提取工艺进行了优化。
1 实验部分
111 仪器与试药
1200高效液相色谱系统(美国Agilent ) ; CQ -25超声波清洗仪(中船总公司) 。欧前胡素对照品(中国药品生物制品检定所, 批号:110826-200511) ; 白芷药材(四川省遂宁市白芷药材G AP 生
基金项目:国家“十一五”科技支撑计划重点项目(编号2007BAQ00161)
对照品溶液, 进样测定, 记录峰面积。以峰面积为纵坐标、进样量为横坐标进行回归, 得回归方程为:Y =357127X +1103(r =019999) , 其线性范围为011363～016816μg 。精密吸取5μl 供试品溶液, 按
“11211”项色谱条件连续进样6次, 测定欧前胡素
作者简介:郑翠英(1983-) , 女, 正攻读中药学专业的硕士学位。E -mail:zhengcuiying2006@1631com 3通讯作者(Corres pondent author ) , E -mail:chaoqun_xu@sina 1com
684 华西药学杂志
表2 正交试验结果
Table 2 Results of O rthogona l test
No 1123456789
A [***********]93465105
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第23卷
的峰面积积分值。计算得RSD =0117%(n =6) , 表
明仪器精密度良好。精密称取欧前胡素对照品适量, 加入已知欧前胡素含量的样品中, 按照样品测定方法测定, 回收率为99165%～104148%, 平均回收率为102113%。113 白芷的提取方法与结果11311 乙醇浓度的考察 分别称取约2g 白芷细粉, 共5份, 精密称定, 置25m l 量瓶中, 分别加20%、40%、60%、80%、95%乙醇至近刻度处, 超声1h, 冷至室温。以同浓度乙醇稀释至刻度, 测定含
B [***********]132245111
C [***********]141335181
D [***********]161211170
Translati on /%[***********][***********]587170
[***********][***********]087172
Su m /%[***********][***********][***********]
Ⅰ
ⅡⅢ
3×K
l
量, 计算转移率。各乙醇浓度的欧前胡素转移率分
别为27179%、74192%、85135%、87114%、85166%。提取率随乙醇浓度的增加而增加, 但当乙醇浓度达60%后, 提取率变化不大。
11312 提取方法的考察 分别称取约50g 白芷细
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表3 方差分析
Table 3 Ana lysis of var i a nce
S ource A B C
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v
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粉2份, 精密称定。1份采用12倍量60%乙醇回流提取(4h ×3) 。另1份采用12倍量60%乙醇超声1h 。另取约50g 白芷粗粉1份, 加60%乙醇浸泡6h, 以3m ・l m in 速度进行渗滤提取, 得12倍量渗滤
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[***********][1**********]97
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D (relative accuracy ) 97714157
94, (液。测定提取液的含量, 计算转移率。在上述条件下, 欧前胡素的转移率分别为84192166%, 11313 g , 加60%乙醇浸泡6h, 。当渗滤量到达2、4、6、8、10、12倍量时, 分别取样测定。上述条件下, 欧
提取方法的考察结果表明, 渗滤法优于超声和
回流提取法, 渗滤法提取的工艺参数采用正交试验进行优化。
含量测定时, 曾采用精密量取提取液、低温蒸干后甲醇溶解残渣的方法制备供试品溶液。结果显示, 在甲醇溶解、转移过程中会造成有效成分的损失。因此, 采用提取液稀释后进行测定, 操作简便、结果可靠。
文中试验将白芷细粉进行回流法与超声法提取, 目的在于提高欧前胡素的提取率; 而采用渗滤法, 细粉则易堵塞渗滤筒, 因此, 采用粗粉进行提取, 方便操作, 也符合渗滤法的提取特点和要求。参考文献:
[1] 张富强, 聂红, 韦艺, 等1白芷的化学与药理研究进展[J ]1南
前胡素的转移率分别为60179%、85126%、91178%、92158%、94171%、94199%, 可见提取率随溶媒量的增加而增加。当溶媒量达到6倍量时, 溶媒用量增加, 提取率增加不显著。11314 正交试验设计 以白芷中欧前胡素的转移率为考察指标, 取白芷粗粉进行正交试验。主要因素为乙醇浓度(A ) 、浸泡时间(B ) 、溶媒用量(C ) , 选
4
择L 9(3) 正交表进行试验。因素水平见表1。
查方差分析表, 得F 0101(2, 11) =7121, 因素A 与因素C 有显著性差异, 因素B 无显著性差异, 其影响因素大小为A >C >B 。由直观分析可以看出, 最佳提取工艺为A 3B 1C 3(表2) , 方差分析见表3。11315 验证试验 按“11314”项下确定的优化工艺参数, 进行3次重复试验, 得欧前胡素的平均转移率为
表1 因素水平表
Table 1 Factors and levels of the orthogona l desi gn Levels 123
A /%204060
B /h61224
C /ti m es 246
京中医药大学学报, 2002, 18(3) :190-192.
[2] 梁明金, 杨广德, 贺浪冲, 等1白芷中欧前胡素的提取方法研
究[J ].中成药, 2000, 22(12) :829-8311
[3] 中华人民共和国国家药典委员会. 中国药典[S].一部. 北京:
化学工业出版社, 2005. 89.
[4] 刘萍. HP LC 法测定白芷中提取挥发油前后欧前胡素含量
[J ].实用中医药杂志, 2004, 20(8) :470.
收稿日期:2008-01