脲酶urease （水解酶）：
脲酶试验原理：
存在于大多数细菌、真菌和高等植物里。它是一种酰胺酶、能酶促有机物质分子中酶键的水解。脲酶的作用是极为专性的，它仅能水解尿素，水解的最终产物是氨和碳酸。土壤脲酶活性，与土壤的微生物数量、有机物质含量、全氮和速效磷含量呈正相关。根际土壤脲酶活性较高，中性土壤脲酶活性大于碱性土壤。人们常用土壤脲酶活性表征土壤的氮素状况。
土壤中脲酶活性的测定是以尿素为基质经酶促反应后测定生成的氨量，也可以通过测定未水解的尿素量来求得。本方法是测定生成的氨量。
试剂：
1）甲苯
2）10%尿素：称取10g 尿素，用水溶至100ml 。
3）柠檬酸盐缓冲液（PH6.7）：184克柠檬酸和147.5克氢氧化钾溶于蒸馏水。将两溶液合并，用1mol/LNaOH将PH 调至6.7，用水稀释至1000毫升。
4）苯酚钠溶液（1.35mol/L）：62.5克苯酚溶于少量乙醇，加2毫升甲醇和18.5毫升丙酮，用乙醇稀释至100毫升（A ），存于冰箱中；27克NaOH 溶于100毫升水（B ）。将AB 溶液保存在冰箱中。使用前将2溶液各20毫升混合，用蒸馏水稀释至100毫升。
5）次氯酸钠溶液：用水稀释试剂，至活性氯的浓度为0.9%，溶液稳定。
6）氮的标准溶液：a 精确称取0.4717克硫酸铵溶于水并稀释至1000ml ，得到1ml 含有0.1mg 氮的标准液
标准曲线绘制：吸取配置好的氮溶液10ml ，定容至100ml ，即稀释了10倍，吸取0，1，3，5，7，9，11，13ml 移至50ml 容量瓶，加水至20ml ，再加入4ml 苯酚钠，仔细混合，加入3ml 次氯酸钠，充分摇荡，放置20分钟, 用水稀释至刻度。将着色液在紫外分光光度计上于578nm 处进行比色测定，以标准溶液浓度为横坐标，以光密度值为纵坐标绘制曲线图。
操作步骤
1) 称取5g 过1mm 筛的风干土样于50ml 容量瓶中。
2) 向容量瓶中加入1ml 甲苯（以能全部使土样湿润为度）并放置15分钟
3) 之后加入10ml 10％尿素溶液和20ml 柠檬酸缓冲液（PH6.7），并仔细混合
4) 将容量瓶放入37摄氏度恒温箱中，培养24h
5) 培养结束后，用热至38摄氏度水稀释至刻度，仔细摇荡，并将悬液用致密滤纸过滤于三角瓶中。
6) 显色：吸取3ml 滤液于50ml 容量瓶中，加入10ml 蒸馏水，充分震荡，然后加入4ml 苯酚钠，仔细混合，再加入3ml 次氯酸钠，充分摇荡，放置20分钟，用水稀释至刻度，溶液呈现靛酚的蓝色。
7) 1h内在（靛酚的蓝色在1h 内保持稳定）在分光光度计上用1cm 液槽，于578nm 处将显色液进行比色测定。
8) 无土对照：不加土样，其他操作与样品实验相同。以检验试剂纯度，整个实验设置一个对照
9) 无基质对照：以等体积的水代替基质，其他操作与样品实验相同。每个土样都设此对照。
结果计算：
脲酶活性以24h 后1g 土壤中NH3-N 的mg 数表示。
NH3-N （mg ）＝a*2
A ：从标准曲线查得NH3-N 毫克数
2 ：换算成1g 土的系数。
以24h 后1g 土壤中释放出的酚的质量（mg ）表示磷酸酶活性。
脲酶活性=（a 样品－a 无土－a 无基质）×V ×n ／m
式中：a 样品为样品吸光值由标准曲线求得的酚毫克数；
a 无土为无土对照吸光值由标准曲线求得的酚毫克数；
a 无基质为无基质对照吸光值由标准曲线求得的酚毫克数；
V 为显色液体积；n 为分取倍数，浸出液体积／吸取滤液体积；m 表示烘干土重
脲酶urease （水解酶）：
脲酶试验原理：
存在于大多数细菌、真菌和高等植物里。它是一种酰胺酶、能酶促有机物质分子中酶键的水解。脲酶的作用是极为专性的，它仅能水解尿素，水解的最终产物是氨和碳酸。土壤脲酶活性，与土壤的微生物数量、有机物质含量、全氮和速效磷含量呈正相关。根际土壤脲酶活性较高，中性土壤脲酶活性大于碱性土壤。人们常用土壤脲酶活性表征土壤的氮素状况。
土壤中脲酶活性的测定是以尿素为基质经酶促反应后测定生成的氨量，也可以通过测定未水解的尿素量来求得。本方法是测定生成的氨量。
试剂：
1）甲苯
2）10%尿素：称取10g 尿素，用水溶至100ml 。
3）柠檬酸盐缓冲液（PH6.7）：184克柠檬酸和147.5克氢氧化钾溶于蒸馏水。将两溶液合并，用1mol/LNaOH将PH 调至6.7，用水稀释至1000毫升。
4）苯酚钠溶液（1.35mol/L）：62.5克苯酚溶于少量乙醇，加2毫升甲醇和18.5毫升丙酮，用乙醇稀释至100毫升（A ），存于冰箱中；27克NaOH 溶于100毫升水（B ）。将AB 溶液保存在冰箱中。使用前将2溶液各20毫升混合，用蒸馏水稀释至100毫升。
5）次氯酸钠溶液：用水稀释试剂，至活性氯的浓度为0.9%，溶液稳定。
6）氮的标准溶液：a 精确称取0.4717克硫酸铵溶于水并稀释至1000ml ，得到1ml 含有0.1mg 氮的标准液
标准曲线绘制：吸取配置好的氮溶液10ml ，定容至100ml ，即稀释了10倍，吸取0，1，3，5，7，9，11，13ml 移至50ml 容量瓶，加水至20ml ，再加入4ml 苯酚钠，仔细混合，加入3ml 次氯酸钠，充分摇荡，放置20分钟, 用水稀释至刻度。将着色液在紫外分光光度计上于578nm 处进行比色测定，以标准溶液浓度为横坐标，以光密度值为纵坐标绘制曲线图。
操作步骤
1) 称取5g 过1mm 筛的风干土样于50ml 容量瓶中。
2) 向容量瓶中加入1ml 甲苯（以能全部使土样湿润为度）并放置15分钟
3) 之后加入10ml 10％尿素溶液和20ml 柠檬酸缓冲液（PH6.7），并仔细混合
4) 将容量瓶放入37摄氏度恒温箱中，培养24h
5) 培养结束后，用热至38摄氏度水稀释至刻度，仔细摇荡，并将悬液用致密滤纸过滤于三角瓶中。
6) 显色：吸取3ml 滤液于50ml 容量瓶中，加入10ml 蒸馏水，充分震荡，然后加入4ml 苯酚钠，仔细混合，再加入3ml 次氯酸钠，充分摇荡，放置20分钟，用水稀释至刻度，溶液呈现靛酚的蓝色。
7) 1h内在（靛酚的蓝色在1h 内保持稳定）在分光光度计上用1cm 液槽，于578nm 处将显色液进行比色测定。
8) 无土对照：不加土样，其他操作与样品实验相同。以检验试剂纯度，整个实验设置一个对照
9) 无基质对照：以等体积的水代替基质，其他操作与样品实验相同。每个土样都设此对照。
结果计算：
脲酶活性以24h 后1g 土壤中NH3-N 的mg 数表示。
NH3-N （mg ）＝a*2
A ：从标准曲线查得NH3-N 毫克数
2 ：换算成1g 土的系数。
以24h 后1g 土壤中释放出的酚的质量（mg ）表示磷酸酶活性。
脲酶活性=（a 样品－a 无土－a 无基质）×V ×n ／m
式中：a 样品为样品吸光值由标准曲线求得的酚毫克数；
a 无土为无土对照吸光值由标准曲线求得的酚毫克数；
a 无基质为无基质对照吸光值由标准曲线求得的酚毫克数；
V 为显色液体积；n 为分取倍数，浸出液体积／吸取滤液体积；m 表示烘干土重