基因超量表达在分子植物病理学中的应用
植物和病原物互作过程中涉及一系列的分子事件发生，包括分子识别、分子互作、信号传导以及最后的致病及其相关基因和抗病及其相关基因的诱导和表达等。为了研究需要常常要分步选取单个基因为目标进行功能研究，研究的基本思路就是放大或缩小该基因的表达量以便从对植物表形等性状的影响和变化中获得其功能等信息；另一方面为了获得良好的抗病效果抗病基因工程中也要超量表达某抗病或抗病相关基因，因此基因的超量表达（Over expression）属于基因功能研究和应用的基本方法之一。
基因的超量表达主要包括两个关键步骤：首先是超量双元表达载体的构建， 其次是超量表达的实现，即通过转基因手段使目的基因在转化植株中的超量表达。超量表达过程可能达不到预料的结果，这主要和所使用的表达载体、组成型表达启动子，以及转基因途径等因素有关。从目前超量表达的相关研究分析，造成表达量低的原因主要是目的基因的稳定性差、启动子活性高低、位置效应严重等，而解决策略主要从优化表达载体，如启动子的串连使用（如4×35s ）、增加位点控制序列区（locus control region ,LCD）、使用提高表达的非翻译序列（如烟草的osmotin UTR）等方面进行。以下以超量表达Peroxygenase （POG ）基因的试验为例作以说明。
一．材料：
pCAMBIA1301载体，POG cDNA ，4×35s 启动子，必要的工具酶等；水稻愈伤组织作为转化受体。
二．方法与步骤
1．双元表达载体的构建
2．农杆菌介导的水稻转化
基因超量表达在分子植物病理学中的应用
植物和病原物互作过程中涉及一系列的分子事件发生，包括分子识别、分子互作、信号传导以及最后的致病及其相关基因和抗病及其相关基因的诱导和表达等。为了研究需要常常要分步选取单个基因为目标进行功能研究，研究的基本思路就是放大或缩小该基因的表达量以便从对植物表形等性状的影响和变化中获得其功能等信息；另一方面为了获得良好的抗病效果抗病基因工程中也要超量表达某抗病或抗病相关基因，因此基因的超量表达（Over expression）属于基因功能研究和应用的基本方法之一。
基因的超量表达主要包括两个关键步骤：首先是超量双元表达载体的构建， 其次是超量表达的实现，即通过转基因手段使目的基因在转化植株中的超量表达。超量表达过程可能达不到预料的结果，这主要和所使用的表达载体、组成型表达启动子，以及转基因途径等因素有关。从目前超量表达的相关研究分析，造成表达量低的原因主要是目的基因的稳定性差、启动子活性高低、位置效应严重等，而解决策略主要从优化表达载体，如启动子的串连使用（如4×35s ）、增加位点控制序列区（locus control region ,LCD）、使用提高表达的非翻译序列（如烟草的osmotin UTR）等方面进行。以下以超量表达Peroxygenase （POG ）基因的试验为例作以说明。
一．材料：
pCAMBIA1301载体，POG cDNA ，4×35s 启动子，必要的工具酶等；水稻愈伤组织作为转化受体。
二．方法与步骤
1．双元表达载体的构建
2．农杆菌介导的水稻转化