双水相萃取牛血清蛋白

数据记录

表1 PEG2000-硫酸铵双水相体系相图的制作表

实验现象记录

图1 取的三个成相比例的成相试管图

图2 分别拍照的试管其中之一近图

图3 余下两支试管

图4 一个成相比例的试管取上下相溶液各1ml后加入双缩脲试剂图

实验结果处理

由标准曲线得吸光度和蛋白质浓度关系为y=0.2321x+0.0089(其中y代表吸光度，x代表蛋白质浓度)由此可得下表：

表2 样品吸光度和蛋白质含量

根据实验所得数据，计算系统的相比，蛋白在不同双水相系统中的分配系数及收率。计算公式如下：表观分配系数 K=Ct/Cb 相比 R=Vt/Vb

收率 P=下相蛋白含量/上下相蛋白总含量=Vt*Ct/(Vt*Ct+Vb*Cb)=R*K/(1+R*K) 式中 Ct、Cb分别为上下相蛋白浓度；Vt、Vb分别为上下相体积。

表3 样品蛋白在不同双水相系统中的分配系数及收率

分析讨论

一、相图制备中误差

1、在滴定硫酸铵前，滴定管已经清洗干净，但是没有用蒸馏水试漏，也没有用滴定液润洗，这在一定程度上稀释了滴定液，在滴定过程中也没有办法较好地控制活塞，以控制滴定量。而且用滴定液润洗还可以将气泡排除，这点也没有做好，这些都是可能的误差来源。

2、滴定过程中，接近滴定终点时没有一滴一滴地加，加入几滴之后才摇晃试管的，这样，可能出现浑浊的点已经过了终点，数据产生误差。而且读数也有误差，只由一位同学读数，使误差增大。二、分离过程中误差

1、相图绘制出之后，需取三个成相比例。因为相图绘制有误差，在取点时也是取的大概位置，这使得之后计算出的PEG2000和硫酸铵的质量也是大概数值，这对之后对蛋白质的萃取有影响。

2、在测上下相体积时，有的试管上下相体积相差比较大，下相体积很小，因此体积测量可能存在误差。