高效液相色谱仪测定酱油中苯甲酸的不确定度

・实验技术・

高效液相色谱仪测定酱油中

苯甲酸的不确定度

戚荣平

　　中图分类号:R65717+2　　文献标识码:B 　　文章编号:100720931(2006) 0120081202

　　国家技术监督局发布的“测量不确定度评定和表示”, 以高效液相色谱法测定酱油中苯甲酸为例, 分析了利用标准曲线测定样品的不确定度计算和步骤, 在实际工作中有

2]较强的实用价值[1、。

表1　标准曲线数据(每个浓度测定3次)

标准液浓度x (ng/μl )

1

1010

2010

3010

5010

[***********][***********][***********][***********]93606118

1　检测方法　采用G B/T5009. 29-2003方法, 标准使用

峰面积2液浓度为01050mg/ml 。酱油样品用超纯水定容后, 经

μm 水系滤膜过滤后进行测定。手动进样器吸取标准使0145

用液20ul 注入进样口, 将不同浓度的4复3次进行标样分析, 得出标准曲线, 的峰面积测定相应浓度。

2　测量数学模型211　计算公式:y =1。

12285736, a =611153546, r =0199997; 即:y =7212285736x +611153546。

212　酱油样品测定6次, 结果见表2。

表2　酱油样品测定(n =6) 结果

峰面积y 样品浓度x (ng/μl )

[***********]

[***********]

[***********]

[***********]

[***********]

[***********]

　　得出Y ′=2917142499　　x ′=40130690(ng/μl )

6(xi -) 2=0102744

(n -1)

3　测定酱油中苯甲酸浓度的不确定度分量

x ′=

311　A 类不确定度, 即重复测定样品产生的相对不确定度u rel (1) ==6181×10-4

(x ′)

312　工作曲线拟合引起的相对不确定度u rel (2) , 工作曲线

浓度x

(ng/μl ) [1**********]0

n i =1

表3　工作曲线数据

代入工作曲线计算得出的峰面积

[***********][***********][***********][***********]543617154

峰面积

y [***********][***********][***********][***********]183600149

[y -(bx

+a ) ][***********][***********][***********][1**********]0

见表3。

得x =2715(ng/μl ) 　　6[y i -u rel (2) 计算公式表示为:u rel (2) =

xb

(b j +a ) ]2=1501192

[1**********]0

2

=3164×10-++

P n S xx

(bx i +a ) ]2n -3

=12192

3

S =

n

[y i -

S xx =6(x j -x ) 2=2625

i =1

　　注:n —标准溶液测定次数, n =4×3=12; p —测试样品得次数, p =6; x —各个标准溶液浓度的平均值, x =2715(ng/μl ) ;

x ′—样品浓度的平均值, x ′=40130690(ng/μl ) ; b —工作曲线的斜

率, b =7212285736; j —下标, 测试标准溶液的次数。

作者单位:杭州市下城区疾病预防控制中心, 浙江杭州　310003

313　苯甲酸标准溶液以及配制引起的相对不确定度u rel (3) ,

苯甲酸标准溶液的配制(以0105mg/ml 标准溶液为例) :用

10ml 移液管吸取10ml 苯甲酸标准贮备液(1100mg/ml ) ,

体积不确定度为(实际温差为3℃, 水的体积膨胀系数为

211×10-4/℃,

-4=010364ml

以上三项合成得出:

222

=01068×10-V 2

综上所述, u rel (v3) =

2

由国家标准物质研究中心提供, 编号为G BW (E ) 100006, 相对不确定度为1%) 至100ml 容量瓶中, 定容到刻度, 得浓度为011mg/ml 标准使用液, 再用5ml 刻度吸管吸取5ml 标准使用液至100ml 容量瓶中, 定容到刻度, 得浓度为0105mg/ml (50ng/μl ) 标准使用液。公式表示为:

C 1=C 0V 2V 4

注:C 1—苯甲酸标准使用液的浓度; C 0—苯甲酸标准贮备液的浓度; V 1—10ml 移液管的体积; V 2—100ml 容量瓶的体积; V 3—

5ml 刻度吸管吸取5ml 标准使用液; V 4—100ml 容量瓶的体积。

u rel (v2) =

-2222

102rel (c ) +u rel (v ) +u rel (v ) +u rel (v ) +u rel (v ) =0152×01234

2

314　峰面积的量化误差相对不确定U rel (4)

本中心高效液相色谱仪的峰面积最小分辨率为0100001

=110×10-9(忽略不计)

2×y ′

315　分析仪器的相对不确定度u rel (5)

u rel (v4) =

31311　苯甲酸标准贮备液的相对不确定度u rel (c0) , 已知苯

甲酸标准贮备液1100mg/ml , 相对不确定度为1%, k =2, 则u rel (c0) =

=015%2

31312　移液管(10ml ) 的相对不确定度u rel (vl ) , 其中又包

(1) 吸管体积的不确定度, 称液管(10ml ) (2) 吸取时的估读误差, 估计为 01005ml (以RSD 表示) 为0122%() , 则

4　　综上所述, 酱油中苯

(5) =

括三个部分:

的容量允差为±0102ml , 按均匀分布换算成标准差为

=010116ml ;

4。

=013按均匀分布换算成标准差为

表4　酱油中苯甲酸含量不确定度来源

序号

来源

12345

相对不确定度

符合

u rel (1) u rel (2) u rel (3) u rel (4) u rel (5)

自由度

数值

6181×10-43164×100152×10110×10910×10

-3-2

(实际温差为3℃, 211×10-4/℃) 。u rel =

-4010036ml

以上三项合成得出:

符合数值

v 1v 2v 3v 4v 5

59505050

222

=01125×10-2

V 1

31313　刻度吸管(5ml ) 吸取5ml 标准使用液的相对不确u rel (vl ) =

重复性　

工作曲线标准溶液量化误差分析仪器

-9-4

定度u rel (v3) :其中又包括三个部分:第一, 刻度吸管体积的不确定度, 刻度吸管(5ml ) 的容量允差为±01025ml , 按均

=010144ml ; 第二, 吸取时的估读误差, 估计为±01005ml , 按均匀分布换算成标准偏

5　合成标准不确定度　

u c ,rel =10-2

2222

2rel (1) +u rel (2) +u rel (3) +u rel (4) +u rel (5) =0164×

匀分布换算成标准偏差为

=010029ml ; 第三, 移液管和溶液的温度与校正时的温度不同引起的体积不确定度为(实际温差为3℃, 水

差为

46　有效自由度　v eff =4=504

44+++595050

7　扩展不确定度分析　取可信区间95%, 查t 表得t 9550=

) , 的体积膨胀系数为211×10-4/℃

010018ml

-4

2101, 合成标准不确定度u c =u c ,rel ×x ′=0164×10-2×40130690=0126(ng/μl ) , 扩展不确定度U =u c ×t 9550=0152(ng/μl ) 。8　结果报告　测定结果:(40130690±0152) ng/μl , k =2, p =95%

=

以上三项合成得出:

222

u rel (v3) ==01043×10-2

V 3

31314　容量瓶(100ml ) 的相对不确定度u rel (v2) , u rel (v4) :

参考文献

[1]国家技术监督局. 测量不确定度评定和表示[S].中华人民共

同理, 其中又包括三个部分:第一, 容量瓶体积的不确定度, 容量瓶(100ml ) 的容量允差为±0110ml , 按均匀分布

=01277ml ; 第二, 定容时的估读误差, 估计为±01005ml , 按均匀分布换算成标准偏差为

和国国家计量技术规范JJ F1059—1999.

[2]中国实验室国家认可委员会. 化学分析中不确定度的评估指南

[M ].北京:中国计量出版社. 2002.

(收稿日期:2005201204)

换算成标准偏差为

=01029ml ; 第三, 容量瓶和溶液的温度不同引起的国内统一刊号:CN33-1200/R 定价:4100元

・实验技术・

高效液相色谱仪测定酱油中

苯甲酸的不确定度

戚荣平

　　中图分类号:R65717+2　　文献标识码:B 　　文章编号:100720931(2006) 0120081202

　　国家技术监督局发布的“测量不确定度评定和表示”, 以高效液相色谱法测定酱油中苯甲酸为例, 分析了利用标准曲线测定样品的不确定度计算和步骤, 在实际工作中有

2]较强的实用价值[1、。

表1　标准曲线数据(每个浓度测定3次)

标准液浓度x (ng/μl )

1

1010

2010

3010

5010

[***********][***********][***********][***********]93606118

1　检测方法　采用G B/T5009. 29-2003方法, 标准使用

峰面积2液浓度为01050mg/ml 。酱油样品用超纯水定容后, 经

μm 水系滤膜过滤后进行测定。手动进样器吸取标准使0145

用液20ul 注入进样口, 将不同浓度的4复3次进行标样分析, 得出标准曲线, 的峰面积测定相应浓度。

2　测量数学模型211　计算公式:y =1。

12285736, a =611153546, r =0199997; 即:y =7212285736x +611153546。

212　酱油样品测定6次, 结果见表2。

表2　酱油样品测定(n =6) 结果

峰面积y 样品浓度x (ng/μl )

[***********]

[***********]

[***********]

[***********]

[***********]

[***********]

　　得出Y ′=2917142499　　x ′=40130690(ng/μl )

6(xi -) 2=0102744

(n -1)

3　测定酱油中苯甲酸浓度的不确定度分量

x ′=

311　A 类不确定度, 即重复测定样品产生的相对不确定度u rel (1) ==6181×10-4

(x ′)

312　工作曲线拟合引起的相对不确定度u rel (2) , 工作曲线

浓度x

(ng/μl ) [1**********]0

n i =1

表3　工作曲线数据

代入工作曲线计算得出的峰面积

[***********][***********][***********][***********]543617154

峰面积

y [***********][***********][***********][***********]183600149

[y -(bx

+a ) ][***********][***********][***********][1**********]0

见表3。

得x =2715(ng/μl ) 　　6[y i -u rel (2) 计算公式表示为:u rel (2) =

xb

(b j +a ) ]2=1501192

[1**********]0

2

=3164×10-++

P n S xx

(bx i +a ) ]2n -3

=12192

3

S =

n

[y i -

S xx =6(x j -x ) 2=2625

i =1

　　注:n —标准溶液测定次数, n =4×3=12; p —测试样品得次数, p =6; x —各个标准溶液浓度的平均值, x =2715(ng/μl ) ;

x ′—样品浓度的平均值, x ′=40130690(ng/μl ) ; b —工作曲线的斜

率, b =7212285736; j —下标, 测试标准溶液的次数。

作者单位:杭州市下城区疾病预防控制中心, 浙江杭州　310003

313　苯甲酸标准溶液以及配制引起的相对不确定度u rel (3) ,

苯甲酸标准溶液的配制(以0105mg/ml 标准溶液为例) :用

10ml 移液管吸取10ml 苯甲酸标准贮备液(1100mg/ml ) ,

体积不确定度为(实际温差为3℃, 水的体积膨胀系数为

211×10-4/℃,

-4=010364ml

以上三项合成得出:

222

=01068×10-V 2

综上所述, u rel (v3) =

2

由国家标准物质研究中心提供, 编号为G BW (E ) 100006, 相对不确定度为1%) 至100ml 容量瓶中, 定容到刻度, 得浓度为011mg/ml 标准使用液, 再用5ml 刻度吸管吸取5ml 标准使用液至100ml 容量瓶中, 定容到刻度, 得浓度为0105mg/ml (50ng/μl ) 标准使用液。公式表示为:

C 1=C 0V 2V 4

注:C 1—苯甲酸标准使用液的浓度; C 0—苯甲酸标准贮备液的浓度; V 1—10ml 移液管的体积; V 2—100ml 容量瓶的体积; V 3—

5ml 刻度吸管吸取5ml 标准使用液; V 4—100ml 容量瓶的体积。

u rel (v2) =

-2222

102rel (c ) +u rel (v ) +u rel (v ) +u rel (v ) +u rel (v ) =0152×01234

2

314　峰面积的量化误差相对不确定U rel (4)

本中心高效液相色谱仪的峰面积最小分辨率为0100001

=110×10-9(忽略不计)

2×y ′

315　分析仪器的相对不确定度u rel (5)

u rel (v4) =

31311　苯甲酸标准贮备液的相对不确定度u rel (c0) , 已知苯

甲酸标准贮备液1100mg/ml , 相对不确定度为1%, k =2, 则u rel (c0) =

=015%2

31312　移液管(10ml ) 的相对不确定度u rel (vl ) , 其中又包

(1) 吸管体积的不确定度, 称液管(10ml ) (2) 吸取时的估读误差, 估计为 01005ml (以RSD 表示) 为0122%() , 则

4　　综上所述, 酱油中苯

(5) =

括三个部分:

的容量允差为±0102ml , 按均匀分布换算成标准差为

=010116ml ;

4。

=013按均匀分布换算成标准差为

表4　酱油中苯甲酸含量不确定度来源

序号

来源

12345

相对不确定度

符合

u rel (1) u rel (2) u rel (3) u rel (4) u rel (5)

自由度

数值

6181×10-43164×100152×10110×10910×10

-3-2

(实际温差为3℃, 211×10-4/℃) 。u rel =

-4010036ml

以上三项合成得出:

符合数值

v 1v 2v 3v 4v 5

59505050

222

=01125×10-2

V 1

31313　刻度吸管(5ml ) 吸取5ml 标准使用液的相对不确u rel (vl ) =

重复性　

工作曲线标准溶液量化误差分析仪器

-9-4

定度u rel (v3) :其中又包括三个部分:第一, 刻度吸管体积的不确定度, 刻度吸管(5ml ) 的容量允差为±01025ml , 按均

=010144ml ; 第二, 吸取时的估读误差, 估计为±01005ml , 按均匀分布换算成标准偏

5　合成标准不确定度　

u c ,rel =10-2

2222

2rel (1) +u rel (2) +u rel (3) +u rel (4) +u rel (5) =0164×

匀分布换算成标准偏差为

=010029ml ; 第三, 移液管和溶液的温度与校正时的温度不同引起的体积不确定度为(实际温差为3℃, 水

差为

46　有效自由度　v eff =4=504

44+++595050

7　扩展不确定度分析　取可信区间95%, 查t 表得t 9550=

) , 的体积膨胀系数为211×10-4/℃

010018ml

-4

2101, 合成标准不确定度u c =u c ,rel ×x ′=0164×10-2×40130690=0126(ng/μl ) , 扩展不确定度U =u c ×t 9550=0152(ng/μl ) 。8　结果报告　测定结果:(40130690±0152) ng/μl , k =2, p =95%

=

以上三项合成得出:

222

u rel (v3) ==01043×10-2

V 3

31314　容量瓶(100ml ) 的相对不确定度u rel (v2) , u rel (v4) :

参考文献

[1]国家技术监督局. 测量不确定度评定和表示[S].中华人民共

同理, 其中又包括三个部分:第一, 容量瓶体积的不确定度, 容量瓶(100ml ) 的容量允差为±0110ml , 按均匀分布

=01277ml ; 第二, 定容时的估读误差, 估计为±01005ml , 按均匀分布换算成标准偏差为

和国国家计量技术规范JJ F1059—1999.

[2]中国实验室国家认可委员会. 化学分析中不确定度的评估指南

[M ].北京:中国计量出版社. 2002.

(收稿日期:2005201204)

换算成标准偏差为

=01029ml ; 第三, 容量瓶和溶液的温度不同引起的国内统一刊号:CN33-1200/R 定价:4100元