·12·
中国现代药物应用2012年4月第6卷第8期Chin J Mod Drug Appl ，Apr 2012，Vol．6，No．8
玫瑰花中总黄酮提取方法比较研究
李淑芳
桑小军
【摘要】目的比较不同方法提取玫瑰花中总黄酮的效果。方法分别用超声提取法和回流提取法对
玫瑰花药材进行提取，以芦丁为对照品，采用分光光度法测定玫瑰花总黄酮含量。结果总黄酮在10. 08～100. 8μg /ml范围内呈良好线性关系（r =0. 9994），超声提取法和回流提取法的回收率分别为98. 9%和100. 3%，RSD 分别为1. 0%和1. 8%。结论超声提取法操作简便，效率高，可适用于工业化生产。
【关键词】玫瑰花；总黄酮；分光光度法
Comparative study on extraction of total flavonoids from flowers of rosa rugosa
【Abstract 】Objective flowers of rosa rugosa．Methods
LI Shu-fang ，SANG Xi-
ao-jun．Department of pharmacy ，The First Affiliated Hospital of Baotou Medical College ，Baotou 014010，China
To make a comparison about the extraction technology of total flavonoids in The contents of total flavonoids were extracted from flowers of rosa rugosa by
There was good liner relationship between 10. 08～
different methods of regurgitant extracting and ultrasonic wave extraction ，that were determined by spectropho-tometry with rutin as the reference substance．Results
100. 8μg /ml（r =0. 9994）．The recoveries of regurgitant extracting and ultrasonic wave extraction were 98. 9%（RSD =1. 0%）and 100. 3%（RSD =1. 8%），respectively．Conclusion The ultrasonic wave extraction is simple ，efficient and can be applied in mass production．
【Key words 】Rosa rugosa ；Total flavonoids ；Spectrophotometric method
玫瑰花为蔷薇科植物玫瑰（Rosa rugosa Thunb ）的干燥花蕾，其性味甘温，归肝、脾经，具有行气解郁，和血止痛之功效
［1］
层，水相加乙酸乙酯萃取3次，乙酸乙酯部分用旋转蒸发仪蒸
干，加70%乙醇溶解并定容于50ml 容量瓶中，摇匀，即得。2. 2
对照品溶液的制备精密称取60℃干燥至恒重的芦丁
加70%乙醇适量溶解并对照品25. 2mg 至25ml 容量瓶中，
定容至刻度。精密量取10. 0ml 至50ml 容量瓶中，加70%
乙醇定容，摇匀，即得芦丁对照品溶液（C =0. 2016mg /ml）。2. 3
测定波长的选择精密量取对照品溶液1. 0ml 置10ml 容量瓶中，按顺序依次加入5%亚硝酸钠溶液0. 4ml ，摇匀，放置6min ；加10%硝酸铝溶液0. 4ml ，摇匀，放置6min ；再加入4%氢氧化钠溶液4. 0ml ，并用70%乙醇稀释至刻度，摇匀，放置15min 。同法配制空白溶液。用紫外-可见分
确定最大吸收波光光度计在400～800nm 波长范围内扫描，长为510nm 。
2. 4标准曲线的绘制
1. 0，精密量取芦丁对照品溶液0. 5，
2. 0，3. 0，4. 0，5. 0ml ，分别置于10ml 容量瓶中，按“2. 3”项“加入5%亚硝酸钠溶液0. 4ml ”下自起依法操作，同法配制空白溶液，于510nm 处测定吸光度。以浓度（C ）为横坐标，吸光度（A ）为纵坐标进行线性回归，得回归方程为：A =9. 7957C +0. 0074（r =0. 9994）。结果表明，该方法在10. 08～100. 8μg /ml范围内线性关系良好。
2. 5精密度试验精密量取芦丁对照品溶液1. 0ml ，置10ml 容量瓶中，“2. 3”按项下方法显色并测定吸光度，重复测RSD 为0. 25%，表明仪器的精密度良好。定6次，
2. 6稳定性试验精密量取“2. 1”项下方法制备的样品溶
“2. 3”10、20、30、40、60液1. 0ml ，按项下方法显色，分别于0、min 测定吸光度，超声提取法和回流提取法的RSD 分别为
0. 56%和0. 98%，表明样品溶液在60min 内稳定。2. 7
重复性试验取玫瑰花粉末10份，按“2. 1”项下方法
“2. 3”制备样品溶液，每组5份，按项下方法显色并测定吸光度，结果得超声提取法和回流提取法的含量分别为1. 76%
RSD 分别为0. 95%和1. 5%，和1. 74%，表明两种方法的重现性较好。
。玫瑰花含有挥发油、氨基酸、黄酮类、多糖类等多种化
其中的黄酮类成分具有抗癌、免疫调节、降血糖、抗学成分，
［2-4］
。目前，氧化等多种药理活性玫瑰花总黄酮提取方法主
［5，6］
。研究者虽研究了超声提要有回流提取法和超声提取法
取法的最佳提取工艺，但不同提取方法之间的比较研究报道
较少。为寻找高效、省时的提取方法，本文以芦丁为对照品，采用分光光度法测定总黄酮含量，分别比较了超声提取法和以期为工业提取玫回流提取法提取玫瑰花中总黄酮的效率，瑰花总黄酮提供实验依据。1
仪器与材料1. 1仪器UV-1901紫外-可见分光光度计（北京普析通用
500DB 型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有公司）；KQ-限公司）；恒温水浴锅（北京市长风仪器仪表公司）；旋转蒸
发仪（上海安亭科学仪器厂）；电子天平（北京赛多利斯天平有限公司）。1. 2材料与试剂
玫瑰花购于各地，用研钵磨成细粉备用；
芦丁对照品（中国药品生物制品检定所，批号：100080-200406）；亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、乙醇、甲醇、石油醚、
乙酸乙酯均为分析纯，水为重蒸水。2方法与结果2. 12. 1. 1
样品溶液的制备
超声提取法精密称取玫瑰花粉末约1. 0g 于具塞
锥形瓶中，加入70%乙醇30ml ，浸泡过夜，超声提取40min ，
过滤，滤液用石油醚洗涤3次，弃石油醚层，合并萃取液，转移至50ml 容量瓶中，用70%乙醇定容至刻度，即得。2. 1. 2
回流提取法精密称取玫瑰花粉末约1. 0g 置圆底烧瓶中，加70%乙醇30ml ，加热回流提取2h ，取滤液于旋转蒸发仪中蒸干，加水50ml 振摇，加石油醚洗涤3次，弃石油醚
作者单位：014010内蒙古包头医学院第一附属医院药剂科
中国现代药物应用2012年4月第6卷第8期Chin J Mod Drug Appl ，Apr 2012，Vol．6，No．8
·13·
平板运动试验阳性的女性患者冠脉造影
结果分析
冯云
朱恒青
谢绍峰
【摘要】目的探讨女性平板运动试验（TET ）假阳性的原因及颈动脉斑块检查对冠心病无创性诊断的意义。方法对96例TET 阳性的女性患者进行冠脉造影（CAG ）及颈动脉斑块检查，对三种检查结果进行比较，回顾性分析女性患者出现平板运动试验假阳性的原因。结果CAG 证实为冠心病（CHD ）58例（占60. 4%），非CHD 38例（占39. 6%）；颈动脉斑块检查阳性者71. 2%被证实为CHD ，而阴性者仅36. 7%被证实为CHD ；非CHD 38例中临床最后诊断：心血管神经症20例，高血压病4例，单纯血脂异常4例，X 综合征2例，糖尿病3例，高血压合并糖尿病2例，冠状动脉心肌桥2例，心尖部肥厚型心肌病1X 综合征、例。结论平板运动试验假阳性与心血管神经症、冠状动脉肌桥、高血压病、糖尿病等因素有关，心血管神经症为最常见病因。TET 结合颈动脉斑块检查可显著提高冠心病无创性检查的诊断率。
【关键词】平板运动试验；女性；冠脉造影；颈动脉斑块；冠心病Analysis of coronary angiography for female patients with treadmill exercise test positive FENG Yun ，ZHU Hong-qing ，XIE Shao-feng．Department of Cardiovascular Epidemiology ，Ganzhou Municipal Hospital of Jiangxi Province ，Ganzhou 341000，China
【Abstract 】Objective To discuss the renson of false positive result of treadmill exercise test （TET ）in female patients and the significance of carotid artery plaque inspection in non-invasive diagnosis of coronary
heart disease．Methods TET on 96cases of positive female patients with coronary angiography （CAG ）and examination of carotid plaque ，on the comparison of three kinds of inspection results ，retrospective analysis of female patients of treadmill exercise test false positive reasons．Results CAG confirmed coronary heart disease （CHD ）in 58cases （60. 4percent ），non-CHD38case （39. 6percent ）．71. 2percent positive examination of
carotid plaque was confirmed as CHD ，only 36. 7percent negative was confirmed as CHD．Clinical last diagnosis in non-CHD38example ：cardiovascular neurosis in 20cases ，4cases of hypertension ，dyslipidemia 4simple
作者单位：341000江西省赣州市立医院心内科
2. 8回收率试验取安徽亳州产玫瑰花粉末10份，按
“2. 1”项下方法制备样品溶液，每组5份，分别精密加入一
“2. 3”定量芦丁对照品，按项下方法显色并测定吸光度，结果得超声提取法和回流提取法的回收率分别为98. 9%和
100. 3%，RSD 分别为1. 0%和1. 8%。2. 9样品总黄酮含量测定分别精密量取“2. 1. 1”和“2. 1. 2”“2. 3”项下所得溶液1. 0ml ，按项下方法显色并测定吸光度，将吸光度代入回归方程计算样品溶液中的总黄酮含量，根据稀释倍数及样品质量换算出样品中总黄酮的含量，结果见表1。
表1两种提取方法玫瑰花总黄酮测定结果（%）
来源安徽亳州同仁堂药店山东平阴河北安国
超声提取法总黄酮含量
1. 76
1. 823. 662. 84
回流提取法总黄酮含量
1. 74
1. 793. 602. 87
然后随着温度的升高而降低，可能因为黄酮类化合物结构中的酚羟基在较高温度下不稳定，易出现氧化降解而影响了与
［7］
铝离子的络合使吸光度减小。
3. 3实验采用超声提取法和回流提取法提取玫瑰花中总黄
以分光光度法测定其含量，通过对所得数据进行统计学酮，t 检验，结果表明，在95%的置信水平下，两种方法无显著性差异。由于回流提取法提取所需时间较长，热能消耗大，样品长时间受热易破坏黄酮类化合物的结构，而超声提取法设
易操作，耗时短，且实验可在室温下进行，因此建议备简单，
工业化提取玫瑰花总黄酮宜采用超声提取法。
参考文献
［1］国家药典委员会．中华人民共和国药典（一部）．北京：中国医
2010：185. 药科技出版社，［2］崔山风．槲皮素的研究进展．西北药学杂志，2006，21（6）：
279-281. ［3］邵伟，刘赵昆，刘方．玫瑰花提取物抗衰老作用的研究．南开大
2008，41（3）：64-68. 学学报（自然科学版），［4］李明，李艳芳，孙永超．中药玫瑰花的研究进展．卫生职业教
2007，25（8）：146-148. 育，［5］丁凤伟，刘红燕，李洪芹，等．正交试验法优化玫瑰花总黄酮的
2011，35（3）：255-257. 提取工艺．山东中医药大学学报，［6］刘红燕．不同产地玫瑰花总黄酮含量的比较研究．中医药导
2010，16（5）：101-102. 报，［7］蒋德锡，陈文芝，贾建静，等．分光光度法测定角花胡颓子中的
2011，26（1）：81-82. 总黄酮．华西药学杂志，
3讨论
3. 1考察了溶剂种类（甲醇、70%、乙醇）、乙醇浓度（60%、
80%、90%）、1∶30、1∶40）、料液比（1∶20、超声提取时间（20、30、40、50min ）、1、2、3h ）对玫瑰花总黄回流提取时间（0. 5、酮提取效率的影响，结果表明，采用70%乙醇，以1∶30料液比提取时效果较好，超声提取法和回流提取法的最佳提取时间分别为40min 和2h 。3. 2采用回流提取法时，提取温度在75℃时提取效率最高，
·12·
中国现代药物应用2012年4月第6卷第8期Chin J Mod Drug Appl ，Apr 2012，Vol．6，No．8
玫瑰花中总黄酮提取方法比较研究
李淑芳
桑小军
【摘要】目的比较不同方法提取玫瑰花中总黄酮的效果。方法分别用超声提取法和回流提取法对
玫瑰花药材进行提取，以芦丁为对照品，采用分光光度法测定玫瑰花总黄酮含量。结果总黄酮在10. 08～100. 8μg /ml范围内呈良好线性关系（r =0. 9994），超声提取法和回流提取法的回收率分别为98. 9%和100. 3%，RSD 分别为1. 0%和1. 8%。结论超声提取法操作简便，效率高，可适用于工业化生产。
【关键词】玫瑰花；总黄酮；分光光度法
Comparative study on extraction of total flavonoids from flowers of rosa rugosa
【Abstract 】Objective flowers of rosa rugosa．Methods
LI Shu-fang ，SANG Xi-
ao-jun．Department of pharmacy ，The First Affiliated Hospital of Baotou Medical College ，Baotou 014010，China
To make a comparison about the extraction technology of total flavonoids in The contents of total flavonoids were extracted from flowers of rosa rugosa by
There was good liner relationship between 10. 08～
different methods of regurgitant extracting and ultrasonic wave extraction ，that were determined by spectropho-tometry with rutin as the reference substance．Results
100. 8μg /ml（r =0. 9994）．The recoveries of regurgitant extracting and ultrasonic wave extraction were 98. 9%（RSD =1. 0%）and 100. 3%（RSD =1. 8%），respectively．Conclusion The ultrasonic wave extraction is simple ，efficient and can be applied in mass production．
【Key words 】Rosa rugosa ；Total flavonoids ；Spectrophotometric method
玫瑰花为蔷薇科植物玫瑰（Rosa rugosa Thunb ）的干燥花蕾，其性味甘温，归肝、脾经，具有行气解郁，和血止痛之功效
［1］
层，水相加乙酸乙酯萃取3次，乙酸乙酯部分用旋转蒸发仪蒸
干，加70%乙醇溶解并定容于50ml 容量瓶中，摇匀，即得。2. 2
对照品溶液的制备精密称取60℃干燥至恒重的芦丁
加70%乙醇适量溶解并对照品25. 2mg 至25ml 容量瓶中，
定容至刻度。精密量取10. 0ml 至50ml 容量瓶中，加70%
乙醇定容，摇匀，即得芦丁对照品溶液（C =0. 2016mg /ml）。2. 3
测定波长的选择精密量取对照品溶液1. 0ml 置10ml 容量瓶中，按顺序依次加入5%亚硝酸钠溶液0. 4ml ，摇匀，放置6min ；加10%硝酸铝溶液0. 4ml ，摇匀，放置6min ；再加入4%氢氧化钠溶液4. 0ml ，并用70%乙醇稀释至刻度，摇匀，放置15min 。同法配制空白溶液。用紫外-可见分
确定最大吸收波光光度计在400～800nm 波长范围内扫描，长为510nm 。
2. 4标准曲线的绘制
1. 0，精密量取芦丁对照品溶液0. 5，
2. 0，3. 0，4. 0，5. 0ml ，分别置于10ml 容量瓶中，按“2. 3”项“加入5%亚硝酸钠溶液0. 4ml ”下自起依法操作，同法配制空白溶液，于510nm 处测定吸光度。以浓度（C ）为横坐标，吸光度（A ）为纵坐标进行线性回归，得回归方程为：A =9. 7957C +0. 0074（r =0. 9994）。结果表明，该方法在10. 08～100. 8μg /ml范围内线性关系良好。
2. 5精密度试验精密量取芦丁对照品溶液1. 0ml ，置10ml 容量瓶中，“2. 3”按项下方法显色并测定吸光度，重复测RSD 为0. 25%，表明仪器的精密度良好。定6次，
2. 6稳定性试验精密量取“2. 1”项下方法制备的样品溶
“2. 3”10、20、30、40、60液1. 0ml ，按项下方法显色，分别于0、min 测定吸光度，超声提取法和回流提取法的RSD 分别为
0. 56%和0. 98%，表明样品溶液在60min 内稳定。2. 7
重复性试验取玫瑰花粉末10份，按“2. 1”项下方法
“2. 3”制备样品溶液，每组5份，按项下方法显色并测定吸光度，结果得超声提取法和回流提取法的含量分别为1. 76%
RSD 分别为0. 95%和1. 5%，和1. 74%，表明两种方法的重现性较好。
。玫瑰花含有挥发油、氨基酸、黄酮类、多糖类等多种化
其中的黄酮类成分具有抗癌、免疫调节、降血糖、抗学成分，
［2-4］
。目前，氧化等多种药理活性玫瑰花总黄酮提取方法主
［5，6］
。研究者虽研究了超声提要有回流提取法和超声提取法
取法的最佳提取工艺，但不同提取方法之间的比较研究报道
较少。为寻找高效、省时的提取方法，本文以芦丁为对照品，采用分光光度法测定总黄酮含量，分别比较了超声提取法和以期为工业提取玫回流提取法提取玫瑰花中总黄酮的效率，瑰花总黄酮提供实验依据。1
仪器与材料1. 1仪器UV-1901紫外-可见分光光度计（北京普析通用
500DB 型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有公司）；KQ-限公司）；恒温水浴锅（北京市长风仪器仪表公司）；旋转蒸
发仪（上海安亭科学仪器厂）；电子天平（北京赛多利斯天平有限公司）。1. 2材料与试剂
玫瑰花购于各地，用研钵磨成细粉备用；
芦丁对照品（中国药品生物制品检定所，批号：100080-200406）；亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、乙醇、甲醇、石油醚、
乙酸乙酯均为分析纯，水为重蒸水。2方法与结果2. 12. 1. 1
样品溶液的制备
超声提取法精密称取玫瑰花粉末约1. 0g 于具塞
锥形瓶中，加入70%乙醇30ml ，浸泡过夜，超声提取40min ，
过滤，滤液用石油醚洗涤3次，弃石油醚层，合并萃取液，转移至50ml 容量瓶中，用70%乙醇定容至刻度，即得。2. 1. 2
回流提取法精密称取玫瑰花粉末约1. 0g 置圆底烧瓶中，加70%乙醇30ml ，加热回流提取2h ，取滤液于旋转蒸发仪中蒸干，加水50ml 振摇，加石油醚洗涤3次，弃石油醚
作者单位：014010内蒙古包头医学院第一附属医院药剂科
中国现代药物应用2012年4月第6卷第8期Chin J Mod Drug Appl ，Apr 2012，Vol．6，No．8
·13·
平板运动试验阳性的女性患者冠脉造影
结果分析
冯云
朱恒青
谢绍峰
【摘要】目的探讨女性平板运动试验（TET ）假阳性的原因及颈动脉斑块检查对冠心病无创性诊断的意义。方法对96例TET 阳性的女性患者进行冠脉造影（CAG ）及颈动脉斑块检查，对三种检查结果进行比较，回顾性分析女性患者出现平板运动试验假阳性的原因。结果CAG 证实为冠心病（CHD ）58例（占60. 4%），非CHD 38例（占39. 6%）；颈动脉斑块检查阳性者71. 2%被证实为CHD ，而阴性者仅36. 7%被证实为CHD ；非CHD 38例中临床最后诊断：心血管神经症20例，高血压病4例，单纯血脂异常4例，X 综合征2例，糖尿病3例，高血压合并糖尿病2例，冠状动脉心肌桥2例，心尖部肥厚型心肌病1X 综合征、例。结论平板运动试验假阳性与心血管神经症、冠状动脉肌桥、高血压病、糖尿病等因素有关，心血管神经症为最常见病因。TET 结合颈动脉斑块检查可显著提高冠心病无创性检查的诊断率。
【关键词】平板运动试验；女性；冠脉造影；颈动脉斑块；冠心病Analysis of coronary angiography for female patients with treadmill exercise test positive FENG Yun ，ZHU Hong-qing ，XIE Shao-feng．Department of Cardiovascular Epidemiology ，Ganzhou Municipal Hospital of Jiangxi Province ，Ganzhou 341000，China
【Abstract 】Objective To discuss the renson of false positive result of treadmill exercise test （TET ）in female patients and the significance of carotid artery plaque inspection in non-invasive diagnosis of coronary
heart disease．Methods TET on 96cases of positive female patients with coronary angiography （CAG ）and examination of carotid plaque ，on the comparison of three kinds of inspection results ，retrospective analysis of female patients of treadmill exercise test false positive reasons．Results CAG confirmed coronary heart disease （CHD ）in 58cases （60. 4percent ），non-CHD38case （39. 6percent ）．71. 2percent positive examination of
carotid plaque was confirmed as CHD ，only 36. 7percent negative was confirmed as CHD．Clinical last diagnosis in non-CHD38example ：cardiovascular neurosis in 20cases ，4cases of hypertension ，dyslipidemia 4simple
作者单位：341000江西省赣州市立医院心内科
2. 8回收率试验取安徽亳州产玫瑰花粉末10份，按
“2. 1”项下方法制备样品溶液，每组5份，分别精密加入一
“2. 3”定量芦丁对照品，按项下方法显色并测定吸光度，结果得超声提取法和回流提取法的回收率分别为98. 9%和
100. 3%，RSD 分别为1. 0%和1. 8%。2. 9样品总黄酮含量测定分别精密量取“2. 1. 1”和“2. 1. 2”“2. 3”项下所得溶液1. 0ml ，按项下方法显色并测定吸光度，将吸光度代入回归方程计算样品溶液中的总黄酮含量，根据稀释倍数及样品质量换算出样品中总黄酮的含量，结果见表1。
表1两种提取方法玫瑰花总黄酮测定结果（%）
来源安徽亳州同仁堂药店山东平阴河北安国
超声提取法总黄酮含量
1. 76
1. 823. 662. 84
回流提取法总黄酮含量
1. 74
1. 793. 602. 87
然后随着温度的升高而降低，可能因为黄酮类化合物结构中的酚羟基在较高温度下不稳定，易出现氧化降解而影响了与
［7］
铝离子的络合使吸光度减小。
3. 3实验采用超声提取法和回流提取法提取玫瑰花中总黄
以分光光度法测定其含量，通过对所得数据进行统计学酮，t 检验，结果表明，在95%的置信水平下，两种方法无显著性差异。由于回流提取法提取所需时间较长，热能消耗大，样品长时间受热易破坏黄酮类化合物的结构，而超声提取法设
易操作，耗时短，且实验可在室温下进行，因此建议备简单，
工业化提取玫瑰花总黄酮宜采用超声提取法。
参考文献
［1］国家药典委员会．中华人民共和国药典（一部）．北京：中国医
2010：185. 药科技出版社，［2］崔山风．槲皮素的研究进展．西北药学杂志，2006，21（6）：
279-281. ［3］邵伟，刘赵昆，刘方．玫瑰花提取物抗衰老作用的研究．南开大
2008，41（3）：64-68. 学学报（自然科学版），［4］李明，李艳芳，孙永超．中药玫瑰花的研究进展．卫生职业教
2007，25（8）：146-148. 育，［5］丁凤伟，刘红燕，李洪芹，等．正交试验法优化玫瑰花总黄酮的
2011，35（3）：255-257. 提取工艺．山东中医药大学学报，［6］刘红燕．不同产地玫瑰花总黄酮含量的比较研究．中医药导
2010，16（5）：101-102. 报，［7］蒋德锡，陈文芝，贾建静，等．分光光度法测定角花胡颓子中的
2011，26（1）：81-82. 总黄酮．华西药学杂志，
3讨论
3. 1考察了溶剂种类（甲醇、70%、乙醇）、乙醇浓度（60%、
80%、90%）、1∶30、1∶40）、料液比（1∶20、超声提取时间（20、30、40、50min ）、1、2、3h ）对玫瑰花总黄回流提取时间（0. 5、酮提取效率的影响，结果表明，采用70%乙醇，以1∶30料液比提取时效果较好，超声提取法和回流提取法的最佳提取时间分别为40min 和2h 。3. 2采用回流提取法时，提取温度在75℃时提取效率最高，