一一一ｊ
良品安至－＝＝－５植测■
■一ＩＢ广ＯＯＤＳＣＩＥＮＣＥＡＮＤＴＥＣＨＮＯＬＯＧｒ
食品科技
《≥夕’。
硪粉酶在黻真肼蜜中的应用
徐颖。汪辉
（陕西科技大学生命科学与工程学院，西安７１００２１）
摘要：针对蜂蜜掺假和造假的问题，对真蜂蜜及耐高温ｄ一淀粉酶中的蛋白质含量、淀粉酶活性进行测定分析。实验结果表明：天然蜂蜜在低温条件下可长期保持其酶值基本不变，但是在高温条件下，随着储存时间延长。其酶值就会明显下降。而耐高温Ｏｔ一淀粉酶酶值均没有发生明显变化。通过蜂蜜
。样品中的Ｏｔ一淀粉酶与耐高温Ｏｔ一淀粉酶酶争Ｉ生质的比较为判别真蜂蜜与掺假蜂蜜提供依据。
关键词：蜂蜜：淀粉酶值：酶学性质中图分类号：ＴＳ
２０７．３
文献标志码：Ｂ
文章编号：１００５—９９８９（２００８）０３—０２１４—０３
Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆａ－ａｍｙｌａｓｅｉｎｄｅｔｅｃｔｉｎｇｈｏｎｅｙｑｕａｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ
’。’ＸＵＹｉｎｇ，ＷＡＮＧＨｕｉ
（ＳｈａａｎｘｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏｃｏｕｎｔｅｒｔｈｅｔｒｏｕｂｌｅｓｔｕｄｉｅｄｉｎｔｈｉｓ
ｏｆＳｃｉｅｎｃｅ＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｘｉ７ａｎ７１００２１）
ｏｆｈｏｎｅｙａｄｕｌｔｅｒａｔｉｏｎ，ｔｈｅｐｒｏｔｅｉｎｃｏｎｔｅｎｔ，ｔｈｅａｍｙｌａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙｈａｖｅｂｅｅｎ
ｐａｐｅｒ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅａｍｙｌａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙｉｎｔｈｅｎａｔｕａｌｈｏｎｅｙｋｅｐｔｔｈｅｓａｍｅｕｎｄｅｒ
ｌｏｎｇｔｉｍｅ．Ｂｕｔｄｅｃｒｅａｓｅｄｕｎｄｅｒｈｉｇｈｅｒｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ，ｆｏｒｔｈｅｒｍｏｓｔａｂｌｅａ—ａｍｙｌａｓｅ，ｔｈｅ
ｌｏｗｅｒｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｆｏｒａ
ａｍｙｌａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙｄｉｄｎｏｔｃｈａｎｇｅａｎｙｗａｙ．Ｂｙｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｏｆｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｂｅｔｗｅｅｎａｍｙｌａｓｅｉｎｈｏｎｅｙａｎｄｔｈｅｒｍｏｓｔａｂｌｅｎｔ—ａｍｙｌａｓｅｐｒｏｖｉｄｅｔｈｅｓｔａｎｄａｒｄｓｆｏｒｊｕｄｇｉｎｇｔｈｅｎａｔｕｒｅａｎｄａｄｕｌｔｅｒａｔｅｄｈｏｎｅｙ．１
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｈｏｎｅｙ；ａｍｙｌａｓｅ
ａｃｔｉｖｉｔｙ；ｚｙｍｏｌｏｇｉｃａｌ
ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ
收稿日期：２００７－０７—３０
基金项目：陕西科技大学校级自然科学基金项目（ｚｘ０６—１６）。作者简介：徐颖（１９７８—－），女，硕士，讲师。
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３结论
综上所述．实验利用ＧＣ法对葡萄酒中的反式白藜芦醇进行了分析测定．并考察了方法的检出限、精密度以及回收率，结果令人满意。该分析方法简便、快速、有效，适合实际样品的日常检测分析。
参考文献：【ｌ】
王允祥．论葡萄酒的风味与营养价值．中国酿造，１９９８，（２）：
８—１０
Ｃｈｅｍ，１９９３，（４１）：５２１—５２３【６】
ＭｃＭｕｒｔｒｅｙＫＤ，ｍｉｎｎ
Ｊ＇ＰｏｂａｎｚＫ
ｅｔ
ａ１．ＪＡ出ｃＦｏｏｄＣｈｅｍ，
，．。
１９９４，（４２）：２０７７－２０８８【７】【８】８【９】［１０１
詹沛鑫．酒中的白藜芦醇．酿酒，２０００，（３）：９ｌ一９２
ＳｉｅｍａｎｎＥＨ，ＣｒｅａｓｙＬＬ．Ａｍ
ＪＥｎｏｌＶｉｔｉｅ，１９９２，（１）：４９—５２
Ｊｅａｎｄｅｔ，ＢｅｓｉｓｓＲ，ｅｔａ１．ＡｍＪＥｎｏｌＶｉｔｉｃ，１９９５，（１）：１４
ＰｅｚｅｔＲＰｏｎｔＶ，ＣｕｅｎａｔＰＪ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ，ｔ９９４，（６６３）：．１９１－１９７
ＤＭ，Ｙａｎ
【ｌｌ】ＧｏｌｄｂｅｒｇＪ．ＡｎａｌＣｈｅｍ，１９９４，（６６）：３９５９－３９６３
【１２１韩雅珊，等扁效液相色谱法测定葡萄酒中的白藜芦醇．
色谱，１９９９．（４）：３６５—３６８【１３】Ｓｉｅｍａｎｎ
Ｅ
【２】【３】
冯永红，许实波．白藜芦醇药理作用研究进展叨．国外医药（植物药分册），１９９６，（４）：１５５—１５７
李攻科，等．ＳＰＥ－ＧＣ－ＭＳ法测定葡萄酒中顺反式白藜芦醇．中山大学学报（自然科学版），２０００，（１）：６３—６７
Ｈ’ＣｒｅａｓｙＬＬＣｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｐｈｙｔｏａｌｅｘ－
ｉｎ．ｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌｉｎ
ｗｉｎｅ［Ｊ］．Ａ
Ｍ
ＪＶｉｔｉｅ，１９９２，（１）：４９－５２
【１４】马亭，鲍伦军，等．葡萄酒中白藜芦醇的固相萃取ＧＣＪＭＳ
法测定及其生理活ｌ生的初步研究．高等学校化学学ｔｌｔ，２０００，（７）：１０２３—１０２７
【４】
Ｍｅｉｓｈｉａｎｇ
Ｊ，ＬｉｎｉｎｇＣ，ｅｔａ１．Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９９７，（１）：２１８－２２０
【５】Ｌａｍｕｅ｜ａ—ＲａｖｅｎｔｏｓＲＭ，ＷａｔｅｒｈＯｔｌｌ暑ｅＡＬＪＡｓｒｉｃＦｏｏｄ
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食品科技
，，
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ＴＥＣＨＮＯＬＯＧｙ≥ｐ
－食品安星与桓测
７２２型分光光度计，精密ｐＨ计，台式离心机。
２实验方法
？？≮Ｓ；喜
蜂蜜中含有ｄ一淀粉酶及少量的自身转化酶．其中淀粉酶活性值是评定蜂蜜质量的一项重要指标。酶值的高低反映了蜂蜜的新鲜程度及其营养价值．新鲜的蜂蜜具有酶值高营养价值好的特点。但蜂蜜往往由于加工不当。储存不良而破坏酶的活性或因人为的掺假等降低了酶的活性，致使蜂蜜品质下降。本实验通过比较蜂蜜中淀粉酶和耐高温仅一淀粉酶的蛋白质含量和淀粉酶活性，为判别真蜂蜜和掺假蜂蜜提供依据【１１。１实验材料
。
２．１蜂蜜样品的处理
称取蜂蜜１０．０ｇ于５０ｍＬ具塞试管中．加１．５９ｍｏｌ／Ｌ乙酸缓冲液５ｍＬ，混匀，一加０．５ｍｏｌ／ＬＮａｅｌ３ｍＬ，混匀，加水定容至刻度。取上述１０ｍＬ待测液于试管中，置４０℃水浴１５ｍｉｎ，加４０℃保温的淀粉液５ｍＬ，混匀记时。每隔５ｒａｉｎ。吸１ｍＬ上述酶解液于盛有１０ｍＬ碘液及４０ｍＬ水的锥形瓶中，混匀，于波长ｈ６６０ａｍ，杯径１ｃｍ，以水调零比色，直至吸光度Ａ降为０．２３５以下，记下所需时间［２１。２．２酶活大小的计算
酶值（ＤＮ）＝３００／２ｔ
１．１样品
蜂蜜：野玫瑰蜂蜜，江西花圣食品有限公司；枣花蜂蜜、油菜蜂蜜：陕西当代蜂业有限责任公司：刺槐蜂蜜：陕西老蜂农蜂业有限公司：耐高温ｄ一淀粉酶：西安汉斯啤酒厂。・，１．２主要试剂
ｍｏｌ／Ｌ碘液，乙酸缓冲液（ｐＨ５．３），ＮａＣＩ溶
液，２％淀粉溶液，考马氏亮蓝Ｇ一２５０试剂。
１．３主要仪器
０．０００７
式中：ｔ为吸光度降到０．２３５以下，酶解所需要
的时间。
３结果与讨论
３．１蜂蜜中酶热稳定性的研究
由表１可以看出，随着温度的升高，蜂蜜中的
表１不同温度对酶活性质的影响
淀粉酶稳定性呈下降趋势。枣花和油菜蜂蜜４０℃下的储存时间不宜超过２４ｈ．５０℃下刺槐和油菜蜜的处理时间不应超过２４ｈ．５０℃对枣花蜜酶活的影响很大，０ｈ时酶活性都已降至８．０以下。所以枣花蜜的热稳定性最差，而刺槐蜜的热稳定性最高。３．２酶学性质的初步研究
玫瑰蜜用８０％的硫酸铵分离纯化．丙酮沉淀用量为丙酮：酶液（ｖ／ｖ）＝１．６：１。比较纯化后的蜂蜜淀粉酶和耐高温ｄ一淀粉酶的酶学性质嘲。３．２．１酶的最佳反应温度
比较酶在４０、５０、６０、
７０、８０℃下的水解活力，结果如图ｌ和图２所示：
温度／＇Ｅ
营
妲龌
喜
图２耐高温淀粉酶在不同温度下酶活曲线
玫瑰蜜在４０℃下酶活最高，７０、８０℃对酶活性破坏较大。酶活力值较低。耐高温仅一淀粉酶在４０～８０℃范围内，６０℃的酶活力最大。
３．２．２酶的热稳定性野玫瑰蜂蜜和耐高温仪一淀粉酶在ｐＨ５．３的醋酸缓冲液中在不同温度下保存１０
ｈ，
ｏ
暑
每隔２ｈ测１次酶活。观察酶活的变化。
由图３可知。在０—２ｈ内５０℃下玫瑰蜜酶活下降的较缓慢。６０、７０、８０℃时酶活下降很快。在２—８ｈ内，５０℃和６０℃下蜂蜜的酶活仍在缓慢降低，７０℃和８０℃下蜂蜜的酶活基本不再降低。由图４可知，耐高温Ｏｔ一淀粉酶在各温度下保存较长时间酶活变化
‘
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．温度／。Ｃ
不大。６０℃条件下的酶活性最高且酶活最稳定。
图１蜂蜜淀粉酶在不同温度下酶活曲线
良品安宝与趋测■
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图６耐高温ａ一淀粉酶在不同ｐＨ值下酶活
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图３玫瑰蜂蜜淀粉酶的热稳定性４
１４０１２０
结论
蜂蜜淀粉酶是一种动物淀粉酶．它对温度的稳
ｏ
１００
定性较差。高温时该酶易被破坏，在所选的各种蜂蜜样品中。枣花蜜和油菜蜜４０℃下的储存时间不宜超过２４应超过２４
Ｏ
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ｈ。５０ｈ。５０
ｏＣ下刺槐蜜和油菜蜜的处理时间不ｏＣ对枣花蜜酶活的影响很大，０
ｈ
时酶活性都已降至８．０以下．所以枣花蜜的热稳定
时间，Ｉｌ
性最差。而刺槐蜜的热稳定性最高。实验表明，蜂蜜中的淀粉酶的最适温度为４０℃，最适ｐＨ值为５．３．在这些条件下也最稳定。耐高温ｄ一淀粉酶具有较高的耐热性，在６０～８０℃下仍较稳定，最适温度和ｐＨ值也为６０℃和６．０。假蜂蜜为达到酶活国家标准，通过添加耐高温仪一淀粉酶方法，所以通过测定酶学性质的差异可以判断真假蜂蜜的不同。
参考文献：
【１］
图４耐高温淀粉酶的热稳定性
３．２．３
酶的最适反应ｐＨ值调节ｐＨ为３．０、４．０、
４．６、５．３、６．０、７．０和８．０的磷酸氢二钠一柠檬酸缓冲液『４１加入酶液中，然后测定酶活大小。
，
李军生，黄住明，张嘉婧，等．淀粉酶在真假蜂蜜中的区别【Ｊ】．食品与发酵工业，２００６，３２（１）：７５－７８
【２】
ｐＨ
黄金林，王秉栋．蜂蜜酶值快速检测的研究一标准参考比色板法［Ｊ】．中国畜牧杂志，２００１，３７（６）：３３—３５
．．
图５玫瑰蜜淀粉酶在不同ｐＨ值下酶活
【３】
曾哲灵，薛艳辉，高荫榆．金银花蜜中生物酶的热稳定性【Ｊ】．南昌大学学报，２００６，３０（１）：３０—３５
由图５、图６可知，蜂蜜中淀粉酶的最适酶活在ｐＨ值为５．３，而耐高温仅一淀粉酶的最适酶活在ｐＨ值为６．０。
［４】
宋宏新，李敏康．现代生物化学实验技术教程［Ｍ】．陕西：陕西人民出版社。２００２：１６０—１６２．１７４—１７５。２３９—２４１，２４３，
麓辱臣嚣群要囊近辫蜀羔宴；鼻鄙寰囊匿趁ｊ受ｊ彳量羔点爱班曼曩＝巧羔曼ｉｎ西磁巧ｊ碍ｚ两｛确皿球善研垂曩誉群置耋＝薄尹ｊ西ｔｉｆ马士，午。吐刮舡■蟊荽；彝；区—品疑蕾；蓝王匹Ｈｊ￡誓ｊ曼哑弱』研兰囊ｉ西工曩篓毫翼；
新一代发酵技术研发低糖低热啤酒
最近市场上出现了一种低糖低热啤酒——双鹿纯干啤酒。这是英博双鹿啤酒集团采用新一代发酵技术研发的新品种啤酒。
据英博双鹿啤酒集团技术人员介绍，既能把酒言欢，又能保证健康，一直是英博双鹿啤酒集团致力研究的一个课题。双鹿纯干啤酒之所以低糖低热，是因为采用了新一代的发酵技术，严格控制啤酒的发酵度，使酒液残糖极低。据统计。纯干啤
酒含有不发酵的糖量为２．（卜２．５９，比普通啤酒低１９左右。由于纯干啤酒的含糖量低，其热值也很低，１瓶啤酒的热值仅
Ｏ．１３３千卡。而一个苹果的热值就有８０千卡，是１瓶纯干啤酒的６００多倍。再计算一下纯干啤酒的低热值在一个人的饮食总热量中所占的比值。经查证，一个人一天所需的健康饮食的热量约为每公斤体重４０千卡左右。如一个人的体重为５０公斤。则一天的总热量摄入不超过２０００千卡，才是健康的饮食。由此可见，喝一瓶纯干啤酒所摄入的热量，对于一个人来说。实在是微乎其微的。
低糖、低热，口感新鲜、爽口，是这个新品种啤酒的特点。对那些注重健康生活，喝啤酒怕发胖的人士来说，双鹿纯干啤酒是个不错的选择。
¨、文）
α-淀粉酶在检验真假蜂蜜中的应用
作者：作者单位：刊名：英文刊名：年，卷(期)：被引用次数：
徐颖， 汪辉， XU Ying， WANG Hui
陕西科技大学生命科学与工程学院,西安,710021食品科技
FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY2008,33(3)1次
参考文献(4条)
1.宋宏新;李敏康 现代生物化学实验技术教程 2002
2.曾哲灵;薛艳辉;高荫榆 金银花蜜中生物酶的热稳定性[期刊论文]-南昌大学学报 2006(01)3.黄金林;王秉栋 蜂蜜酶值快速检测的研究-标准参考比色板法[期刊论文]-中国畜牧杂志 2001(06)4.李军生;黄住明;张嘉婧 淀粉酶在真假蜂蜜中的区别[期刊论文]-食品与发酵工业 2006(01)
引证文献(1条)
1.王慧超.陈今朝.韩宗先 α-淀粉酶的研究与应用[期刊论文]-重庆工商大学学报（自然科学版） 2010(4)
本文链接：http://d.g.wanfangdata.com.cn/Periodical_spkj200803062.aspx
一一一ｊ
良品安至－＝＝－５植测■
■一ＩＢ广ＯＯＤＳＣＩＥＮＣＥＡＮＤＴＥＣＨＮＯＬＯＧｒ
食品科技
《≥夕’。
硪粉酶在黻真肼蜜中的应用
徐颖。汪辉
（陕西科技大学生命科学与工程学院，西安７１００２１）
摘要：针对蜂蜜掺假和造假的问题，对真蜂蜜及耐高温ｄ一淀粉酶中的蛋白质含量、淀粉酶活性进行测定分析。实验结果表明：天然蜂蜜在低温条件下可长期保持其酶值基本不变，但是在高温条件下，随着储存时间延长。其酶值就会明显下降。而耐高温Ｏｔ一淀粉酶酶值均没有发生明显变化。通过蜂蜜
。样品中的Ｏｔ一淀粉酶与耐高温Ｏｔ一淀粉酶酶争Ｉ生质的比较为判别真蜂蜜与掺假蜂蜜提供依据。
关键词：蜂蜜：淀粉酶值：酶学性质中图分类号：ＴＳ
２０７．３
文献标志码：Ｂ
文章编号：１００５—９９８９（２００８）０３—０２１４—０３
Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆａ－ａｍｙｌａｓｅｉｎｄｅｔｅｃｔｉｎｇｈｏｎｅｙｑｕａｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ
’。’ＸＵＹｉｎｇ，ＷＡＮＧＨｕｉ
（ＳｈａａｎｘｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏｃｏｕｎｔｅｒｔｈｅｔｒｏｕｂｌｅｓｔｕｄｉｅｄｉｎｔｈｉｓ
ｏｆＳｃｉｅｎｃｅ＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｘｉ７ａｎ７１００２１）
ｏｆｈｏｎｅｙａｄｕｌｔｅｒａｔｉｏｎ，ｔｈｅｐｒｏｔｅｉｎｃｏｎｔｅｎｔ，ｔｈｅａｍｙｌａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙｈａｖｅｂｅｅｎ
ｐａｐｅｒ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅａｍｙｌａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙｉｎｔｈｅｎａｔｕａｌｈｏｎｅｙｋｅｐｔｔｈｅｓａｍｅｕｎｄｅｒ
ｌｏｎｇｔｉｍｅ．Ｂｕｔｄｅｃｒｅａｓｅｄｕｎｄｅｒｈｉｇｈｅｒｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ，ｆｏｒｔｈｅｒｍｏｓｔａｂｌｅａ—ａｍｙｌａｓｅ，ｔｈｅ
ｌｏｗｅｒｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｆｏｒａ
ａｍｙｌａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙｄｉｄｎｏｔｃｈａｎｇｅａｎｙｗａｙ．Ｂｙｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｏｆｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｂｅｔｗｅｅｎａｍｙｌａｓｅｉｎｈｏｎｅｙａｎｄｔｈｅｒｍｏｓｔａｂｌｅｎｔ—ａｍｙｌａｓｅｐｒｏｖｉｄｅｔｈｅｓｔａｎｄａｒｄｓｆｏｒｊｕｄｇｉｎｇｔｈｅｎａｔｕｒｅａｎｄａｄｕｌｔｅｒａｔｅｄｈｏｎｅｙ．１
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｈｏｎｅｙ；ａｍｙｌａｓｅ
ａｃｔｉｖｉｔｙ；ｚｙｍｏｌｏｇｉｃａｌ
ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ
收稿日期：２００７－０７—３０
基金项目：陕西科技大学校级自然科学基金项目（ｚｘ０６—１６）。作者简介：徐颖（１９７８—－），女，硕士，讲师。
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３结论
综上所述．实验利用ＧＣ法对葡萄酒中的反式白藜芦醇进行了分析测定．并考察了方法的检出限、精密度以及回收率，结果令人满意。该分析方法简便、快速、有效，适合实际样品的日常检测分析。
参考文献：【ｌ】
王允祥．论葡萄酒的风味与营养价值．中国酿造，１９９８，（２）：
８—１０
Ｃｈｅｍ，１９９３，（４１）：５２１—５２３【６】
ＭｃＭｕｒｔｒｅｙＫＤ，ｍｉｎｎ
Ｊ＇ＰｏｂａｎｚＫ
ｅｔ
ａ１．ＪＡ出ｃＦｏｏｄＣｈｅｍ，
，．。
１９９４，（４２）：２０７７－２０８８【７】【８】８【９】［１０１
詹沛鑫．酒中的白藜芦醇．酿酒，２０００，（３）：９ｌ一９２
ＳｉｅｍａｎｎＥＨ，ＣｒｅａｓｙＬＬ．Ａｍ
ＪＥｎｏｌＶｉｔｉｅ，１９９２，（１）：４９—５２
Ｊｅａｎｄｅｔ，ＢｅｓｉｓｓＲ，ｅｔａ１．ＡｍＪＥｎｏｌＶｉｔｉｃ，１９９５，（１）：１４
ＰｅｚｅｔＲＰｏｎｔＶ，ＣｕｅｎａｔＰＪ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ，ｔ９９４，（６６３）：．１９１－１９７
ＤＭ，Ｙａｎ
【ｌｌ】ＧｏｌｄｂｅｒｇＪ．ＡｎａｌＣｈｅｍ，１９９４，（６６）：３９５９－３９６３
【１２１韩雅珊，等扁效液相色谱法测定葡萄酒中的白藜芦醇．
色谱，１９９９．（４）：３６５—３６８【１３】Ｓｉｅｍａｎｎ
Ｅ
【２】【３】
冯永红，许实波．白藜芦醇药理作用研究进展叨．国外医药（植物药分册），１９９６，（４）：１５５—１５７
李攻科，等．ＳＰＥ－ＧＣ－ＭＳ法测定葡萄酒中顺反式白藜芦醇．中山大学学报（自然科学版），２０００，（１）：６３—６７
Ｈ’ＣｒｅａｓｙＬＬＣｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｐｈｙｔｏａｌｅｘ－
ｉｎ．ｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌｉｎ
ｗｉｎｅ［Ｊ］．Ａ
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ＪＶｉｔｉｅ，１９９２，（１）：４９－５２
【１４】马亭，鲍伦军，等．葡萄酒中白藜芦醇的固相萃取ＧＣＪＭＳ
法测定及其生理活ｌ生的初步研究．高等学校化学学ｔｌｔ，２０００，（７）：１０２３—１０２７
【４】
Ｍｅｉｓｈｉａｎｇ
Ｊ，ＬｉｎｉｎｇＣ，ｅｔａ１．Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９９７，（１）：２１８－２２０
【５】Ｌａｍｕｅ｜ａ—ＲａｖｅｎｔｏｓＲＭ，ＷａｔｅｒｈＯｔｌｌ暑ｅＡＬＪＡｓｒｉｃＦｏｏｄ
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食品科技
，，
ＩＦ０００ＳＣＩＥＮＣＥ＾Ｋｏ
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－食品安星与桓测
７２２型分光光度计，精密ｐＨ计，台式离心机。
２实验方法
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蜂蜜中含有ｄ一淀粉酶及少量的自身转化酶．其中淀粉酶活性值是评定蜂蜜质量的一项重要指标。酶值的高低反映了蜂蜜的新鲜程度及其营养价值．新鲜的蜂蜜具有酶值高营养价值好的特点。但蜂蜜往往由于加工不当。储存不良而破坏酶的活性或因人为的掺假等降低了酶的活性，致使蜂蜜品质下降。本实验通过比较蜂蜜中淀粉酶和耐高温仅一淀粉酶的蛋白质含量和淀粉酶活性，为判别真蜂蜜和掺假蜂蜜提供依据【１１。１实验材料
。
２．１蜂蜜样品的处理
称取蜂蜜１０．０ｇ于５０ｍＬ具塞试管中．加１．５９ｍｏｌ／Ｌ乙酸缓冲液５ｍＬ，混匀，一加０．５ｍｏｌ／ＬＮａｅｌ３ｍＬ，混匀，加水定容至刻度。取上述１０ｍＬ待测液于试管中，置４０℃水浴１５ｍｉｎ，加４０℃保温的淀粉液５ｍＬ，混匀记时。每隔５ｒａｉｎ。吸１ｍＬ上述酶解液于盛有１０ｍＬ碘液及４０ｍＬ水的锥形瓶中，混匀，于波长ｈ６６０ａｍ，杯径１ｃｍ，以水调零比色，直至吸光度Ａ降为０．２３５以下，记下所需时间［２１。２．２酶活大小的计算
酶值（ＤＮ）＝３００／２ｔ
１．１样品
蜂蜜：野玫瑰蜂蜜，江西花圣食品有限公司；枣花蜂蜜、油菜蜂蜜：陕西当代蜂业有限责任公司：刺槐蜂蜜：陕西老蜂农蜂业有限公司：耐高温ｄ一淀粉酶：西安汉斯啤酒厂。・，１．２主要试剂
ｍｏｌ／Ｌ碘液，乙酸缓冲液（ｐＨ５．３），ＮａＣＩ溶
液，２％淀粉溶液，考马氏亮蓝Ｇ一２５０试剂。
１．３主要仪器
０．０００７
式中：ｔ为吸光度降到０．２３５以下，酶解所需要
的时间。
３结果与讨论
３．１蜂蜜中酶热稳定性的研究
由表１可以看出，随着温度的升高，蜂蜜中的
表１不同温度对酶活性质的影响
淀粉酶稳定性呈下降趋势。枣花和油菜蜂蜜４０℃下的储存时间不宜超过２４ｈ．５０℃下刺槐和油菜蜜的处理时间不应超过２４ｈ．５０℃对枣花蜜酶活的影响很大，０ｈ时酶活性都已降至８．０以下。所以枣花蜜的热稳定性最差，而刺槐蜜的热稳定性最高。３．２酶学性质的初步研究
玫瑰蜜用８０％的硫酸铵分离纯化．丙酮沉淀用量为丙酮：酶液（ｖ／ｖ）＝１．６：１。比较纯化后的蜂蜜淀粉酶和耐高温ｄ一淀粉酶的酶学性质嘲。３．２．１酶的最佳反应温度
比较酶在４０、５０、６０、
７０、８０℃下的水解活力，结果如图ｌ和图２所示：
温度／＇Ｅ
营
妲龌
喜
图２耐高温淀粉酶在不同温度下酶活曲线
玫瑰蜜在４０℃下酶活最高，７０、８０℃对酶活性破坏较大。酶活力值较低。耐高温仅一淀粉酶在４０～８０℃范围内，６０℃的酶活力最大。
３．２．２酶的热稳定性野玫瑰蜂蜜和耐高温仪一淀粉酶在ｐＨ５．３的醋酸缓冲液中在不同温度下保存１０
ｈ，
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每隔２ｈ测１次酶活。观察酶活的变化。
由图３可知。在０—２ｈ内５０℃下玫瑰蜜酶活下降的较缓慢。６０、７０、８０℃时酶活下降很快。在２—８ｈ内，５０℃和６０℃下蜂蜜的酶活仍在缓慢降低，７０℃和８０℃下蜂蜜的酶活基本不再降低。由图４可知，耐高温Ｏｔ一淀粉酶在各温度下保存较长时间酶活变化
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不大。６０℃条件下的酶活性最高且酶活最稳定。
图１蜂蜜淀粉酶在不同温度下酶活曲线
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ｐＨ
∞弱如筋加坫ｍ，０
２
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６
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图６耐高温ａ一淀粉酶在不同ｐＨ值下酶活
时问ｍ
图３玫瑰蜂蜜淀粉酶的热稳定性４
１４０１２０
结论
蜂蜜淀粉酶是一种动物淀粉酶．它对温度的稳
ｏ
１００
定性较差。高温时该酶易被破坏，在所选的各种蜂蜜样品中。枣花蜜和油菜蜜４０℃下的储存时间不宜超过２４应超过２４
Ｏ
２
４
６
８
１０
姜８０
喜６０
链４０
２００
ｈ。５０ｈ。５０
ｏＣ下刺槐蜜和油菜蜜的处理时间不ｏＣ对枣花蜜酶活的影响很大，０
ｈ
时酶活性都已降至８．０以下．所以枣花蜜的热稳定
时间，Ｉｌ
性最差。而刺槐蜜的热稳定性最高。实验表明，蜂蜜中的淀粉酶的最适温度为４０℃，最适ｐＨ值为５．３．在这些条件下也最稳定。耐高温ｄ一淀粉酶具有较高的耐热性，在６０～８０℃下仍较稳定，最适温度和ｐＨ值也为６０℃和６．０。假蜂蜜为达到酶活国家标准，通过添加耐高温仪一淀粉酶方法，所以通过测定酶学性质的差异可以判断真假蜂蜜的不同。
参考文献：
【１］
图４耐高温淀粉酶的热稳定性
３．２．３
酶的最适反应ｐＨ值调节ｐＨ为３．０、４．０、
４．６、５．３、６．０、７．０和８．０的磷酸氢二钠一柠檬酸缓冲液『４１加入酶液中，然后测定酶活大小。
，
李军生，黄住明，张嘉婧，等．淀粉酶在真假蜂蜜中的区别【Ｊ】．食品与发酵工业，２００６，３２（１）：７５－７８
【２】
ｐＨ
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．．
图５玫瑰蜜淀粉酶在不同ｐＨ值下酶活
【３】
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由图５、图６可知，蜂蜜中淀粉酶的最适酶活在ｐＨ值为５．３，而耐高温仅一淀粉酶的最适酶活在ｐＨ值为６．０。
［４】
宋宏新，李敏康．现代生物化学实验技术教程［Ｍ】．陕西：陕西人民出版社。２００２：１６０—１６２．１７４—１７５。２３９—２４１，２４３，
麓辱臣嚣群要囊近辫蜀羔宴；鼻鄙寰囊匿趁ｊ受ｊ彳量羔点爱班曼曩＝巧羔曼ｉｎ西磁巧ｊ碍ｚ两｛确皿球善研垂曩誉群置耋＝薄尹ｊ西ｔｉｆ马士，午。吐刮舡■蟊荽；彝；区—品疑蕾；蓝王匹Ｈｊ￡誓ｊ曼哑弱』研兰囊ｉ西工曩篓毫翼；
新一代发酵技术研发低糖低热啤酒
最近市场上出现了一种低糖低热啤酒——双鹿纯干啤酒。这是英博双鹿啤酒集团采用新一代发酵技术研发的新品种啤酒。
据英博双鹿啤酒集团技术人员介绍，既能把酒言欢，又能保证健康，一直是英博双鹿啤酒集团致力研究的一个课题。双鹿纯干啤酒之所以低糖低热，是因为采用了新一代的发酵技术，严格控制啤酒的发酵度，使酒液残糖极低。据统计。纯干啤
酒含有不发酵的糖量为２．（卜２．５９，比普通啤酒低１９左右。由于纯干啤酒的含糖量低，其热值也很低，１瓶啤酒的热值仅
Ｏ．１３３千卡。而一个苹果的热值就有８０千卡，是１瓶纯干啤酒的６００多倍。再计算一下纯干啤酒的低热值在一个人的饮食总热量中所占的比值。经查证，一个人一天所需的健康饮食的热量约为每公斤体重４０千卡左右。如一个人的体重为５０公斤。则一天的总热量摄入不超过２０００千卡，才是健康的饮食。由此可见，喝一瓶纯干啤酒所摄入的热量，对于一个人来说。实在是微乎其微的。
低糖、低热，口感新鲜、爽口，是这个新品种啤酒的特点。对那些注重健康生活，喝啤酒怕发胖的人士来说，双鹿纯干啤酒是个不错的选择。
¨、文）
α-淀粉酶在检验真假蜂蜜中的应用
作者：作者单位：刊名：英文刊名：年，卷(期)：被引用次数：
徐颖， 汪辉， XU Ying， WANG Hui
陕西科技大学生命科学与工程学院,西安,710021食品科技
FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY2008,33(3)1次
参考文献(4条)
1.宋宏新;李敏康 现代生物化学实验技术教程 2002
2.曾哲灵;薛艳辉;高荫榆 金银花蜜中生物酶的热稳定性[期刊论文]-南昌大学学报 2006(01)3.黄金林;王秉栋 蜂蜜酶值快速检测的研究-标准参考比色板法[期刊论文]-中国畜牧杂志 2001(06)4.李军生;黄住明;张嘉婧 淀粉酶在真假蜂蜜中的区别[期刊论文]-食品与发酵工业 2006(01)
引证文献(1条)
1.王慧超.陈今朝.韩宗先 α-淀粉酶的研究与应用[期刊论文]-重庆工商大学学报（自然科学版） 2010(4)
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