・４２・
中草药ＣｈｉｎｅｓｅＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌａｎｄＨｅｒｂａｌＤｒｕｇｓ２００２年第３３卷第１期
・药理实验与临床观察・
１６４种中药乙醇提取物抗真菌作用研究
宫毓静１，安汝国２，虞慧１，王理达１，郑俊华１，果德安”
（１．北京大学药学院中医药现代研究中心，北京
１０００８３｛
２．吉林大学生物工程研究所，吉林长春１３００２１）
摘要：目的体外观察ｉ６４种中药９５％乙醇提取物对白色念珠菌、啤酒酵母和威克海姆原藻８种真菌的作用，并对其中抑菌效果明显的中药中的主要成分进行抗真菌药敏试验。方法半固体药基混合法，微量稀释法。结果２２种中药乙醇提取物对１种或几种真菌显示较强的抑制作用，所试验的单体化台物对３种真菌无显著抑制作用。结论首次对中药９５％乙醇提取物应用半固体药基混合法进行抗真菌活性筛选，土槿皮、牡丹皮９５％乙醇粗提物对
３种真菌均有较强的抑制作用。
关键词：抗真菌活性；中药乙醇提取物｝白色念珠菌；威克海姆原藻；啤酒酵母
中围分类号：Ｒ２８６．８５
文献标识码：Ａ
文章编号：０２５３
２６７０（２００２）０１一００４２—０６
Ｓｔｕｄｉｅｓ
ｏｎ
ａｎｔｉｆｕｎｇａｌａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｅｔｈａｎｏｌｅｘｔｒａｃｔｓｆｒｏｍ１６４ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅｍｅｄｉｃｉｎｅｓ
ＧｏＮＧＹｕ—ｊｉｎ９１，ＡＮＲｕ—ｇｕ０２，ＹＵＨｕｉｌ，ＷＡＮＧＬｉ—ｄａｌ，ＺＨＥＮＧＪｕｎ—ｈｕａｌ，ＧＵＯＤｅ—ａｎｌ
（１．ＳｃｈｏｏｌｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｌｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＭｏｄｅｒｎＲｅｓｅａｓｃｈＣｅｍｅｒｆｏｒＴＣＭ．ＢｅｉｊｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ．Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００８３，Ｃｈｉｎａ：
２．ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＪｉｌｉｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，ＣｈａｎｇｅｈｕｎＪｉｌｉｎ１３００２１，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔ
ｒｏｍｙ（Ｐ５
ｃｅｒｅｖｉｓｉａｃ
Ｔｏ
ｓｃｒｅｅｎ
ａｎｔｉｆｕｎｇａｌａｇｅｎｔｓ
ａｇａｉｎｓｔＣａｎｄｉｄａａｌｂｉｃａｎｓ（Ｒｏｂｉｎ）Ｂｅｒｋｈ，Ｓａｃｃｈａ—
ｆｒｏｍ
１６４
ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ
Ｃｈｉｎｅｓｅｍｅｄｉｃｉｎｅｓ
ＨａｎｓｅｎＧＬ７ａｎｄＰｒｏｔｏｔｈｅｃａｗｉｃｋｅｒｈａｍｉｉ
（ＴＣＭｓ）．ＭｅｔｈｏｄｓＴｈｅ
ｅｘｔｒａｃｔｓ
ｏｆ１６４ＴＣＭＳｗｅｒｅｐｒｅｐａｒｅｄｗｉｔｈ９５％ｅｔｈａｎｏｌａｎｄｔｈｅａｎｔｉｆｕｎｇａｌａｅｔｉｖｉ—
ｔｙｏｆｔｈｅｓｅｅｘｔｒａｃｔｓａｇａｉｎｓｔａｂｏｖｅｔｈｒｅｅｆｕｎｇｉＷＤＳｍｅａｓｕｒｅｄｂｙｓｅｍｉｓｏｌｉｄａｇａｒｄｉｌｕｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ
Ｔｈｅｅｔｈａｎｏｌ
ｅｘｔｒａｃｔｓ
ｆｒｏｍ２２ＴＣＭｓｅｘｈｉｂｉｔｅｄｐｏｔｅｎｔａｎｔｊｆｕｎｇａｌａｃｔｉｖｌｔｙ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ
ｆｒｏｍＴＣＭＳｗａｓｍｅａｓｕｒｅｄｂｙｕｓｉｎｇｓｅｍｉｓｏｌｉｄ
ａｇａｒ
Ｔｈｅａｎｔｉｆｕｎａｌａｃｔｉｖ—
ｉｔｙｏｆｔｈｅｅｔｈａｎｏｌ
ｅｘｔｒａｃｔｓｅｘｔｒａｃｔｓ
ｄｉｌｕｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅｆｉｒｓｔ
ｔｉｍｅ．Ｔｈｅｅｔｈａｎ０１
ａｒｅ
ｆｒｏｍｔｈｅｂａｒｋｏｆＰｓｅｕｄｏｌａｒｉｚｋａｅｍｐｆｅｒｉＧｏｒｄ．ａｎｄＰａｅｏｎｉａｓｕｆＪｈ＊ｔｉｃｏｓａＡｎｄｒ．
ｍｏｒｅｐｏｔｅｎｔａｎｔｉｆｕｎｇａｌａｇｅｎｔｓｔｈａｎｔｈｏｓｅｏｆｔｅｓｔｅｄｏｔｈｅｒｍｅｄｉｃｉｎｅｓ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ａｎｔｉｆｕｎｇａｌａｃｔｉｖｉｔｙ；ｅｔｈａｎｏｌ
ｅｘｔｒａｃｔｓ
ｏｆｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅｓ（ＴＣＭｓ）；Ｃａｎｄｉｄａ
ａｌｂｉｃａｎｓ（Ｒｏｂｉｎ）Ｂｅｒｋｈ．；Ｐｒｏｔｏｔｈｅｃａｗｉｃｋｅｒｈａｍｉｉ；ＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＨａｎｓｅｎＧＬ一７
真菌病的发病率日益增加，临床上应用的抗真菌药物（两性霉素Ｂ、氟康唑、酮康唑等）对某些真菌病有效，但从高效低毒、抗真菌谱和耐药性方面评价，没有一种药物令人满意。近年来，国内外学者对中草药抗真菌试验作了大量筛选，其中大蒜，黄连，黄柏，白藓皮，土槿皮的抗真菌能力较强““ｊ。但各作者对中药材的提取方法有较大差异，主要为水煎剂，生理盐水、醋、酒等浸出剂。提取的有效成分不完全，并且为了抑制细菌的生长，药物与培养基共同灭菌，而加热后可使某些药物失效。４“］。本研究是从祖国医书记载，老中医治疗真菌病的验方及文献报道具有抑制真菌的药物中，选出ｌ６４种中药材，应用９５％乙醇超声提取药物成分，经真空干燥后，以二甲
收藕日期；２００１
０４
２３
基亚砜配制溶液，体外观察药物对３种真菌的作用。为进一步分析单味药中最有效的药物成分，探讨作用机制，动物试验及临床应用奠定基础。
白色念珠菌Ｃａｎｄｉｄａ
ａｌｂｉｃａｎｓ（Ｒｏｂｉｎ）Ｂｅｒｋｈ．
是念珠菌属中致病力最强的一种，也是念珠菌病最常见的病原体。威克海姆原藻（Ｐｒｏｔｏｔｈｅｃａ
ｗｉｃｈｅｒ—
ｈａｍｉｉ）属于无绿藻，可引起人皮肤、皮下组织、ＥＩ腔、鼻、浆膜等处的病变“］。啤酒酵母ＧＬ一７（Ｓａｃｃｈａ
ｒｏｍｙｃｅｓ
ｃｅｒｅｉｓｉａｅＨａｎｓｅｎ
ＧＬ一７）是啤酒酵母的甾醇
营养缺陷型突变ｕ株，对于研究甾醇的生物合成途径是很好的模式菌”。。
１材料
ｌ
６３种中药材（购自北京同仁堂药店），土槿皮
基盒项目：国家自然科学基金（ＮＯ．３００７０９１７）
作者简介：宫毓静（１９７３），女，吉林省通化市人。现为吉林大学生物』＝程研究所９８级博士研究生．研究方向为抗真菌中药筛选及有效成
中草药ＣｈｉｎｅｓｅＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌａｎｄＨｅｒｂａｌ
Ｄｒｕｇｓ
２００２年第３３卷第１期
・４３・
（１
９９９年秋采于浙江省衢州市，由果德安教授鉴
２．２．２培养基：改良沙氏培养基（蛋白胨１％，葡萄糖２％）；改良沙氏半固体培养基（蛋白胨１％．葡萄糖２％，琼脂０．３％）；ＹＰＧ液体培养基（蛋白胨２％，葡萄糖２％，酵母提取物ｌ％）；ＹＰＧ半固体培养基（蛋白胨２％，葡萄糖２％．酵母提取物１％，琼脂
０．３％）。
定），单体化合物（购自中国药品生物制品检定所）。两性霉素Ｂ（购自Ｓｉｇｍａ公司），蛋白胨（购自ＤＩＦ～ＣＯ公司），酵母提取物（购自ＯＸＩＯＩＤ公司），葡萄糖（汕头市光华化学厂），琼脂（北京原平生物技术有限公司），麦角甾醇（购自Ｓｉｇｍａ公司），所用实验试剂为国产分析纯。
２方法与结果
２．２．３菌的培养：将标准菌株划线接种培养后，挑选菌落接种于液体培养基中，白色念珠菌加入沙氏培养基，威克海姆原藻加入ＹＰＧ培养基，啤酒酵母加入ＹＰＧ培养基（加入１×１０温摇床中（３０
Ｃ，１００
ｍｉｎ，
２．１药物的制各：中药材５０ｇ研成粉末，过２０目筛，５倍量的９５％乙醇浸泡２４ｈ，超声提取３０抽滤后再经３倍量的９０％乙醇超声提取２０ｍｉｎ，两次提取液合并，减压回收乙醇．６０Ｃ真空恒温干燥。得中药材乙醇浸膏。将中药醇提物用二甲基亚砜溶解，并稀释为３个浓度，药物终浓度分别为１０，１，
０．１
ｍｇ／Ｌ麦角甾醇），置人恒
ｒ／ｍｉｎ）培养．取培养８ｈ处于对
数生长期的真菌作药敏试验。血球计数板计数。２．３抑菌试验
２．３．１
药基混合法试验：半固体培养基以每管终体
３ｍｍ×１００
ｍｇ／ｍｌ，。二甲基亚砜终浓度为２．５％。单体化合
积ｌｍＬ分装于试管（１
ｃ、０．１
ｌｌｌｍ）中，在１２０
物和两性霉素Ｂ用最低量的二甲基亚砜溶解，无菌水稀释，单体化合物的最终作用浓度为１０００～２／ｚｇ／ｍＬ，两性霉素Ｂ为１６～０．０３ｐｇ／ｍＬ。二甲基Ⅱ砜的终浓度低于１％。２．２菌的传代培养
２．２．１实验菌株：白色念珠菌ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）（购自中科院微生物所）。威可海姆原藻（Ｐ．ｗｉｃｋｅｒｈａｍｉｉ），啤酒酵母ＧＬ一７（５，ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＧ１，一７）菌种由Ｗ．Ｄａｖｉｄ
Ｎｅｓ（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＣｈｅｍｉｓｔｒｙａｎｄＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，
Ｔｅｘａｓ
Ｔｅｃｈ
Ｐａ条件下灭菌２０ｍｉｎ。当灭菌培养基冷却
至４０ｃ～ｊｏ【：时，以无菌操作加入中药ＤＭＳＯ溶液２５ｐＬ，混匀制成斜面，同时用溶媒（２．５％
ＭＤＳ０）与蒸馏水作对照。取受试菌液划线接种于斜面上。白色念珠菌终浓度１×１０３ｃｆｕ／ｍＬ。威克海姆原藻与啤酒酵母ＧＬ一７终浓度２×１０４ｃｆｕ／ｍＩ，，放于
３０
ｃ温箱中于４８ｈ内观察菌生长状态。目测并以
下列标准记录：菌完全无生长“一”；菌发育迟缓，形成的菌落较小“＋”；菌发育不旺盛“＋＋”；菌发育较旺盛，但菌落比正常较小“＋＋＋”；菌发育迅速旺盛“＋＋十＋”。平均三次试验结果列于表ｌ。
ＵｎｉｖｅｒｓｉｔＹ．Ｌｕｂｏｃｋ，Ｔｅｘａｓ，ＵＳＡ）博
士惠赠。
表１
白色念珠蔺
中药
０
中药乙醇提取物对３种真菌豹抑制作用
威克海姆原藻
啤酒酵母（ＧＬ７）
０
ｍｇ／ｍＬ
＋＋一
ｌｍｇ／ｍＬ。十＋＋＋＋
｝十十
０．１ｍｇ／ｍＬ＋一＋＋
＋＋
１０
ｍｇ／ｍＬ＋｝＋
ｌｍｇ／ｍ１＋＋＋＋＋＋＋十十＋＋＋＋＋＋＋｝十＋十一＋＋＋
＋一
１ｍｇ／ｍＬ＋一十＋＋Ｉ十＋十＋＋十＋＋＋＋＋ｆ’十十＋＋＋＋＋＋＋＋＋
十十十
１０
ｍｇ／ｍＬ
１
ｍｇ／ｎｄ。０．１ｍｇ／ｍＬ
＋＋＋＋＋＋十＋十十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋｛＋＋＋十＋＋＋＋＋＋＋＋＋｛十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋｛．Ｙ十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋十＋＋＋＋＋＋一＋＋＋＋
＋一一十
秦皮黄连生地榆一
一
槟榔
＋一十儿茶
十十＋＋血竭
＋＋＋＋苦参
＋＋＋＋石榴皮
十十十白芍
五倍子一
＋＋＋一皂角
＋＋｝虎枝
芦荟｝十十一丁香一地肤于＋＋＋一
＋＋内最蔻
十＋＋蚤休
＋＋大黄
牛蒡子＋＋＋
十十＋生艾叶
＋＋甘草
＋＋海桐皮
威灵仙＋＋＋
十＋＋白头翁
十十一十夏枯草
＋一十十一＋＋＋
＋＋
＋＋＋
一
＋＋＋＋＋＋＋＋
＋｝
一
一＋
｝一十＋＋一＋＋＋一＋＋
十一｝十
十十十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋十＋＋十＋＋＋
＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋Ｆ＋
十十十一
＋＋十＋＋＋＋｝｝十十十＋＋
＋＋＋＋＋＋
十十＋
一＋＋＋一＋＋＋一＋＋＋
十
＋＋＋一
＋｝一一
＋＋＋＋
＋＋一
＋＋＋＋
＋＋＋＋十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋
一
＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋十十十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋｝｝十＋＋＋＋十＋＋＋＋＋＋＋｝＋十＋十＋＋一＋＋＋一＋＋＋＋＋十十。
Ｆ十十十十＋＋一＋一一＋＋
十＋＋＋＋＋＋＋＋＋｝｝十＋＋十＋＋＋＋＋＋＋＋｛＋＋＋‘＿一一＋＋＋＋＋｛ｌ＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋十＋＋＋＋＿｝＋＋＋＋
十＋一＋＋一一＋－一十十＋＋＋一＋＋＋
＋｝十＋＋十＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋一
｝十
一
＋＋＋・一十＋＋＋
＋｝十
＋＋一＋｛｝｝＋＋＋＋｝十＋＋＋十＋＋＋＋＋＋十一＋＋＋＋＋
＋＋＋＋一＋＋＋＋＋＋十十＋＋＋＋＋＋＋＋一
｝ｒ十＋一一
一
一＋＋＋
十十
＋＋一＋＋＋＋
＋＋｝ｔ十＋＋十＋
十＋＋
＋一一＋一一＿－＋一＋＋＋一＋＋＋一＋＋＋
十十＋＋＋＋＋＋＋＋＋１
＋＋＋＋＋一＋
＋＋一・
十十＋＋＋＋
＋＋＋＋＋＋＋＋
＋４４。
中草药ＣｈｉｎｅｓｅＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌａｎｄＨｅｒｂａｌＤｒｕｇｓ
２００２年第３３卷第１期
续裹１
中草药Ｃｈｉｎｅｓｅ
续表１
白色念珠苗
。～１０ｍｇ／ｍＬ姜黄大小蓟补骨脂
＋
ＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌａｎｄＨｅｒｂａｌＤｒｕｇｓ２００２年第３３卷第１期
・４５・
戚克海坶原藻
０．１
啤酒酵母（ＧＬ一７）
０．１
１ｍｇ／ｍＬ
＋＋
ｍｇ／ｒｎＬ】０ｍｇ／ｍＬ
十
１
ｍｇ／ｍＬｍｇ／ｍＬ
１０ｍｇ／ｍｌ一１ｍｇ／ｍＬ
一
十十十＋
０・１
ｍｇ／ｍＬ
＿＿＋＋＋
十＋＋＋十＋＋十
＋＋＋＋
＋＋＋＋
羌活
瞍酱鱼腥草川芎桑叶
＋＋
＋＋＋＋
＋＋＋
＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋
＋十十＋
＋十＋
一
一＋＋＋
一
＋＋＋＋
＋＋＋十
厚朴术通麻黄马齿苋黑旱莲
车前草辛夷
＋＋
＋＋＋＋
肉桂
紫草莆柏
＋十十＋＋＋＋＋＋＋＋一＋一＋＋一
一
＋＋丁＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋
＋＋十＋＋＋＋＋＋＋＋＋十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋十＋＋＋＋＋＋＋＋十＋＋＋
＋＋＋＋
一
一
＋十＋
十
＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋
＋
＋＋＋＋＋＋十
＋＋
一
一
＋＋＋＋十十＋十
＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋
＋＋＋十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋
十＋十＋
十＋＋＋＋＋十＋＋＋｛＋
＋＋＋十
＋＋＋＋十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋十十十十
＋＋＋＋
＋＋＋＋
＋＋
十＋
一
＋＋＋
＋＋＋十十＋
＋＋＋＋十十＋＋十＋＋＋＋＋＋＋十
＋＋＋十＋十
＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋十
十＋＋＋
＋斗＋＋
一＋＋＋＋＋十＋＋＋
＋＋十十
＋＋＋＋
十＋十＋
＋＋＋＋＋＋＋＋
十＋＋＋＋＋＋＋
＋十＋＋＋十十十＋＋＋＋ｔ＋＋＋＿＿＋＋＋
＋＋＋＋十＋十＋
＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋
＋＋
一
＋＋＋＋十＋十＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋十
桂枝
白芷徐长卿菖蒲
＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋十十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋１＿十＋＋＋＋
＋＋＋＋
＋＋＋＋
＋＋＋＋＋十十十
＋＋＋＋
十十
一
一
一
一一一
＋＋＋
十＋＋＋＋＋
十＋十
＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋十＋＋＋＋＋＋
＋＋
＋＋＋＋
十十
一一
一一
＋＋＋＋
＋十
＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋
＋＋
＋＋＋＋＋＋十
十＋＋＋
十＋＋＋＋＋＋＋＋＋
一
一
＋＋＋＋
一
＋＋＋＋
＋＋＋＋
＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋十＋＋＋
＋＋＋十＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋
使君子
白防
芨已
＋十＋＋＋＋＋＋
十十十十
＋十十十＋＋＋＋
＋＋＋＋＋＋＋＋
十＋＋＋＋＋＋＋
＋ｔ＋
野菊花扁蓄
蒲公萸半边莲
＋＋＋＋＋＋＋＋＋
＋十十＋
一
一
＋＋十＋
＋＋＋＋
＋＋＋
＿＿＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋十
＋＋＋
＋＋＋＋＋十十＋＋＋＋＋＋＋士＋＋＋＿＿＋
莱菔子槐花
仙鹤草＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋十
＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋
＋＋＋＋
一
＋＋
＋＋牟＋＋＋＋
＋＋＋＋
＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋
＋十十＋
一＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋十
十＋＋＋＋＋＋＋
十＋＋＋
＋十十＋＋＋十＋＋＋＋＋
＋｝＋＋
十＋＋十
鹅不食草穿心莲
茜草浮萍
＋＋＋＋＋＋
＋＋十＋
十十＋＋＿＿＋＋＋
＋＋＋＋
＋＋＋十＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋
一
＋＋＋一＋＋＋＋
＋十＋
夜交藤
生卷柏草乌头
一
＋＋卞＋
＋＋＋十
地骨皮忍冬藤鹤虱椿白皮
牵牛子皂刺革群骨碎补老鹳草
＋十＋＋＋＋＋
一＋＋＋＋十十＋＋＋＋＋＋
一十＋＋＋
＋＋＋＋
八角茴香。＋＋＋淫羊藿风尾草
干漆
＋＋十＋十＋＋＋＋＋＋＋＋十＋＋
＋十＋十
＋＋十十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋十＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋
＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋十
十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋十十
一＋＋＋＋
一
一
一
＋＋＋＋＋＋＋＋
＋十＋
＋＋＋＋
＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋
＋＋＋＋＋＋＋十＋＋＋＋’十＋＋＋十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋
十＋＋＋
＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋十十＋＋＋十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋
＋十＋十
＋十＋＋
＋＋＋＋
＋＋＋＋
＋十＋＋＋＋＋＋
＋＋十＋
＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋
＋＋＋＋
一
＋＋＋＋
＋＋＋
＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋十＋＋
＋十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋
十十十十
＋＋＋一
＋＋＋十
＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋十＋＋＋＋
＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋
＋＋＋＋
一
＋＋＋＋
＋＋＋＋
＋＋＋十十十十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋十＋＋上＋＋
＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋＋＋＋＋十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋
一
＋＋士＋
＋＋十＋
＋＋＋
一
一一
一
＋＋上＋
＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋
一
一＋＋
＋＋＋十
＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋
＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋牟＋
木鳖子火麻仁急性子
紫苑
十＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋十
一
＋＋
＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋
＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋十十＋＋十＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋十
十十＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋＋＋
＋＋十
十＋十＋＋＋＋＋
＋＋＋＋＋＋＋十
＋＋十十
＋＋十＋
一
＋＋＋＋＋十＋＋＋＋＋＋
一
＋＋十十
益母草半夏
附子
＋十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋
＋十十十
＋十＋十＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋
一一
＋＋＋＋＋＋
十＋＋＋
＋＋＋＋＋＋
＋＋＋
十十＋＋＋＋＋
一
＋十＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋
＋＋＋＋
＋＋＋＋
一
＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋
一
＋＋＋＋
＋＋＋＋＋＋＋＋
十＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋
十＋＋＋
＋＋＋＋＋＋＋＋Ｊ＿＋＋＋
＋＋＋＋
＋＋＋＋
＋＋＋＋＋十＋＋＋＋＋＋
十
十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋
＋十十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋十十＋＋＋＋＋
＋＋＋＋十十十十
高良姜山楂土槿皮苦参＋虻床子
一
＋＋＋＋十＋＋＋＋４－４－＋
一
＋＋一＋＋＋＋
一
＋＋＋＋
一
＋＋＋＋＋＋＋
一
＋
荆芥＋生地＋＋＋＋
＋＋＋＋＋＋
ｑ－＋十＋
一
＋＋４－＋
＋＋
十＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋＋十十
十＋＋十
■寸＋＋＋
＋＋＋＋
芝吐±壹翅座±±±＝
±————二二上±————二±ｉ二±一
注：“一”菌完全无生长；“＋”磕发育迟缓．形成的菌落较小｛“十＋”菌发育不旺盛；“＋＋４－”菌发育较旺盛ｔ但菌落比正常较小｛
±±±±
±±±±±±±±±±±±±±±±
十＋十一Ｌ
－＋＋＋＋”苗发育迅速旺盛。设屯的溶煤对照不抑制菌的生长｛以上结果为三次结果平均。
本试验中共对１６４种单昧药和３个小复方（苦参＋蛇床；艾叶＋海桐皮；荆芥＋生地）的乙醇提取物进行了３种真菌的抗菌活性试验。对一种或几种
真菌具有较强抑制作用的药物有：牡丹皮，土槿皮，知母，高良姜，黄连，丁香，肉桂，黄柏，黄芩，菖蒲，桂枝，五倍子，肉豆蔻．防己，地骨皮，青木香，草薜．木
‘４６。
中草药ＣｈｉｎｅｓｅＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌａｎｄＨｅｒｂａｌＤｒｕｇｓ２００２年第３３卷第１期
香，徐长卿，丹参，鹤虱，急性子。
在１ｍｇ／ｍＬ浓度，牡丹皮，土槿皮对３种真菌
３讨论
本实验应用体外半固体药基法筛选抗真菌中药，该方法简便经济，是很便捷的初步筛选方法。抗真菌药物筛选试验结果受外界的影响因素复杂，例如，药物的种类，制备方法，药物浓度．溶媒的选择＋试验菌的种类，菌种成熟的程度，菌孢子的浓度，培养的温度及时间等…。并且体外实验结果与临床应用效果尚有差异。因此，本实验结果仅仅是在一定条均有抑制作用。对白色念珠茵有抑制作用的有黄连，丁香，肉桂，知母，高良姜，桂枝，五倍子；对威克海姆原藻有抑制作用的有黄连，丁香，肉桂，肉豆蔻，青木香，菖蒲，防己，地骨皮，革薜｝对ＧＬ一７有抑制作用的有知母，高良姜．青木香，革蒋，木香。
２．３．２微量稀释法测定药敏试验：９６孔细胞培养板紫外线照射３０ｍｉｎ后，于每板第１排各孔（１２孔）内分别加入培养基１８０ｐＬ，第儿孔为阴性对照．１２孔为阳性对照；系列稀释浓度的待测药液１０
儿依次加入相应药液于各孔中，阴性对照中加２０
“Ｉ．，加人制备的真菌溶液１０ｐＬ（阴性对照孔不加），使最终菌量为０．５×１０３～２．５ｘ１０３ｃｆｕ／ｍＬ，振荡５ｍｉｎ使各液充分混匀，３５‘Ｃ温箱培养（湿盒内保持液量）４８ｈ观察。未见菌生长的最低浓度为最低抑菌浓度（ＭＩＣ），见表２。
２５个单体化合物中只有紫草素对酵母ＧＬ７有特异性抑制作用，最低抑菌浓度为３．１３ｐｇ／ｍＬ，柠檬醛对威克海姆原藻和啤酒酵母ＧＩ，一７的最低抑菌
浓度为２５０ｇｇ／ｍＬ，其他成分与对照药两性霉素Ｂ
相比，无明显的抗菌活性。
表２微量稀释法药物抗真菌敬感性试验（ＭＩＣ：ｌａｇ／ｍＬ）
件下药物与真菌作用的结果，它的阴性结果只说明在本实验条件下无作用，而阳性结果必须是在低浓度下有明显作用的。在抑菌作用的估价中，我们不重视大于“＋＋”的抑菌结果。
本实验中中药种类较多，为求方法上的一致性。只应用中药的乙醇提取物，而未做其它提取方法的对比。由于提取溶剂不同使某些中药抑菌结果与其它报道有显著差异。例如，文献中黄连的１０％水煎剂对白色念珠菌无作用，血竭的水煎剂对白色念珠菌有一定的抑制作用“Ｊ，而本实验结果显示黄连的乙醇提取物在１ｍｇ／ｍｌ，浓度对白色念珠菌有抑制作用，而血竭的醇提物作用不明显。曹仁烈报道土槿皮水提液无抑菌作用ｏ］，而本实验中土槿皮乙醇提取物却显示强的抗真菌作用。说明提取溶剂不同．提取出的有效成分不同，体现的药效就不同。
同一种药物对不同菌株作用也不同，其中除牡丹皮，土槿皮对３种菌均有作用外，其它药物只对其中的一种或两种菌有作用，提示作用靶点可能不同。
很多报道挥发油是抗真菌有效部位，例如肉桂。
丁香，珊瑚姜等”…Ｊ。本试验在药物提取过程中，未
单独分离提取挥发油，并且在提取物的真空干燥过程中，挥发性物质含量会受影响，也可能是影响药效
的原因之一。
我们选取有效中药的主要单体成分作抑菌实验。与两性霉素Ｂ相比，结果均不理想。肉桂醛的最低抑菌浓度与报道基本相同－…，丁香酚未表现出强的抗真菌作用，与宋军的结果有明显差异ｏ］。紫草素对酵母ＧＬ一７有特异性抑制作用，最低抑菌浓度为
３．１
３／＊ｇ／ｍＬ，值得进一步研究。
本实验选用的临床常用的３个两味药组成的小
菌作用不及单味药强“］。因为中药的抗真菌有效成复方，未表现出明显的抑菌作用。曹松年等研究巾药复方的水煎剂对皮肤癣菌抑制作用，认为复方的抑分与机制的多样性，复方的研究就更为复杂。还有报道复方并不是通过直接抑菌而起作用，可能是通过增强肌体免疫力而抗真菌“～。尚有待进一步探讨。
中草药ＣｈｉｎｅｓｅＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌａｎｄＨｅｒｂａｌ
Ｄｒｕｇｓ
２００２年第３３卷第１期
・４７・
由于中药粗提物中含有多种化学成分，成分与药理作用复杂，并且受多种因素影响。目前的研究大多处于初步阶段，筛选抗菌谱，通过扫描，透射电镜观察形态变化，缺乏对于作用机制与毒性的进一步探讨，难以开发出有效的抗真菌药物，并指导临床用药。作用机制的阐述，毒性研究需作大量的工作。因此，今后的工作重点应是一方面从已发现的具有抗真菌的中药中活性追踪提取有效成分，进而对有效成分进行抗真菌机制研究；另一方面，可以针对高效低毒作用机制，设计选择性作用靶点减少用药量，进行高通量筛选化合物或先导化合物，建立相关生物信息库，为合成新的抗真菌药物奠定基础。
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龙胆苦苷的保肝作用研究
刘占文，陈长勋＋．金若敏，史国庆，宋纯清，胡之璧
（上海中医药大学，上海２０００３２）
摘要：目的研究－ｇ龙胆苦苷的肝保护作用及与龙胆草药理作用的一致性。方法给动物ｉｇ给药，用ＣＣＩ；、Ｄ—ＧＩａＮ造急性肝损伤模型，测定小鼠血清ＡＬＴ、ＡＳＴ及肝组织中谷胱甘肽过氧化物酶古量，采用麻醉大鼠．测定胆汁分泌量及胆汁成分。结果ｉｇ龙胆苦苷后能明显降低ＣＣｌ。急性肝损伤小鼠血清ＡＬＴ，ＡＳＴ水平及增加肝组织中谷胱甘肽过氧化物酶活力，大鼠胆流量明显增加，胆汁中胆红素浓度提高。结论龙胆苦苷具有明显肝保护作用。
关键词：尤胆苦苷；保肝；利胆中圈分类号：Ｒ２８６．５５
文献标识码：Ａ
文章编号：０２５３
２６７０（２００２）０１—００４７～０４
Ｓｔｕｄｉｅｓ
ｏｎ
ｌｉｖｅｒ—ｐｒｏｔｅｃｔｉＯｎａｎｄｐｒｏｍｏｔｉｎｇｂｉｌｅｓｅｃｒｅｔｉｏｎ０ｆｇｅｎ“０ｐｉｃｒＯｓｉｄｅ
Ｌ１ＵＺｈａｎ—ｗｅｎ，ＣＨＥＮＣｈａｎｇ—ｘｕｎ，ＪＩＮＲｕｏ—ｒａｉｎ，ＳＨＩＧｕｏ—ｑｉｎｇ，ＳＯＮＧＣｈｕｎ—ｑｉｎｇ，ＨＵＺｈｉ—ｂｉ
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Ｔｏｓｔｕｄｙｔｈｅｌｉｖｅｒ—ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎａｎｄｂｉｌｅｐｒｏｍｏｔｉｎｇｓｅｃｒｅｔｉｏｎｏｆｇｅｎｔｉｏｐｉｃｒｏｓｉｄｅａｄ—Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔ
ｍｉｎｉｓｔｒａｔｅｄｉｇｉｎｒａｔ．ＭｅｔｈｏｄｓＧｅｎｔｉｏＤｉｃｒｏｓｉｄｅｗａｓａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｅｄｉｇｔＯｔｈｅｍｉｃｅｗｉｔｈｌｉｖｅｒｉｎｊｕｒｙｉｎｄｕｃｅｄｂｙＣＣｌ。ａｎｄＤ—ＧｌａＮ．Ａｌ，Ｔ，ＡＳＴｌｅｖｅｌｓｉｎｓｅｒｕｍａｎｄＧＳＨ—Ｐｘａｃｔｉｖｉｔｙ
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ｔｉｏｐｉｃｒｏｓｉｄｅｗｅｒｅｅｓｔｉｍａｔｅｄ．ＲｅｓｕｌｔｓＧｅｎｔｉｏＤｉｃｒｏｓｉｄｅａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｅｄｉｇｄｅｃｒｅａｓｅｄｔｈｅｓｅｒｕｍＡＩ。ＴａｎｄＡＳＴ
ｌｅｖｅｌｓ．ｉｎｃｒｅａｓｅｄｔｈｅ１ｉｖｅｒＧＳＨＰｘａｃｔｉｖｉｔｙｉｎｔｈｅｍｉｃｅｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈＣＣＩ。，ｐｒｏｍｏｔｅｄｔｈｅｓｅｃｒｅｔｉｏｎｏｆｂｉｌｅａｎｄｉｎｃｒｅａｓｅｄｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆｂｉｌｉｒｕｂｉｎｉｎｔｈｅｂｉｌｅ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｈｉｂｉｔｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｉｖｅｒｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎａｎｄｐｒｏｍｏｔｉｎｇｂｉｌｅｓｅｃｒｅｔｉｏｎ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｇｅｎｔｉｏｐｉｃｒｏｓｉｄｅ；ｌｉｖｅｒｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ；ｐｒｏｍｏｔｉｎｇｂｉｌｅｓｅｃｒｅｔｉｏｎ
Ｇｅｎｔｉｏｐｉｃｒｏｓｉｄｅａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｅｄｉｇ
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收稿日期：２００１—０６—１
２
ｌ妻磊异：易喜毂焉；銎荠雾罴慧署藩墓霎曼蓦薹弗！翥辩嚣蠢’；冀？盖车篙；：翟莽凳学医学专业．学士．，。。。年毕业于上海中医药本
学，药理学硬上。目前为上海同仁医院药剂科主管中药师。主要研究方向为中药药理学ｆ肝胆方面）。Ｔｅｌ６２８２４２５９药剂科
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＊通讯联系人
164种中药乙醇提取物抗真菌作用研究
作者：作者单位：刊名：英文刊名：年，卷(期)：被引用次数：
宫毓静， 安汝国， 虞慧， 王理达， 郑俊华， 果德安
宫毓静,虞慧,王理达,郑俊华,果德安(北京大学药学院,中医药现代研究中心,北京,100083)， 安汝国(吉林大学生物工程研究所,吉林,长春,130021)中草药
CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS2002,33(1)85次
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本文链接：http://d.g.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200201020.aspx
・４２・
中草药ＣｈｉｎｅｓｅＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌａｎｄＨｅｒｂａｌＤｒｕｇｓ２００２年第３３卷第１期
・药理实验与临床观察・
１６４种中药乙醇提取物抗真菌作用研究
宫毓静１，安汝国２，虞慧１，王理达１，郑俊华１，果德安”
（１．北京大学药学院中医药现代研究中心，北京
１０００８３｛
２．吉林大学生物工程研究所，吉林长春１３００２１）
摘要：目的体外观察ｉ６４种中药９５％乙醇提取物对白色念珠菌、啤酒酵母和威克海姆原藻８种真菌的作用，并对其中抑菌效果明显的中药中的主要成分进行抗真菌药敏试验。方法半固体药基混合法，微量稀释法。结果２２种中药乙醇提取物对１种或几种真菌显示较强的抑制作用，所试验的单体化台物对３种真菌无显著抑制作用。结论首次对中药９５％乙醇提取物应用半固体药基混合法进行抗真菌活性筛选，土槿皮、牡丹皮９５％乙醇粗提物对
３种真菌均有较强的抑制作用。
关键词：抗真菌活性；中药乙醇提取物｝白色念珠菌；威克海姆原藻；啤酒酵母
中围分类号：Ｒ２８６．８５
文献标识码：Ａ
文章编号：０２５３
２６７０（２００２）０１一００４２—０６
Ｓｔｕｄｉｅｓ
ｏｎ
ａｎｔｉｆｕｎｇａｌａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｅｔｈａｎｏｌｅｘｔｒａｃｔｓｆｒｏｍ１６４ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅｍｅｄｉｃｉｎｅｓ
ＧｏＮＧＹｕ—ｊｉｎ９１，ＡＮＲｕ—ｇｕ０２，ＹＵＨｕｉｌ，ＷＡＮＧＬｉ—ｄａｌ，ＺＨＥＮＧＪｕｎ—ｈｕａｌ，ＧＵＯＤｅ—ａｎｌ
（１．ＳｃｈｏｏｌｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｌｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＭｏｄｅｒｎＲｅｓｅａｓｃｈＣｅｍｅｒｆｏｒＴＣＭ．ＢｅｉｊｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ．Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００８３，Ｃｈｉｎａ：
２．ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＪｉｌｉｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，ＣｈａｎｇｅｈｕｎＪｉｌｉｎ１３００２１，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔ
ｒｏｍｙ（Ｐ５
ｃｅｒｅｖｉｓｉａｃ
Ｔｏ
ｓｃｒｅｅｎ
ａｎｔｉｆｕｎｇａｌａｇｅｎｔｓ
ａｇａｉｎｓｔＣａｎｄｉｄａａｌｂｉｃａｎｓ（Ｒｏｂｉｎ）Ｂｅｒｋｈ，Ｓａｃｃｈａ—
ｆｒｏｍ
１６４
ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ
Ｃｈｉｎｅｓｅｍｅｄｉｃｉｎｅｓ
ＨａｎｓｅｎＧＬ７ａｎｄＰｒｏｔｏｔｈｅｃａｗｉｃｋｅｒｈａｍｉｉ
（ＴＣＭｓ）．ＭｅｔｈｏｄｓＴｈｅ
ｅｘｔｒａｃｔｓ
ｏｆ１６４ＴＣＭＳｗｅｒｅｐｒｅｐａｒｅｄｗｉｔｈ９５％ｅｔｈａｎｏｌａｎｄｔｈｅａｎｔｉｆｕｎｇａｌａｅｔｉｖｉ—
ｔｙｏｆｔｈｅｓｅｅｘｔｒａｃｔｓａｇａｉｎｓｔａｂｏｖｅｔｈｒｅｅｆｕｎｇｉＷＤＳｍｅａｓｕｒｅｄｂｙｓｅｍｉｓｏｌｉｄａｇａｒｄｉｌｕｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ
Ｔｈｅｅｔｈａｎｏｌ
ｅｘｔｒａｃｔｓ
ｆｒｏｍ２２ＴＣＭｓｅｘｈｉｂｉｔｅｄｐｏｔｅｎｔａｎｔｊｆｕｎｇａｌａｃｔｉｖｌｔｙ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ
ｆｒｏｍＴＣＭＳｗａｓｍｅａｓｕｒｅｄｂｙｕｓｉｎｇｓｅｍｉｓｏｌｉｄ
ａｇａｒ
Ｔｈｅａｎｔｉｆｕｎａｌａｃｔｉｖ—
ｉｔｙｏｆｔｈｅｅｔｈａｎｏｌ
ｅｘｔｒａｃｔｓｅｘｔｒａｃｔｓ
ｄｉｌｕｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅｆｉｒｓｔ
ｔｉｍｅ．Ｔｈｅｅｔｈａｎ０１
ａｒｅ
ｆｒｏｍｔｈｅｂａｒｋｏｆＰｓｅｕｄｏｌａｒｉｚｋａｅｍｐｆｅｒｉＧｏｒｄ．ａｎｄＰａｅｏｎｉａｓｕｆＪｈ＊ｔｉｃｏｓａＡｎｄｒ．
ｍｏｒｅｐｏｔｅｎｔａｎｔｉｆｕｎｇａｌａｇｅｎｔｓｔｈａｎｔｈｏｓｅｏｆｔｅｓｔｅｄｏｔｈｅｒｍｅｄｉｃｉｎｅｓ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ａｎｔｉｆｕｎｇａｌａｃｔｉｖｉｔｙ；ｅｔｈａｎｏｌ
ｅｘｔｒａｃｔｓ
ｏｆｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅｓ（ＴＣＭｓ）；Ｃａｎｄｉｄａ
ａｌｂｉｃａｎｓ（Ｒｏｂｉｎ）Ｂｅｒｋｈ．；Ｐｒｏｔｏｔｈｅｃａｗｉｃｋｅｒｈａｍｉｉ；ＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＨａｎｓｅｎＧＬ一７
真菌病的发病率日益增加，临床上应用的抗真菌药物（两性霉素Ｂ、氟康唑、酮康唑等）对某些真菌病有效，但从高效低毒、抗真菌谱和耐药性方面评价，没有一种药物令人满意。近年来，国内外学者对中草药抗真菌试验作了大量筛选，其中大蒜，黄连，黄柏，白藓皮，土槿皮的抗真菌能力较强““ｊ。但各作者对中药材的提取方法有较大差异，主要为水煎剂，生理盐水、醋、酒等浸出剂。提取的有效成分不完全，并且为了抑制细菌的生长，药物与培养基共同灭菌，而加热后可使某些药物失效。４“］。本研究是从祖国医书记载，老中医治疗真菌病的验方及文献报道具有抑制真菌的药物中，选出ｌ６４种中药材，应用９５％乙醇超声提取药物成分，经真空干燥后，以二甲
收藕日期；２００１
０４
２３
基亚砜配制溶液，体外观察药物对３种真菌的作用。为进一步分析单味药中最有效的药物成分，探讨作用机制，动物试验及临床应用奠定基础。
白色念珠菌Ｃａｎｄｉｄａ
ａｌｂｉｃａｎｓ（Ｒｏｂｉｎ）Ｂｅｒｋｈ．
是念珠菌属中致病力最强的一种，也是念珠菌病最常见的病原体。威克海姆原藻（Ｐｒｏｔｏｔｈｅｃａ
ｗｉｃｈｅｒ—
ｈａｍｉｉ）属于无绿藻，可引起人皮肤、皮下组织、ＥＩ腔、鼻、浆膜等处的病变“］。啤酒酵母ＧＬ一７（Ｓａｃｃｈａ
ｒｏｍｙｃｅｓ
ｃｅｒｅｉｓｉａｅＨａｎｓｅｎ
ＧＬ一７）是啤酒酵母的甾醇
营养缺陷型突变ｕ株，对于研究甾醇的生物合成途径是很好的模式菌”。。
１材料
ｌ
６３种中药材（购自北京同仁堂药店），土槿皮
基盒项目：国家自然科学基金（ＮＯ．３００７０９１７）
作者简介：宫毓静（１９７３），女，吉林省通化市人。现为吉林大学生物』＝程研究所９８级博士研究生．研究方向为抗真菌中药筛选及有效成
中草药ＣｈｉｎｅｓｅＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌａｎｄＨｅｒｂａｌ
Ｄｒｕｇｓ
２００２年第３３卷第１期
・４３・
（１
９９９年秋采于浙江省衢州市，由果德安教授鉴
２．２．２培养基：改良沙氏培养基（蛋白胨１％，葡萄糖２％）；改良沙氏半固体培养基（蛋白胨１％．葡萄糖２％，琼脂０．３％）；ＹＰＧ液体培养基（蛋白胨２％，葡萄糖２％，酵母提取物ｌ％）；ＹＰＧ半固体培养基（蛋白胨２％，葡萄糖２％．酵母提取物１％，琼脂
０．３％）。
定），单体化合物（购自中国药品生物制品检定所）。两性霉素Ｂ（购自Ｓｉｇｍａ公司），蛋白胨（购自ＤＩＦ～ＣＯ公司），酵母提取物（购自ＯＸＩＯＩＤ公司），葡萄糖（汕头市光华化学厂），琼脂（北京原平生物技术有限公司），麦角甾醇（购自Ｓｉｇｍａ公司），所用实验试剂为国产分析纯。
２方法与结果
２．２．３菌的培养：将标准菌株划线接种培养后，挑选菌落接种于液体培养基中，白色念珠菌加入沙氏培养基，威克海姆原藻加入ＹＰＧ培养基，啤酒酵母加入ＹＰＧ培养基（加入１×１０温摇床中（３０
Ｃ，１００
ｍｉｎ，
２．１药物的制各：中药材５０ｇ研成粉末，过２０目筛，５倍量的９５％乙醇浸泡２４ｈ，超声提取３０抽滤后再经３倍量的９０％乙醇超声提取２０ｍｉｎ，两次提取液合并，减压回收乙醇．６０Ｃ真空恒温干燥。得中药材乙醇浸膏。将中药醇提物用二甲基亚砜溶解，并稀释为３个浓度，药物终浓度分别为１０，１，
０．１
ｍｇ／Ｌ麦角甾醇），置人恒
ｒ／ｍｉｎ）培养．取培养８ｈ处于对
数生长期的真菌作药敏试验。血球计数板计数。２．３抑菌试验
２．３．１
药基混合法试验：半固体培养基以每管终体
３ｍｍ×１００
ｍｇ／ｍｌ，。二甲基亚砜终浓度为２．５％。单体化合
积ｌｍＬ分装于试管（１
ｃ、０．１
ｌｌｌｍ）中，在１２０
物和两性霉素Ｂ用最低量的二甲基亚砜溶解，无菌水稀释，单体化合物的最终作用浓度为１０００～２／ｚｇ／ｍＬ，两性霉素Ｂ为１６～０．０３ｐｇ／ｍＬ。二甲基Ⅱ砜的终浓度低于１％。２．２菌的传代培养
２．２．１实验菌株：白色念珠菌ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）（购自中科院微生物所）。威可海姆原藻（Ｐ．ｗｉｃｋｅｒｈａｍｉｉ），啤酒酵母ＧＬ一７（５，ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＧ１，一７）菌种由Ｗ．Ｄａｖｉｄ
Ｎｅｓ（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＣｈｅｍｉｓｔｒｙａｎｄＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，
Ｔｅｘａｓ
Ｔｅｃｈ
Ｐａ条件下灭菌２０ｍｉｎ。当灭菌培养基冷却
至４０ｃ～ｊｏ【：时，以无菌操作加入中药ＤＭＳＯ溶液２５ｐＬ，混匀制成斜面，同时用溶媒（２．５％
ＭＤＳ０）与蒸馏水作对照。取受试菌液划线接种于斜面上。白色念珠菌终浓度１×１０３ｃｆｕ／ｍＬ。威克海姆原藻与啤酒酵母ＧＬ一７终浓度２×１０４ｃｆｕ／ｍＩ，，放于
３０
ｃ温箱中于４８ｈ内观察菌生长状态。目测并以
下列标准记录：菌完全无生长“一”；菌发育迟缓，形成的菌落较小“＋”；菌发育不旺盛“＋＋”；菌发育较旺盛，但菌落比正常较小“＋＋＋”；菌发育迅速旺盛“＋＋十＋”。平均三次试验结果列于表ｌ。
ＵｎｉｖｅｒｓｉｔＹ．Ｌｕｂｏｃｋ，Ｔｅｘａｓ，ＵＳＡ）博
士惠赠。
表１
白色念珠蔺
中药
０
中药乙醇提取物对３种真菌豹抑制作用
威克海姆原藻
啤酒酵母（ＧＬ７）
０
ｍｇ／ｍＬ
＋＋一
ｌｍｇ／ｍＬ。十＋＋＋＋
｝十十
０．１ｍｇ／ｍＬ＋一＋＋
＋＋
１０
ｍｇ／ｍＬ＋｝＋
ｌｍｇ／ｍ１＋＋＋＋＋＋＋十十＋＋＋＋＋＋＋｝十＋十一＋＋＋
＋一
１ｍｇ／ｍＬ＋一十＋＋Ｉ十＋十＋＋十＋＋＋＋＋ｆ’十十＋＋＋＋＋＋＋＋＋
十十十
１０
ｍｇ／ｍＬ
１
ｍｇ／ｎｄ。０．１ｍｇ／ｍＬ
＋＋＋＋＋＋十＋十十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋｛＋＋＋十＋＋＋＋＋＋＋＋＋｛十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋｛．Ｙ十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋十＋＋＋＋＋＋一＋＋＋＋
＋一一十
秦皮黄连生地榆一
一
槟榔
＋一十儿茶
十十＋＋血竭
＋＋＋＋苦参
＋＋＋＋石榴皮
十十十白芍
五倍子一
＋＋＋一皂角
＋＋｝虎枝
芦荟｝十十一丁香一地肤于＋＋＋一
＋＋内最蔻
十＋＋蚤休
＋＋大黄
牛蒡子＋＋＋
十十＋生艾叶
＋＋甘草
＋＋海桐皮
威灵仙＋＋＋
十＋＋白头翁
十十一十夏枯草
＋一十十一＋＋＋
＋＋
＋＋＋
一
＋＋＋＋＋＋＋＋
＋｝
一
一＋
｝一十＋＋一＋＋＋一＋＋
十一｝十
十十十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋十＋＋十＋＋＋
＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋Ｆ＋
十十十一
＋＋十＋＋＋＋｝｝十十十＋＋
＋＋＋＋＋＋
十十＋
一＋＋＋一＋＋＋一＋＋＋
十
＋＋＋一
＋｝一一
＋＋＋＋
＋＋一
＋＋＋＋
＋＋＋＋十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋
一
＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋十十十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋｝｝十＋＋＋＋十＋＋＋＋＋＋＋｝＋十＋十＋＋一＋＋＋一＋＋＋＋＋十十。
Ｆ十十十十＋＋一＋一一＋＋
十＋＋＋＋＋＋＋＋＋｝｝十＋＋十＋＋＋＋＋＋＋＋｛＋＋＋‘＿一一＋＋＋＋＋｛ｌ＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋十＋＋＋＋＿｝＋＋＋＋
十＋一＋＋一一＋－一十十＋＋＋一＋＋＋
＋｝十＋＋十＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋一
｝十
一
＋＋＋・一十＋＋＋
＋｝十
＋＋一＋｛｝｝＋＋＋＋｝十＋＋＋十＋＋＋＋＋＋十一＋＋＋＋＋
＋＋＋＋一＋＋＋＋＋＋十十＋＋＋＋＋＋＋＋一
｝ｒ十＋一一
一
一＋＋＋
十十
＋＋一＋＋＋＋
＋＋｝ｔ十＋＋十＋
十＋＋
＋一一＋一一＿－＋一＋＋＋一＋＋＋一＋＋＋
十十＋＋＋＋＋＋＋＋＋１
＋＋＋＋＋一＋
＋＋一・
十十＋＋＋＋
＋＋＋＋＋＋＋＋
＋４４。
中草药ＣｈｉｎｅｓｅＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌａｎｄＨｅｒｂａｌＤｒｕｇｓ
２００２年第３３卷第１期
续裹１
中草药Ｃｈｉｎｅｓｅ
续表１
白色念珠苗
。～１０ｍｇ／ｍＬ姜黄大小蓟补骨脂
＋
ＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌａｎｄＨｅｒｂａｌＤｒｕｇｓ２００２年第３３卷第１期
・４５・
戚克海坶原藻
０．１
啤酒酵母（ＧＬ一７）
０．１
１ｍｇ／ｍＬ
＋＋
ｍｇ／ｒｎＬ】０ｍｇ／ｍＬ
十
１
ｍｇ／ｍＬｍｇ／ｍＬ
１０ｍｇ／ｍｌ一１ｍｇ／ｍＬ
一
十十十＋
０・１
ｍｇ／ｍＬ
＿＿＋＋＋
十＋＋＋十＋＋十
＋＋＋＋
＋＋＋＋
羌活
瞍酱鱼腥草川芎桑叶
＋＋
＋＋＋＋
＋＋＋
＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋
＋十十＋
＋十＋
一
一＋＋＋
一
＋＋＋＋
＋＋＋十
厚朴术通麻黄马齿苋黑旱莲
车前草辛夷
＋＋
＋＋＋＋
肉桂
紫草莆柏
＋十十＋＋＋＋＋＋＋＋一＋一＋＋一
一
＋＋丁＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋
＋＋十＋＋＋＋＋＋＋＋＋十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋十＋＋＋＋＋＋＋＋十＋＋＋
＋＋＋＋
一
一
＋十＋
十
＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋
＋
＋＋＋＋＋＋十
＋＋
一
一
＋＋＋＋十十＋十
＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋
＋＋＋十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋
十＋十＋
十＋＋＋＋＋十＋＋＋｛＋
＋＋＋十
＋＋＋＋十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋十十十十
＋＋＋＋
＋＋＋＋
＋＋
十＋
一
＋＋＋
＋＋＋十十＋
＋＋＋＋十十＋＋十＋＋＋＋＋＋＋十
＋＋＋十＋十
＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋十
十＋＋＋
＋斗＋＋
一＋＋＋＋＋十＋＋＋
＋＋十十
＋＋＋＋
十＋十＋
＋＋＋＋＋＋＋＋
十＋＋＋＋＋＋＋
＋十＋＋＋十十十＋＋＋＋ｔ＋＋＋＿＿＋＋＋
＋＋＋＋十＋十＋
＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋
＋＋
一
＋＋＋＋十＋十＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋十
桂枝
白芷徐长卿菖蒲
＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋十十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋１＿十＋＋＋＋
＋＋＋＋
＋＋＋＋
＋＋＋＋＋十十十
＋＋＋＋
十十
一
一
一
一一一
＋＋＋
十＋＋＋＋＋
十＋十
＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋十＋＋＋＋＋＋
＋＋
＋＋＋＋
十十
一一
一一
＋＋＋＋
＋十
＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋
＋＋
＋＋＋＋＋＋十
十＋＋＋
十＋＋＋＋＋＋＋＋＋
一
一
＋＋＋＋
一
＋＋＋＋
＋＋＋＋
＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋十＋＋＋
＋＋＋十＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋
使君子
白防
芨已
＋十＋＋＋＋＋＋
十十十十
＋十十十＋＋＋＋
＋＋＋＋＋＋＋＋
十＋＋＋＋＋＋＋
＋ｔ＋
野菊花扁蓄
蒲公萸半边莲
＋＋＋＋＋＋＋＋＋
＋十十＋
一
一
＋＋十＋
＋＋＋＋
＋＋＋
＿＿＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋十
＋＋＋
＋＋＋＋＋十十＋＋＋＋＋＋＋士＋＋＋＿＿＋
莱菔子槐花
仙鹤草＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋十
＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋
＋＋＋＋
一
＋＋
＋＋牟＋＋＋＋
＋＋＋＋
＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋
＋十十＋
一＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋十
十＋＋＋＋＋＋＋
十＋＋＋
＋十十＋＋＋十＋＋＋＋＋
＋｝＋＋
十＋＋十
鹅不食草穿心莲
茜草浮萍
＋＋＋＋＋＋
＋＋十＋
十十＋＋＿＿＋＋＋
＋＋＋＋
＋＋＋十＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋
一
＋＋＋一＋＋＋＋
＋十＋
夜交藤
生卷柏草乌头
一
＋＋卞＋
＋＋＋十
地骨皮忍冬藤鹤虱椿白皮
牵牛子皂刺革群骨碎补老鹳草
＋十＋＋＋＋＋
一＋＋＋＋十十＋＋＋＋＋＋
一十＋＋＋
＋＋＋＋
八角茴香。＋＋＋淫羊藿风尾草
干漆
＋＋十＋十＋＋＋＋＋＋＋＋十＋＋
＋十＋十
＋＋十十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋十＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋
＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋十
十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋十十
一＋＋＋＋
一
一
一
＋＋＋＋＋＋＋＋
＋十＋
＋＋＋＋
＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋
＋＋＋＋＋＋＋十＋＋＋＋’十＋＋＋十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋
十＋＋＋
＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋十十＋＋＋十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋
＋十＋十
＋十＋＋
＋＋＋＋
＋＋＋＋
＋十＋＋＋＋＋＋
＋＋十＋
＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋
＋＋＋＋
一
＋＋＋＋
＋＋＋
＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋十＋＋
＋十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋
十十十十
＋＋＋一
＋＋＋十
＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋十＋＋＋＋
＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋
＋＋＋＋
一
＋＋＋＋
＋＋＋＋
＋＋＋十十十十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋十＋＋上＋＋
＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋＋＋＋＋十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋
一
＋＋士＋
＋＋十＋
＋＋＋
一
一一
一
＋＋上＋
＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋
一
一＋＋
＋＋＋十
＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋
＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋牟＋
木鳖子火麻仁急性子
紫苑
十＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋十
一
＋＋
＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋
＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋十十＋＋十＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋十
十十＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋＋＋
＋＋十
十＋十＋＋＋＋＋
＋＋＋＋＋＋＋十
＋＋十十
＋＋十＋
一
＋＋＋＋＋十＋＋＋＋＋＋
一
＋＋十十
益母草半夏
附子
＋十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋
＋十十十
＋十＋十＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋
一一
＋＋＋＋＋＋
十＋＋＋
＋＋＋＋＋＋
＋＋＋
十十＋＋＋＋＋
一
＋十＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋
＋＋＋＋
＋＋＋＋
一
＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋
一
＋＋＋＋
＋＋＋＋＋＋＋＋
十＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋
十＋＋＋
＋＋＋＋＋＋＋＋Ｊ＿＋＋＋
＋＋＋＋
＋＋＋＋
＋＋＋＋＋十＋＋＋＋＋＋
十
十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋
＋十十＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋十十＋＋＋＋＋
＋＋＋＋十十十十
高良姜山楂土槿皮苦参＋虻床子
一
＋＋＋＋十＋＋＋＋４－４－＋
一
＋＋一＋＋＋＋
一
＋＋＋＋
一
＋＋＋＋＋＋＋
一
＋
荆芥＋生地＋＋＋＋
＋＋＋＋＋＋
ｑ－＋十＋
一
＋＋４－＋
＋＋
十＋＋＋＋＋＋＋
＋＋＋＋＋十十
十＋＋十
■寸＋＋＋
＋＋＋＋
芝吐±壹翅座±±±＝
±————二二上±————二±ｉ二±一
注：“一”菌完全无生长；“＋”磕发育迟缓．形成的菌落较小｛“十＋”菌发育不旺盛；“＋＋４－”菌发育较旺盛ｔ但菌落比正常较小｛
±±±±
±±±±±±±±±±±±±±±±
十＋十一Ｌ
－＋＋＋＋”苗发育迅速旺盛。设屯的溶煤对照不抑制菌的生长｛以上结果为三次结果平均。
本试验中共对１６４种单昧药和３个小复方（苦参＋蛇床；艾叶＋海桐皮；荆芥＋生地）的乙醇提取物进行了３种真菌的抗菌活性试验。对一种或几种
真菌具有较强抑制作用的药物有：牡丹皮，土槿皮，知母，高良姜，黄连，丁香，肉桂，黄柏，黄芩，菖蒲，桂枝，五倍子，肉豆蔻．防己，地骨皮，青木香，草薜．木
‘４６。
中草药ＣｈｉｎｅｓｅＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌａｎｄＨｅｒｂａｌＤｒｕｇｓ２００２年第３３卷第１期
香，徐长卿，丹参，鹤虱，急性子。
在１ｍｇ／ｍＬ浓度，牡丹皮，土槿皮对３种真菌
３讨论
本实验应用体外半固体药基法筛选抗真菌中药，该方法简便经济，是很便捷的初步筛选方法。抗真菌药物筛选试验结果受外界的影响因素复杂，例如，药物的种类，制备方法，药物浓度．溶媒的选择＋试验菌的种类，菌种成熟的程度，菌孢子的浓度，培养的温度及时间等…。并且体外实验结果与临床应用效果尚有差异。因此，本实验结果仅仅是在一定条均有抑制作用。对白色念珠茵有抑制作用的有黄连，丁香，肉桂，知母，高良姜，桂枝，五倍子；对威克海姆原藻有抑制作用的有黄连，丁香，肉桂，肉豆蔻，青木香，菖蒲，防己，地骨皮，革薜｝对ＧＬ一７有抑制作用的有知母，高良姜．青木香，革蒋，木香。
２．３．２微量稀释法测定药敏试验：９６孔细胞培养板紫外线照射３０ｍｉｎ后，于每板第１排各孔（１２孔）内分别加入培养基１８０ｐＬ，第儿孔为阴性对照．１２孔为阳性对照；系列稀释浓度的待测药液１０
儿依次加入相应药液于各孔中，阴性对照中加２０
“Ｉ．，加人制备的真菌溶液１０ｐＬ（阴性对照孔不加），使最终菌量为０．５×１０３～２．５ｘ１０３ｃｆｕ／ｍＬ，振荡５ｍｉｎ使各液充分混匀，３５‘Ｃ温箱培养（湿盒内保持液量）４８ｈ观察。未见菌生长的最低浓度为最低抑菌浓度（ＭＩＣ），见表２。
２５个单体化合物中只有紫草素对酵母ＧＬ７有特异性抑制作用，最低抑菌浓度为３．１３ｐｇ／ｍＬ，柠檬醛对威克海姆原藻和啤酒酵母ＧＩ，一７的最低抑菌
浓度为２５０ｇｇ／ｍＬ，其他成分与对照药两性霉素Ｂ
相比，无明显的抗菌活性。
表２微量稀释法药物抗真菌敬感性试验（ＭＩＣ：ｌａｇ／ｍＬ）
件下药物与真菌作用的结果，它的阴性结果只说明在本实验条件下无作用，而阳性结果必须是在低浓度下有明显作用的。在抑菌作用的估价中，我们不重视大于“＋＋”的抑菌结果。
本实验中中药种类较多，为求方法上的一致性。只应用中药的乙醇提取物，而未做其它提取方法的对比。由于提取溶剂不同使某些中药抑菌结果与其它报道有显著差异。例如，文献中黄连的１０％水煎剂对白色念珠菌无作用，血竭的水煎剂对白色念珠菌有一定的抑制作用“Ｊ，而本实验结果显示黄连的乙醇提取物在１ｍｇ／ｍｌ，浓度对白色念珠菌有抑制作用，而血竭的醇提物作用不明显。曹仁烈报道土槿皮水提液无抑菌作用ｏ］，而本实验中土槿皮乙醇提取物却显示强的抗真菌作用。说明提取溶剂不同．提取出的有效成分不同，体现的药效就不同。
同一种药物对不同菌株作用也不同，其中除牡丹皮，土槿皮对３种菌均有作用外，其它药物只对其中的一种或两种菌有作用，提示作用靶点可能不同。
很多报道挥发油是抗真菌有效部位，例如肉桂。
丁香，珊瑚姜等”…Ｊ。本试验在药物提取过程中，未
单独分离提取挥发油，并且在提取物的真空干燥过程中，挥发性物质含量会受影响，也可能是影响药效
的原因之一。
我们选取有效中药的主要单体成分作抑菌实验。与两性霉素Ｂ相比，结果均不理想。肉桂醛的最低抑菌浓度与报道基本相同－…，丁香酚未表现出强的抗真菌作用，与宋军的结果有明显差异ｏ］。紫草素对酵母ＧＬ一７有特异性抑制作用，最低抑菌浓度为
３．１
３／＊ｇ／ｍＬ，值得进一步研究。
本实验选用的临床常用的３个两味药组成的小
菌作用不及单味药强“］。因为中药的抗真菌有效成复方，未表现出明显的抑菌作用。曹松年等研究巾药复方的水煎剂对皮肤癣菌抑制作用，认为复方的抑分与机制的多样性，复方的研究就更为复杂。还有报道复方并不是通过直接抑菌而起作用，可能是通过增强肌体免疫力而抗真菌“～。尚有待进一步探讨。
中草药ＣｈｉｎｅｓｅＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌａｎｄＨｅｒｂａｌ
Ｄｒｕｇｓ
２００２年第３３卷第１期
・４７・
由于中药粗提物中含有多种化学成分，成分与药理作用复杂，并且受多种因素影响。目前的研究大多处于初步阶段，筛选抗菌谱，通过扫描，透射电镜观察形态变化，缺乏对于作用机制与毒性的进一步探讨，难以开发出有效的抗真菌药物，并指导临床用药。作用机制的阐述，毒性研究需作大量的工作。因此，今后的工作重点应是一方面从已发现的具有抗真菌的中药中活性追踪提取有效成分，进而对有效成分进行抗真菌机制研究；另一方面，可以针对高效低毒作用机制，设计选择性作用靶点减少用药量，进行高通量筛选化合物或先导化合物，建立相关生物信息库，为合成新的抗真菌药物奠定基础。
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龙胆苦苷的保肝作用研究
刘占文，陈长勋＋．金若敏，史国庆，宋纯清，胡之璧
（上海中医药大学，上海２０００３２）
摘要：目的研究－ｇ龙胆苦苷的肝保护作用及与龙胆草药理作用的一致性。方法给动物ｉｇ给药，用ＣＣＩ；、Ｄ—ＧＩａＮ造急性肝损伤模型，测定小鼠血清ＡＬＴ、ＡＳＴ及肝组织中谷胱甘肽过氧化物酶古量，采用麻醉大鼠．测定胆汁分泌量及胆汁成分。结果ｉｇ龙胆苦苷后能明显降低ＣＣｌ。急性肝损伤小鼠血清ＡＬＴ，ＡＳＴ水平及增加肝组织中谷胱甘肽过氧化物酶活力，大鼠胆流量明显增加，胆汁中胆红素浓度提高。结论龙胆苦苷具有明显肝保护作用。
关键词：尤胆苦苷；保肝；利胆中圈分类号：Ｒ２８６．５５
文献标识码：Ａ
文章编号：０２５３
２６７０（２００２）０１—００４７～０４
Ｓｔｕｄｉｅｓ
ｏｎ
ｌｉｖｅｒ—ｐｒｏｔｅｃｔｉＯｎａｎｄｐｒｏｍｏｔｉｎｇｂｉｌｅｓｅｃｒｅｔｉｏｎ０ｆｇｅｎ“０ｐｉｃｒＯｓｉｄｅ
Ｌ１ＵＺｈａｎ—ｗｅｎ，ＣＨＥＮＣｈａｎｇ—ｘｕｎ，ＪＩＮＲｕｏ—ｒａｉｎ，ＳＨＩＧｕｏ—ｑｉｎｇ，ＳＯＮＧＣｈｕｎ—ｑｉｎｇ，ＨＵＺｈｉ—ｂｉ
（ＳｈａｎｇｈａｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴＣＭ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２０００３２，Ｃｈｉｎａ）
Ｔｏｓｔｕｄｙｔｈｅｌｉｖｅｒ—ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎａｎｄｂｉｌｅｐｒｏｍｏｔｉｎｇｓｅｃｒｅｔｉｏｎｏｆｇｅｎｔｉｏｐｉｃｒｏｓｉｄｅａｄ—Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔ
ｍｉｎｉｓｔｒａｔｅｄｉｇｉｎｒａｔ．ＭｅｔｈｏｄｓＧｅｎｔｉｏＤｉｃｒｏｓｉｄｅｗａｓａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｅｄｉｇｔＯｔｈｅｍｉｃｅｗｉｔｈｌｉｖｅｒｉｎｊｕｒｙｉｎｄｕｃｅｄｂｙＣＣｌ。ａｎｄＤ—ＧｌａＮ．Ａｌ，Ｔ，ＡＳＴｌｅｖｅｌｓｉｎｓｅｒｕｍａｎｄＧＳＨ—Ｐｘａｃｔｉｖｉｔｙ
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ａｆｔｅｒｉｇａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎｏｆｇｅｎ—
ｔｉｏｐｉｃｒｏｓｉｄｅｗｅｒｅｅｓｔｉｍａｔｅｄ．ＲｅｓｕｌｔｓＧｅｎｔｉｏＤｉｃｒｏｓｉｄｅａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｅｄｉｇｄｅｃｒｅａｓｅｄｔｈｅｓｅｒｕｍＡＩ。ＴａｎｄＡＳＴ
ｌｅｖｅｌｓ．ｉｎｃｒｅａｓｅｄｔｈｅ１ｉｖｅｒＧＳＨＰｘａｃｔｉｖｉｔｙｉｎｔｈｅｍｉｃｅｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈＣＣＩ。，ｐｒｏｍｏｔｅｄｔｈｅｓｅｃｒｅｔｉｏｎｏｆｂｉｌｅａｎｄｉｎｃｒｅａｓｅｄｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆｂｉｌｉｒｕｂｉｎｉｎｔｈｅｂｉｌｅ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｈｉｂｉｔｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｉｖｅｒｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎａｎｄｐｒｏｍｏｔｉｎｇｂｉｌｅｓｅｃｒｅｔｉｏｎ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｇｅｎｔｉｏｐｉｃｒｏｓｉｄｅ；ｌｉｖｅｒｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ；ｐｒｏｍｏｔｉｎｇｂｉｌｅｓｅｃｒｅｔｉｏｎ
Ｇｅｎｔｉｏｐｉｃｒｏｓｉｄｅａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｅｄｉｇ
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收稿日期：２００１—０６—１
２
ｌ妻磊异：易喜毂焉；銎荠雾罴慧署藩墓霎曼蓦薹弗！翥辩嚣蠢’；冀？盖车篙；：翟莽凳学医学专业．学士．，。。。年毕业于上海中医药本
学，药理学硬上。目前为上海同仁医院药剂科主管中药师。主要研究方向为中药药理学ｆ肝胆方面）。Ｔｅｌ６２８２４２５９药剂科
ｒ
＊通讯联系人
164种中药乙醇提取物抗真菌作用研究
作者：作者单位：刊名：英文刊名：年，卷(期)：被引用次数：
宫毓静， 安汝国， 虞慧， 王理达， 郑俊华， 果德安
宫毓静,虞慧,王理达,郑俊华,果德安(北京大学药学院,中医药现代研究中心,北京,100083)， 安汝国(吉林大学生物工程研究所,吉林,长春,130021)中草药
CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS2002,33(1)85次
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