·1
068·表1样品编号
[**************]13
Journal of Chinese Medicinal Materials
三丫苦药材重金属元素含量测定结果（mg /kg）
铜2. 24. 81. 72. 23. 03. 32. 42. 22. 72. 92. 72. 17. 8
砷0. 20. 20. 20. 20. 20. 20. 30. 20. 20. 20. 10. 10. 2
镉0. 10. 10. 40. 20. 20. 10. 20. 10. 10. 10. 30. 40. 7
汞0. 10. 10. 10. 10. 10. 10. 10. 10. 10. 10. 10. 10. 1
铅1. 41. 42. 24. 21. 34. 51. 03. 41. 81. 84. 22. 93. 3
第36卷第7期2013年7月
程，以减少外界环境对中药材的重金属污染。3. 2在对重金属元素分析检测前，一般均需对样品进行消解，目前常用的方法有：干法灰化、湿法消化和微波消解。干法灰化、湿法消化方法虽然设备简单，但消解时间长，试剂用量大，空白值高，挥发性元素易损失；而微波消解效率高，可以减少实验环境对样品的污染，大幅降低空白值，元素挥发损失少，测定结果较准确可靠，目前已被广泛应用于各种样品的前处理。
参
考
文
献
［1］广东省食品药品监督管理局．广东省中药材标准［S ］.
2004：7-9．第一册. 广州：广东科技出版社，
［2］广西壮族自治区卫生厅．广西中药材标准［S ］. 南宁：广
1992：9．西科学技术出版社，
［3］王冬梅，AES 法测定12个产地两冯洁，覃富景，等．ICP-．中药材，2012，35面针药材中重金属元素的含量［J ］（3）：366-368.
［4］李丽敏，王柯，季申．电感耦合等离子质谱法测定肾康
J ］．药物分析杂志，2012，注射液中重金属及有害元素［32（2）：277-281．
［5］国家药典委员会．中华人民共和国药典［S ］. 一部. 北
2010：80．京：中国医药科技出版社，
金属及有害元素残留限度标准［铅（Pb ）≤5mg /kg，
镉（Cd ）≤0. 3mg /kg，汞（Hg ）≤0. 2mg /kg，砷（As ）
〔5〕≤2mg /kg，铜（Cu ）≤20. 0mg /kg］，其余10批各元素的含量均低于限度标准。分析原因，可能是中
药材生长环境中水和土壤受污染而导致重金属含量偏高；另一方面也可能与植物本身对某些重金属元素具有吸收和富集的特性有关。因此，要解决中药材重金属超标的问题，必须从中药材的生产源头做起，按照中药材GAP 的要求，规范中药材生产全过
·加工炮制与养护·
不同制备方法对生白芍和炒白芍中
多糖含量及理化性质的影响
12*23芸，陶移文，陈法江，田庚元
（1. 广东省食品药品检验所，广东广州510180；2. 广州医科大学，广东广州510182；3. 中国科学院上海有机化学研究所，上海200032）
汪
摘要目的：考察2种制备方法对生白芍和炒白芍中多糖的含量及理化性质的影响。方法：应用生白芍和炒
分别采用水提醇沉和水提酮沉方法制备白芍多糖，测定提取率、糖含量、糖醛酸含量、元素组成以及单糖组白芍，
成。结果：水提醇沉制备生白芍多糖和炒白芍多糖的提取率分别为1. 56%和1. 18%，糖含量为80. 56%和80. 79%，糖醛酸含量为3. 33%和5. 47%，单糖组成主要为葡萄糖，分别达92. 21%和87. 30%；水提酮沉制备生白芍多糖和炒白芍多糖的提取率分别为1. 58%和1. 54%，糖含量为86. 50%和81. 64%，糖醛酸含量为3. 79%和3. 25%，单糖组成主要为葡萄糖，分别达91. 45%和86. 62%。结论：水提酮沉制备白芍多糖的产率和糖含量略高于水提醇沉方法，但单糖组成几乎一致；炒白芍的多糖产率低于生品，单糖组成中葡萄糖的含量也显著低于生品。
关键词
生白芍；炒白芍；多糖；理化性质
文献标识码：A
4454（2013）07-1068-04文章编号：1001-中图分类号：R284. 1
02-17收稿日期：2013-【2012】178号）；广东省中医药管理局项目（20112153）基金项目：广州医科大学青年骨干教师培养工程（广医发
），女，81863096，E-mail ：wysnake30@126. com 。作者简介：汪芸（1977-硕士，副主任中药师，研究方向：中药质量分析；Tel ：020-*
Tel ：020-81340993，E-mail ：yywentao@yahoo. com. cn 。通讯作者：陶移文，
Influence of Different Preparation on the Content of Carbohydrate and Physicochemical Properties
of Polysaccharides from Raw Paeoniae Radix Alba and Stir-baked Paeoniae Radix Alba
WANG Yun 1，TAO Yi-wen 2，CHEN Fa-jiang 2，TIAN Geng-yuan 3
（1. Guangdong Institute for Food and Drug Control ，Guangzhou 510180，China ；2. Guangzhou Medical University ，Guangzhou 510182，China ；3. Shanghai Institute of Organic Chemistry ，Chinese Academy of Science ，Shanghai 200032，China ）
Abstract
Objective ：To observe the difference of two preparation methods on the content of carbohydrate and physicochemical
properties of polysaccharides from raw Paeoniae Radix Alba and stir-baked Paeoniae Radix Alba. Methods ：Polysaccharides extracted from raw Paeoniae Radix Alba and stir-baked Paeoniae Radix Alba with water were precipitated by ethanol and named as BSEP-S and BSEP-C ，respectively. In the same way ，those deposited by acetone were named as BSAP-S and BSAP-C. Their physicochemical properties ，including extraction yield ，the content of carbohydrate ，elemental composition and monosaccharide composition ，were determined. Results ：Extraction yield ，sugar content and uronic acid content of BSEP-S was 1. 56%，80. 56%and 3. 33%，BSEP-C 80. 79%and 5. 47%，BSAP-S 1. 58%，86. 50%and 3. 79%，and BSAP-C 1. 54%，81. 64%and 3. 25%，respectively. In 1. 18%，
addition ，monosaccharide compositions showed that glucose was the main monosaccharide and successively reached 92. 21%，87. 30%，91. 45%and 86. 62%. Conclusion ：Yield and content of carbohydrate from raw Paeoniae Radix Alba and stir-baked Paeoniae Radix Alba by water extraction-ethanol precipitation are a little higher than that by water extraction-acetone precipitation ，but monosaccharide compositions are almost the same. Different preparation has significant impact on the yield and the content of carbohydrate in Paeoniae Radix Alba by stir-baked method ，and it can decrease the dissolution of polysaccharide.
Key words
Raw Paeoniae Radix Alba ；Stir-baked Paeoniae Radix Alba ；Polysaccharide ；Physicochemical property
白芍为毛茛科植物芍药Paeonia lactiflora Pall. 的干燥根，性微寒，味苦酸，主产于浙江、安徽、四川“浙八味”为著名的之一，具有柔肝止痛、养血等省，
调经、敛阴止汗等功效
〔1〕
（GlcA ）、半乳糖（Gla ）、甘露糖（Man ）、木糖（Xyl ）、鼠李糖（Rha ）和阿拉伯糖（Ara ）（美国Sigma 公司）；乙醇为工业级，水为蒸馏水，丙酮、硫酸、苯酚、间羟联苯和四硼酸钠等其他试剂均为分析纯。1. 3
仪器
HP 6890气相色谱仪（美国安捷伦公
ERBA 元素自动分析仪（意大利CARIO-司）；CARIO-ERBA 公司）；754分光光度计（上海分析仪器三厂）；BS21S 精密电子天平（德国赛多利斯公司）；LG-5真空冷冻干燥机（上海市离心机械研究所）；RE52-86A 型真空旋转蒸发仪（上海亚荣公司）；Labofuge 400R 型冷冻离心机（德国Heraeus 公司）。22. 1
方法与结果炮制品的制备
生白芍：取原材料，除去杂质
。白芍的炮制方法多样，。生白芍强于养血柔肝、
现行全国各地尚有炒制、酒制、土制、麸制、酒麸焯、制炭、煨制、盐制等方法
〔2〕
平肝滋阴，主要用于镇肝熄风、滋阴安神、治疗肝阳
缓脾止痛，主要用于上亢等；炒白芍强于养血活络、
脾虚或肝脾不和之泄泻腹痛者。有文献报道说不同炮制方法对白芍中芍药苷含量影响显著
〔3〕
，但迄今
笔者尚未见不同炮制方法对白芍中多糖的含量及理化性质影响的报道。有关白芍中多糖成分的研究，余宏凯等
〔4〕
报道分离得到一多糖-蛋白复合物，
6〕
Tomoda 等〔5，报道分离得到白芍中性多糖和酸性多及毛须，洗净，干燥，粉碎，过80目筛，备用。炒白芍：取白芍片置锅内，用文火加热，炒至表面微黄色，取出放凉，粉碎，过80目筛，备用。2. 22. 2. 1
两种提取方法制备白芍粗多糖
水提-乙醇沉淀：分别称取生白芍和炒白芍
糖。药理活性研究表明，白芍多糖具有免疫调节和抗肿瘤等功效
〔7〕
，因此，本实验以多糖作为白芍内
在质量的指标性成分，采用水提-乙醇沉淀和水提-丙酮沉淀的方法制备多糖，分别考察对生白芍和炒为白芍多白芍中多糖的含量及其理化性质的影响，糖的进一步研究提供参考。1材料与仪器1. 1
材料
白芍药材购自浙江省新昌县，经广东
省食品药品检验所林惠蓉主任中药师鉴定为Paeonia lactiflora Pall. 的干燥根。不同炮制方法处理后，经粉碎机粉碎，过80目筛后干燥器中保存、备
用。1. 2
试剂
标准品葡萄糖（Glc ）、葡萄糖醛酸
100g ，按1ʒ 10的投料比分别加入蒸馏水常温浸泡24h ，过滤，提取液经真空旋转蒸发仪浓缩至250mL ，然后往浓缩液中加入6倍体积的95%乙醇，使室温静置沉淀多糖，离心，弃上清含醇量达到81%，
液，沉淀用蒸馏水溶解，抽滤，滤液用截留分子量1000的透析膜在常温流水透析，以除去小分子的寡糖等杂质。透析液经减压浓缩后真空冷冻干燥，分S ）和炒白芍多糖（BSEP-别获得生白芍多糖（BSEP-C ）。结果见表1。
2. 2. 2
水提-丙酮沉淀：制备方法除了用6倍体积
浓缩液的丙酮代替6倍体积浓缩液的95%乙醇外，
2. 6
蛋白质含量测定蛋白质的含量可以通过含氮量换算，即通过元素自动分析仪测定样品中N 元
其他条件同“2. 2. 1”项下方法，最后分别获得生白
S ）和炒白芍多糖（BSAP-C ）。结果见芍多糖（BSAP-表1。
多糖得率（%）=（多糖的质量/药材的质量）ˑ 100%
素的含量，然后乘以6. 25的系数即为该样品中蛋白
质的含量。本次白芍多糖的元素分析都未测到N 元素，也就是说白芍多糖中的含氮量低于仪器的检测限（即低于0. 30%，见表2），所以蛋白质含量低于0. 30%ˑ 6. 25，即低于1. 88%。
2. 7紫外检测4种白芍多糖分别制成1. 0mg /mL 的水溶液，进行紫外检测（200 400nm 区间紫外扫描），结果显示，白芍多糖除了在200nm 处有最大末端吸收峰，其余位置未见明显的吸收峰，此为多糖的UV 特征吸收峰，这表明水提醇沉和水提酮
而蛋白质、氨基酸及核沉的白芍多糖中多糖含量高，
酸等含量极少（260 280nm 未见明显吸收峰），同
元素分析结果吻合。2. 82. 8. 1
单糖组成分析
白芍多糖的完全酸水解：分别取20mg 白
芍多糖，精密称定，加入1mol /LH 2SO 4溶液4mL ，
由表1可知，水提-丙酮沉淀方法制备的BSAP-S 和BSAP-C 的多糖得率均分别略优于水提-乙醇沉S 和BSEP-C 。淀方法制备的BSEP-〔8，9〕
2. 3中性糖含量测定(苯酚-硫酸法) 以Glc
作为单糖标准品，采用经典苯酚-硫酸法测定白芍多糖的糖含量。结果见表1。
2. 4糖醛酸含量测定(间羟联苯-四硼酸钠硫酸法)
〔9，10〕
以GlcA 作为糖醛酸标准品，采用经典间
羟联苯-四硼酸钠硫酸法测定白芍多糖的糖醛酸含量。结果见表1。
表1白芍多糖的得率、中性糖含量及糖醛酸含量分析（%）样品BSEP-S BSAP-S BSEP-C BSAP-C
颜色白色白色浅黄色浅黄色
多糖得率1. 561. 581. 181. 54
中性糖
含量80. 5686. 5080. 7981. 64
糖醛酸含量3. 333. 795. 473. 25
100ħ 下水解4h ，然后加入BaCO 3固体中和水解母液至中性，过滤，得到水解后的单糖混合物。2. 8. 2
单糖糖腈乙酸酯衍生物的制备：完全酸水
〔9〕
解后的单糖混合物按照经典方法分别制备成糖
Gal 、Man 、Xyl 、Ara 和腈乙酸酯衍生物，同时取Glc 、Rha 6种标准单糖，同法操作制得标准单糖糖腈乙
酸酯衍生物。2. 8. 3
GC 分析：将衍生制备的糖腈乙酸酯衍生物
样品和6种常见标准单糖的糖腈乙酸酯衍生物对照
17毛细品进行GC 分析。GC 分析条件为：3%OV-
2. 5
元素分析白芍多糖样品经105ħ 烘干至恒
ERBA 元素自动分析仪进行C 、H 和N 以CARIO-重，
元素的分析。结果见表2。
表2样品BSEP-S BSAP-S BSEP-C BSAP-C 表3单糖Rha Ara Xyl Man Glc Gal
BSEP-S t R /min17. 8118. 96－30. 3331. 1131. 41
A %0. 752. 88－0. 9692. 213. 21
t R /min17. 8219. 1319. 8530. 4231. 1731. 74
白芍多糖的元素分析（%）N ＜0. 30＜0. 30＜0. 30＜0. 30
C 38. 7638. 2737. 6538. 78
H 6. 406. 296. 406. 34
蛋白质＜1. 88＜1. 88＜1. 88＜1. 88
FID 检测器，管柱（25m ˑ 0. 3mm ），载气为N 2，采
用程序升温法从180ħ 初始温度以2ħ /min的速度升至200ħ ，维持30min 。进样量为1μL 。分别获得6种标准单糖衍生物图谱和4个白芍多糖水解后的糖腈乙酸酯衍生物图谱，经比较分析，可知白芍多糖样品中单糖的组成及含量。结果见表3。
白芍多糖的单糖组成分析BSAP-S
A /%0. 953. 040. 330. 7991. 453. 43
t R /min17. 8119. 0019. 8430. 3831. 1831. 47
BSEP-S
A /%1. 055. 260. 411. 0787. 304. 71
t R /min17. 8318. 99－30. 3631. 1131. 42
BSAP-S
A /%0. 796. 23－2. 0186. 624. 35
；“－”注：A 为峰面积的百分比；t R 为GC 峰的保留时间表示未检测到
S 和BSAP-S 的GC 数据分析表由表3中BSEP-明，生白芍多糖的单糖组成主要为Glc ，分别达92. 21%和91. 45%，此外还分别含有3. 21%和
3. 43%的Gal 、2. 88%和3. 04%的Ara 及微量的Man C 和BSAP-C 的GC 数据分析表明，和Rha ；BSEP-炒白芍多糖的单糖组成主要也为Glc ，分别达87. 30%和86. 62%，比相应的生白芍多糖中的葡萄糖所占的比率低，此外，还分别含有4. 71%和4. 35%的Gal 、5. 26%和6. 23%的Ara 及微量的Man 和Rha 。3
结论与讨论
不同制备多糖的方法结果表明，水提酮沉制备白芍多糖的得率和中性糖含量略高于水提醇沉方
但单糖组成几乎一致；白芍炮制前后的结果表法，
明，炒白芍的多糖产率低于生品，单糖组成中葡萄糖的含量也显著低于生品。
由多糖含量测定结果可以看出，水提-乙醇沉淀和水提-丙酮沉淀方法，白芍经过炒制后的多糖得率均较生品的得率低，这可能是因为白芍多糖是水溶
性多糖，在清炒过程中使白芍直接接触锅底，导致受热温度较高，使多糖发生降解甚至焦化，进而影响多糖的含量。同时，比较水提-乙醇沉淀与水提-丙酮沉淀2种方法所得白芍多糖的产率发现，后者多糖的产率和含量比前者略高，这是因为多糖是多羟基醇类化合物，为强极性分子，具有溶于水而不溶于有机溶剂的特点，所以，水溶性多糖常在乙醇或丙根据酮中沉淀析出。不过丙酮的极性比乙醇小，“极性相似相溶”的原理，多糖在丙酮中的溶解度更小，因而析出的水溶性多糖更多，多糖的产率和含量更高。
由多糖的单糖组成定量分析结果可知，生白芍多糖的单糖组成中葡萄糖的含量高于炒白芍多糖中葡萄糖的含量，而半乳糖和木糖的含量略低。说明
中药经炮制后临床效果发生改变可能是因为其化学
有可能是量变（如白芍多成分发生一系列的变化，
糖的含量发生改变），也有可能是质变（如白芍多糖
的单糖组成发生改变）。因此，研究中药炮制前后理化性质的变化以及同种中药不同炮制品的理化性质的差异，对探讨中药炮制作用和原理具有重要的意义。炮制前后白芍多糖活性的比较有待进一步探讨。
参
考
文
献
［1］国家药典委员会. 中华人民共和国药典［S ］. 一部.
2010：96-97. 北京：中国医药科技出版社，
［2］王小蓉. 略论白芍的炮制及功用［J ］. 传统医药，2006，
16（16）：56.
［3］时维静，储明明，谭志静. 不同炮制方法对白芍中芍药
2008，15苷含量的影响［J ］. 中国中医药信息杂志，（12）：49-50.
［4］余宏凯，陈彦，孙玉军，等. 白芍多糖分离纯化及性质
J ］. 生物学杂志，2008，25（5）：34-36. 分析［
［5］Tomoda M ，Matsumoto K. Characterization of a neutral and
acidic polysaccharide having immunological activities from the root of Paeonia lactiflora ［J ］. Biol Pharm Bull ，1993，16（12）：1207-1210.
［6］Tomoda M ，Matsumoto K. An acidic polysaccharide with
immunological activities from the root of Paeonia lactiflora ［J ］. Biol Pharm Bull ，1994，17（9）：1161-1164. ［7］高小荣，J ］. 中国新田庚元. 白芍化学成分研究进展［
2006，15（6）：416-418. 药杂志，
［8］张唯杰. 糖复合物生化研究技术［M ］. 上海：上海科学
1994：11-12. 技术出版社，
［9］陶移文，田庚元，汪敬武. 元胡粗多糖的提取及理化性
J ］. 南昌大学学报（理科版），2010，34（6）：575-578. 质［
［10］林颖，黄琳绢，田庚元. 一种改良的糖醛酸含量测定方
J ］. 中草药，1999，30（11）：817-819. 法［
檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽
售《中药材》杂志合订本
1991年(50元) ，1992年(50元) ，1995年(70元) ，1996年(70元) ，1997年(75现有1990年(50元) ，
1998年(精装100元) ，1999年(精装100元) ，2000年(精装150元) ，2001年、2002年、2003年、2004年元) ，
(精装上、2005年、2006年(精装上、2007年(精装上、下册每年180元) ，下册每年200元) ，下册220元) ，2008年、2009年、2010年、2011年(精装上、中、下册每年400元) 《中药材》杂志合订本。需者请汇款至《中药材》编辑部购买。
·1
068·表1样品编号
[**************]13
Journal of Chinese Medicinal Materials
三丫苦药材重金属元素含量测定结果（mg /kg）
铜2. 24. 81. 72. 23. 03. 32. 42. 22. 72. 92. 72. 17. 8
砷0. 20. 20. 20. 20. 20. 20. 30. 20. 20. 20. 10. 10. 2
镉0. 10. 10. 40. 20. 20. 10. 20. 10. 10. 10. 30. 40. 7
汞0. 10. 10. 10. 10. 10. 10. 10. 10. 10. 10. 10. 10. 1
铅1. 41. 42. 24. 21. 34. 51. 03. 41. 81. 84. 22. 93. 3
第36卷第7期2013年7月
程，以减少外界环境对中药材的重金属污染。3. 2在对重金属元素分析检测前，一般均需对样品进行消解，目前常用的方法有：干法灰化、湿法消化和微波消解。干法灰化、湿法消化方法虽然设备简单，但消解时间长，试剂用量大，空白值高，挥发性元素易损失；而微波消解效率高，可以减少实验环境对样品的污染，大幅降低空白值，元素挥发损失少，测定结果较准确可靠，目前已被广泛应用于各种样品的前处理。
参
考
文
献
［1］广东省食品药品监督管理局．广东省中药材标准［S ］.
2004：7-9．第一册. 广州：广东科技出版社，
［2］广西壮族自治区卫生厅．广西中药材标准［S ］. 南宁：广
1992：9．西科学技术出版社，
［3］王冬梅，AES 法测定12个产地两冯洁，覃富景，等．ICP-．中药材，2012，35面针药材中重金属元素的含量［J ］（3）：366-368.
［4］李丽敏，王柯，季申．电感耦合等离子质谱法测定肾康
J ］．药物分析杂志，2012，注射液中重金属及有害元素［32（2）：277-281．
［5］国家药典委员会．中华人民共和国药典［S ］. 一部. 北
2010：80．京：中国医药科技出版社，
金属及有害元素残留限度标准［铅（Pb ）≤5mg /kg，
镉（Cd ）≤0. 3mg /kg，汞（Hg ）≤0. 2mg /kg，砷（As ）
〔5〕≤2mg /kg，铜（Cu ）≤20. 0mg /kg］，其余10批各元素的含量均低于限度标准。分析原因，可能是中
药材生长环境中水和土壤受污染而导致重金属含量偏高；另一方面也可能与植物本身对某些重金属元素具有吸收和富集的特性有关。因此，要解决中药材重金属超标的问题，必须从中药材的生产源头做起，按照中药材GAP 的要求，规范中药材生产全过
·加工炮制与养护·
不同制备方法对生白芍和炒白芍中
多糖含量及理化性质的影响
12*23芸，陶移文，陈法江，田庚元
（1. 广东省食品药品检验所，广东广州510180；2. 广州医科大学，广东广州510182；3. 中国科学院上海有机化学研究所，上海200032）
汪
摘要目的：考察2种制备方法对生白芍和炒白芍中多糖的含量及理化性质的影响。方法：应用生白芍和炒
分别采用水提醇沉和水提酮沉方法制备白芍多糖，测定提取率、糖含量、糖醛酸含量、元素组成以及单糖组白芍，
成。结果：水提醇沉制备生白芍多糖和炒白芍多糖的提取率分别为1. 56%和1. 18%，糖含量为80. 56%和80. 79%，糖醛酸含量为3. 33%和5. 47%，单糖组成主要为葡萄糖，分别达92. 21%和87. 30%；水提酮沉制备生白芍多糖和炒白芍多糖的提取率分别为1. 58%和1. 54%，糖含量为86. 50%和81. 64%，糖醛酸含量为3. 79%和3. 25%，单糖组成主要为葡萄糖，分别达91. 45%和86. 62%。结论：水提酮沉制备白芍多糖的产率和糖含量略高于水提醇沉方法，但单糖组成几乎一致；炒白芍的多糖产率低于生品，单糖组成中葡萄糖的含量也显著低于生品。
关键词
生白芍；炒白芍；多糖；理化性质
文献标识码：A
4454（2013）07-1068-04文章编号：1001-中图分类号：R284. 1
02-17收稿日期：2013-【2012】178号）；广东省中医药管理局项目（20112153）基金项目：广州医科大学青年骨干教师培养工程（广医发
），女，81863096，E-mail ：wysnake30@126. com 。作者简介：汪芸（1977-硕士，副主任中药师，研究方向：中药质量分析；Tel ：020-*
Tel ：020-81340993，E-mail ：yywentao@yahoo. com. cn 。通讯作者：陶移文，
Influence of Different Preparation on the Content of Carbohydrate and Physicochemical Properties
of Polysaccharides from Raw Paeoniae Radix Alba and Stir-baked Paeoniae Radix Alba
WANG Yun 1，TAO Yi-wen 2，CHEN Fa-jiang 2，TIAN Geng-yuan 3
（1. Guangdong Institute for Food and Drug Control ，Guangzhou 510180，China ；2. Guangzhou Medical University ，Guangzhou 510182，China ；3. Shanghai Institute of Organic Chemistry ，Chinese Academy of Science ，Shanghai 200032，China ）
Abstract
Objective ：To observe the difference of two preparation methods on the content of carbohydrate and physicochemical
properties of polysaccharides from raw Paeoniae Radix Alba and stir-baked Paeoniae Radix Alba. Methods ：Polysaccharides extracted from raw Paeoniae Radix Alba and stir-baked Paeoniae Radix Alba with water were precipitated by ethanol and named as BSEP-S and BSEP-C ，respectively. In the same way ，those deposited by acetone were named as BSAP-S and BSAP-C. Their physicochemical properties ，including extraction yield ，the content of carbohydrate ，elemental composition and monosaccharide composition ，were determined. Results ：Extraction yield ，sugar content and uronic acid content of BSEP-S was 1. 56%，80. 56%and 3. 33%，BSEP-C 80. 79%and 5. 47%，BSAP-S 1. 58%，86. 50%and 3. 79%，and BSAP-C 1. 54%，81. 64%and 3. 25%，respectively. In 1. 18%，
addition ，monosaccharide compositions showed that glucose was the main monosaccharide and successively reached 92. 21%，87. 30%，91. 45%and 86. 62%. Conclusion ：Yield and content of carbohydrate from raw Paeoniae Radix Alba and stir-baked Paeoniae Radix Alba by water extraction-ethanol precipitation are a little higher than that by water extraction-acetone precipitation ，but monosaccharide compositions are almost the same. Different preparation has significant impact on the yield and the content of carbohydrate in Paeoniae Radix Alba by stir-baked method ，and it can decrease the dissolution of polysaccharide.
Key words
Raw Paeoniae Radix Alba ；Stir-baked Paeoniae Radix Alba ；Polysaccharide ；Physicochemical property
白芍为毛茛科植物芍药Paeonia lactiflora Pall. 的干燥根，性微寒，味苦酸，主产于浙江、安徽、四川“浙八味”为著名的之一，具有柔肝止痛、养血等省，
调经、敛阴止汗等功效
〔1〕
（GlcA ）、半乳糖（Gla ）、甘露糖（Man ）、木糖（Xyl ）、鼠李糖（Rha ）和阿拉伯糖（Ara ）（美国Sigma 公司）；乙醇为工业级，水为蒸馏水，丙酮、硫酸、苯酚、间羟联苯和四硼酸钠等其他试剂均为分析纯。1. 3
仪器
HP 6890气相色谱仪（美国安捷伦公
ERBA 元素自动分析仪（意大利CARIO-司）；CARIO-ERBA 公司）；754分光光度计（上海分析仪器三厂）；BS21S 精密电子天平（德国赛多利斯公司）；LG-5真空冷冻干燥机（上海市离心机械研究所）；RE52-86A 型真空旋转蒸发仪（上海亚荣公司）；Labofuge 400R 型冷冻离心机（德国Heraeus 公司）。22. 1
方法与结果炮制品的制备
生白芍：取原材料，除去杂质
。白芍的炮制方法多样，。生白芍强于养血柔肝、
现行全国各地尚有炒制、酒制、土制、麸制、酒麸焯、制炭、煨制、盐制等方法
〔2〕
平肝滋阴，主要用于镇肝熄风、滋阴安神、治疗肝阳
缓脾止痛，主要用于上亢等；炒白芍强于养血活络、
脾虚或肝脾不和之泄泻腹痛者。有文献报道说不同炮制方法对白芍中芍药苷含量影响显著
〔3〕
，但迄今
笔者尚未见不同炮制方法对白芍中多糖的含量及理化性质影响的报道。有关白芍中多糖成分的研究，余宏凯等
〔4〕
报道分离得到一多糖-蛋白复合物，
6〕
Tomoda 等〔5，报道分离得到白芍中性多糖和酸性多及毛须，洗净，干燥，粉碎，过80目筛，备用。炒白芍：取白芍片置锅内，用文火加热，炒至表面微黄色，取出放凉，粉碎，过80目筛，备用。2. 22. 2. 1
两种提取方法制备白芍粗多糖
水提-乙醇沉淀：分别称取生白芍和炒白芍
糖。药理活性研究表明，白芍多糖具有免疫调节和抗肿瘤等功效
〔7〕
，因此，本实验以多糖作为白芍内
在质量的指标性成分，采用水提-乙醇沉淀和水提-丙酮沉淀的方法制备多糖，分别考察对生白芍和炒为白芍多白芍中多糖的含量及其理化性质的影响，糖的进一步研究提供参考。1材料与仪器1. 1
材料
白芍药材购自浙江省新昌县，经广东
省食品药品检验所林惠蓉主任中药师鉴定为Paeonia lactiflora Pall. 的干燥根。不同炮制方法处理后，经粉碎机粉碎，过80目筛后干燥器中保存、备
用。1. 2
试剂
标准品葡萄糖（Glc ）、葡萄糖醛酸
100g ，按1ʒ 10的投料比分别加入蒸馏水常温浸泡24h ，过滤，提取液经真空旋转蒸发仪浓缩至250mL ，然后往浓缩液中加入6倍体积的95%乙醇，使室温静置沉淀多糖，离心，弃上清含醇量达到81%，
液，沉淀用蒸馏水溶解，抽滤，滤液用截留分子量1000的透析膜在常温流水透析，以除去小分子的寡糖等杂质。透析液经减压浓缩后真空冷冻干燥，分S ）和炒白芍多糖（BSEP-别获得生白芍多糖（BSEP-C ）。结果见表1。
2. 2. 2
水提-丙酮沉淀：制备方法除了用6倍体积
浓缩液的丙酮代替6倍体积浓缩液的95%乙醇外，
2. 6
蛋白质含量测定蛋白质的含量可以通过含氮量换算，即通过元素自动分析仪测定样品中N 元
其他条件同“2. 2. 1”项下方法，最后分别获得生白
S ）和炒白芍多糖（BSAP-C ）。结果见芍多糖（BSAP-表1。
多糖得率（%）=（多糖的质量/药材的质量）ˑ 100%
素的含量，然后乘以6. 25的系数即为该样品中蛋白
质的含量。本次白芍多糖的元素分析都未测到N 元素，也就是说白芍多糖中的含氮量低于仪器的检测限（即低于0. 30%，见表2），所以蛋白质含量低于0. 30%ˑ 6. 25，即低于1. 88%。
2. 7紫外检测4种白芍多糖分别制成1. 0mg /mL 的水溶液，进行紫外检测（200 400nm 区间紫外扫描），结果显示，白芍多糖除了在200nm 处有最大末端吸收峰，其余位置未见明显的吸收峰，此为多糖的UV 特征吸收峰，这表明水提醇沉和水提酮
而蛋白质、氨基酸及核沉的白芍多糖中多糖含量高，
酸等含量极少（260 280nm 未见明显吸收峰），同
元素分析结果吻合。2. 82. 8. 1
单糖组成分析
白芍多糖的完全酸水解：分别取20mg 白
芍多糖，精密称定，加入1mol /LH 2SO 4溶液4mL ，
由表1可知，水提-丙酮沉淀方法制备的BSAP-S 和BSAP-C 的多糖得率均分别略优于水提-乙醇沉S 和BSEP-C 。淀方法制备的BSEP-〔8，9〕
2. 3中性糖含量测定(苯酚-硫酸法) 以Glc
作为单糖标准品，采用经典苯酚-硫酸法测定白芍多糖的糖含量。结果见表1。
2. 4糖醛酸含量测定(间羟联苯-四硼酸钠硫酸法)
〔9，10〕
以GlcA 作为糖醛酸标准品，采用经典间
羟联苯-四硼酸钠硫酸法测定白芍多糖的糖醛酸含量。结果见表1。
表1白芍多糖的得率、中性糖含量及糖醛酸含量分析（%）样品BSEP-S BSAP-S BSEP-C BSAP-C
颜色白色白色浅黄色浅黄色
多糖得率1. 561. 581. 181. 54
中性糖
含量80. 5686. 5080. 7981. 64
糖醛酸含量3. 333. 795. 473. 25
100ħ 下水解4h ，然后加入BaCO 3固体中和水解母液至中性，过滤，得到水解后的单糖混合物。2. 8. 2
单糖糖腈乙酸酯衍生物的制备：完全酸水
〔9〕
解后的单糖混合物按照经典方法分别制备成糖
Gal 、Man 、Xyl 、Ara 和腈乙酸酯衍生物，同时取Glc 、Rha 6种标准单糖，同法操作制得标准单糖糖腈乙
酸酯衍生物。2. 8. 3
GC 分析：将衍生制备的糖腈乙酸酯衍生物
样品和6种常见标准单糖的糖腈乙酸酯衍生物对照
17毛细品进行GC 分析。GC 分析条件为：3%OV-
2. 5
元素分析白芍多糖样品经105ħ 烘干至恒
ERBA 元素自动分析仪进行C 、H 和N 以CARIO-重，
元素的分析。结果见表2。
表2样品BSEP-S BSAP-S BSEP-C BSAP-C 表3单糖Rha Ara Xyl Man Glc Gal
BSEP-S t R /min17. 8118. 96－30. 3331. 1131. 41
A %0. 752. 88－0. 9692. 213. 21
t R /min17. 8219. 1319. 8530. 4231. 1731. 74
白芍多糖的元素分析（%）N ＜0. 30＜0. 30＜0. 30＜0. 30
C 38. 7638. 2737. 6538. 78
H 6. 406. 296. 406. 34
蛋白质＜1. 88＜1. 88＜1. 88＜1. 88
FID 检测器，管柱（25m ˑ 0. 3mm ），载气为N 2，采
用程序升温法从180ħ 初始温度以2ħ /min的速度升至200ħ ，维持30min 。进样量为1μL 。分别获得6种标准单糖衍生物图谱和4个白芍多糖水解后的糖腈乙酸酯衍生物图谱，经比较分析，可知白芍多糖样品中单糖的组成及含量。结果见表3。
白芍多糖的单糖组成分析BSAP-S
A /%0. 953. 040. 330. 7991. 453. 43
t R /min17. 8119. 0019. 8430. 3831. 1831. 47
BSEP-S
A /%1. 055. 260. 411. 0787. 304. 71
t R /min17. 8318. 99－30. 3631. 1131. 42
BSAP-S
A /%0. 796. 23－2. 0186. 624. 35
；“－”注：A 为峰面积的百分比；t R 为GC 峰的保留时间表示未检测到
S 和BSAP-S 的GC 数据分析表由表3中BSEP-明，生白芍多糖的单糖组成主要为Glc ，分别达92. 21%和91. 45%，此外还分别含有3. 21%和
3. 43%的Gal 、2. 88%和3. 04%的Ara 及微量的Man C 和BSAP-C 的GC 数据分析表明，和Rha ；BSEP-炒白芍多糖的单糖组成主要也为Glc ，分别达87. 30%和86. 62%，比相应的生白芍多糖中的葡萄糖所占的比率低，此外，还分别含有4. 71%和4. 35%的Gal 、5. 26%和6. 23%的Ara 及微量的Man 和Rha 。3
结论与讨论
不同制备多糖的方法结果表明，水提酮沉制备白芍多糖的得率和中性糖含量略高于水提醇沉方
但单糖组成几乎一致；白芍炮制前后的结果表法，
明，炒白芍的多糖产率低于生品，单糖组成中葡萄糖的含量也显著低于生品。
由多糖含量测定结果可以看出，水提-乙醇沉淀和水提-丙酮沉淀方法，白芍经过炒制后的多糖得率均较生品的得率低，这可能是因为白芍多糖是水溶
性多糖，在清炒过程中使白芍直接接触锅底，导致受热温度较高，使多糖发生降解甚至焦化，进而影响多糖的含量。同时，比较水提-乙醇沉淀与水提-丙酮沉淀2种方法所得白芍多糖的产率发现，后者多糖的产率和含量比前者略高，这是因为多糖是多羟基醇类化合物，为强极性分子，具有溶于水而不溶于有机溶剂的特点，所以，水溶性多糖常在乙醇或丙根据酮中沉淀析出。不过丙酮的极性比乙醇小，“极性相似相溶”的原理，多糖在丙酮中的溶解度更小，因而析出的水溶性多糖更多，多糖的产率和含量更高。
由多糖的单糖组成定量分析结果可知，生白芍多糖的单糖组成中葡萄糖的含量高于炒白芍多糖中葡萄糖的含量，而半乳糖和木糖的含量略低。说明
中药经炮制后临床效果发生改变可能是因为其化学
有可能是量变（如白芍多成分发生一系列的变化，
糖的含量发生改变），也有可能是质变（如白芍多糖
的单糖组成发生改变）。因此，研究中药炮制前后理化性质的变化以及同种中药不同炮制品的理化性质的差异，对探讨中药炮制作用和原理具有重要的意义。炮制前后白芍多糖活性的比较有待进一步探讨。
参
考
文
献
［1］国家药典委员会. 中华人民共和国药典［S ］. 一部.
2010：96-97. 北京：中国医药科技出版社，
［2］王小蓉. 略论白芍的炮制及功用［J ］. 传统医药，2006，
16（16）：56.
［3］时维静，储明明，谭志静. 不同炮制方法对白芍中芍药
2008，15苷含量的影响［J ］. 中国中医药信息杂志，（12）：49-50.
［4］余宏凯，陈彦，孙玉军，等. 白芍多糖分离纯化及性质
J ］. 生物学杂志，2008，25（5）：34-36. 分析［
［5］Tomoda M ，Matsumoto K. Characterization of a neutral and
acidic polysaccharide having immunological activities from the root of Paeonia lactiflora ［J ］. Biol Pharm Bull ，1993，16（12）：1207-1210.
［6］Tomoda M ，Matsumoto K. An acidic polysaccharide with
immunological activities from the root of Paeonia lactiflora ［J ］. Biol Pharm Bull ，1994，17（9）：1161-1164. ［7］高小荣，J ］. 中国新田庚元. 白芍化学成分研究进展［
2006，15（6）：416-418. 药杂志，
［8］张唯杰. 糖复合物生化研究技术［M ］. 上海：上海科学
1994：11-12. 技术出版社，
［9］陶移文，田庚元，汪敬武. 元胡粗多糖的提取及理化性
J ］. 南昌大学学报（理科版），2010，34（6）：575-578. 质［
［10］林颖，黄琳绢，田庚元. 一种改良的糖醛酸含量测定方
J ］. 中草药，1999，30（11）：817-819. 法［
檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽
售《中药材》杂志合订本
1991年(50元) ，1992年(50元) ，1995年(70元) ，1996年(70元) ，1997年(75现有1990年(50元) ，
1998年(精装100元) ，1999年(精装100元) ，2000年(精装150元) ，2001年、2002年、2003年、2004年元) ，
(精装上、2005年、2006年(精装上、2007年(精装上、下册每年180元) ，下册每年200元) ，下册220元) ，2008年、2009年、2010年、2011年(精装上、中、下册每年400元) 《中药材》杂志合订本。需者请汇款至《中药材》编辑部购买。