胡利静等 １０种药物材料对铜绿微囊藻的抑制作用
１０种药物材料对铜绿微囊藻的抑制作用＊
胡利静 肖艳翼 刘腾飞 吴映捷 胡 鲲 杨先乐＃
）（上海海洋大学水产与生命学院，国家水生动物病原库，上海２０１３０６
确定其最佳的抑藻浓度，采用叶绿素ａ检测法来确定铜绿微囊藻的生物 摘要 为筛选抑制铜绿微囊藻生长的有效药物材料，
并采用二倍稀释法对筛选出的８种药物材料进行了最佳抑藻浓度的测定。量，从而对１０种药物材料的作用效果进行了定性研究，大黄、黄连、土槿皮、蜜桔皮、马水桔皮、蜜柚皮、铁观音、大蒜等药物材料能有效抑制铜绿微囊藻的生长；大麦茶、仙鹤草不能抑制铜／／铁观音、马水桔皮水提液质量浓度大于３．大黄浸提液质绿微囊藻的生长。当蜜桔皮、蜜柚皮水提液质量浓度大于６．２５ｇＬ，１３ｇＬ，／／土槿皮、量浓度大于５．黄连提取物浸提液质量浓度大于２．且随着各０００ｇＬ，５００ｇＬ时对铜绿微囊藻的生长具有有效的抑制作用，／浸提液浓度的增加，其抑制效果呈上升趋势；而大蒜液质量浓度大于５．０００ｇＬ时能使铜绿微囊藻维持在初始水平。将各材料抑藻浓度设定在以上浓度时较为合理。研究结果为水产养殖治理蓝藻以及控制蓝藻药物进一步的研发提供了参考。
关键词 药物 铜绿微囊藻 抑制作用：／ＯＩ１０．１５９８５．ｃｎｋｉ．１００１８６５．２０１６．０７．００９３ Ｄ－ｊ
Ｔｈｅｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆ１０ｋｉｎｄｓｏｆｄｒｕｍａｔｅｒｉａｌｓｏｎＭａＬＸＹＬＴＷＵｉｃｒｏｃｓｔｉｓｅｒｕｉｎｏｓａ ＨＵ ｉｉｎＩＡＯ ａｎｉ，ＩＵ ｅｎｅｉ， ｙｇｊｇ，ｙｇｆｇ （ＨＵ ＫＹＸＣｏＦａＬＳＳＣＣｏＡｕＰＹｉｎｉｅ，ｕｎ，ＡＮＧ ｉａｎｌｅ．ｏｌｌｅｅｉｓｈｅｒｉｅｓｎｄ ｉｅｃｉｅｎｃｅｓ，ｔａｔｅｏｌｌｅｃｔｉｏｎ ｅｎｔｅｒａｔｉｃａｔｈｏ－ ｆ ｆ ｑｇｊｇｆ）ｅｎ，ｈａｎｈａｉｃｅａｎ ｎｉｖｅｒｓｉｔｈａｎｈａｉ０１３０６２ＳＯＵＳ ｇｇｙ，ｇ
：ＡｂｓｔｒａｃｔｍａｔｅｒｉａｌｓｆｏｒｉｎｈｉｂｉｔｉｎＩｔｗａｓａｉｍｅｄｔｏｓｃｒｅｅｎｅｆｆｅｃｔｉｖｅｄｒｕｉｃｒｏｃｓｔｉｓｅｒｕｉｎｏｓａｎｄｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅＭａａ ｇｇｙｇ ｏｎｅｏｆｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｔｈｅｏｔｉｍａｌｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ．ＴｈｅｂｉｏｍａｓｓｏｆｉｃｒｏｃｓｔｉｓｅｒｕｉｎｏｓａａｓｍｅａｓｕｒｅｄｕｓｉｎＭａｗ －ｐｇｙｇ ，，ｎＭｍａｔｅｒｉａｌｓｏｎｅｆｆｅｃｔｓｏｆ１０ｋｉｎｄｓｏｆｄｒｕｔｈｅｉｎｈｉｂｉｔｉｎａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｏｆａｌａｅｂｉｏｍａｓｓｃｈｌｏｒｏｈｌｌａｔｏｓｔｕｄｉｃｒｏ－ ｇｇｇｐｙｙ ａｃｓａｔｉｓｅｒｕｉｎｏｓａ，ｎｄｄｏｕｂｌｅｄｉｌｕｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｉｖｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｅｉｈｔｓｃｒｅｅｎｅｄ ｇｙｇ
，ｍａｔｅｒｉａｌｓ．ｋｉｎｄｓｏｆｄｒｕａｄｉｘｔｈｉｚｏｍａ ｈｅｉ，ｈｉｚｏｍａ ｏｔｉｄｉｓ，ｏｒｔｅｘ ｓｅｕｄｏｌａｒｉｃｉｓ，ａｎｅｒｉｎｅｅｅｌＭａｓｈｕｉＲｅＲＲＲＣＣＰＴ ｇｇｐｐ ，，ｏｒａｎｅｅｅｌＰｏｍｅｌｏｅｅｌＴｉｅｕａｎｉｎｔｅａａｎｄｌｌｉｕｍａｔｉｖｕｍｃｏｕｌｄｉｎｈｉｂｉｔｔｈｅｒｏｗｔｈｏｆｉｃｒｏｃｓｔｉｓｅｒｕｉｎｏｓａ，ＡｓＭａ ｇｐｐｇｙｇｙｇ，ｈｉｌｅｏｒｄｅｕｍｖｕｌａａｎｄｅｒｂａ ｉｍｏｎｉａｅｏｕｌｄｎｏｔ．ＷｈｅｎｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｏｆＴａｎｅｒｉｎｅｅｅｌＰｏｍｅｌｏｅｅｌａｎｄＭａｓｈｕｉｗＨＨＡｒｃ ｇｐｐｇｇ，ｏｒａｎｅｅｅｌａｎｄＴｉｅｕａｎｉｎｔｅａａｄｉｘｔｈｉｚｏｍａ ｈｅｉｎｄｏｒｔｅｘ ｓｅｕｄｏｌａｒｉｃｉｓ，ｈｉｚｏｍａ ｏｔｉｄｉｓｅｒｅｒｅａｔｅｒＲｅＲＲａＣＰＲＣｗ ｇｐｇｙｇｐ／Ｌ，ｉｔｈａｄａｓｉｎｉｆｉｃａｎｔｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｅｆｆｅｃｔｏｎｒｏｗｔｈｏｆｔｈａｎ６．２５，３．１３，５．０００，２．５００ｇａＭａｉｃｒｏｃｓｔｉｓｅｒｕｉｎｏｓａ，ｎｄｔｈｅｉｎ － ｇｇｙｇ；ｈｉｂｉｔｉｏｎｅｆｆｅｃｔｗａｓｍｏｒｅｒｏｎｏｕｎｃｅｄｗｉｔｈｔｈｅｉｎｃｒｅａｓｅｏｆｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆｅａｃｈｅｘｔｒａｃｔｗｈｅｎｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆ ｐ／ａｎｌｅｉｔｅｖｅｒｌｌｉｕｍａｔｉｖｕｍｗａｓｍｏｒｅｔｈａｎ５．０００ｇＬ，ｔｈｅａｌａｅｃｏｕｌｄｂｅｍａｉｎｔａｉｎｅｄａｔｔｈｅｉｎｉｔｉａｌｌｅｖｅｌ．ＣｏｎｓｉｄｅｒｉｎＡｓ ｙｇｇｇ ｗａｓｍｏｒｅｒｅａｓｏｎａｂｌｅｔｏｓｅｔｔｈｅａｂｏｖｅｃｏｎｔｒｏｌａｌａｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｗｅｒｅｂｅｎｅｆｉｃｉａｌｔｏｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｔｈｅｒｅ －ｇｆｕｒｔｈｅｒ．ｃａｎｏｂａｃｔｅｒｉａａｎｄｓｔｕｄｅａｒｃｈｏｆｃｏｎｔｒｏｌｌｉｎｓ ｙｙｇ
：；ＭＫｅｗｏｒｄｓｒｕｉｃｒｏｃｓｔｉｓｅｒｕｉｎｏｓａ；ｎｈｉｂｉｔｉｏｎｉａ ｄ ｇｙｇｙ
是单细胞原核生物，又叫蓝Ｃａｎｏｈｔａ） 蓝藻（ｙｐｙ
细菌、蓝绿菌或蓝绿藻，是一类藻类的总称，主要指、颤藻目（色球藻目（ＣＯｈｒｏｏｃｏｃｃａｌｅｓ）ｓｃｉｌｌａｔｏｒｉａ－、、念珠藻目（真枝藻目（ｌＮＳｅｓ）ｏｓｔｏｃａｌｅｓ）ｔｉｏｎｅｍａ）ｇ
可在营养丰富的淡水水体中出现。蓝藻中４个目，
有些种类常于夏季高温时大量繁殖，并在水面形成。蓝藻一层蓝绿色且有腥臭味的浮沫，称为“水华”、鱼水华的种类有很多，主要有微囊藻（Ｍｉｃｒｏｃｓｔｉｓ）ｙ、、腥藻（鞘颤藻（束丝藻（ＡＬｎｂａ）Ａｈ－ｎａｂａｅｎａ）ｙｇｙｐ
［１］
，、其中以产毒的颤藻（ａｏＯｎｉｚｍｅｎｏｎ）ｓｃｉｌｌａｔｏｒｉａ）
最为常见。铜铜绿微囊藻（Ｍａｉｃｒｏｃｓｔｉｓｅｒｕｉｎｏｓａ） ｙｇ
绿微囊藻大量繁殖时，水面会被厚厚的蓝绿色湖靛所覆盖，改变了水体的理化环境，降低了水体的透明
２］
，影响鱼虾等水生动物的正常生长；度［水体中营养
物质被耗尽时，铜绿微囊藻开始大量死亡，藻细胞破解，使水体散发腥臭味，溶解氧减少，造成鱼虾等水生动物的死亡，所以池塘养殖水体中过量的铜绿微囊藻威胁着水产养殖业的健康发展，因此研发绿色
＃通讯作者。第一作者：胡利静，女，硕士研究生，研究方向为水产动物医学。９８９年生，１
））（；。上海高校知识服务平台建设项目（资助项目“鱼虾用疫苗与药物研究开发”６３计划”ｏ．２０１１ＡＡ１０Ａ２１６ｏ．ＺＦ１２０６ＮＮ８＊国家“
·４９·
８卷 第７期 ２０１６年７月 环境污染与防治 第３
环保的抑藻药物势在必行。
目前水产养殖中蓝藻的除杀多采用人工或机械
打捞、化学药物杀藻等方法。人工或机械打捞的方法虽见效快，但劳动强度大、操作困难、耗时、效率低而且费用高，因此实际生产中以化学药物抑藻方法为主。水产养殖中常用的化学抑藻药物为硫酸铜，但硫酸铜的大量使用和使用次数的增加常会使重金属在养殖水域中积累，引发二次污染，并影响水生生物生长等。因此，寻求经济、安全、环保、有效的抑藻药物，对水产养殖业的健康发展具有重要的意义。本研究从药食两用的植物及常见的中草药中选择了对铜绿微囊藻进行抑制效果筛选试０种药物材料，１验，并对初筛药物的有效剂量进行测定，以期为开发绿色环保的抑藻药物提供一定的技术指导。１ 材料与方法１ 材料和仪器１．１．１ 供试藻种１．
铜绿微囊藻藻种购买于中国科学院野生生物种。——淡水藻种库，质库—编号为Ｆ４ＡＣＨＢ３４－１．１．２ 抑藻材料
蜜桔、马水桔、蜜柚、大蒜从市场上购得；铁观音、大麦茶购于商店；仙鹤草、大黄、土槿皮提取物、黄连提取物等购于药店。１．３ 主要仪器１．
２２智能型光照培养箱；Ｃ５０ＢＰＹ７３０分ＤＵＭＧ－－
）；光光度计（美国Ｂ１ｅｃｋｍａｎｌｌｅｒａＸ５Ｒ低速冷冻Ａ－ ｇ）。离心机（美国Ｂｅｃｋｍａｎ
２ 培养基组分及培养条件１．
铜绿微囊藻的培养按淡水藻种库提供配方，采温度（用ＢＧ１１培养基培养。培养条件为：５．０±２）℃，，光照强度３光暗比１每天０．５００ｌｘ２ｈ∶１２ｈ，０ 摇动３～５次。
３ 浸提液制备方法１．
蜜桔皮、马水桔皮、蜜柚皮水提液的制备参考文］献［的提取方法，自来水冲洗柑橘皮表面灰尘，将３柑橘皮切成小块，在烘箱中干燥。以桔皮（干质量，／／去离子水为０．下同）用去离子水在０５ｋＬ的比例，ｇ。４℃黑暗中浸提４ｄ
称取１加入１００ｇ去皮大蒜，００ 大蒜液制备：
搅拌成糜状后挤压得汁液，置于磨口ｍＬ去离子水，
／试剂瓶中，室温保存，大蒜质量浓度为１ｋＬ。ｇ大麦茶浸提液制备：称取铁观音、大麦 铁观音、
，煮沸１重复一次，茶２ｇ加去离子水２０ｍＬ，０ｍｉｎ，·５０·
使茶液合并两次茶液并用去离子水定容至２０ｍＬ，／的最终质量浓度为１００ｇＬ作为试验原液，４℃保存备用。
大黄浸提液制备参考文献［的提取方４］ 仙鹤草、
／法，按药物／蒸馏水为０．１０ｋＬ的比例分别将两种ｇ药物加入盛一定量蒸馏水的烧杯中，置于电炉上煮沸浸提，煮沸２定容，使药液质量０ｍｉｎ后滤出药液，／浓度为１００ｇＬ作为试验原液，４℃保存备用。黄连提取物浸提液制备：按药 土槿皮提取物、
／物／蒸馏水为０．０５ｋＬ的比例分别将两种药物加入ｇ盛一定量蒸馏水的烧杯中，煮沸１定０ｍｉｎ后过滤，／容，使药液质量浓度为５０ｇＬ作为试验原液，４℃保存备用。４ 试验方法１．
４．１ 筛选试验１．
将铜绿微囊藻在ＢＧ１１培养基下预培养１０～１５，使其处于对数生长期，作为接种的藻种。在无菌ｄ
条件下，在２５０ｍＬ的锥形瓶中各加入２０ｍＬ藻液，／并分别加入一定量初始叶绿素ａ为０．３４０６μｍＬ， ｇ
的浸提液，最后加入无菌培养基，使培养液总体积为马水桔皮、蜜柚皮水提液００ｍＬ。最终使蜜桔皮、１
／大蒜液和铁观音、质量浓度均为６．大麦茶、２５ｇＬ，／土仙鹤草、大黄浸提液的质量浓度均为５．０００ｇＬ，槿皮提取物、黄连提取物浸提液的质量浓度均为／并设空白对照组。５００ｇＬ。每组３个平行，２．４．２ 有效药物最佳抑藻浓度确定１．
根据筛选结果，采用二倍稀释法将有效药物的母液依次倍数稀释，查看抑藻效果，确定药物的最佳抑藻浓度。每组３个平行，并设空白对照组。４．３ 测定指标１．
由于活体藻类中叶绿素ａ的含量较高，而在死亡藻体、浮游动物及其他无机漂浮物中叶绿素ａ的含量较低，因此把叶绿素ａ含量的测定作为测量藻
５］
。类生物量的重要指标［
］参考文献［的测定方法，即取３６ 叶绿素ａ测定：／弃去上清００ｒｍｉｎ下离心１０ｍｉｎ，３５ｍＬ培养液， 体积分数）液，然后加入等体积９甲醇，混合０％的（均匀。将混匀的溶液放置在４℃黑暗条件下萃取／然后３取上清００ｒｍｉｎ下再离心１０ｍｉｎ，６～８ｈ，５
液，用分光光度计测定其在６６５ｎｍ处的吸光度
７］
，（为：并计算叶绿素ａ的含量，计算公式［ＯＤ６６５）
（）１ｃ＝１３．９×ＯＤ６６５
／式中：ｃ为叶绿素ａ质量浓度，ｍＬ。ｇμ
胡利静等 １０种药物材料对铜绿微囊藻的抑制作用
）
表１ １０种材料对铜绿微囊藻生长的抑制率１
ＴＭ．ａａｂｌｅ１ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｒａｔｅｏｆ１０ｋｉｎｄｓｍａｔｅｒｉａｌｏｎｅｒｕｉｎｏｓａ ｙｇ
％
４ｄ
５ｄ
ｃ
ｂ
９６．３８±０．６５ａ１００．００±０ｂ９６．３８±０．６５ｇ５８．５３±０．８７ｆ６１．４６±０．８５ｉ１５．１２±１．３３ｈ２８．２９±１．３０ｅ７１．７０±０．８１ｄ８５．３７±０．１０ｃ８９．２７±０．７３
材料蜜桔皮马水桔皮蜜柚皮大蒜铁观音大麦茶仙鹤草大黄土槿皮提取物黄连提取物
０ｄ８４±０．３６－８．
ｃｂ
ａ
０３±４．２９３．ａ７８±３．９３２．
ｂ５１±６．２９－７．
ｃ ４．６５±５．１８－１
ｂ ９５±３．５０－４．ａ３３±０．２６７．
ｂ ３３±０．２６－７．
ｃｂ ８９±３．８９－９．
ｂ ９５±３．５０－４．
１ｄ４５．１６±１．９４
ｂ
ｂａ
５０．００±１．９４ａ５６．４３±１．０１ｅ －１．８５±２．６２ｄ １４．４２±４．６９ｅ ５．３６±４．３０ｄ １４．４２±４．６９ｃ ２５．３４±４．４１ｃ ２５．４４±２．３５ｃ ２７．２９±０．６９
２ｄ６２．０６±２．５３
ｂ
ａ
７０．８９±１．６１ａ７０．８９±１．６１ｅ １２．０１±０．３９ｄ ３５．９３±２．０９ｆ ６．６２±１．７４ｅ １４．５８±３．３０ｃ ５０．５６±３．４３ｃ ５０．６７±０．９４ｃ ４９．２８±２．５７
３ｄ７７．６０±１．０２
ｂ
ａ
９３．５９±１．１７ａ８９．５９±１．２６ｆ ２８．５４±２．５０ｅ ４８．９６±１．９２ｈ ８．１１±３．７４ｇ １５．３１±０．２２ｄ ５９．１９±１．２４ｃ ６６．２９±２．９５ｃ ６５．２８±１．９６
８８．６８±０．８０
ａ
９６．６７±０．９５ｂ ９３．３２±１．０５ｈ ４３．０６±１．８７ｇ ５４．０１±１．８４ｊ １５．３１±１．６６ｉ ２３．３３±２．５２ｆ ６７．１５±０．３４ｅ ７６．６３±１．１７ｄ ８０．３１±１．６２
１）相同字母的数据间没有显著差异，不同字母的数据间差异显著。 注：
１．５ 数据分析
各浸提液对铜绿微囊藻生长的抑制率计算公式为：
（）Ｉ１－Ｎ／Ｎ０）×１Ｒ＝（００％２
式中：ＩＮ为浸提液组藻的叶绿素ａＲ为抑制率，％；
／质量浓度，Ｎ０为对照组藻的叶绿素ａ质量ｍＬ；ｇμ／浓度，ｍＬ。ｇμ
ｘｃｅｌ２００３和ＩＢＭＳＰＳＳＳｔａｔｉｓｔｉｃｓ 所得数据用Ｅ
１９．０软件程序包进行统计分析。２ 结果与分析
１ １０种材料对铜绿微囊藻生长抑制率的影响２．
０种材料对铜绿微囊藻生长抑制率的影响如１表１所示。经统计分析可知，从１ｄ时的抑制率来看，蜜桔皮、蜜柚皮、马水桔皮对铜绿微囊藻生长的抑制率较大；大黄、土槿皮提取物、黄连提取物对铜绿微囊藻的抑制率次之，且３者之间无显著差异；大蒜、大麦茶对铜绿微囊藻的抑制率最低。从２ｄ的抑制率来看，３种柑橘皮对铜绿微囊藻的抑制率依然较高，且明显高于其他７种材料对铜绿微囊藻的抑制率；大黄、土槿皮提取物、黄连提取物对铜绿微囊藻的抑制率次之；仙鹤草、大蒜、大麦茶对铜绿微囊藻的抑制率较低。从３～５ｄ的抑制情况看，大蒜对铜绿微囊藻的抑制率上升较快；仙鹤草、大麦茶对其的抑制率仍保持较低水平；其他材料抑藻率较大，且不同的材料间有不同的差异性。
２ １０种材料对铜绿微囊藻叶绿素ａ含量的影响２．
０种材料在不同时间内对铜绿微囊藻叶绿素ａ１质量浓度的影响如图１所示。铜绿微囊藻各处理组作用的时间对叶绿素ａ含量的回归方程如表２所示，其中ｙ为铜绿微囊藻的叶绿素ａ质量浓度，／。从图１及表ｘ为各处理组作用的时间，ｍＬ；ｄｇμ
蜜桔皮、马水桔皮、蜜柚皮、土槿皮提取２可以看出，
物、黄连提取物浸提液组中铜绿微囊藻的叶绿素ａ含量随着时间延长呈下降趋势，各组间下降的幅度略有不同，马水桔皮＞蜜桔皮＞蜜柚皮＞黄连提取物＞土槿皮提取物。大蒜、铁观音、大麦茶、仙鹤草、大黄的浸提液组及对照组中铜绿微囊藻的叶绿素ａ含量随着时间延长呈上升趋势，大蒜、铁观音、大黄的浸提液组上升幅度明显小于仙鹤草和大麦茶，且这些浸提液组中叶绿素ａ含量的上升幅度均低于对照组的上升幅度，但仙鹤草和大麦茶浸提液组叶绿素ａ含量的上升幅度与对照组相差不大。
表２ 铜绿微囊藻各处理组作用的时间对叶绿素ａ
含量的回归方程
ａｂｌｅ２ ＲｅｒｅｓｉｓｉｏｎｅｕａｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆＴ ｇｑｃｈｌｏｒｏｈｌｌａａｎｄａｃｔｉｏｎｔｉｍｅｆｏｒｅａｃｈｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｐｙ
ｏｆｒｏｕｅｒｕｉｎｏｓａＭ．ａ ｇｐｇ
对照组和浸提液组材料
对照组蜜桔皮大麦茶马水桔皮仙鹤草蜜柚皮大黄大蒜土槿皮提取物
铁观音黄连提取物
回归方程
２
ｘ＋０．ｒ＝０．１８４０４６，８９９ｙ＝０．
２
ｘ＋０．ｒ＝０．０２６１８４，９２７ｙ＝－０．
２ｘ＋０．ｒ＝０．１４１０９０，９０９ ｙ＝０．
２
ｘ＋０．ｒ＝０．０３０１５５，９１３ｙ＝－０．
２ｘ＋０．ｒ＝０．１１２１０５，９４６ｙ＝０．
２
ｘ＋０．ｒ＝０．０２３１４７，９４９ｙ＝－０．
２ｘ＋０．ｒ＝０．０１６１６９，５８９ｙ＝０．
２
ｘ＋０．ｒ＝０．０３６２１８，９７５ｙ＝０．
２ｘ＋０．ｒ＝０．０１２２００，８６６ｙ＝－０．
２
ｘ＋０．ｒ＝０．０３６１７４，８１７ｙ＝０．
２ｘ＋０．ｒ＝０．０２０２０７，９４２ｙ＝－０．
２．３ 有效材料抑藻最佳浓度的确定
各质量浓度蜜桔皮水提液对铜绿微囊藻叶绿素／其中０．Ｌ浓度３９、０．７８ｇａ的作用效果如图２所示，
组与对照组中铜绿微囊藻叶绿素ａ变化相似；５６１．／Ｌ浓度组的铜绿微囊藻叶绿素ａ的合成呈上升趋ｇ势，但与对照组相比上升幅度降低，说明该浓度组对铜绿微囊藻叶绿素ａ的合成具有一定的抑制能力；／１３ｇＬ浓度组使铜绿微囊藻的叶绿素ａ基本维持３．
·５１·
８卷 第７期 ２０１６年７月 环境污染与防治 第３
图１ １０种材料对铜绿微囊藻叶绿素ａ质量浓度的影响
Ｆｉ．１ Ｅｆｆｅｃｔｏｆ１０ｋｉｎｄｓｍａｔｅｒｉａｌｏｎｒｏｗｔｈｏｆｅｒｕｉｎｏｓ
ａＭ．ａ ｇｇｇ
图２ 蜜桔皮对铜绿微囊藻生长的影响
Ｍ．ａｉ．２ ＥｆｆｅｃｔｏｆＴａｎｅｒｉｎｅｅｅｌｏｎｒｏｗｔｈｏｆｅｒｕｉｎｏｓａＦ ｇｇｐｇｇ
／、、在初始值（状态；而６．３４０６μｍＬ）．２５１２．５０２５．０００ ｇ／Ｌ浓度组能明显抑制铜绿微囊藻叶绿素ａ的合成。ｇ
马水桔皮水提液质量浓度为１．５６ 如图３所示，
／Ｌ时铜绿微囊藻的叶绿素ａ能基本维持在初始值ｇ
／状态，当小于１．Ｌ时对铜绿微囊藻叶绿素ａ的５６ｇ／合成抑制率减弱甚至促进其合成，当大于１．Ｌ５６ｇ时能抑制铜绿微囊藻叶绿素ａ的合成。
／蜜柚皮水提液０．７８、１．５６ｇＬ浓度 如图４所示，
／组的叶绿素ａ与初始值相比略有增长，而３．１３ｇＬ／浓度组与初始值相比略有下降，３９ｇＬ浓度组的０．叶绿素ａ反而超过了对照组的叶绿素ａ含量，而大／于３．１３ｇＬ的各浓度组均对铜绿微囊藻的叶绿素ａ
合成具有抑制作用
。·５２·
图３ 马水桔皮对铜绿微囊藻生长影响
ｉ．３ ＥｆｆｅｃｔｏｆＭａｓｈｕｉｏｒａｎｅｅｅｌｏｎｒｏｗｔｈＦ ｇｇｐｇ
Ｍ．ａｏｆｅｒｕｉｎｏｓ
ａ ｇ
图４ 蜜柚皮对铜绿微囊藻生长的影响
ｉ．４ ＥｆｆｅｃｔｏｆＰｏｍｅｌｏｅｅｌｏｎｒｏｗｔｈｏｆｅｒｕｉｎｏｓａＭ．ａＦ ｇｐｇｇ
大蒜液对铜绿微囊藻叶绿素ａ质量浓度的影响
胡利静等 １０种药物材料对铜绿微囊藻的抑制作用
／如图５所示。０．３１３ｇＬ浓度组对其叶绿素ａ的合成无抑制作用，其他各浓度组随着时间的延长叶绿素ａ含量总体呈增长趋势，但在同一个时间点其叶绿素ａ均低于对照组，且随着大蒜液浓度的增大叶／绿素ａ含量的增长幅度降低。当其大于５．０００ｇＬ
时，叶绿素ａ含量基本维持在初始水平
。
／于２．５００ｇＬ时两种材料均能有效抑制铜绿微囊藻
叶绿素ａ的合成，且大黄的抑制效果好于铁观音；当／／除大黄１．小于２．５００ｇ２５０ｇＬ时，Ｌ浓度组外其他浓度组中的叶绿素ａ含量与对照组的接近且均呈增／长趋势；大黄１．２５０ｇＬ浓度组叶绿素ａ含量虽有增长趋势，但明显低于对照组。图９所示，土槿皮、黄连提取物浸提液 如图８、
对铜绿微囊藻叶绿素ａ含量的影响相似。当大于／两种材料各浓度组中的叶绿素ａ均呈５００ｇＬ时，２．
下降趋势，且浓度越大其下降幅度越大；当小于／两种材料各浓度组中的叶绿素ａ均呈５００ｇＬ时，２．
上升趋势，且随着浓度降低其上升幅度增加，但各浓度组上升幅度均低于对照组
。
图５ 大蒜对铜绿微囊藻生长的影响
Ｍ．ａＦｉ．５ｆｆｅｃｔｏｆＡｌｌｉｕｍｓａｔｉｖｕｍｏｎｒｏｗｔｈｏｆｅｒｕｉｎｏｓａ Ｅ ｇｇｇ
图７分别为铁观音、大黄浸提液对铜绿微 图６、
／囊藻生长影响趋势图。在２．５００ｇＬ时两种材料均使铜绿微囊藻的叶绿素ａ维持在初始值附近；当
大
图８ 土槿皮提取物对铜绿微囊藻生长的影响
ｉ．８ Ｅｆｆｅｃｔｏｆｏｒｔｅｘ ｓｅｕｄｏｌａｒｉｃｉｓｎｒｏｗｔｈＣＰｏＦ ｇｇ
ｅｒｕｉｎｏｓ
ａｏｆＭ．ａ ｇ
图６ 铁观音对铜绿微囊藻生长的影响
Ｍ．ａｉ．６ｆｆｅｃｔｏｆＴｉｅｕａｎｉｎｔｅａｏｎｒｏｗｔｈｏｆｅｒｕｉｎｏｓ
ａＦ Ｅ ｇｇｙｇｇ
图９ 黄连提取物对铜绿微囊藻生长的影响
ｉ．９ Ｅｆｆｅｃｔｏｆｈｉｚｏｍａ ｏｔｉｄｉｓｎｒｏｗｔｈＲＣｏＦ ｇｇｐ
ｏｆｅｒｕｉｎｏｓａＭ．ａ ｇ
３ 讨 论
目前，防治淡水水华的发生不仅是环境领域的
８］
，也是淡水水产养殖业关注的焦点。随着抑热点［
］１９１－
、水生藻技术的发展，国内外研究者研究溶藻菌［］］１１１１２３４６－－
、陆生植物［等抑藻技术，植物［尤其是植物
图７ 大黄对铜绿微囊藻生长的影响
ｉ．７ Ｅｆｆｅｃｔｏｆａｄｉｘｔｈｉｚｏｍａ ｈｅｉｎｒｏｗｔｈＦｏＲｅＲＲ ｇｇ
ｏｆｅｒｕｉｎｏｓａＭ．ａ ｇ
化感作用因其具有经济、高效、绿色环保的特点，备
］１１７８－
。目前研究报道的具有抑受国内外学者亲睐［
·５３·
８卷 第７期 ２０１６年７月 环境污染与防治 第３
］１２９２－
，但利用水生植物藻作用的水生植物有很多种［
亚心形扁藻生长的影响，表明其对亚心形扁藻有一定的促进作用，且作用的最佳质量分数分别为
［３］
研究了３种５０％、０．７５％和１．００％。周银环等３１．
中草药对绿色巴夫藻生长及叶绿素ａ含量的影响，
直接抑制铜绿微囊藻的作用效果并不理想，可能因水生植物长期生长并适应了该特定的环境从而不再产生对铜绿微囊藻的生长具有抑制作用的代谢产
２３］
，也可能是其代谢产物长期在特定环境中抑藻物［
结果表明添加一定量的当归、桔梗能提高绿色巴夫藻的生长及叶绿素ａ含量。当归、桔梗属于营养性的药物材料，仙鹤草也属于该类材料，本试验中虽然并未出现促进铜绿微囊藻生长的作用效果，但其抑藻效果并不明显。土槿皮等具有杀菌、抗病毒的作用，本试验中其对铜绿微囊藻的生长具有抑制作用效果。因此，选择合适的抑藻材料对抑藻机制的研究及抑藻剂的研制非常重要。４ 结 论
（）从１０种材料中筛选出８种有效抑制铜绿１
微囊藻生长的材料：大黄、黄连、土槿皮、蜜桔皮、马水桔皮、蜜柚皮、铁观音、大蒜，且抑藻的作用效果能够持久。而大麦茶、仙鹤草不能有效抑制铜绿微囊藻的生长。
（）蜜桔皮等柑橘皮类水提液在低浓度时促进２
铜绿微囊藻的生长，具有低促高抑的作用效果。而黄连、土槿皮等药物材料在低浓度时抑制作用较弱。（）由于本试验中的药物材料浸提液本身具有３颜色，考虑到应用时对水质环境的影响，各材料抑藻／质量浓度如下：蜜桔皮、蜜柚皮水提液为６．２５ｇＬ；／铁观音、马水桔皮水提液为３．大黄浸提液及１３ｇＬ；／土槿皮、黄连提取物浸提液为大蒜液为５．０００ｇＬ；／５００ｇＬ。２．参考文献：
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２＋对栅藻和鱼腥藻增殖的影响［］李玉华，武佃卫，等．６Ｃｕ 李慧敏，
效果逐渐消亡。目前，关于药物材料对铜绿微囊藻
２４］
。控制的研究，主要集中在个别药物材料的研究［２５］
研究美人蕉种植水对铜绿微囊藻的抑如潘琦等［
制效应时发现，以蒸馏水培养３ｄ收集获得的美人蕉种植水对铜绿微囊藻的生长有明显的抑制作用，且推断美人蕉自身代谢产生的化感物质可有效抑制
２６］
／发现，铜绿微囊藻的正常生长。李娟等［０ｍＬ５ｇ
的Ｈ２Ｏ２能有效抑制铜绿微囊藻的生长，且对藻细胞
２７］发的生理指标等有很强的损伤效应。汪小雄等［
现，浸泡５ｄ的荔枝落叶能抑制铜绿微囊藻的生长，且随着时间延长，抑制效应下降。而对于药物材料
２８］
。因此，筛选方面的研究报道却较少［本试验选择
用其浸提液进行了对铜绿微了１０种陆生药物材料，囊藻生长抑制的研究，发现不同的药物材料浸提液对铜绿微囊藻生长表现出不同的抑制效果。具有较强抑藻作用的有蜜桔皮、马水桔皮、蜜柚皮、大黄、土槿皮、黄连，且２～５ｄ均可保持一定的抑藻率，说明这几种材料均有持久抑藻的作用效果；其次是铁观音、大蒜；而大麦茶和仙鹤草在试验期间其抑制率一可认为这两种材料对铜绿微囊藻生长直小于３０％，的影响作用不明显。另外，大蒜、大黄在前期抑制率较低，随着时间延长其抑制率增幅较大，可能是由于浸提液中的有效成分需要一定的活化时间后才能发挥抑藻效果；蜜桔等柑橘皮含有丰富的生物活性物
２３９］０］
，。柑橘、具有抗菌、质［抗病毒等作用［大蒜、铁
观音都是人们常用的食物及饮品，较之土槿皮、黄连更加方便易得，综上而言这几种材料有望作为抑藻剂的制备材料。
为了进一步了解有效抑藻材料的最佳抑藻浓度，本试验采用二倍稀释的方法对铜绿微囊藻进行抑制试验。柑橘皮类水提液对铜绿微囊藻有低促高抑的作用效果，这与梁宇斌等
［３１］
的研究结果类似，
脐橙皮提取液有低促高抑的作用效果，在质量浓度／而为１．６６ｇＬ时对铜绿微囊藻的生长有促进作用，
／在３．３１、６．６２ｇＬ时对其具有明显的抑制作用。本试验得到的具体结果与之略有不同，可能是由于柑橘种类不同或所产地区不同所致。不同种类的中草药材料对藻的影响可能起抑制作用，也可能起促进作用。刘东超等·５４·
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·５５·
胡利静等 １０种药物材料对铜绿微囊藻的抑制作用
１０种药物材料对铜绿微囊藻的抑制作用＊
胡利静 肖艳翼 刘腾飞 吴映捷 胡 鲲 杨先乐＃
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确定其最佳的抑藻浓度，采用叶绿素ａ检测法来确定铜绿微囊藻的生物 摘要 为筛选抑制铜绿微囊藻生长的有效药物材料，
并采用二倍稀释法对筛选出的８种药物材料进行了最佳抑藻浓度的测定。量，从而对１０种药物材料的作用效果进行了定性研究，大黄、黄连、土槿皮、蜜桔皮、马水桔皮、蜜柚皮、铁观音、大蒜等药物材料能有效抑制铜绿微囊藻的生长；大麦茶、仙鹤草不能抑制铜／／铁观音、马水桔皮水提液质量浓度大于３．大黄浸提液质绿微囊藻的生长。当蜜桔皮、蜜柚皮水提液质量浓度大于６．２５ｇＬ，１３ｇＬ，／／土槿皮、量浓度大于５．黄连提取物浸提液质量浓度大于２．且随着各０００ｇＬ，５００ｇＬ时对铜绿微囊藻的生长具有有效的抑制作用，／浸提液浓度的增加，其抑制效果呈上升趋势；而大蒜液质量浓度大于５．０００ｇＬ时能使铜绿微囊藻维持在初始水平。将各材料抑藻浓度设定在以上浓度时较为合理。研究结果为水产养殖治理蓝藻以及控制蓝藻药物进一步的研发提供了参考。
关键词 药物 铜绿微囊藻 抑制作用：／ＯＩ１０．１５９８５．ｃｎｋｉ．１００１８６５．２０１６．０７．００９３ Ｄ－ｊ
Ｔｈｅｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆ１０ｋｉｎｄｓｏｆｄｒｕｍａｔｅｒｉａｌｓｏｎＭａＬＸＹＬＴＷＵｉｃｒｏｃｓｔｉｓｅｒｕｉｎｏｓａ ＨＵ ｉｉｎＩＡＯ ａｎｉ，ＩＵ ｅｎｅｉ， ｙｇｊｇ，ｙｇｆｇ （ＨＵ ＫＹＸＣｏＦａＬＳＳＣＣｏＡｕＰＹｉｎｉｅ，ｕｎ，ＡＮＧ ｉａｎｌｅ．ｏｌｌｅｅｉｓｈｅｒｉｅｓｎｄ ｉｅｃｉｅｎｃｅｓ，ｔａｔｅｏｌｌｅｃｔｉｏｎ ｅｎｔｅｒａｔｉｃａｔｈｏ－ ｆ ｆ ｑｇｊｇｆ）ｅｎ，ｈａｎｈａｉｃｅａｎ ｎｉｖｅｒｓｉｔｈａｎｈａｉ０１３０６２ＳＯＵＳ ｇｇｙ，ｇ
：ＡｂｓｔｒａｃｔｍａｔｅｒｉａｌｓｆｏｒｉｎｈｉｂｉｔｉｎＩｔｗａｓａｉｍｅｄｔｏｓｃｒｅｅｎｅｆｆｅｃｔｉｖｅｄｒｕｉｃｒｏｃｓｔｉｓｅｒｕｉｎｏｓａｎｄｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅＭａａ ｇｇｙｇ ｏｎｅｏｆｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｔｈｅｏｔｉｍａｌｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ．ＴｈｅｂｉｏｍａｓｓｏｆｉｃｒｏｃｓｔｉｓｅｒｕｉｎｏｓａａｓｍｅａｓｕｒｅｄｕｓｉｎＭａｗ －ｐｇｙｇ ，，ｎＭｍａｔｅｒｉａｌｓｏｎｅｆｆｅｃｔｓｏｆ１０ｋｉｎｄｓｏｆｄｒｕｔｈｅｉｎｈｉｂｉｔｉｎａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｏｆａｌａｅｂｉｏｍａｓｓｃｈｌｏｒｏｈｌｌａｔｏｓｔｕｄｉｃｒｏ－ ｇｇｇｐｙｙ ａｃｓａｔｉｓｅｒｕｉｎｏｓａ，ｎｄｄｏｕｂｌｅｄｉｌｕｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｉｖｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｅｉｈｔｓｃｒｅｅｎｅｄ ｇｙｇ
，ｍａｔｅｒｉａｌｓ．ｋｉｎｄｓｏｆｄｒｕａｄｉｘｔｈｉｚｏｍａ ｈｅｉ，ｈｉｚｏｍａ ｏｔｉｄｉｓ，ｏｒｔｅｘ ｓｅｕｄｏｌａｒｉｃｉｓ，ａｎｅｒｉｎｅｅｅｌＭａｓｈｕｉＲｅＲＲＲＣＣＰＴ ｇｇｐｐ ，，ｏｒａｎｅｅｅｌＰｏｍｅｌｏｅｅｌＴｉｅｕａｎｉｎｔｅａａｎｄｌｌｉｕｍａｔｉｖｕｍｃｏｕｌｄｉｎｈｉｂｉｔｔｈｅｒｏｗｔｈｏｆｉｃｒｏｃｓｔｉｓｅｒｕｉｎｏｓａ，ＡｓＭａ ｇｐｐｇｙｇｙｇ，ｈｉｌｅｏｒｄｅｕｍｖｕｌａａｎｄｅｒｂａ ｉｍｏｎｉａｅｏｕｌｄｎｏｔ．ＷｈｅｎｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｏｆＴａｎｅｒｉｎｅｅｅｌＰｏｍｅｌｏｅｅｌａｎｄＭａｓｈｕｉｗＨＨＡｒｃ ｇｐｐｇｇ，ｏｒａｎｅｅｅｌａｎｄＴｉｅｕａｎｉｎｔｅａａｄｉｘｔｈｉｚｏｍａ ｈｅｉｎｄｏｒｔｅｘ ｓｅｕｄｏｌａｒｉｃｉｓ，ｈｉｚｏｍａ ｏｔｉｄｉｓｅｒｅｒｅａｔｅｒＲｅＲＲａＣＰＲＣｗ ｇｐｇｙｇｐ／Ｌ，ｉｔｈａｄａｓｉｎｉｆｉｃａｎｔｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｅｆｆｅｃｔｏｎｒｏｗｔｈｏｆｔｈａｎ６．２５，３．１３，５．０００，２．５００ｇａＭａｉｃｒｏｃｓｔｉｓｅｒｕｉｎｏｓａ，ｎｄｔｈｅｉｎ － ｇｇｙｇ；ｈｉｂｉｔｉｏｎｅｆｆｅｃｔｗａｓｍｏｒｅｒｏｎｏｕｎｃｅｄｗｉｔｈｔｈｅｉｎｃｒｅａｓｅｏｆｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆｅａｃｈｅｘｔｒａｃｔｗｈｅｎｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆ ｐ／ａｎｌｅｉｔｅｖｅｒｌｌｉｕｍａｔｉｖｕｍｗａｓｍｏｒｅｔｈａｎ５．０００ｇＬ，ｔｈｅａｌａｅｃｏｕｌｄｂｅｍａｉｎｔａｉｎｅｄａｔｔｈｅｉｎｉｔｉａｌｌｅｖｅｌ．ＣｏｎｓｉｄｅｒｉｎＡｓ ｙｇｇｇ ｗａｓｍｏｒｅｒｅａｓｏｎａｂｌｅｔｏｓｅｔｔｈｅａｂｏｖｅｃｏｎｔｒｏｌａｌａｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｗｅｒｅｂｅｎｅｆｉｃｉａｌｔｏｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｔｈｅｒｅ －ｇｆｕｒｔｈｅｒ．ｃａｎｏｂａｃｔｅｒｉａａｎｄｓｔｕｄｅａｒｃｈｏｆｃｏｎｔｒｏｌｌｉｎｓ ｙｙｇ
：；ＭＫｅｗｏｒｄｓｒｕｉｃｒｏｃｓｔｉｓｅｒｕｉｎｏｓａ；ｎｈｉｂｉｔｉｏｎｉａ ｄ ｇｙｇｙ
是单细胞原核生物，又叫蓝Ｃａｎｏｈｔａ） 蓝藻（ｙｐｙ
细菌、蓝绿菌或蓝绿藻，是一类藻类的总称，主要指、颤藻目（色球藻目（ＣＯｈｒｏｏｃｏｃｃａｌｅｓ）ｓｃｉｌｌａｔｏｒｉａ－、、念珠藻目（真枝藻目（ｌＮＳｅｓ）ｏｓｔｏｃａｌｅｓ）ｔｉｏｎｅｍａ）ｇ
可在营养丰富的淡水水体中出现。蓝藻中４个目，
有些种类常于夏季高温时大量繁殖，并在水面形成。蓝藻一层蓝绿色且有腥臭味的浮沫，称为“水华”、鱼水华的种类有很多，主要有微囊藻（Ｍｉｃｒｏｃｓｔｉｓ）ｙ、、腥藻（鞘颤藻（束丝藻（ＡＬｎｂａ）Ａｈ－ｎａｂａｅｎａ）ｙｇｙｐ
［１］
，、其中以产毒的颤藻（ａｏＯｎｉｚｍｅｎｏｎ）ｓｃｉｌｌａｔｏｒｉａ）
最为常见。铜铜绿微囊藻（Ｍａｉｃｒｏｃｓｔｉｓｅｒｕｉｎｏｓａ） ｙｇ
绿微囊藻大量繁殖时，水面会被厚厚的蓝绿色湖靛所覆盖，改变了水体的理化环境，降低了水体的透明
２］
，影响鱼虾等水生动物的正常生长；度［水体中营养
物质被耗尽时，铜绿微囊藻开始大量死亡，藻细胞破解，使水体散发腥臭味，溶解氧减少，造成鱼虾等水生动物的死亡，所以池塘养殖水体中过量的铜绿微囊藻威胁着水产养殖业的健康发展，因此研发绿色
＃通讯作者。第一作者：胡利静，女，硕士研究生，研究方向为水产动物医学。９８９年生，１
））（；。上海高校知识服务平台建设项目（资助项目“鱼虾用疫苗与药物研究开发”６３计划”ｏ．２０１１ＡＡ１０Ａ２１６ｏ．ＺＦ１２０６ＮＮ８＊国家“
·４９·
８卷 第７期 ２０１６年７月 环境污染与防治 第３
环保的抑藻药物势在必行。
目前水产养殖中蓝藻的除杀多采用人工或机械
打捞、化学药物杀藻等方法。人工或机械打捞的方法虽见效快，但劳动强度大、操作困难、耗时、效率低而且费用高，因此实际生产中以化学药物抑藻方法为主。水产养殖中常用的化学抑藻药物为硫酸铜，但硫酸铜的大量使用和使用次数的增加常会使重金属在养殖水域中积累，引发二次污染，并影响水生生物生长等。因此，寻求经济、安全、环保、有效的抑藻药物，对水产养殖业的健康发展具有重要的意义。本研究从药食两用的植物及常见的中草药中选择了对铜绿微囊藻进行抑制效果筛选试０种药物材料，１验，并对初筛药物的有效剂量进行测定，以期为开发绿色环保的抑藻药物提供一定的技术指导。１ 材料与方法１ 材料和仪器１．１．１ 供试藻种１．
铜绿微囊藻藻种购买于中国科学院野生生物种。——淡水藻种库，质库—编号为Ｆ４ＡＣＨＢ３４－１．１．２ 抑藻材料
蜜桔、马水桔、蜜柚、大蒜从市场上购得；铁观音、大麦茶购于商店；仙鹤草、大黄、土槿皮提取物、黄连提取物等购于药店。１．３ 主要仪器１．
２２智能型光照培养箱；Ｃ５０ＢＰＹ７３０分ＤＵＭＧ－－
）；光光度计（美国Ｂ１ｅｃｋｍａｎｌｌｅｒａＸ５Ｒ低速冷冻Ａ－ ｇ）。离心机（美国Ｂｅｃｋｍａｎ
２ 培养基组分及培养条件１．
铜绿微囊藻的培养按淡水藻种库提供配方，采温度（用ＢＧ１１培养基培养。培养条件为：５．０±２）℃，，光照强度３光暗比１每天０．５００ｌｘ２ｈ∶１２ｈ，０ 摇动３～５次。
３ 浸提液制备方法１．
蜜桔皮、马水桔皮、蜜柚皮水提液的制备参考文］献［的提取方法，自来水冲洗柑橘皮表面灰尘，将３柑橘皮切成小块，在烘箱中干燥。以桔皮（干质量，／／去离子水为０．下同）用去离子水在０５ｋＬ的比例，ｇ。４℃黑暗中浸提４ｄ
称取１加入１００ｇ去皮大蒜，００ 大蒜液制备：
搅拌成糜状后挤压得汁液，置于磨口ｍＬ去离子水，
／试剂瓶中，室温保存，大蒜质量浓度为１ｋＬ。ｇ大麦茶浸提液制备：称取铁观音、大麦 铁观音、
，煮沸１重复一次，茶２ｇ加去离子水２０ｍＬ，０ｍｉｎ，·５０·
使茶液合并两次茶液并用去离子水定容至２０ｍＬ，／的最终质量浓度为１００ｇＬ作为试验原液，４℃保存备用。
大黄浸提液制备参考文献［的提取方４］ 仙鹤草、
／法，按药物／蒸馏水为０．１０ｋＬ的比例分别将两种ｇ药物加入盛一定量蒸馏水的烧杯中，置于电炉上煮沸浸提，煮沸２定容，使药液质量０ｍｉｎ后滤出药液，／浓度为１００ｇＬ作为试验原液，４℃保存备用。黄连提取物浸提液制备：按药 土槿皮提取物、
／物／蒸馏水为０．０５ｋＬ的比例分别将两种药物加入ｇ盛一定量蒸馏水的烧杯中，煮沸１定０ｍｉｎ后过滤，／容，使药液质量浓度为５０ｇＬ作为试验原液，４℃保存备用。４ 试验方法１．
４．１ 筛选试验１．
将铜绿微囊藻在ＢＧ１１培养基下预培养１０～１５，使其处于对数生长期，作为接种的藻种。在无菌ｄ
条件下，在２５０ｍＬ的锥形瓶中各加入２０ｍＬ藻液，／并分别加入一定量初始叶绿素ａ为０．３４０６μｍＬ， ｇ
的浸提液，最后加入无菌培养基，使培养液总体积为马水桔皮、蜜柚皮水提液００ｍＬ。最终使蜜桔皮、１
／大蒜液和铁观音、质量浓度均为６．大麦茶、２５ｇＬ，／土仙鹤草、大黄浸提液的质量浓度均为５．０００ｇＬ，槿皮提取物、黄连提取物浸提液的质量浓度均为／并设空白对照组。５００ｇＬ。每组３个平行，２．４．２ 有效药物最佳抑藻浓度确定１．
根据筛选结果，采用二倍稀释法将有效药物的母液依次倍数稀释，查看抑藻效果，确定药物的最佳抑藻浓度。每组３个平行，并设空白对照组。４．３ 测定指标１．
由于活体藻类中叶绿素ａ的含量较高，而在死亡藻体、浮游动物及其他无机漂浮物中叶绿素ａ的含量较低，因此把叶绿素ａ含量的测定作为测量藻
５］
。类生物量的重要指标［
］参考文献［的测定方法，即取３６ 叶绿素ａ测定：／弃去上清００ｒｍｉｎ下离心１０ｍｉｎ，３５ｍＬ培养液， 体积分数）液，然后加入等体积９甲醇，混合０％的（均匀。将混匀的溶液放置在４℃黑暗条件下萃取／然后３取上清００ｒｍｉｎ下再离心１０ｍｉｎ，６～８ｈ，５
液，用分光光度计测定其在６６５ｎｍ处的吸光度
７］
，（为：并计算叶绿素ａ的含量，计算公式［ＯＤ６６５）
（）１ｃ＝１３．９×ＯＤ６６５
／式中：ｃ为叶绿素ａ质量浓度，ｍＬ。ｇμ
胡利静等 １０种药物材料对铜绿微囊藻的抑制作用
）
表１ １０种材料对铜绿微囊藻生长的抑制率１
ＴＭ．ａａｂｌｅ１ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｒａｔｅｏｆ１０ｋｉｎｄｓｍａｔｅｒｉａｌｏｎｅｒｕｉｎｏｓａ ｙｇ
％
４ｄ
５ｄ
ｃ
ｂ
９６．３８±０．６５ａ１００．００±０ｂ９６．３８±０．６５ｇ５８．５３±０．８７ｆ６１．４６±０．８５ｉ１５．１２±１．３３ｈ２８．２９±１．３０ｅ７１．７０±０．８１ｄ８５．３７±０．１０ｃ８９．２７±０．７３
材料蜜桔皮马水桔皮蜜柚皮大蒜铁观音大麦茶仙鹤草大黄土槿皮提取物黄连提取物
０ｄ８４±０．３６－８．
ｃｂ
ａ
０３±４．２９３．ａ７８±３．９３２．
ｂ５１±６．２９－７．
ｃ ４．６５±５．１８－１
ｂ ９５±３．５０－４．ａ３３±０．２６７．
ｂ ３３±０．２６－７．
ｃｂ ８９±３．８９－９．
ｂ ９５±３．５０－４．
１ｄ４５．１６±１．９４
ｂ
ｂａ
５０．００±１．９４ａ５６．４３±１．０１ｅ －１．８５±２．６２ｄ １４．４２±４．６９ｅ ５．３６±４．３０ｄ １４．４２±４．６９ｃ ２５．３４±４．４１ｃ ２５．４４±２．３５ｃ ２７．２９±０．６９
２ｄ６２．０６±２．５３
ｂ
ａ
７０．８９±１．６１ａ７０．８９±１．６１ｅ １２．０１±０．３９ｄ ３５．９３±２．０９ｆ ６．６２±１．７４ｅ １４．５８±３．３０ｃ ５０．５６±３．４３ｃ ５０．６７±０．９４ｃ ４９．２８±２．５７
３ｄ７７．６０±１．０２
ｂ
ａ
９３．５９±１．１７ａ８９．５９±１．２６ｆ ２８．５４±２．５０ｅ ４８．９６±１．９２ｈ ８．１１±３．７４ｇ １５．３１±０．２２ｄ ５９．１９±１．２４ｃ ６６．２９±２．９５ｃ ６５．２８±１．９６
８８．６８±０．８０
ａ
９６．６７±０．９５ｂ ９３．３２±１．０５ｈ ４３．０６±１．８７ｇ ５４．０１±１．８４ｊ １５．３１±１．６６ｉ ２３．３３±２．５２ｆ ６７．１５±０．３４ｅ ７６．６３±１．１７ｄ ８０．３１±１．６２
１）相同字母的数据间没有显著差异，不同字母的数据间差异显著。 注：
１．５ 数据分析
各浸提液对铜绿微囊藻生长的抑制率计算公式为：
（）Ｉ１－Ｎ／Ｎ０）×１Ｒ＝（００％２
式中：ＩＮ为浸提液组藻的叶绿素ａＲ为抑制率，％；
／质量浓度，Ｎ０为对照组藻的叶绿素ａ质量ｍＬ；ｇμ／浓度，ｍＬ。ｇμ
ｘｃｅｌ２００３和ＩＢＭＳＰＳＳＳｔａｔｉｓｔｉｃｓ 所得数据用Ｅ
１９．０软件程序包进行统计分析。２ 结果与分析
１ １０种材料对铜绿微囊藻生长抑制率的影响２．
０种材料对铜绿微囊藻生长抑制率的影响如１表１所示。经统计分析可知，从１ｄ时的抑制率来看，蜜桔皮、蜜柚皮、马水桔皮对铜绿微囊藻生长的抑制率较大；大黄、土槿皮提取物、黄连提取物对铜绿微囊藻的抑制率次之，且３者之间无显著差异；大蒜、大麦茶对铜绿微囊藻的抑制率最低。从２ｄ的抑制率来看，３种柑橘皮对铜绿微囊藻的抑制率依然较高，且明显高于其他７种材料对铜绿微囊藻的抑制率；大黄、土槿皮提取物、黄连提取物对铜绿微囊藻的抑制率次之；仙鹤草、大蒜、大麦茶对铜绿微囊藻的抑制率较低。从３～５ｄ的抑制情况看，大蒜对铜绿微囊藻的抑制率上升较快；仙鹤草、大麦茶对其的抑制率仍保持较低水平；其他材料抑藻率较大，且不同的材料间有不同的差异性。
２ １０种材料对铜绿微囊藻叶绿素ａ含量的影响２．
０种材料在不同时间内对铜绿微囊藻叶绿素ａ１质量浓度的影响如图１所示。铜绿微囊藻各处理组作用的时间对叶绿素ａ含量的回归方程如表２所示，其中ｙ为铜绿微囊藻的叶绿素ａ质量浓度，／。从图１及表ｘ为各处理组作用的时间，ｍＬ；ｄｇμ
蜜桔皮、马水桔皮、蜜柚皮、土槿皮提取２可以看出，
物、黄连提取物浸提液组中铜绿微囊藻的叶绿素ａ含量随着时间延长呈下降趋势，各组间下降的幅度略有不同，马水桔皮＞蜜桔皮＞蜜柚皮＞黄连提取物＞土槿皮提取物。大蒜、铁观音、大麦茶、仙鹤草、大黄的浸提液组及对照组中铜绿微囊藻的叶绿素ａ含量随着时间延长呈上升趋势，大蒜、铁观音、大黄的浸提液组上升幅度明显小于仙鹤草和大麦茶，且这些浸提液组中叶绿素ａ含量的上升幅度均低于对照组的上升幅度，但仙鹤草和大麦茶浸提液组叶绿素ａ含量的上升幅度与对照组相差不大。
表２ 铜绿微囊藻各处理组作用的时间对叶绿素ａ
含量的回归方程
ａｂｌｅ２ ＲｅｒｅｓｉｓｉｏｎｅｕａｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆＴ ｇｑｃｈｌｏｒｏｈｌｌａａｎｄａｃｔｉｏｎｔｉｍｅｆｏｒｅａｃｈｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｐｙ
ｏｆｒｏｕｅｒｕｉｎｏｓａＭ．ａ ｇｐｇ
对照组和浸提液组材料
对照组蜜桔皮大麦茶马水桔皮仙鹤草蜜柚皮大黄大蒜土槿皮提取物
铁观音黄连提取物
回归方程
２
ｘ＋０．ｒ＝０．１８４０４６，８９９ｙ＝０．
２
ｘ＋０．ｒ＝０．０２６１８４，９２７ｙ＝－０．
２ｘ＋０．ｒ＝０．１４１０９０，９０９ ｙ＝０．
２
ｘ＋０．ｒ＝０．０３０１５５，９１３ｙ＝－０．
２ｘ＋０．ｒ＝０．１１２１０５，９４６ｙ＝０．
２
ｘ＋０．ｒ＝０．０２３１４７，９４９ｙ＝－０．
２ｘ＋０．ｒ＝０．０１６１６９，５８９ｙ＝０．
２
ｘ＋０．ｒ＝０．０３６２１８，９７５ｙ＝０．
２ｘ＋０．ｒ＝０．０１２２００，８６６ｙ＝－０．
２
ｘ＋０．ｒ＝０．０３６１７４，８１７ｙ＝０．
２ｘ＋０．ｒ＝０．０２０２０７，９４２ｙ＝－０．
２．３ 有效材料抑藻最佳浓度的确定
各质量浓度蜜桔皮水提液对铜绿微囊藻叶绿素／其中０．Ｌ浓度３９、０．７８ｇａ的作用效果如图２所示，
组与对照组中铜绿微囊藻叶绿素ａ变化相似；５６１．／Ｌ浓度组的铜绿微囊藻叶绿素ａ的合成呈上升趋ｇ势，但与对照组相比上升幅度降低，说明该浓度组对铜绿微囊藻叶绿素ａ的合成具有一定的抑制能力；／１３ｇＬ浓度组使铜绿微囊藻的叶绿素ａ基本维持３．
·５１·
８卷 第７期 ２０１６年７月 环境污染与防治 第３
图１ １０种材料对铜绿微囊藻叶绿素ａ质量浓度的影响
Ｆｉ．１ Ｅｆｆｅｃｔｏｆ１０ｋｉｎｄｓｍａｔｅｒｉａｌｏｎｒｏｗｔｈｏｆｅｒｕｉｎｏｓ
ａＭ．ａ ｇｇｇ
图２ 蜜桔皮对铜绿微囊藻生长的影响
Ｍ．ａｉ．２ ＥｆｆｅｃｔｏｆＴａｎｅｒｉｎｅｅｅｌｏｎｒｏｗｔｈｏｆｅｒｕｉｎｏｓａＦ ｇｇｐｇｇ
／、、在初始值（状态；而６．３４０６μｍＬ）．２５１２．５０２５．０００ ｇ／Ｌ浓度组能明显抑制铜绿微囊藻叶绿素ａ的合成。ｇ
马水桔皮水提液质量浓度为１．５６ 如图３所示，
／Ｌ时铜绿微囊藻的叶绿素ａ能基本维持在初始值ｇ
／状态，当小于１．Ｌ时对铜绿微囊藻叶绿素ａ的５６ｇ／合成抑制率减弱甚至促进其合成，当大于１．Ｌ５６ｇ时能抑制铜绿微囊藻叶绿素ａ的合成。
／蜜柚皮水提液０．７８、１．５６ｇＬ浓度 如图４所示，
／组的叶绿素ａ与初始值相比略有增长，而３．１３ｇＬ／浓度组与初始值相比略有下降，３９ｇＬ浓度组的０．叶绿素ａ反而超过了对照组的叶绿素ａ含量，而大／于３．１３ｇＬ的各浓度组均对铜绿微囊藻的叶绿素ａ
合成具有抑制作用
。·５２·
图３ 马水桔皮对铜绿微囊藻生长影响
ｉ．３ ＥｆｆｅｃｔｏｆＭａｓｈｕｉｏｒａｎｅｅｅｌｏｎｒｏｗｔｈＦ ｇｇｐｇ
Ｍ．ａｏｆｅｒｕｉｎｏｓ
ａ ｇ
图４ 蜜柚皮对铜绿微囊藻生长的影响
ｉ．４ ＥｆｆｅｃｔｏｆＰｏｍｅｌｏｅｅｌｏｎｒｏｗｔｈｏｆｅｒｕｉｎｏｓａＭ．ａＦ ｇｐｇｇ
大蒜液对铜绿微囊藻叶绿素ａ质量浓度的影响
胡利静等 １０种药物材料对铜绿微囊藻的抑制作用
／如图５所示。０．３１３ｇＬ浓度组对其叶绿素ａ的合成无抑制作用，其他各浓度组随着时间的延长叶绿素ａ含量总体呈增长趋势，但在同一个时间点其叶绿素ａ均低于对照组，且随着大蒜液浓度的增大叶／绿素ａ含量的增长幅度降低。当其大于５．０００ｇＬ
时，叶绿素ａ含量基本维持在初始水平
。
／于２．５００ｇＬ时两种材料均能有效抑制铜绿微囊藻
叶绿素ａ的合成，且大黄的抑制效果好于铁观音；当／／除大黄１．小于２．５００ｇ２５０ｇＬ时，Ｌ浓度组外其他浓度组中的叶绿素ａ含量与对照组的接近且均呈增／长趋势；大黄１．２５０ｇＬ浓度组叶绿素ａ含量虽有增长趋势，但明显低于对照组。图９所示，土槿皮、黄连提取物浸提液 如图８、
对铜绿微囊藻叶绿素ａ含量的影响相似。当大于／两种材料各浓度组中的叶绿素ａ均呈５００ｇＬ时，２．
下降趋势，且浓度越大其下降幅度越大；当小于／两种材料各浓度组中的叶绿素ａ均呈５００ｇＬ时，２．
上升趋势，且随着浓度降低其上升幅度增加，但各浓度组上升幅度均低于对照组
。
图５ 大蒜对铜绿微囊藻生长的影响
Ｍ．ａＦｉ．５ｆｆｅｃｔｏｆＡｌｌｉｕｍｓａｔｉｖｕｍｏｎｒｏｗｔｈｏｆｅｒｕｉｎｏｓａ Ｅ ｇｇｇ
图７分别为铁观音、大黄浸提液对铜绿微 图６、
／囊藻生长影响趋势图。在２．５００ｇＬ时两种材料均使铜绿微囊藻的叶绿素ａ维持在初始值附近；当
大
图８ 土槿皮提取物对铜绿微囊藻生长的影响
ｉ．８ Ｅｆｆｅｃｔｏｆｏｒｔｅｘ ｓｅｕｄｏｌａｒｉｃｉｓｎｒｏｗｔｈＣＰｏＦ ｇｇ
ｅｒｕｉｎｏｓ
ａｏｆＭ．ａ ｇ
图６ 铁观音对铜绿微囊藻生长的影响
Ｍ．ａｉ．６ｆｆｅｃｔｏｆＴｉｅｕａｎｉｎｔｅａｏｎｒｏｗｔｈｏｆｅｒｕｉｎｏｓ
ａＦ Ｅ ｇｇｙｇｇ
图９ 黄连提取物对铜绿微囊藻生长的影响
ｉ．９ Ｅｆｆｅｃｔｏｆｈｉｚｏｍａ ｏｔｉｄｉｓｎｒｏｗｔｈＲＣｏＦ ｇｇｐ
ｏｆｅｒｕｉｎｏｓａＭ．ａ ｇ
３ 讨 论
目前，防治淡水水华的发生不仅是环境领域的
８］
，也是淡水水产养殖业关注的焦点。随着抑热点［
］１９１－
、水生藻技术的发展，国内外研究者研究溶藻菌［］］１１１１２３４６－－
、陆生植物［等抑藻技术，植物［尤其是植物
图７ 大黄对铜绿微囊藻生长的影响
ｉ．７ Ｅｆｆｅｃｔｏｆａｄｉｘｔｈｉｚｏｍａ ｈｅｉｎｒｏｗｔｈＦｏＲｅＲＲ ｇｇ
ｏｆｅｒｕｉｎｏｓａＭ．ａ ｇ
化感作用因其具有经济、高效、绿色环保的特点，备
］１１７８－
。目前研究报道的具有抑受国内外学者亲睐［
·５３·
８卷 第７期 ２０１６年７月 环境污染与防治 第３
］１２９２－
，但利用水生植物藻作用的水生植物有很多种［
亚心形扁藻生长的影响，表明其对亚心形扁藻有一定的促进作用，且作用的最佳质量分数分别为
［３］
研究了３种５０％、０．７５％和１．００％。周银环等３１．
中草药对绿色巴夫藻生长及叶绿素ａ含量的影响，
直接抑制铜绿微囊藻的作用效果并不理想，可能因水生植物长期生长并适应了该特定的环境从而不再产生对铜绿微囊藻的生长具有抑制作用的代谢产
２３］
，也可能是其代谢产物长期在特定环境中抑藻物［
结果表明添加一定量的当归、桔梗能提高绿色巴夫藻的生长及叶绿素ａ含量。当归、桔梗属于营养性的药物材料，仙鹤草也属于该类材料，本试验中虽然并未出现促进铜绿微囊藻生长的作用效果，但其抑藻效果并不明显。土槿皮等具有杀菌、抗病毒的作用，本试验中其对铜绿微囊藻的生长具有抑制作用效果。因此，选择合适的抑藻材料对抑藻机制的研究及抑藻剂的研制非常重要。４ 结 论
（）从１０种材料中筛选出８种有效抑制铜绿１
微囊藻生长的材料：大黄、黄连、土槿皮、蜜桔皮、马水桔皮、蜜柚皮、铁观音、大蒜，且抑藻的作用效果能够持久。而大麦茶、仙鹤草不能有效抑制铜绿微囊藻的生长。
（）蜜桔皮等柑橘皮类水提液在低浓度时促进２
铜绿微囊藻的生长，具有低促高抑的作用效果。而黄连、土槿皮等药物材料在低浓度时抑制作用较弱。（）由于本试验中的药物材料浸提液本身具有３颜色，考虑到应用时对水质环境的影响，各材料抑藻／质量浓度如下：蜜桔皮、蜜柚皮水提液为６．２５ｇＬ；／铁观音、马水桔皮水提液为３．大黄浸提液及１３ｇＬ；／土槿皮、黄连提取物浸提液为大蒜液为５．０００ｇＬ；／５００ｇＬ。２．参考文献：
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（）：９００４，１７１０４．９２－
［］］孟春晓．淡水水体中蓝藻水华研究进展［安徽农业２Ｊ． 高政权，
（）：科学，７００９，３７１６５９７５９８．７２－
［］３ＩＳＡＳＨＩＫ，ＴＡＮＡＫＡ Ｙ．Ａｌｌｅｌｏａｔｈｉｃｏｔｅｎｔｉａｌｏｆｃｉｔｒｕｓｆｒｕｉｔ Ｈ ｐｐ
ｅｅｌａｎｄａｂｓｃｉｓｉｃａｃｉｄｕｃｏｓｅｅｓｔｅｒ［Ｊ］．ＰｌａｎｔＧｒｏｗｔｈＲｅｕｌａｌ－－ ｐｇｇ，（）：ｔ１ｉｏｎ２００３，４０２１７２０．１－
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厦门大学，００８．２
［］水生生物监测手册［南京：东南大学出版社，５９９３．１Ｍ］． 王德铭．
２＋对栅藻和鱼腥藻增殖的影响［］李玉华，武佃卫，等．６Ｃｕ 李慧敏，
效果逐渐消亡。目前，关于药物材料对铜绿微囊藻
２４］
。控制的研究，主要集中在个别药物材料的研究［２５］
研究美人蕉种植水对铜绿微囊藻的抑如潘琦等［
制效应时发现，以蒸馏水培养３ｄ收集获得的美人蕉种植水对铜绿微囊藻的生长有明显的抑制作用，且推断美人蕉自身代谢产生的化感物质可有效抑制
２６］
／发现，铜绿微囊藻的正常生长。李娟等［０ｍＬ５ｇ
的Ｈ２Ｏ２能有效抑制铜绿微囊藻的生长，且对藻细胞
２７］发的生理指标等有很强的损伤效应。汪小雄等［
现，浸泡５ｄ的荔枝落叶能抑制铜绿微囊藻的生长，且随着时间延长，抑制效应下降。而对于药物材料
２８］
。因此，筛选方面的研究报道却较少［本试验选择
用其浸提液进行了对铜绿微了１０种陆生药物材料，囊藻生长抑制的研究，发现不同的药物材料浸提液对铜绿微囊藻生长表现出不同的抑制效果。具有较强抑藻作用的有蜜桔皮、马水桔皮、蜜柚皮、大黄、土槿皮、黄连，且２～５ｄ均可保持一定的抑藻率，说明这几种材料均有持久抑藻的作用效果；其次是铁观音、大蒜；而大麦茶和仙鹤草在试验期间其抑制率一可认为这两种材料对铜绿微囊藻生长直小于３０％，的影响作用不明显。另外，大蒜、大黄在前期抑制率较低，随着时间延长其抑制率增幅较大，可能是由于浸提液中的有效成分需要一定的活化时间后才能发挥抑藻效果；蜜桔等柑橘皮含有丰富的生物活性物
２３９］０］
，。柑橘、具有抗菌、质［抗病毒等作用［大蒜、铁
观音都是人们常用的食物及饮品，较之土槿皮、黄连更加方便易得，综上而言这几种材料有望作为抑藻剂的制备材料。
为了进一步了解有效抑藻材料的最佳抑藻浓度，本试验采用二倍稀释的方法对铜绿微囊藻进行抑制试验。柑橘皮类水提液对铜绿微囊藻有低促高抑的作用效果，这与梁宇斌等
［３１］
的研究结果类似，
脐橙皮提取液有低促高抑的作用效果，在质量浓度／而为１．６６ｇＬ时对铜绿微囊藻的生长有促进作用，
／在３．３１、６．６２ｇＬ时对其具有明显的抑制作用。本试验得到的具体结果与之略有不同，可能是由于柑橘种类不同或所产地区不同所致。不同种类的中草药材料对藻的影响可能起抑制作用，也可能起促进作用。刘东超等·５４·
［２］３
（）：［］安全与环境学报，１００７，７３３６．１Ｊ．２－
［］现代植物生理学指导［７Ｍ］． 中国科学院上海植物生理研究所．
北京：科学出版社，９９９９：９３６．１－
［］门玉洁，李锋民．植物化感作用抑制藻类生长的研究进８ 胡洪营，
（）：］展［生态环境，１００６，１５１５３５７．１Ｊ．２－
研究了马齿觅、桔梗、花粉等对
胡利静等 １０种药物材料对铜绿微囊藻的抑制作用
［］ａ９ＳＨＩＫＡＷＡ Ｋ，ＡＤＡＣＨＩＭ，ＮＩＳＨＩＪＩＭＡ Ｍ，ｅｔａｌ．ｎｏ－Ｃ－ ＹＯ ｙβ
ａｆｌａｎｉｎｅｒｏｄｕｃｔｉｏｎｂｍａｒｉｎｅｂａｃｔｅｒｉａｏｎｃａｎｉｄｅｒｅｅｍｅｄｉｕｍ－ ｐｙｙ ［］ａｎｄｉｔｓｓｅｃｉｆｉｃｉｎｈｉｂｉｔｏｒａｃｔｉｖｉｔｔｏｗａｒｄｃａｎｏｂａｃｔｅｒｉａＪ．Ａ－ ｐｙｙｙｐ ，（）：７ｌ．Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．２０００，６６２１８２２．７－ｐ
［］潘伟斌，陈宝华．溶藻细菌Ｌ１０７对水华鱼腥藻氮代谢的 张涵之，
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（）：］控制分析［资源开发与市场，００８，２４２９０２．９１Ｊ．２－
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（）：］步研究［生态科学，００６，２５２２２２３．１Ｊ．２１－
［］胡洪营．桔皮水提液对铜绿微囊藻生长的抑制效果研究１６ 张薛，
（）：［］环境科学研究，４００８，２１５３８．４Ｊ．２－
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（）：水，２１０１１，３７４１５２１．１－
［］１８ＪＲ．Ａｌｌｅｌｏｃｈｅｍｉｃａｌｓａｓｌｅａｄｓｆｏｒｎｅｗｈｅｒｂｉｃｉｄｅｓ ＶＹＶＹＡＮ
：［］，（）１６３１６４６．１ａｎｄａｒｏｃｈｅｍｉｃａｌｓＪ．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ２００２，５８９－ ｇ
［］１９ＲＮＥＲＳ，ＮＩＣＫＬＩＳＣＨ Ａ．Ａｌｌｅｌｏａｔｈｉｃｒｏｗｔｈｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ Ｋ ｐｇ
ｓｕｂｍｅｒｅｄｍａｃｒｏｈｔｅｓｏｆｓｅｌｅｃｔｅｄｈｔｏｌａｎｋｔｏｎｓｅｃｉｅｓｂ ｇｐｙｐｙｐｐｙ ，（）［］：８２００２，３８５Ｊ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＰｈｃｏｌｏ６２７１．８－ ｙｇｙ
［］２０ＩＳ，ＩＮＯＵＥＹ，ＨＯＳＯＭＩＭ，ｅｔａｌ．Ｍｒｉｏｈｌｌｕｍｓｉ－ ＮＡＫＡ ｙｐｙｐ
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