麝香草酚浊度试验(TTT ,Thymol Turbity Test)医学检查方法之一
1. 正常参考值
0~6u (浊度试验)
-或+(絮状试验)
2. 临床意义
急性肝炎的诊断 急性肝炎(病毒性、中毒性)TTT 阳性率达60%~80%,发病1周开始升高,2周达高峰,以后逐渐恢复。
肝炎与肝硬化病情诊断 慢性肝炎、肝硬化伴进行性肝损害,TTT 明显升高。
阻塞性黄疸与肝炎的鉴别 无肝细胞损害,TTT 正常,急性肝实质损害,TTT 升高。
其他疾病 疟疾、血吸虫、系统性红斑狼疮及各种亚急性、慢性细菌感染等。
3、实验基本步骤
(一) 原理
当血清与麝香草酚巴比妥缓冲液作用时,其中麝香草酚可减低血清内类脂质的分散力,而血清经巴比妥缓冲液稀释后,球蛋白部分溶解度减低而发生沉淀,此沉淀为球蛋白、类脂质和麝香草酚的复合体,使溶液变浊,与标准管比较,即得浊度的单位数。
(二) 试剂
1.麝香草酚巴比妥缓冲液(pH7.8) 。称取巴比妥钠1.03g ,巴比妥1.38g, 加蒸馏水500m1,加热至沸,放冷后,加入10%麝香草酚酒精溶液5m1,用力摇匀,塞好瓶口,置室温下过夜,过滤后备用。
国内有配制此液的片剂供应,临用时稀释即成,适用于基层单位。
2.硫酸钡人工标准管的制备。称取结晶氮化钡1.175g ,或无水氯化钡1.0g ,溶于蒸馏水内,使成100m1,即成0.048mol/L氯化钡溶液。另于100m1容量瓶内加入0.1mol/L硫酸液约70m1,滴加上述氯化钡液3ml ,边加边摇,再以0.1mol/l硫酸液稀释至刻度处,混匀后,即成乳白色硫酸钡标准混悬液。此液相当于22.2麦氏单位(Maclagan Unit)。
取口径,厚度,颜色相同的小试管20支,按下表配制标准管,加液后混匀,然后加塞浸蜡密封。如日久变质,应重新配制。
(三) 方法
1.浊度试验。取与标准管口径一致的试管1支,加血清0.1ml ,再加麝香草酚巴比妥缓冲液6m1,混合,放置30min ,以带黑字白纸为背景,与标准管目测比浊,求得浊度单位数。
如用光电比浊时,将测定液置于比色杯中,用520nm 或绿色滤光板,以蒸馏水调零点,读取光密度数,查标准曲线,即得浊度单位数。
标准曲线绘制:按上表配制不同浓度的标准液,用520nm 或绿色滤光板比浊,以蒸馏水调零点,读取各管光密度数。以光密度为纵坐标,以单位数为横坐标,绘成标准曲线。
2.絮状试验。血清经麝香草酚浊度试验后,继续将试管放置室温下24h ,观察其底部有无絮状沉淀,可按下列标准判断结果:
“—”液体呈均匀的乳白色,无颗粒出现,
“+”液体呈细颗粒状,管底有极少量沉淀,
“++”液体呈较粗的絮状物,管底有沉淀,
“+++”管底有较多的絮状沉淀,但上层液体仍有轻度浑浊, “++++”上层液体几乎完全澄清,管底有大量絮状物。
健康家畜血清絮状试验为“—”或“+”,作为阴性反应。 “++”以上判为阳性反应。
(四) 注意事项 血清必须新鲜,最好空腹采血,因血脂增高时可使浊度增加。
麝香草酚巴比妥缓冲液的pH 值对试验的敏感度影响很大,一般要求pH7.8。
麝香草酚浊度试验(TTT ,Thymol Turbity Test)医学检查方法之一
1. 正常参考值
0~6u (浊度试验)
-或+(絮状试验)
2. 临床意义
急性肝炎的诊断 急性肝炎(病毒性、中毒性)TTT 阳性率达60%~80%,发病1周开始升高,2周达高峰,以后逐渐恢复。
肝炎与肝硬化病情诊断 慢性肝炎、肝硬化伴进行性肝损害,TTT 明显升高。
阻塞性黄疸与肝炎的鉴别 无肝细胞损害,TTT 正常,急性肝实质损害,TTT 升高。
其他疾病 疟疾、血吸虫、系统性红斑狼疮及各种亚急性、慢性细菌感染等。
3、实验基本步骤
(一) 原理
当血清与麝香草酚巴比妥缓冲液作用时,其中麝香草酚可减低血清内类脂质的分散力,而血清经巴比妥缓冲液稀释后,球蛋白部分溶解度减低而发生沉淀,此沉淀为球蛋白、类脂质和麝香草酚的复合体,使溶液变浊,与标准管比较,即得浊度的单位数。
(二) 试剂
1.麝香草酚巴比妥缓冲液(pH7.8) 。称取巴比妥钠1.03g ,巴比妥1.38g, 加蒸馏水500m1,加热至沸,放冷后,加入10%麝香草酚酒精溶液5m1,用力摇匀,塞好瓶口,置室温下过夜,过滤后备用。
国内有配制此液的片剂供应,临用时稀释即成,适用于基层单位。
2.硫酸钡人工标准管的制备。称取结晶氮化钡1.175g ,或无水氯化钡1.0g ,溶于蒸馏水内,使成100m1,即成0.048mol/L氯化钡溶液。另于100m1容量瓶内加入0.1mol/L硫酸液约70m1,滴加上述氯化钡液3ml ,边加边摇,再以0.1mol/l硫酸液稀释至刻度处,混匀后,即成乳白色硫酸钡标准混悬液。此液相当于22.2麦氏单位(Maclagan Unit)。
取口径,厚度,颜色相同的小试管20支,按下表配制标准管,加液后混匀,然后加塞浸蜡密封。如日久变质,应重新配制。
(三) 方法
1.浊度试验。取与标准管口径一致的试管1支,加血清0.1ml ,再加麝香草酚巴比妥缓冲液6m1,混合,放置30min ,以带黑字白纸为背景,与标准管目测比浊,求得浊度单位数。
如用光电比浊时,将测定液置于比色杯中,用520nm 或绿色滤光板,以蒸馏水调零点,读取光密度数,查标准曲线,即得浊度单位数。
标准曲线绘制:按上表配制不同浓度的标准液,用520nm 或绿色滤光板比浊,以蒸馏水调零点,读取各管光密度数。以光密度为纵坐标,以单位数为横坐标,绘成标准曲线。
2.絮状试验。血清经麝香草酚浊度试验后,继续将试管放置室温下24h ,观察其底部有无絮状沉淀,可按下列标准判断结果:
“—”液体呈均匀的乳白色,无颗粒出现,
“+”液体呈细颗粒状,管底有极少量沉淀,
“++”液体呈较粗的絮状物,管底有沉淀,
“+++”管底有较多的絮状沉淀,但上层液体仍有轻度浑浊, “++++”上层液体几乎完全澄清,管底有大量絮状物。
健康家畜血清絮状试验为“—”或“+”,作为阴性反应。 “++”以上判为阳性反应。
(四) 注意事项 血清必须新鲜,最好空腹采血,因血脂增高时可使浊度增加。
麝香草酚巴比妥缓冲液的pH 值对试验的敏感度影响很大,一般要求pH7.8。