第２８卷第４期
山东体育学院学报
Ｖ０１．２８Ｎｏ．４
２０１２年８月
ＪｏｕｒｎａｌｏｆＳｈａｎｄｏｎｇＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＰｈｙｓｉｃａｌＥｄｕｃａｔｉｏｎａｎｄＳｐｏｒｔｓ
Ａｕｇｕｓｔ２０１２
补充枸杞对力竭运动大鼠骨骼肌超微结构变化的影响
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葛新发１，董贵俊１，王宏巍１，．王超１，李可峰１，潘卫东２
ＧＥＸｉｎ—ｆａｌ，ＤＯＮＧＧｕｉ—ｊｕｎｌ，ＷＡＮＧＨｏｎｇ—ｗｅｉｌ，ＷＡＮＧ
Ｃｈａｐｌ，ＬＩＫｅ—ｆｅｎ９１，ＰＡＮ
Ｗｅｉ—
ｄｏｎ９２＋
摘要：枸杞是运动员饮食中常用的营养补剂，对运动后体能恢复、免疫能力提高等具有重要作用。为了研究补充枸杞对力竭运动后大鼠骨骼肌超微结构变化的影响，对Ｗｉｓｔａｒ大鼠６周枸杞灌喂后进行一次性力竭运动，观察运动后即刻、２４ｈ、４８ｈ、７２ｈ的大鼠比目鱼肌超微结构变化。发现力竭运动导致大鼠比目鱼肌在运动后即刻至４８ｈ间超微结构出现显著变化，表现为ｚ线的紊乱、肌纤维断裂、线粒体结构改变及肌核内移等现象。表明补充枸杞能显著改善力竭运动后即刻至４８ｈ比目鱼肌超微结构损伤，加速骨骼肌超微结构损伤恢复。关键词：大鼠；构杞；比目鱼肌；超微结构中图分类号：Ｇ８０４．７
文献标识码：Ａ
文章编号：１００６—２０７６（２０１２）０４—００４６—０５
．Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａｓ
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收稿日期：２０１２—０４—１９
基金项目：山东省中青年科学家科研奖励基金（２００９ＢＳＢ０１０６６）成果。作者简介：葛新发（１９５６一
）。男，博士，教授，博士生导师，研究方向运
动过程技能监控。
通信作者：董贵俊（１９７８一
）。男，博士，副教授，研究方向骨骼肌损伤修复生物学机制研究。
潘卫东（１９６８一），男，博士，研究员，研究方向电磁场生物学效应及其机制研究。
作者单位：１山东体育学院，山东济南２５０１０２；２中国科学院电工研
究所生物医学工程部，北京１００１９０
１
ＳｈａｎｄｏｎｇＳｐｏａｓ
Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｊｉｎａｎ２５０１０２；２
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１００１９０，Ｃｈｉｎａ
４６
万方数据
量墨嘲补充枸杞对力竭运动大鼠骨骼肌超微结构变化的影响
Ｎｏ．４
２ｄ１２
枸杞是一种传统名贵药材，具有“红宝”之称，其成分为枸杞多糖、甜菜碱等及多种微量元素和氨基酸…。枸杞具有的延缓疲劳、抗氧化、滋阴补肾等作用可能与枸杞多糖及血清酶存在的指标关系相关
联”】。同时，枸杞水煎液、提取物、口服液能有效提高
小鼠持续游泳时间，说明枸杞§鲁显著提高小鼠的抗疲劳能力”。ｏ；对机体补充枸杞多糖能降低血清中乳酸
含量，提高骨骼肌在运动过程中利用氧的能力以及心
血管系统供氧能力，增强机体的有氧代谢能力等”。’。在力竭运动中，补充构杞能够瞬显改善机体成分，提高机体的运动能力，有效预防肌肉损伤的发生。力竭运动可导致循环血量重新分布及大量乳酸的堆积，肌细
胞膜受损，线粒体双层膜结构破坏、嵴消失且血清酶活性升高。｛｝充枸杞能有效缓解血清酶上舞幅度，从雨起
到对肌纤维的保护作用”ｏ。目前对枸杞在运动过程中的研究主要集中在运动训练中抗疲劳作用的生理、生化指标的分析，对力竭运动后恢复过程中骨骼肌超微结构变化的影响研究尚未发现。
本研究通过对大鼠进行一次性力竭运动后引起的
骨骼肌超微结构的变化进行研究，观祭补充枸杞后大鼠力竭运动引起骨骼肌超微结构的变化，从组织学分析补充枸杞对力竭运动中大鼠骨骼肌超微结构的影响，探讨补充枸杞对大鼠比目鱼肌损伤恢复的促进作用。
１材料与方法
１．１动物分组及喂养方法
购自山东大学动物饲养中心雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠共．９０只，体重１５７．６±６．０ｇ，室温保持在２３。Ｃ左右，相对湿度（５５±５）％，光照时间为７：９０—１９：００，自由饮食。随机分为６个组，其中自由饮食组、补充安慰剂组、补充枸杞组作为对照缉（每组６只），自由饮食运动组、补充安慰剂运动组、补充枸杞运动组作为运动组（每组２４只）。
１．２枸杞灌喂方式
将枸杞弼蒸馏东洗干净后浸泡粥分钟，分两次煎煮，每次煮沸后加煮１０分钟，分别过滤一起摇匀，制成浓度相当于生药量ｌ∥ｒｔｌｌ的１００％的水煎剂，灌喂剂量为１０∥ｋｇ体重。补充安慰剂组灌喂相同剂量的生理盐水。每天称重鼹次，以根据体重确定羚充鹩裁量”’。１．３运动的条件及方案
实验对照组及运动组实验均为期６周，然后利用动物实验运动跑台力竭运动一次，参照文献力竭运动
万方数据
前让大鼠跑台适应１周．第一天以５ｍ／ｒａｉｎ，第二天以
１０
ｍ／ｒａｉｎ，第三天以１５ｍ／ｒａｉｎ的速度运动直到１周，
每次运动持续１５ｒａｉｎ。休息１天，进行运动（２５
ｒｎ／
ｒａｉｎ，５％坡度，相当于７５％ＶＯ：ｍａｘ）”Ｊ。力竭组以大鼠臀部压在跑台后壁，后肢随转动皮带后拖达３０秒以上，驱赶无效，并有呼吸加深的现象、神态倦怠、俯卧位、垂头等特征为力竭标准。１．４样本取材及电镜标本制作
观察运动组运动后即刻、２４ｈ、４８
ｈ、７２
ｈ的大鼠
比目鱼飘超微结构变化。力溻运动后郎蓟、２４ｈ、４ｓ
ｈ、７２
ｈ取大鼠两侧的比目鱼肌，将一侧比目鱼肌组织
放人冰冷的生理盐水中清洗，统一标记并冻存，而将另外一侧的比目鱼肌组织切割成０．５ｍｉｌｌ×０．５ｍｍ×５
ｍｍ的长方｛奉块状标本，立鄞置于２，５％戊二醛固定液
中固定．ｏ℃～４℃保存。
２．５％戊二醛固定骨骼肌的标本后，将标本置于４０Ｃ的０１ＭＰＢＳ缓冲液中过夜保存，取出后充分在缓冲渡中以大概１５分钟的阔隔冲洗４次，然后抛ｌ％．饿酸同样放置在４℃的环境内固定２ｈ．再用以上同样的方式在缓冲液中进行冲洗，完毕后用梯度乙醇丙酮脱水，环氧树脂包埋，然后把包埋的标本块切制成半薄切片，随后光镜定位，再用超薄切片机进行切片，切片最后用铀一铅双染制片。
２实验结果
２．１
自由饮食组、补充安慰剂组、补充枸杞组大鼠比
目鱼肌超微结构
自由饮食组、补充安慰剂组、补充枸杞组电子显微镜下均显示肌纤维排列整齐，肌节形态正常、结构完整，Ａ、Ｉ、Ｉ－Ｉ带以及Ｍ线完整清晰，肌膜、核膜完整，线
粒体、肌核完整，ｚ线完整连续，无异常现象（见图１），
２．２力竭运动后即刻大鼠比目鱼肌超微结构变化情况
运动组运动后即刻切片均显示明显的ｚ线不连续，呈波纹状，其完整性被破坏，并出现肿胀的线粒体；自由饮食、补充安慰帮运动组与补充枸祝运动组相比，ｚ线排列更加紊乱。
２．３力竭运动后矾ｈ大鼠比目鱼肌超微结构变化情况
力竭运动后２４ｈ自由饮食组与安慰剂组超微结构的损伤明显。损伤程度高于郧刻组，损伤程度严重，如大量线粒体发生肿胀，肌核肿胀，固缩，空泡变性，嵴紊乱，肌膜皱缩，肌细胞肿胀，ｚ线出现异常，部分肌基膜分离，部分肌膜出现溶解现象。巨噬细胞、间质可见
４７
第２８卷第４期
２０１２年．８月
炎性细胞等（如图４）。运动后２４ｈ补充枸杞组的损伤情况比补充即刻组有所增加，与运动后２４ｈ自由饮食组和安慰剂组相比较轻（如图５），线粒体在体积上有肿胀现象，其数目稍微增多，肌细胞肿胀，ｚ线异常，嵴紊乱，巨噬细胞、间质可见炎性细胞等，属局灶性损伤。２．４力竭运动后４８ｈ大鼠比目鱼肌超微结构变化情况
力竭运动后４８ｈ自由饮食组与安慰剂组超微结构的损伤有减轻的趋势，出现逐渐修复现象。损伤程度在局灶性与严重之间，如线粒体发生肿胀、肌核肿胀，固缩，空泡变性，嵴紊乱，肌膜皱缩，肌细胞肿胀，ｚ线出现异常，部分肌基膜分离，部分肌膜出现溶解现象。巨噬细胞、问质可见炎性细胞等（如图６），属局灶性损伤。运动后４８ｈ补充枸杞组的损伤情况轻于补充枸杞２４ｈ组、自由饮食与安慰剂４８ｈ组（如图７），线粒体在体积上有肿胀现象，其数目稍微增多，肌细胞肿胀，ｚ线异常，嵴紊乱，问质偶见具有增殖趋势的卫星细胞等，属局灶性损伤。
２．５力竭运动后７２ｈ大鼠比目鱼肌超微结构变化情况
自由饮食组与安慰剂组力蝎运动后７２ｈ与４８
ｈ
微结构的变化与运动时间、强度等均有关，时间持续越长、强度越大及非习惯性负荷。运动损伤越明显。
造成骨骼肌微损伤的运动方式以离心运动最为显著，尤其是下坡跑台运动．目前大量的研究都证实了这个观点”““，在运动训练中骨骼肌延迟性酸痛现象很常见，这些现象被认为是一个从刺激到适应的过程”“。本研究中，大鼠在进行一次性力竭离心运动后，骨骼肌的超微结构表现出了同样的明显变化。研究发现骨骼肌运动后即刻至２４ｈ超微结构的变化表现为：肌纤维断裂，Ｚ线异常、出现波纹状，线粒体空泡化。这一系列变化在２４ｈ以后取样切片中最明显，其中肌节明、暗带的排列紊乱是骨骼肌形态学在电镜下观察的一些现象”’“。“。这些微变化都是机体对长时间、大强度、非习惯性负荷刺激所做出的反应。本研究结果发现补充枸杞可减轻力竭运动后大鼠比目鱼肌超微结构的一系列形态学的改变。运动后４８ｈ，补充枸杞组骨骼肌微损伤修复速度明显优于自由饮食组和安慰剂组，说明补充枸杞在运动训练过程中对骨骼肌
的损伤有明显的预防及＿堤进修复作用。
４结论
力竭运动导致大鼠比目鱼肌在运动后即刻至４８ｈ问超微结构出现显著变化，表现为肌纤维断裂、Ｚ线改变、线粒体减少等。补充枸杞能显著改善力竭运动后
４８
相比超微结构的损伤逐渐好转出现修复，线粒体在体积上有肿胀现象，其数目稍微增多，肌细胞肿胀，基膜部分分离．ｚ线异常，嵴紊乱，间质偶见具有增殖趋势的卫星细胞等（如图８）。运动后７２ｈ补充枸杞组的损伤情况在修复周期过程中明显优于自由饮食组与安慰剂组（如图９）。卫星细胞在间质中出现增殖，肌细胞中的染色质有凝聚现象出现，基膜逐渐形成，向卫星细胞慢慢转变。
ｈ比目鱼肌超微结构微损伤状况，表明枸杞在运动
训练过程中对骨骼肌的损伤存在保护作用．对力竭运动后骨骼肌微损伤的修复具有促进作用。
３讨论
长时间或力竭运动后造成的骨骼肌纤维结构的改变，称运动性骨骼肌微细损伤。这种损伤的发生有复杂的多种因子参与，其损伤机制也有很多的假说，如代谢学说、机械学说、自由基学说等。这些学说均认为，胞浆内容物泄漏以及胞外钙离子大量进入是肌细胞膜的损伤、完整性丧失的直接原因”ｏ，而细胞膜结构的损伤后会引起一系列肌纤维微结构的改变。所以，运动中若能通过对机体补充营养补剂来维持肌细胞膜的正常功能及完整性，可减轻肌肉微损伤的程度，维持运动员的运动能力及身体机能。
在电子显微镜观察下，骨骼肌超微结构的变化以肌小节形态结构改变为主要表现形式，如肌原纤维排列紊乱，ｚ线排列不整齐，线粒体数量减少。骨骼肌超
４８
附图
圈１对照组比目鱼肌超擞蛄构图（ｘ５０００
万方数据
Ｅ窭圈补充枸杞对力竭运动火鼠骨骼肌超微结构变化的影响
Ｎｏ４２０１２
图２自由饮食、补充安慰荆力竭运动即剥比目鱼肌超微结构变化（ｘ５０００）
图４自由饮食、安慰剂组力竭运动２４
ｈ
比目鱼肌超微结构变化
图６自由饮食、安慰荆４８ｈ比目鱼肌超微结构变化
万方数据
图３补充构杞力竭运动后即刻组比目鱼肌超微结构变化（ｘ５０００ｊ
图５补充枸杞组力竭运动２４ｈ组
比目鱼肌超微结构变化
图７补充拘杞４８ｈ组比目鱼肌
超微结构变化
４９
第弼卷第４期
２０１２年８月
图８自由饮食、安慰刑组力竭运动７２ｈ后比
目鱼肌超微结构变化
图９补充枸杞组力竭运动７２ｈ后比目
鱼肌超微结构变化
参考文献：
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．
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学与组织病理学影响的实验研究［Ｊ］中国运动医学杂志，２０００，１９（１）：１９—２３．
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３９—４２．
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Ｊ，ＦｉｅｂｉｇＲ，ＧｏｒｅＭ．ｅｔａｌ
Ｓｕｐｅｍｘｉｄｅｄｉｓｍｕｔａ．ｓｅｇｅｎｅ
ｉｎ
ｒａｔ
［１３］张海平，宋吉锐一次力竭性离心运动对大鼠肱三头肌超微结构的影响［Ｊ］．上海体育学院学报，２００８，３２（５）：４４—４７．
ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｓａｃｔｉｖａｔｅｄｂｙａ鲥ｎｇ】ｅｂｏｕｔｏｆｅｘｅｒｃｉｓｅ
ｓｋｅｌｅｔａｌ
万方数据
补充枸杞对力竭运动大鼠骨骼肌超微结构变化的影响
作者：
葛新发， 董贵俊， 王宏巍， 王超， 李可峰， 潘卫东， GE Xin-fa， DONG Gui-jun， WANG Hong-wei， WANG Chao， LI Ke-feng，PAN Wei-dong
葛新发,董贵俊,王宏巍,王超,李可峰,GE Xin-fa,DONG Gui-jun,WANGHong-wei,WANG Chao,LI Ke-feng(山东体育学院,山东济南,250102)，潘卫东,PAN Wei-dong(中国科学院电工研究所生物医学工程部,北京,100190)
山东体育学院学报
Journal of Shandong Institute of Physical Education and Sports2012,28(4)
作者单位：
刊名：英文刊名：年，卷(期)：
参考文献(13条)
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11. 李开刚,陆绍中 不同强度的耐力训练后大鼠骨骼肌超微结构适应性变化的研究[期刊论文]-中国运动医学杂志 2000(1)
12. 金其贯,刘霞,李淑艳,常永娜,李宁川 反复离心运动对大鼠骨骼肌损伤和蛋白质降解机制的影响[期刊论文]-体育科学 2010(6)
13. 张海平,宋吉锐 一次力竭性离心运动对大鼠肱三头肌超微结构的影响[期刊论文]-上海体育学院学报 2008(5)
引用本文格式：葛新发. 董贵俊. 王宏巍. 王超. 李可峰. 潘卫东. GE Xin-fa. DONG Gui-jun. WANG Hong-wei. WANG Chao. LI Ke-feng. PAN Wei-dong 补充枸杞对力竭运动大鼠骨骼肌超微结构变化的影响[期刊论文]-山东体育学院学报 2012(4)
第２８卷第４期
山东体育学院学报
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２０１２年８月
ＪｏｕｒｎａｌｏｆＳｈａｎｄｏｎｇＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＰｈｙｓｉｃａｌＥｄｕｃａｔｉｏｎａｎｄＳｐｏｒｔｓ
Ａｕｇｕｓｔ２０１２
补充枸杞对力竭运动大鼠骨骼肌超微结构变化的影响
Ｅｆｆｅｃｔｉｏｆｗｏｌｆｂｅｒｒｙ
ｏｎ
ｒａｔ
ｓｋｅｌｅｔａｌｍｕｓｃｌｅｕｌｔｒａｓｔｒｕｃｔｕｒｅａｆｔｅｒｅｘｈａｕｓｔｉｖｅｅｘｅｒｃｉｓｅ
葛新发１，董贵俊１，王宏巍１，．王超１，李可峰１，潘卫东２
ＧＥＸｉｎ—ｆａｌ，ＤＯＮＧＧｕｉ—ｊｕｎｌ，ＷＡＮＧＨｏｎｇ—ｗｅｉｌ，ＷＡＮＧ
Ｃｈａｐｌ，ＬＩＫｅ—ｆｅｎ９１，ＰＡＮ
Ｗｅｉ—
ｄｏｎ９２＋
摘要：枸杞是运动员饮食中常用的营养补剂，对运动后体能恢复、免疫能力提高等具有重要作用。为了研究补充枸杞对力竭运动后大鼠骨骼肌超微结构变化的影响，对Ｗｉｓｔａｒ大鼠６周枸杞灌喂后进行一次性力竭运动，观察运动后即刻、２４ｈ、４８ｈ、７２ｈ的大鼠比目鱼肌超微结构变化。发现力竭运动导致大鼠比目鱼肌在运动后即刻至４８ｈ间超微结构出现显著变化，表现为ｚ线的紊乱、肌纤维断裂、线粒体结构改变及肌核内移等现象。表明补充枸杞能显著改善力竭运动后即刻至４８ｈ比目鱼肌超微结构损伤，加速骨骼肌超微结构损伤恢复。关键词：大鼠；构杞；比目鱼肌；超微结构中图分类号：Ｇ８０４．７
文献标识码：Ａ
文章编号：１００６—２０７６（２０１２）０４—００４６—０５
．Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａｓ
ｏｎｅ
ｏｆｎｕｔｒｉｄｏｎａｌ
ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｓｉｎａｔｈｌｅｔｅｓ’ｄｉｅｔ，ｗｏｌｆｂｅｒｒｙ
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ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔＷＯｌｉｂｅｒｒｙａｎｄ
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ｕｌｔｒａｓｔｒｕｃｔｕｒａｌｃｈａｎｇｅｓｏｆｔｈｅ
ｓｏｌｅｕｓ
ｍｕｓｃｌｅｉｎ
Ｏｈ．２４ｈ．
４８ｈａｎｄ７２ｈａｆｔｅｒｅｘｈａｕｓｔｉｖｅｅｘｅｒｃｉｓｅ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｕｌｎａ—ｍｉｃｒｏｓｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆ
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收稿日期：２０１２—０４—１９
基金项目：山东省中青年科学家科研奖励基金（２００９ＢＳＢ０１０６６）成果。作者简介：葛新发（１９５６一
）。男，博士，教授，博士生导师，研究方向运
动过程技能监控。
通信作者：董贵俊（１９７８一
）。男，博士，副教授，研究方向骨骼肌损伤修复生物学机制研究。
潘卫东（１９６８一），男，博士，研究员，研究方向电磁场生物学效应及其机制研究。
作者单位：１山东体育学院，山东济南２５０１０２；２中国科学院电工研
究所生物医学工程部，北京１００１９０
１
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１００１９０，Ｃｈｉｎａ
４６
万方数据
量墨嘲补充枸杞对力竭运动大鼠骨骼肌超微结构变化的影响
Ｎｏ．４
２ｄ１２
枸杞是一种传统名贵药材，具有“红宝”之称，其成分为枸杞多糖、甜菜碱等及多种微量元素和氨基酸…。枸杞具有的延缓疲劳、抗氧化、滋阴补肾等作用可能与枸杞多糖及血清酶存在的指标关系相关
联”】。同时，枸杞水煎液、提取物、口服液能有效提高
小鼠持续游泳时间，说明枸杞§鲁显著提高小鼠的抗疲劳能力”。ｏ；对机体补充枸杞多糖能降低血清中乳酸
含量，提高骨骼肌在运动过程中利用氧的能力以及心
血管系统供氧能力，增强机体的有氧代谢能力等”。’。在力竭运动中，补充构杞能够瞬显改善机体成分，提高机体的运动能力，有效预防肌肉损伤的发生。力竭运动可导致循环血量重新分布及大量乳酸的堆积，肌细
胞膜受损，线粒体双层膜结构破坏、嵴消失且血清酶活性升高。｛｝充枸杞能有效缓解血清酶上舞幅度，从雨起
到对肌纤维的保护作用”ｏ。目前对枸杞在运动过程中的研究主要集中在运动训练中抗疲劳作用的生理、生化指标的分析，对力竭运动后恢复过程中骨骼肌超微结构变化的影响研究尚未发现。
本研究通过对大鼠进行一次性力竭运动后引起的
骨骼肌超微结构的变化进行研究，观祭补充枸杞后大鼠力竭运动引起骨骼肌超微结构的变化，从组织学分析补充枸杞对力竭运动中大鼠骨骼肌超微结构的影响，探讨补充枸杞对大鼠比目鱼肌损伤恢复的促进作用。
１材料与方法
１．１动物分组及喂养方法
购自山东大学动物饲养中心雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠共．９０只，体重１５７．６±６．０ｇ，室温保持在２３。Ｃ左右，相对湿度（５５±５）％，光照时间为７：９０—１９：００，自由饮食。随机分为６个组，其中自由饮食组、补充安慰剂组、补充枸杞组作为对照缉（每组６只），自由饮食运动组、补充安慰剂运动组、补充枸杞运动组作为运动组（每组２４只）。
１．２枸杞灌喂方式
将枸杞弼蒸馏东洗干净后浸泡粥分钟，分两次煎煮，每次煮沸后加煮１０分钟，分别过滤一起摇匀，制成浓度相当于生药量ｌ∥ｒｔｌｌ的１００％的水煎剂，灌喂剂量为１０∥ｋｇ体重。补充安慰剂组灌喂相同剂量的生理盐水。每天称重鼹次，以根据体重确定羚充鹩裁量”’。１．３运动的条件及方案
实验对照组及运动组实验均为期６周，然后利用动物实验运动跑台力竭运动一次，参照文献力竭运动
万方数据
前让大鼠跑台适应１周．第一天以５ｍ／ｒａｉｎ，第二天以
１０
ｍ／ｒａｉｎ，第三天以１５ｍ／ｒａｉｎ的速度运动直到１周，
每次运动持续１５ｒａｉｎ。休息１天，进行运动（２５
ｒｎ／
ｒａｉｎ，５％坡度，相当于７５％ＶＯ：ｍａｘ）”Ｊ。力竭组以大鼠臀部压在跑台后壁，后肢随转动皮带后拖达３０秒以上，驱赶无效，并有呼吸加深的现象、神态倦怠、俯卧位、垂头等特征为力竭标准。１．４样本取材及电镜标本制作
观察运动组运动后即刻、２４ｈ、４８
ｈ、７２
ｈ的大鼠
比目鱼飘超微结构变化。力溻运动后郎蓟、２４ｈ、４ｓ
ｈ、７２
ｈ取大鼠两侧的比目鱼肌，将一侧比目鱼肌组织
放人冰冷的生理盐水中清洗，统一标记并冻存，而将另外一侧的比目鱼肌组织切割成０．５ｍｉｌｌ×０．５ｍｍ×５
ｍｍ的长方｛奉块状标本，立鄞置于２，５％戊二醛固定液
中固定．ｏ℃～４℃保存。
２．５％戊二醛固定骨骼肌的标本后，将标本置于４０Ｃ的０１ＭＰＢＳ缓冲液中过夜保存，取出后充分在缓冲渡中以大概１５分钟的阔隔冲洗４次，然后抛ｌ％．饿酸同样放置在４℃的环境内固定２ｈ．再用以上同样的方式在缓冲液中进行冲洗，完毕后用梯度乙醇丙酮脱水，环氧树脂包埋，然后把包埋的标本块切制成半薄切片，随后光镜定位，再用超薄切片机进行切片，切片最后用铀一铅双染制片。
２实验结果
２．１
自由饮食组、补充安慰剂组、补充枸杞组大鼠比
目鱼肌超微结构
自由饮食组、补充安慰剂组、补充枸杞组电子显微镜下均显示肌纤维排列整齐，肌节形态正常、结构完整，Ａ、Ｉ、Ｉ－Ｉ带以及Ｍ线完整清晰，肌膜、核膜完整，线
粒体、肌核完整，ｚ线完整连续，无异常现象（见图１），
２．２力竭运动后即刻大鼠比目鱼肌超微结构变化情况
运动组运动后即刻切片均显示明显的ｚ线不连续，呈波纹状，其完整性被破坏，并出现肿胀的线粒体；自由饮食、补充安慰帮运动组与补充枸祝运动组相比，ｚ线排列更加紊乱。
２．３力竭运动后矾ｈ大鼠比目鱼肌超微结构变化情况
力竭运动后２４ｈ自由饮食组与安慰剂组超微结构的损伤明显。损伤程度高于郧刻组，损伤程度严重，如大量线粒体发生肿胀，肌核肿胀，固缩，空泡变性，嵴紊乱，肌膜皱缩，肌细胞肿胀，ｚ线出现异常，部分肌基膜分离，部分肌膜出现溶解现象。巨噬细胞、间质可见
４７
第２８卷第４期
２０１２年．８月
炎性细胞等（如图４）。运动后２４ｈ补充枸杞组的损伤情况比补充即刻组有所增加，与运动后２４ｈ自由饮食组和安慰剂组相比较轻（如图５），线粒体在体积上有肿胀现象，其数目稍微增多，肌细胞肿胀，ｚ线异常，嵴紊乱，巨噬细胞、间质可见炎性细胞等，属局灶性损伤。２．４力竭运动后４８ｈ大鼠比目鱼肌超微结构变化情况
力竭运动后４８ｈ自由饮食组与安慰剂组超微结构的损伤有减轻的趋势，出现逐渐修复现象。损伤程度在局灶性与严重之间，如线粒体发生肿胀、肌核肿胀，固缩，空泡变性，嵴紊乱，肌膜皱缩，肌细胞肿胀，ｚ线出现异常，部分肌基膜分离，部分肌膜出现溶解现象。巨噬细胞、问质可见炎性细胞等（如图６），属局灶性损伤。运动后４８ｈ补充枸杞组的损伤情况轻于补充枸杞２４ｈ组、自由饮食与安慰剂４８ｈ组（如图７），线粒体在体积上有肿胀现象，其数目稍微增多，肌细胞肿胀，ｚ线异常，嵴紊乱，问质偶见具有增殖趋势的卫星细胞等，属局灶性损伤。
２．５力竭运动后７２ｈ大鼠比目鱼肌超微结构变化情况
自由饮食组与安慰剂组力蝎运动后７２ｈ与４８
ｈ
微结构的变化与运动时间、强度等均有关，时间持续越长、强度越大及非习惯性负荷。运动损伤越明显。
造成骨骼肌微损伤的运动方式以离心运动最为显著，尤其是下坡跑台运动．目前大量的研究都证实了这个观点”““，在运动训练中骨骼肌延迟性酸痛现象很常见，这些现象被认为是一个从刺激到适应的过程”“。本研究中，大鼠在进行一次性力竭离心运动后，骨骼肌的超微结构表现出了同样的明显变化。研究发现骨骼肌运动后即刻至２４ｈ超微结构的变化表现为：肌纤维断裂，Ｚ线异常、出现波纹状，线粒体空泡化。这一系列变化在２４ｈ以后取样切片中最明显，其中肌节明、暗带的排列紊乱是骨骼肌形态学在电镜下观察的一些现象”’“。“。这些微变化都是机体对长时间、大强度、非习惯性负荷刺激所做出的反应。本研究结果发现补充枸杞可减轻力竭运动后大鼠比目鱼肌超微结构的一系列形态学的改变。运动后４８ｈ，补充枸杞组骨骼肌微损伤修复速度明显优于自由饮食组和安慰剂组，说明补充枸杞在运动训练过程中对骨骼肌
的损伤有明显的预防及＿堤进修复作用。
４结论
力竭运动导致大鼠比目鱼肌在运动后即刻至４８ｈ问超微结构出现显著变化，表现为肌纤维断裂、Ｚ线改变、线粒体减少等。补充枸杞能显著改善力竭运动后
４８
相比超微结构的损伤逐渐好转出现修复，线粒体在体积上有肿胀现象，其数目稍微增多，肌细胞肿胀，基膜部分分离．ｚ线异常，嵴紊乱，间质偶见具有增殖趋势的卫星细胞等（如图８）。运动后７２ｈ补充枸杞组的损伤情况在修复周期过程中明显优于自由饮食组与安慰剂组（如图９）。卫星细胞在间质中出现增殖，肌细胞中的染色质有凝聚现象出现，基膜逐渐形成，向卫星细胞慢慢转变。
ｈ比目鱼肌超微结构微损伤状况，表明枸杞在运动
训练过程中对骨骼肌的损伤存在保护作用．对力竭运动后骨骼肌微损伤的修复具有促进作用。
３讨论
长时间或力竭运动后造成的骨骼肌纤维结构的改变，称运动性骨骼肌微细损伤。这种损伤的发生有复杂的多种因子参与，其损伤机制也有很多的假说，如代谢学说、机械学说、自由基学说等。这些学说均认为，胞浆内容物泄漏以及胞外钙离子大量进入是肌细胞膜的损伤、完整性丧失的直接原因”ｏ，而细胞膜结构的损伤后会引起一系列肌纤维微结构的改变。所以，运动中若能通过对机体补充营养补剂来维持肌细胞膜的正常功能及完整性，可减轻肌肉微损伤的程度，维持运动员的运动能力及身体机能。
在电子显微镜观察下，骨骼肌超微结构的变化以肌小节形态结构改变为主要表现形式，如肌原纤维排列紊乱，ｚ线排列不整齐，线粒体数量减少。骨骼肌超
４８
附图
圈１对照组比目鱼肌超擞蛄构图（ｘ５０００
万方数据
Ｅ窭圈补充枸杞对力竭运动火鼠骨骼肌超微结构变化的影响
Ｎｏ４２０１２
图２自由饮食、补充安慰荆力竭运动即剥比目鱼肌超微结构变化（ｘ５０００）
图４自由饮食、安慰剂组力竭运动２４
ｈ
比目鱼肌超微结构变化
图６自由饮食、安慰荆４８ｈ比目鱼肌超微结构变化
万方数据
图３补充构杞力竭运动后即刻组比目鱼肌超微结构变化（ｘ５０００ｊ
图５补充枸杞组力竭运动２４ｈ组
比目鱼肌超微结构变化
图７补充拘杞４８ｈ组比目鱼肌
超微结构变化
４９
第弼卷第４期
２０１２年８月
图８自由饮食、安慰刑组力竭运动７２ｈ后比
目鱼肌超微结构变化
图９补充枸杞组力竭运动７２ｈ后比目
鱼肌超微结构变化
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ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｓａｃｔｉｖａｔｅｄｂｙａ鲥ｎｇ】ｅｂｏｕｔｏｆｅｘｅｒｃｉｓｅ
ｓｋｅｌｅｔａｌ
万方数据
补充枸杞对力竭运动大鼠骨骼肌超微结构变化的影响
作者：
葛新发， 董贵俊， 王宏巍， 王超， 李可峰， 潘卫东， GE Xin-fa， DONG Gui-jun， WANG Hong-wei， WANG Chao， LI Ke-feng，PAN Wei-dong
葛新发,董贵俊,王宏巍,王超,李可峰,GE Xin-fa,DONG Gui-jun,WANGHong-wei,WANG Chao,LI Ke-feng(山东体育学院,山东济南,250102)，潘卫东,PAN Wei-dong(中国科学院电工研究所生物医学工程部,北京,100190)
山东体育学院学报
Journal of Shandong Institute of Physical Education and Sports2012,28(4)
作者单位：
刊名：英文刊名：年，卷(期)：
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引用本文格式：葛新发. 董贵俊. 王宏巍. 王超. 李可峰. 潘卫东. GE Xin-fa. DONG Gui-jun. WANG Hong-wei. WANG Chao. LI Ke-feng. PAN Wei-dong 补充枸杞对力竭运动大鼠骨骼肌超微结构变化的影响[期刊论文]-山东体育学院学报 2012(4)