几种感受态细胞的用途、基因型和特点
1、DH5菌株
用途:克隆菌,用于分子克隆、质粒提取。
基因型:supE44△lacU169(80lacZ△M15)
hsdR17recAlendAlgyrA19
thi-1relAl
特点:一种用于铺制与培养质粒平板和粘性平板的抑制型菌株.其80lacZ△M15基因的产物可与pUC载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α互补,可用于蓝白斑筛选。recAl和endAl的突变有利于克隆DNA的稳定和高纯度质粒的提取。
2、TOP10菌株
用途:克隆菌,用于分子克隆,质粒提取。
基因型:F_mcrAΔ(mrr-hsdRMS-mcrBC)φ80lacZΔM15△lacⅩ74recA1
nupGdeoRaraD139Δ(ara-leu)7697galUgalKrpsL(StrR)endA1
特点:一种用于铺制与培养质粒平板和粘粒平板的重级缺陷的抑制型菌株。其中φ80lacZΔM15基因的产物可与pUC载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α-互补,可用于蓝白斑筛选。该菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增,能保证高拷贝质粒的稳定遗传。
3、JM109菌株
用途:克隆菌,用于分子克隆。
基因型:recAlsupE44endAlhsdR17
GyrA96relAlthiΔ(lac-proAB)
F’[traD36proAB+lacZ△M15]
特点:一种支持带有琥珀突变的载体生长的重组缺陷的抑制型菌株,对转染的DNA有修饰作用而无限制作用。
4、BL21(DE3)菌株
用途:表达菌,可用于表达非毒性蛋白
基因型:hsdSgal(cITS857indlSam7nin5lacUV5-T7)
特点:该菌株用于高效表达克隆于含有T7噬菌体启动子的表达载体的基因。T7噬菌体RNA聚合酶位于噬菌体DE3区,该区整合于BL21染色体上
5、BL21(DE3)pLysS菌株
用途:表达菌,可表达毒性蛋白和非毒性蛋白。
基因型:F-,ompThsd(rBB-mB-),gal,dcm(DE3,pLysS,Camr)
特点:该菌株含有pLysS质粒,因此具有氯霉素抗性。pLysS质粒含有表达T7溶菌酶的基因,能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰目的蛋白的表达。
几种感受态细胞的用途、基因型和特点
1、DH5菌株
用途:克隆菌,用于分子克隆、质粒提取。
基因型:supE44△lacU169(80lacZ△M15)
hsdR17recAlendAlgyrA19
thi-1relAl
特点:一种用于铺制与培养质粒平板和粘性平板的抑制型菌株.其80lacZ△M15基因的产物可与pUC载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α互补,可用于蓝白斑筛选。recAl和endAl的突变有利于克隆DNA的稳定和高纯度质粒的提取。
2、TOP10菌株
用途:克隆菌,用于分子克隆,质粒提取。
基因型:F_mcrAΔ(mrr-hsdRMS-mcrBC)φ80lacZΔM15△lacⅩ74recA1
nupGdeoRaraD139Δ(ara-leu)7697galUgalKrpsL(StrR)endA1
特点:一种用于铺制与培养质粒平板和粘粒平板的重级缺陷的抑制型菌株。其中φ80lacZΔM15基因的产物可与pUC载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α-互补,可用于蓝白斑筛选。该菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增,能保证高拷贝质粒的稳定遗传。
3、JM109菌株
用途:克隆菌,用于分子克隆。
基因型:recAlsupE44endAlhsdR17
GyrA96relAlthiΔ(lac-proAB)
F’[traD36proAB+lacZ△M15]
特点:一种支持带有琥珀突变的载体生长的重组缺陷的抑制型菌株,对转染的DNA有修饰作用而无限制作用。
4、BL21(DE3)菌株
用途:表达菌,可用于表达非毒性蛋白
基因型:hsdSgal(cITS857indlSam7nin5lacUV5-T7)
特点:该菌株用于高效表达克隆于含有T7噬菌体启动子的表达载体的基因。T7噬菌体RNA聚合酶位于噬菌体DE3区,该区整合于BL21染色体上
5、BL21(DE3)pLysS菌株
用途:表达菌,可表达毒性蛋白和非毒性蛋白。
基因型:F-,ompThsd(rBB-mB-),gal,dcm(DE3,pLysS,Camr)
特点:该菌株含有pLysS质粒,因此具有氯霉素抗性。pLysS质粒含有表达T7溶菌酶的基因,能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰目的蛋白的表达。