土壤速效磷测定
—碳酸氢钠浸提钼锑抗比色法
【原理】
石灰性土壤和中性土壤中的速效磷，多以磷酸一钙和磷酸二钙的状态存在，可用0.5M碳酸氢钠提取到溶液中；酸性土壤中的活性磷多以磷酸铁和磷酸铝状态存在，0.5M碳酸氢钠也可以提取磷酸铁和磷酸铝表面的磷。
待测液中的磷酸与钼锑抗混合显色剂作用，在一定酸度和三价锑离子的存在下，磷酸和钼酸铵形成黄色锑磷钼混合杂多酸，其组成比为磷（P）∶锑（Sb）∶钼（Mo）=1∶2∶12。锑磷钼混合杂多酸在常温下，易为抗坏血酸还原为磷钼蓝，使的显色速度加快。（测定磷的范围0.06～0.44mg/L）。
【试剂】
① 0.5mol〃L-1 NaHCO3溶液：准确称取42g NaHCO3溶于800ml水中，冷却后以
0.5mol〃L-1 NaOH溶液调节pH＝8.5，定容至1L；
② 3.25mol〃L-1 H2SO4钼锑贮存液：蒸馏水400ml于1000ml烧杯，缓缓加入208.3ml
浓硫酸，搅拌，冷却；另外称取钼酸铵20g，在50℃水浴中溶解，然后冷却；硫酸溶液缓缓加入到钼酸铵溶液中，不断搅拌，再加100ml 0.5％的酒石酸锑钾溶液，冷却定容，避光保存；
③ 钼锑抗混合显色剂：于100ml钼锑贮存液中，加入1.5g左旋抗坏血酸，摇匀，避光，
现配现用；
④ P标准溶液配制：45℃烘干4－8h的分析纯磷酸二氢钾0.2197g，定容至1000ml，
摇匀，此时P浓度为50 mg/L；准确吸取10ml，定容到100ml，为5 mg/L磷标准液（不宜长时间保存）；
⑤ 0.5mol〃L-1 NaOH溶液：20g NaOH定容到1000ml。
【步骤】
1. 土壤浸提
准确称取2.50g样品于150ml三角瓶中→加50ml 0.5M碳酸氢钠→封口，震荡30min(25℃恒温水浴震荡)→后过滤到三角瓶中
2. 磷含量测定
10ml滤液于50ml容量瓶（含量过高时吸取5ml或更少，用0.5M碳酸氢钠补足到10ml）→缓慢沿瓶壁加入5ml混合显色剂，充分摇匀后排除二氧化碳气体，定容，摇匀→30min后在660nm波长下比色（该颜色可以稳定24h）→测得吸光值后根据标准曲线计算速效磷含量。
同样的方法做空白（不加土样）。
【标准曲线的绘制】
分别吸取5mg/L磷标准溶液0、1、2、3、4、5ml于50ml容量瓶中→再逐个加入10ml0.5M碳酸氢钠溶液→分别加入5ml钼锑抗混合显色剂，混匀，排气，再摇匀→定容；
得系列浓度的磷溶液：0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mg/L→静置30min后在660nm波长下比色；
绘制标准曲线。
【结果计算】
速效磷（mg/kg）＝？mg/L（标准曲线查得值）×（50／10）×（50／m）
其中：？mg/L为标准曲线查得磷的mg/L数；
50为显色液总体积，ml；
10为待测液吸取量，ml；
50为提取液总体积，ml；
m为样品质量，g。
土壤速效磷测定
—碳酸氢钠浸提钼锑抗比色法
【原理】
石灰性土壤和中性土壤中的速效磷，多以磷酸一钙和磷酸二钙的状态存在，可用0.5M碳酸氢钠提取到溶液中；酸性土壤中的活性磷多以磷酸铁和磷酸铝状态存在，0.5M碳酸氢钠也可以提取磷酸铁和磷酸铝表面的磷。
待测液中的磷酸与钼锑抗混合显色剂作用，在一定酸度和三价锑离子的存在下，磷酸和钼酸铵形成黄色锑磷钼混合杂多酸，其组成比为磷（P）∶锑（Sb）∶钼（Mo）=1∶2∶12。锑磷钼混合杂多酸在常温下，易为抗坏血酸还原为磷钼蓝，使的显色速度加快。（测定磷的范围0.06～0.44mg/L）。
【试剂】
① 0.5mol〃L-1 NaHCO3溶液：准确称取42g NaHCO3溶于800ml水中，冷却后以
0.5mol〃L-1 NaOH溶液调节pH＝8.5，定容至1L；
② 3.25mol〃L-1 H2SO4钼锑贮存液：蒸馏水400ml于1000ml烧杯，缓缓加入208.3ml
浓硫酸，搅拌，冷却；另外称取钼酸铵20g，在50℃水浴中溶解，然后冷却；硫酸溶液缓缓加入到钼酸铵溶液中，不断搅拌，再加100ml 0.5％的酒石酸锑钾溶液，冷却定容，避光保存；
③ 钼锑抗混合显色剂：于100ml钼锑贮存液中，加入1.5g左旋抗坏血酸，摇匀，避光，
现配现用；
④ P标准溶液配制：45℃烘干4－8h的分析纯磷酸二氢钾0.2197g，定容至1000ml，
摇匀，此时P浓度为50 mg/L；准确吸取10ml，定容到100ml，为5 mg/L磷标准液（不宜长时间保存）；
⑤ 0.5mol〃L-1 NaOH溶液：20g NaOH定容到1000ml。
【步骤】
1. 土壤浸提
准确称取2.50g样品于150ml三角瓶中→加50ml 0.5M碳酸氢钠→封口，震荡30min(25℃恒温水浴震荡)→后过滤到三角瓶中
2. 磷含量测定
10ml滤液于50ml容量瓶（含量过高时吸取5ml或更少，用0.5M碳酸氢钠补足到10ml）→缓慢沿瓶壁加入5ml混合显色剂，充分摇匀后排除二氧化碳气体，定容，摇匀→30min后在660nm波长下比色（该颜色可以稳定24h）→测得吸光值后根据标准曲线计算速效磷含量。
同样的方法做空白（不加土样）。
【标准曲线的绘制】
分别吸取5mg/L磷标准溶液0、1、2、3、4、5ml于50ml容量瓶中→再逐个加入10ml0.5M碳酸氢钠溶液→分别加入5ml钼锑抗混合显色剂，混匀，排气，再摇匀→定容；
得系列浓度的磷溶液：0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mg/L→静置30min后在660nm波长下比色；
绘制标准曲线。
【结果计算】
速效磷（mg/kg）＝？mg/L（标准曲线查得值）×（50／10）×（50／m）
其中：？mg/L为标准曲线查得磷的mg/L数；
50为显色液总体积，ml；
10为待测液吸取量，ml；
50为提取液总体积，ml；
m为样品质量，g。