中国医药 工 业 杂志
,
・
・
原还型 谷 甘肤 肤的金 属 鳌合 和亲 色谱 纯化
潘飞
,
郑 雁
,
湖临北 工 业学 生大 物工程 学
院
湖 武汉
。
北摘要
制备 了 以壳 聚 糖 为 体载的 金 属 鳌 合 亲和 色 谱分 离纯 化 还 原型 肤 甘谷
肚。
研究
了、
钱离 子浓 等度对 纯 度 达
名
洗可
,脱的影
响 据 根试 验果结 确定 洗脱 液 为
。、
。
比
磷 酸缓冲盐 液 住含
比
,
得所
平均取率 为
关键 提词
还原 型 谷 甘肤
金 属 肤 鳌合 亲 和谱色
壳糖
聚 一一 一
中 分图 号
类文标 献识码 一
章 文 编
谷号 肤肤甘 由是
谷酸
氨、
一
半
氨肤和 甘氨酸
,
得 到富
十含
的
酵母 抽提 液
,
。
另
以壳聚 糖 为 载体
、
缩 合酸而 成 的 琉含基 的 生物活 性 三 肤 化合 原态
物理功能
生
,还有
为 配
制得基 金 属 鳌合 剂
以
酵 母 抽液 提上柱 分
。
和氧化态
两
种
’
。〕
有种
多离
,
考察 洗了 脱条 件 纯对化 结 果 影的
仪 器响与试 剂 一
对
维 持 生 体物 内适 宜 的化 还 原氧环境 临 床 尤用于 中毒 性 和感 性染 肝炎 的 治 疗
、 为要
重,
〔〕
〔〕
、
高型液 效 色 谱 仪相旧 本 津岛公司
。
傅里叶变
型 可 见 分光 度计
有 光机物 及 金 属重的解 毒等阶
了
。
症辐 癌射和疗 的化保护,
换红 外谱光 美仪
国 壳 聚 糖是 然天的 氨 基 多
,糖
生物
相性 容与
海上精 密 学科 器仪有 限 公司
吸
附 均 性 好较
可
接 直或经 修 饰后 用 各 种作 色 谱 和。
啤酒 母酵泥 华 润集 武 团 东汉 西湖 啤酒 公司 市 钠售、
壳聚,糖
蛋
白质 分 纯离化 的 载 体 兴的 色谱 技
术
金,属 离子 亲和 色谱 是新
、
,
分 量子
’一
,
脱 乙
度
酞 氨基亚 二 乙 对照品酸公 司
。利
,
用,
、
、
二硫二
一
硝,基 甲苯酸
化试剂生 公司
等金 属离子 与 蛋 白质 表 的 面 组氨酸
氨 酸配 位合结
间空构象 不同 ,
、 色氨酸 或半 肤 数
量
公、司
含量
,于 氨 基 酸由 种类
、
置位
,
及 庚 烷磺 酸钠美 国
其余试 均剂为 分析 纯
故 与
金属 离 子和亲 大力小 不
同 〔 〕“
。
从
方 法与结 提果 液取的制 备
、
而
选择 性 地 分离纯化
本
究 研通过 啤 酒 酵 母 的对 处 预理及 胞 破细碎 收
稿期日 基 项金 目作 者 简介药
物
,
。啤
酵酒母 泥经 预处 理 包 括过
筛净的 酒 啤 母 后酵,
杂 得 到 除
对
一
纯
、按
的比 例
将
,
一
湖 一北 教育省厅 重大 目 潘 飞 男 项硕士研究生, ,
轻 基 苯
甲 酸 丙 醋溶 液 加 菌至 体中,
℃
,
专业
方
向
多肤
拌
搅。
离心
上清液加
入
,,
絮凝剂 壳聚 糖 使其 浓终 度为一
搅
。拌
几
,
,通
联讯 系人 邱雁临 生资 源的微 生 物 转 化研 究
一
一
,
女授
教
,
博士
生导师
, 从事
离再
后 取 心清液上备 用
。
亲 和 谱 色 的制剂 备
主
￡壳聚 葱
糖,
溶于
乙 溶 液酸
。。
,
搅
,拌
,
七
,尽
一
心
尸
入、
,
一
国中 药工医业 志杂
,
用
注 射 将 器壳聚 糖溶液注 入 氧 化 钠 溶 液组 成 的凝 液 中结
,甲
溶 醇液
与氢
采剂用 如
下
林,
洗 涤 色谱
柱再生 的 性 鉴 定
定
。
乳得 色 中白 空的 聚壳。
糖 小球
醛
液溶加 入后 丙加烷
。
水
洗 至 中性 中 ,
,
丙
酮 洗后
加至涤。
戊
二,。
法 检洗 测脱液 中
的,
色谱 条件
,
快 搅速 交联
,拌
水 洗 至
中性
色
谱柱 流 动相 酸磷 盐 溶 液磷 二酸 氢
,钠
硼
氢化钠 溶液
拌
搅。
水
洗
,
。庚
氢 氧 化
钠 液溶 调 至搅
拌联交,
加 入环氧 氯 按 的
,
烷
磺 酸
钠甲
醇用水 定 容至
流速
。
,
用 磷
酸调
至 洗水至 中
性,
,
,测 波检
长,
比例 壳在 聚糖小 中球加
℃入水 浴 中保温
亚 氨基 二乙酸 钠 溶 液,
所得
图。 谱 见图
对
照品 的 出峰 时间 为 图谱中仅 存 一 个在
峰
后 , 洗水至 中性
,
抽干 备用
。
洗液脱
说
向上
述 壳聚 糖 球小中 加入 水 色谱 柱
涤
色,
搅
拌 匀均后 装 至 倍柱 体 积 的 洗水
。明 脱 洗液 无 其中 他 杂质蛋 白
且 出峰 时 间与 照对
品
中。
,
用
本一基
致,
初 确 定步 洗脱 中液为
加
入,
硫酸 铜液溶 进行 鳌合至 柱 全部变 为蓝 十
,
水 洗 除
未去结合的
至 流液出 无色
的分 离 纯 化用 倍 体 积柱 缓 冲的液
,、
平衡 谱色
柱
,
取
“
”
项
下得制 浓的度为,
取提 液浓 缩
样上。
经,
法
〔测
检
〕
。
’
察用考 不磷 同 盐 缓酸
冲液
洗
脱
液洗
脱对 纯 化 效果 影 响 的分 别用 不 同的
比
,
进
照 品
对
,
样
品
图
的
℃
、
图
行洗谱脱 明在
,
记 录
获得一
所需 洗 的 脱液体 积
结果 表,
‘ 〔。〕
将 洗脱 液在一
条
下 件冷冻 干燥后 制
一
范 内围洗 脱液 体积 随
增加而 提
高 于
由
。
得样品 末粉
,
经
外光谱仪红。
检测
。
,
谱图与 一
在
,
综 考合虑
确
定 最 佳 件条为
一
的液溶 中损 失 率最 低。
标准
图 谱 本基 一致
所得 样 品纯 为度
。
综合
,
图谱 和
据
竞 争性物
质结合 强很
,
时当金
鳌 合 属 基配 与蛋 质白,
图谱 定确洗脱 中 主液要 成 为
计分算倍 ,
一般 的 盐 以难洗 脱 吸附
的蛋 白
质。
因
化纯倍数为
须此 入 引 能 与金 配属位 的 竞 争 性 质物
类 此质物
一
,提
取 收率 为结论
般 系含 为咪有
哩,
、
原
子等 电 子 予 体给 小的分 物子 质
组氨 酸 按盐 和等。
要
主
” 汇, 〕
加 入后 可 改 变蛋 白 为竞 争 质性
研 本 以壳究聚糖 载为体
醛 和环氧 氯丙 烷 为 交联剂 ,
、
配 基
,
以戊 为
二与
金属 离 子的亲 和 作 用 本 究选研用
亚 氨基二 乙 酸 为钠金 属
物
质 通 过 改变 洗 脱 中液
。
的浓度 考 察 其对分 离 度浓提高 更 洗 脱易 但 泄的漏 导 ,
,。
鳌
合 成剂 功制 备 用 于了
离 纯分 化的 型新金 属。
的
影 响 结 果表 明所需洗 液体脱积 随
降低而其 竞 争 作用即 随 之增 强
,
鳌 合和 色谱 亲剂提 取
率 提高了
,
产
达品 使到 用 标准
,与
文 献
〔
’」
,
,
所用 子离 交换法 相 比较倍
。纯
度提高
了倍
脱洗液
中 浓度提 会 明显 增高加
,
致分 离 能 力下
降浓度为
重加 产 污品染
。。
合综考 虑
定确
考参文 献
综
上采
以
、用
川
比
的,
含
比
一
〕
,
,
流
洗脱速
洗 脱 完 毕后用 强 鳌合
中
国药工 医上 志
杂‘
,
・
・
一
「
」蒋挺 大 聚壳糖「 刀王
,,
第
版北 化 京学工 业 版出社
,
,
一
一
,
,
,
彭 星亮 蔡梅伊蔡 伟 等 谷 甘胧肤 助 辅治疗 重 病型 性 毒
炎 肝和 炎肝肝 化 硬
「一
,
,
,中国
新药 与 临 杂志床
,
,
,
,
一
潘
,
邱飞雁 黄临欣 啤 酒 废酵 母 还中原 型 谷 甘 肤 的肤抽
,
,
胡
俊斌 新刘月 陈 燕 等 谷 胧 肤 甘对化疗 药 物性肝 损害 的 治作防用仁 ,
,
,
新方法探 讨
提〔 赵 」 旭 东 魏东芝 物 分析杂 万志「
,
, ,,,
生 技术
,物
,
,一
国新药 中 临床与 志
杂
,
,
一
犯
群 等
谷肤 肤 甘简的 便 测定 法
一〕
药
〕 胜马林 姜 初明 眺 甘 肤谷 治疗瘤肿病 伴 人 肝损 肾害和
、
’
药物性 肝一
,
、
肾损 害 〕中 仁国 药新与临 床 杂
志
,
’,
旭孙 东李 旗红隋洪 艳等 属鳌金 合亲 和层 析 分离 蛋质 的研白
究 生 物工程 报学,
,,
,
,
一
杨
秀 明 勾 琼喻 兰 等谷 眺甘 肤 与纳 酮 合 用 洛 治 疗 二苯
,
,
〔
蔡俊
邱 雁临 离 子 交换 提法取还 原 型谷 脱 甘 肤,
,的
氮
卓 类药 物 中毒
例仁
中 国新药 与临 床 志
杂
,
, 究研「 食 品研究与 发
开一
,
、 乞
一
由 。印
,
邪石
,比
封
面
匕 仁 乐康包 衣 技术 有限 公 司
海彩
插 插 彩插
彩插彩
北
创京 腾技科有 限 司公北 京 创 科技腾 有 限公
司
封内
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封二内
安 伦 科 技捷
有 限公司
院 医处 方 分 析统 系 天 津市勒 易 爱医药 料 科材技有限公 司
梅
勒特 托 利仪多器 上 海有限 公 司上
海 贝 凯 生 物 工 化 设备 有限公 司 特梅勒 托利 多仪器 海上 有限 公 司一
一
封
封三底彩插
天
津市 大 天 天科发 有 技 限公 司 天原津 大 学 无 线 电厂匕
松森制 药 备设 有 公 限 海司
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海上东 高华压 质均机 厂
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第第 届
世 界 制 原料 药 国中 展届世 界制药 原料 中国 展
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潘飞
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谷号 肤肤甘 由是
谷酸
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氨肤和 甘氨酸
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、 为要
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,糖
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相性 容与
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接 直或经 修 饰后 用 各 种作 色 谱 和。
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等金 属离子 与 蛋 白质 表 的 面 组氨酸
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,
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。
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,
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,
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经,
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,
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,
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‘ 〔。〕
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,
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,
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,
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确
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所得 样 品纯 为度
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,
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一
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、
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、
配 基
,
以戊 为
二与
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。
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,。
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合 成剂 功制 备 用 于了
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的
影 响 结 果表 明所需洗 液体脱积 随
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,
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率 提高了
,
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,
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所用 子离 交换法 相 比较倍
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合综考 虑
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