热烈庆祝中国中医研究院中药研究所成立五十周年 中国中医研究院中药研究所炮制研究中心
樟帮盐炙法 标准品
附图 泽泻各炮制品以及标准品的HPLC 图谱
高效液相色谱法测定郁金饮片中姜黄素的含量
雷云霞1，孙立立2，杨书斌2，王娇2
（1. 济南市妇幼保健院；2. 山东省中医药研究院）
[摘 要] 目的：建立高效液相色谱法测定郁金饮片中姜黄素含量的定量分析方法。方法：采用超声提取法，选用色谱柱：Lichrospher ODS C18(4.6×150mm，5μm) ，流动相：乙腈-水（5%冰醋酸）（45：55），检测波长：420 nm，流速：1ml/min，柱温：室温，进行高效液相色谱测定。结果: 在上述色谱条件下，姜黄素进样量在0.4160-0.0208ug 范围内与其峰面积呈良好的线性关系（r =0.9999），平均回收率为99.75 %（n=5），RSD 为1.20%(n=5);精密度试验对照品和供试品RSD 分别为1.28%，1.10%(n=5)，；稳定性试验表明对照品和供试品溶液48小时内稳定；重复性试验RSD 为0.54%(n=5)。结论：该测定方法简单可行，结果准确，重复性好，可用于温郁金、黄丝郁金饮片中姜黄素的含量测定。 [关键词] 郁金饮片；姜黄素；高效液相色谱法；含量测定
郁金具有行气化瘀，清心解郁，利胆退黄的功效，临床常用于经闭痛经，胸腹涨痛、刺痛，热病
分别为姜科植物温郁金Curcuma 神昏，癫痫发狂，黄疸尿赤。中国药典2000年版[1]收载有4个入药品种，
wenyujin Y.H.Chen et C.Ling、姜黄Curcuma longa L.、广西莪术Cuecuma Kwangsiensis S.G.Lee et C.F .Liang 或蓬莪术Curcuma Phaeocaulis Val.的干燥块根。前两者分别习称“温郁金”和“黄丝郁金”，其余按性状不同习称“桂郁金”或“绿丝郁金”。现代研究表明，郁金具有免疫抑制、降血脂、保肝、抗真菌、抗氧化、抗肿瘤、中枢抑制等多种药理活性[2]。据文献检索，郁金中含有少量挥发油、姜黄素等成分，其中姜黄素为其降血脂、抗氧化、抗炎的主要有效成分[3]；其含量以黄丝郁金最高，比莪术高 近百倍，同一植物根茎含量高于块根[4]。本文选用反相高效液相色谱法建立了郁金饮片中姜黄素的含 量测定方法，测定了三种不同品种十批郁金饮片中姜黄素的含量，实验结果证明，该法简单易行、准确、精密度及重现性俱佳，可作为制定黄丝郁金饮片质量标准的参考依据。
1 仪器、试药和供试样品
1.1 仪器：Agilent 1100 Series 高效液相色谱仪(美国) ；Agilent 8453紫外分光光度仪(美国) ；KQ3200型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司) ；BECKMAN COULTER-AllegraTM 6 centrifuge台式高速离心机；939 全自动薄层制板器(重庆南岸贝尔德仪器厂) ；METTLER TOLEDO 1/100000天平(瑞士) ；MILLI-Q 超纯水纯化系统 。
1.2 试药：姜黄素对照品（中国药品生物制品检定所）；甲醇（色谱纯，天津四友）；水为超纯水，其它试剂均为分析纯。 1.3 供试样品：安徽沪谯中药饮片厂自制郁金中试产品，批号：桂04051601，桂04051602，桂04051603，桂04051604，桂04051605，桂04051606, 温04051607，温04051608，黄丝04051609，黄丝04051610。 2 色谱条件
；流动相：乙腈：水（5%冰醋酸）（45:55）；色谱柱：Lichrospher ODS C18柱（4.6×150mm，5um ）
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流速1.0ml/min；检测波长420nm ；柱温为室温。理论板数按姜黄素峰计算应不低于2000。 3 试验方法与结果 3.1 检测波长的选择
在上述色谱条件下，取姜黄素对照品适量，加甲醇稀释后作为样品溶液，以甲醇为参比，用紫外分光光度计在190～900nm 波长范围内扫描，测定姜黄素的最大吸收波长为420nm, 故选定检测波长为420nm. 检测波长选择见附图1。 3.2 对照品溶液的制备
精密称取姜黄素对照品5.20mg ，置25ml 量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密吸取5ml 置50ml 量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为姜黄素对照品溶液储备液，浓度为0.0208mg/ml。
精密量取姜黄素对照品溶液储备液5ml ，置50ml 量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为姜黄素对照品溶液，浓度为0.00208mg/ml。 3.3 供试品溶液的制备
3.3.1 供试品溶液提取条件的选择
参照文献报道:①乙醚脱脂后，加甲醇超声提取0.5h ②直接用甲醇超声提取0.5h, 进行比较试验：取温郁金饮片（批号：04051607）粉末2份各1.0g ，精密称定，按方法①分别置具塞三角烧瓶或圆底烧瓶中，分别精密加入乙醚50ml ，进行超声提取0.5h ，过滤弃去乙醚液，药渣晾干，再精密加入甲醇50ml ，称定重量，超声提取0.5h ，取下放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，离心，取上清液，于旋转蒸发仪低温回收甲醇，定容于5ml 容量瓶中，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm ）滤过；另取2份按②直接精密加入50ml 甲醇，称定重量，超声提取0.5h ，取下放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，离心，取上清液，于旋转蒸发仪低温回收甲醇，定容于5ml 容量瓶中，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm ）滤过，作为供试品液1-4。在上述色谱条件下，精密吸取供试品溶液1－4各20μl, 分别注入液相色谱仪测定，结果各提取方法姜黄素均能达到基线分离，测得的姜黄素峰面积基本一致。测定结果见表1。
表1 不同提取方法测定结果
供试液 1 2 3 4
提取溶剂 乙醚-甲醇 乙醚-甲醇 甲 醇 甲 醇
提取方法
姜黄素（mg/g）
超声0.5h 0.0107 超声0.5h 0.0108 超声0.5h 0.0107 超声0.5h 0.0108
试验结果表明：上述两种提取方法测得的姜黄素含量相差无几，说明两种提取方法效果一致。为简便，选用直接用甲醇超声提取0.5h 作为本品的提取方法。 3.3.2供试品溶液的制备
取温郁金、桂郁金饮片粉末1.0g ，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml ，密塞，称定重量，超声提取30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，离心，取上清液，置旋转蒸发仪低温回收甲醇，定容于5ml 量瓶中，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm ）滤过，作为温郁金、桂郁金供试品溶液。
取黄丝郁金饮片粉末0.1g ，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml ，密塞，称定重量，超声提取30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，离心，取上清液，置旋转蒸发仪低温回收甲醇，定容于25ml 量瓶中，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm ）滤过，作为黄丝郁金供试品溶液。
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3.4 系统适应性试验考察
在上述色谱条件下，分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20ul ，分别注入液相色谱仪，测定。结果表明，分离度为1.87和1.90，达到基线分离，且保留时间适中。对照品的保留时间和峰形与供试品均一致。因此该分析条件可行。对照品和供试品高效液相色谱图见附图2—6。 3.5 线性关系考察
精密吸取姜黃素对照品溶液储备液10ml,8ml ，6ml,4ml,2ml,1ml,0.5ml, 分别置10ml 量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，在上述色谱条件下重复进样两次，每次20ul, 测定峰面积，以姜黄素对照品进样量（μg ）为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程为Y=15554.35X+15.61905，相关系数r=0.9999。结果表明，在上述色谱条件下，姜黄素进样量在0.4160～0.0208μg 范围内与峰面积值呈良好的线性关系。
3.6 精密度试验
在上述色谱条件下，精密吸取对照品溶液（浓度为0.00208mg/ml）和温郁金供试品溶液各20μl ，分别注入液相色谱仪，测定；对照品溶液和温郁金供试品溶液分别各测定5次，结果姜黄素对照品峰面积的RSD 为1.28%，温郁金供试品姜黄素峰面积的RSD 为1.10%，表明精密度良好。 3.7 稳定性试验
在上述色谱条件下，精密吸取对照品溶液(浓度为0.00208mg/ml)和温郁金供试品溶液各20μl ，分别注入液相色谱仪，测定，然后每隔6小时测定一次，考察12小时，再于24和48小时各考察一次。结果表明，对照品和温郁金供试品溶液至少在48小时内测定结果稳定，姜黄素对照品峰面积的RSD 为1.52%（n=5），温郁金供试品中姜黄素峰面积的RSD 为1.05％（n ＝5）。 3.8 重复性试验
取温郁金粉末约1.0g ，精密称定，共5份，以下按含量测定方法进行测定，测得姜黄素的平均含量分别为0.0106mg/g，RSD 为0.54％, 说明本方法重复性良好。重复性试验结果见表5。
表5 重复性试验结果
测定次数
1 2 3 4 5
含量（mg/g）
0.010 0.0106 0.0106 0.0106 0.0107 0.0106 0.0105 0.0106 0.0106 0.0106
平均含量（mg/g）
RSD （%）
0.0106 0.54
3.9 回收率试验
采用加样回收法试验。取已知姜黄素含量的温郁金（批号：04051607，姜黄素的含量为0.0106mg/g）粉末约0.5g ，精密称定，共称取5份，分别置25ml 量瓶中，各分别加入一定量的姜黄素对照品，按供试品制备方法制成供试品溶液，并按含量测定方法进行测定, 按以下公式计算回收率。
回收率（%）=
测得姜黄素的量-样品中姜黄素的量
×100%
加入姜黄素的量
试验结果表明，姜黄素平均回收率为99.75％（n=5），RSD=1.20%。说明该测定方法测定结果准确，测定结果见表6。
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表6 回收率试验结果
次数 样品量（g ）
样品含姜黄
素（ug ）
加入姜黄素量（ug ）
6.24 6.24 6.24 6.24 6.24
测得量（ug ）
回收率（%）
X （%）
RSD （%）
1 0.5439 5.76 2 0.5824 6.17 3 0.5491 5.82 4 0.6799 7.21 5 0.5394 5.72
11.87 97.83 12.42 100.2
12.03 99.52 99.75 1.20 13.51 101.0 11.97 100.2
3.10 十批中试样品的测定
取10批中试郁金样品，各0.1g(黄丝郁金) 或1.0g （温郁金、桂郁金）, 精密称定，照供试品溶液制备项下分别操作，制成供试品溶液。在上述色谱条件下，精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20ul ，分别注入液相色谱仪，测定，并计算各样品中姜黄素的含量，测定结果见表7。
表7 样品的测定结果
批 号 桂 桂 桂 桂 桂 桂 温 温 黄丝 黄丝
含 量（mg/g）
X （mg/g）
04051601 -- -- 04051602 -- -- 04051603 -- -- 04051604 -- -- 04051605 -- -- 04051606 -- -- 04051606 0.011 0.011 04051607 0.010 0.010 04051610 1.071 1.070 04051609 1.068 1.069 --
-- -- -- -- -- 0.011 0.010 1.070 1.069
4 小结与讨论
通过方法学考察，确定了提取条件为：甲醇为溶剂，超声提取0.5h 。建立了高效液相色谱法测定
；柱温：室郁金饮片中姜黄素含量的系统条件：色谱柱：Lichrospher ODS C18柱（4.6×150mm，5um ）
温；流动相：乙腈-水（5%冰醋酸）（45:55）；流速：1.0ml/min；检测波长：420nm 。在上述色谱条件下，温郁金和黄丝郁金中姜黄素分离良好，可达基线分离, 与其相邻峰的分离度大于1.5，达到定量分析的要求。
试验结果表明，不同品种郁金中姜黄素含量相差很大，桂郁金中几乎不含姜黄素，故姜黄素不适合作为桂郁金质量控制的指标。温郁金中姜黄素的含量为0.011mg/g，黄丝郁金中姜黄素含量为1.070mg/g。可以选其作为黄丝郁金、温郁金的质量控制指标。 参考文献
[1]中华人民共和国药典(一部)[S].北京:化学工业出版社,2000:166-167
[2]Hermann PTA,et al.The pharmacology of curcuma longa[S]. Planta Med,1991;57(1):1
[3]徐国钧等. 常用中药材品种整理和质量研究(第一册)[M].福州:福建科学技术出版社,1994:350,360 [4]李艳萍. 中药郁金的化学成分研究. 西北大学学报[J](自然科学版),2000,30(5):411-414.
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附图1 姜黄素的紫外吸收图谱 附图2 姜黄素对照品的HPLC 图谱
附图3 温郁金04051607的HPLC 图谱 附图4 黄丝郁金04051610的HPLC 图谱
附图5 桂郁金04051601 的HPLC 图谱
高效液相色谱法测定祖师麻胶囊中祖师麻甲素含量
陈博，王万，原红果，吴纯洁（成都中医药大学，成都 610072）
[摘 要] 目的：建立祖师麻胶囊质量标准。方法：高效液相色谱法。Kromasil-C 18色谱柱（4.6mm×250mm，5µm），流动相：甲醇-0.5％醋酸溶液（32:68），流速0.5ml·min-1，检测波长327nm 。结果：祖师麻甲素在0.03530～0.4236μg 间呈很好的线性关系，r =0.9999，回收率为101.75%，RSD =2.21%。结论：该法操作简便，准确，可作为该制剂含量测定方法。
[关键词] 祖师麻胶囊； 祖师麻甲素； 高效液相色谱法
祖师麻胶囊系新药转正标准[标准编号：WS3-159(Z-53)-94（Z ）]祖师麻片改剂型而来，具有祛风除湿，活血止痛之功。主要用于风湿痹症，关节炎，类风湿性关节炎诸症，疗效显著。本方仅由祖师麻1味药材组成，祖师麻为瑞香科植物唐古特瑞香Daphne tangutica Maxim.的干燥根皮及茎皮，祖师麻甲素（又名瑞香素）为其主要活性成分之一。查阅大量文献资料，祖师麻甲素的高效液相含量测定报道很少[2]，并且通过实验发现，其方法不是很理想。为更加方便和准确的控制制剂质量，我们经过反复实验，最终选用HPLC 法进行试验，并在文献报道的基础上改进了方法，为该制剂建立方便、稳定和可控的质量标准提供了依据。
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附图 泽泻各炮制品以及标准品的HPLC 图谱
高效液相色谱法测定郁金饮片中姜黄素的含量
雷云霞1，孙立立2，杨书斌2，王娇2
（1. 济南市妇幼保健院；2. 山东省中医药研究院）
[摘 要] 目的：建立高效液相色谱法测定郁金饮片中姜黄素含量的定量分析方法。方法：采用超声提取法，选用色谱柱：Lichrospher ODS C18(4.6×150mm，5μm) ，流动相：乙腈-水（5%冰醋酸）（45：55），检测波长：420 nm，流速：1ml/min，柱温：室温，进行高效液相色谱测定。结果: 在上述色谱条件下，姜黄素进样量在0.4160-0.0208ug 范围内与其峰面积呈良好的线性关系（r =0.9999），平均回收率为99.75 %（n=5），RSD 为1.20%(n=5);精密度试验对照品和供试品RSD 分别为1.28%，1.10%(n=5)，；稳定性试验表明对照品和供试品溶液48小时内稳定；重复性试验RSD 为0.54%(n=5)。结论：该测定方法简单可行，结果准确，重复性好，可用于温郁金、黄丝郁金饮片中姜黄素的含量测定。 [关键词] 郁金饮片；姜黄素；高效液相色谱法；含量测定
郁金具有行气化瘀，清心解郁，利胆退黄的功效，临床常用于经闭痛经，胸腹涨痛、刺痛，热病
分别为姜科植物温郁金Curcuma 神昏，癫痫发狂，黄疸尿赤。中国药典2000年版[1]收载有4个入药品种，
wenyujin Y.H.Chen et C.Ling、姜黄Curcuma longa L.、广西莪术Cuecuma Kwangsiensis S.G.Lee et C.F .Liang 或蓬莪术Curcuma Phaeocaulis Val.的干燥块根。前两者分别习称“温郁金”和“黄丝郁金”，其余按性状不同习称“桂郁金”或“绿丝郁金”。现代研究表明，郁金具有免疫抑制、降血脂、保肝、抗真菌、抗氧化、抗肿瘤、中枢抑制等多种药理活性[2]。据文献检索，郁金中含有少量挥发油、姜黄素等成分，其中姜黄素为其降血脂、抗氧化、抗炎的主要有效成分[3]；其含量以黄丝郁金最高，比莪术高 近百倍，同一植物根茎含量高于块根[4]。本文选用反相高效液相色谱法建立了郁金饮片中姜黄素的含 量测定方法，测定了三种不同品种十批郁金饮片中姜黄素的含量，实验结果证明，该法简单易行、准确、精密度及重现性俱佳，可作为制定黄丝郁金饮片质量标准的参考依据。
1 仪器、试药和供试样品
1.1 仪器：Agilent 1100 Series 高效液相色谱仪(美国) ；Agilent 8453紫外分光光度仪(美国) ；KQ3200型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司) ；BECKMAN COULTER-AllegraTM 6 centrifuge台式高速离心机；939 全自动薄层制板器(重庆南岸贝尔德仪器厂) ；METTLER TOLEDO 1/100000天平(瑞士) ；MILLI-Q 超纯水纯化系统 。
1.2 试药：姜黄素对照品（中国药品生物制品检定所）；甲醇（色谱纯，天津四友）；水为超纯水，其它试剂均为分析纯。 1.3 供试样品：安徽沪谯中药饮片厂自制郁金中试产品，批号：桂04051601，桂04051602，桂04051603，桂04051604，桂04051605，桂04051606, 温04051607，温04051608，黄丝04051609，黄丝04051610。 2 色谱条件
；流动相：乙腈：水（5%冰醋酸）（45:55）；色谱柱：Lichrospher ODS C18柱（4.6×150mm，5um ）
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流速1.0ml/min；检测波长420nm ；柱温为室温。理论板数按姜黄素峰计算应不低于2000。 3 试验方法与结果 3.1 检测波长的选择
在上述色谱条件下，取姜黄素对照品适量，加甲醇稀释后作为样品溶液，以甲醇为参比，用紫外分光光度计在190～900nm 波长范围内扫描，测定姜黄素的最大吸收波长为420nm, 故选定检测波长为420nm. 检测波长选择见附图1。 3.2 对照品溶液的制备
精密称取姜黄素对照品5.20mg ，置25ml 量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密吸取5ml 置50ml 量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为姜黄素对照品溶液储备液，浓度为0.0208mg/ml。
精密量取姜黄素对照品溶液储备液5ml ，置50ml 量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为姜黄素对照品溶液，浓度为0.00208mg/ml。 3.3 供试品溶液的制备
3.3.1 供试品溶液提取条件的选择
参照文献报道:①乙醚脱脂后，加甲醇超声提取0.5h ②直接用甲醇超声提取0.5h, 进行比较试验：取温郁金饮片（批号：04051607）粉末2份各1.0g ，精密称定，按方法①分别置具塞三角烧瓶或圆底烧瓶中，分别精密加入乙醚50ml ，进行超声提取0.5h ，过滤弃去乙醚液，药渣晾干，再精密加入甲醇50ml ，称定重量，超声提取0.5h ，取下放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，离心，取上清液，于旋转蒸发仪低温回收甲醇，定容于5ml 容量瓶中，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm ）滤过；另取2份按②直接精密加入50ml 甲醇，称定重量，超声提取0.5h ，取下放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，离心，取上清液，于旋转蒸发仪低温回收甲醇，定容于5ml 容量瓶中，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm ）滤过，作为供试品液1-4。在上述色谱条件下，精密吸取供试品溶液1－4各20μl, 分别注入液相色谱仪测定，结果各提取方法姜黄素均能达到基线分离，测得的姜黄素峰面积基本一致。测定结果见表1。
表1 不同提取方法测定结果
供试液 1 2 3 4
提取溶剂 乙醚-甲醇 乙醚-甲醇 甲 醇 甲 醇
提取方法
姜黄素（mg/g）
超声0.5h 0.0107 超声0.5h 0.0108 超声0.5h 0.0107 超声0.5h 0.0108
试验结果表明：上述两种提取方法测得的姜黄素含量相差无几，说明两种提取方法效果一致。为简便，选用直接用甲醇超声提取0.5h 作为本品的提取方法。 3.3.2供试品溶液的制备
取温郁金、桂郁金饮片粉末1.0g ，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml ，密塞，称定重量，超声提取30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，离心，取上清液，置旋转蒸发仪低温回收甲醇，定容于5ml 量瓶中，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm ）滤过，作为温郁金、桂郁金供试品溶液。
取黄丝郁金饮片粉末0.1g ，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml ，密塞，称定重量，超声提取30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，离心，取上清液，置旋转蒸发仪低温回收甲醇，定容于25ml 量瓶中，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm ）滤过，作为黄丝郁金供试品溶液。
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3.4 系统适应性试验考察
在上述色谱条件下，分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20ul ，分别注入液相色谱仪，测定。结果表明，分离度为1.87和1.90，达到基线分离，且保留时间适中。对照品的保留时间和峰形与供试品均一致。因此该分析条件可行。对照品和供试品高效液相色谱图见附图2—6。 3.5 线性关系考察
精密吸取姜黃素对照品溶液储备液10ml,8ml ，6ml,4ml,2ml,1ml,0.5ml, 分别置10ml 量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，在上述色谱条件下重复进样两次，每次20ul, 测定峰面积，以姜黄素对照品进样量（μg ）为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程为Y=15554.35X+15.61905，相关系数r=0.9999。结果表明，在上述色谱条件下，姜黄素进样量在0.4160～0.0208μg 范围内与峰面积值呈良好的线性关系。
3.6 精密度试验
在上述色谱条件下，精密吸取对照品溶液（浓度为0.00208mg/ml）和温郁金供试品溶液各20μl ，分别注入液相色谱仪，测定；对照品溶液和温郁金供试品溶液分别各测定5次，结果姜黄素对照品峰面积的RSD 为1.28%，温郁金供试品姜黄素峰面积的RSD 为1.10%，表明精密度良好。 3.7 稳定性试验
在上述色谱条件下，精密吸取对照品溶液(浓度为0.00208mg/ml)和温郁金供试品溶液各20μl ，分别注入液相色谱仪，测定，然后每隔6小时测定一次，考察12小时，再于24和48小时各考察一次。结果表明，对照品和温郁金供试品溶液至少在48小时内测定结果稳定，姜黄素对照品峰面积的RSD 为1.52%（n=5），温郁金供试品中姜黄素峰面积的RSD 为1.05％（n ＝5）。 3.8 重复性试验
取温郁金粉末约1.0g ，精密称定，共5份，以下按含量测定方法进行测定，测得姜黄素的平均含量分别为0.0106mg/g，RSD 为0.54％, 说明本方法重复性良好。重复性试验结果见表5。
表5 重复性试验结果
测定次数
1 2 3 4 5
含量（mg/g）
0.010 0.0106 0.0106 0.0106 0.0107 0.0106 0.0105 0.0106 0.0106 0.0106
平均含量（mg/g）
RSD （%）
0.0106 0.54
3.9 回收率试验
采用加样回收法试验。取已知姜黄素含量的温郁金（批号：04051607，姜黄素的含量为0.0106mg/g）粉末约0.5g ，精密称定，共称取5份，分别置25ml 量瓶中，各分别加入一定量的姜黄素对照品，按供试品制备方法制成供试品溶液，并按含量测定方法进行测定, 按以下公式计算回收率。
回收率（%）=
测得姜黄素的量-样品中姜黄素的量
×100%
加入姜黄素的量
试验结果表明，姜黄素平均回收率为99.75％（n=5），RSD=1.20%。说明该测定方法测定结果准确，测定结果见表6。
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中华中医药学会第五届中药炮制学术会议论文集 广东康美药业股份有限公司
表6 回收率试验结果
次数 样品量（g ）
样品含姜黄
素（ug ）
加入姜黄素量（ug ）
6.24 6.24 6.24 6.24 6.24
测得量（ug ）
回收率（%）
X （%）
RSD （%）
1 0.5439 5.76 2 0.5824 6.17 3 0.5491 5.82 4 0.6799 7.21 5 0.5394 5.72
11.87 97.83 12.42 100.2
12.03 99.52 99.75 1.20 13.51 101.0 11.97 100.2
3.10 十批中试样品的测定
取10批中试郁金样品，各0.1g(黄丝郁金) 或1.0g （温郁金、桂郁金）, 精密称定，照供试品溶液制备项下分别操作，制成供试品溶液。在上述色谱条件下，精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20ul ，分别注入液相色谱仪，测定，并计算各样品中姜黄素的含量，测定结果见表7。
表7 样品的测定结果
批 号 桂 桂 桂 桂 桂 桂 温 温 黄丝 黄丝
含 量（mg/g）
X （mg/g）
04051601 -- -- 04051602 -- -- 04051603 -- -- 04051604 -- -- 04051605 -- -- 04051606 -- -- 04051606 0.011 0.011 04051607 0.010 0.010 04051610 1.071 1.070 04051609 1.068 1.069 --
-- -- -- -- -- 0.011 0.010 1.070 1.069
4 小结与讨论
通过方法学考察，确定了提取条件为：甲醇为溶剂，超声提取0.5h 。建立了高效液相色谱法测定
；柱温：室郁金饮片中姜黄素含量的系统条件：色谱柱：Lichrospher ODS C18柱（4.6×150mm，5um ）
温；流动相：乙腈-水（5%冰醋酸）（45:55）；流速：1.0ml/min；检测波长：420nm 。在上述色谱条件下，温郁金和黄丝郁金中姜黄素分离良好，可达基线分离, 与其相邻峰的分离度大于1.5，达到定量分析的要求。
试验结果表明，不同品种郁金中姜黄素含量相差很大，桂郁金中几乎不含姜黄素，故姜黄素不适合作为桂郁金质量控制的指标。温郁金中姜黄素的含量为0.011mg/g，黄丝郁金中姜黄素含量为1.070mg/g。可以选其作为黄丝郁金、温郁金的质量控制指标。 参考文献
[1]中华人民共和国药典(一部)[S].北京:化学工业出版社,2000:166-167
[2]Hermann PTA,et al.The pharmacology of curcuma longa[S]. Planta Med,1991;57(1):1
[3]徐国钧等. 常用中药材品种整理和质量研究(第一册)[M].福州:福建科学技术出版社,1994:350,360 [4]李艳萍. 中药郁金的化学成分研究. 西北大学学报[J](自然科学版),2000,30(5):411-414.
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热烈庆祝中国中医研究院中药研究所成立五十周年 中国中医研究院中药研究所炮制研究中心
附图1 姜黄素的紫外吸收图谱 附图2 姜黄素对照品的HPLC 图谱
附图3 温郁金04051607的HPLC 图谱 附图4 黄丝郁金04051610的HPLC 图谱
附图5 桂郁金04051601 的HPLC 图谱
高效液相色谱法测定祖师麻胶囊中祖师麻甲素含量
陈博，王万，原红果，吴纯洁（成都中医药大学，成都 610072）
[摘 要] 目的：建立祖师麻胶囊质量标准。方法：高效液相色谱法。Kromasil-C 18色谱柱（4.6mm×250mm，5µm），流动相：甲醇-0.5％醋酸溶液（32:68），流速0.5ml·min-1，检测波长327nm 。结果：祖师麻甲素在0.03530～0.4236μg 间呈很好的线性关系，r =0.9999，回收率为101.75%，RSD =2.21%。结论：该法操作简便，准确，可作为该制剂含量测定方法。
[关键词] 祖师麻胶囊； 祖师麻甲素； 高效液相色谱法
祖师麻胶囊系新药转正标准[标准编号：WS3-159(Z-53)-94（Z ）]祖师麻片改剂型而来，具有祛风除湿，活血止痛之功。主要用于风湿痹症，关节炎，类风湿性关节炎诸症，疗效显著。本方仅由祖师麻1味药材组成，祖师麻为瑞香科植物唐古特瑞香Daphne tangutica Maxim.的干燥根皮及茎皮，祖师麻甲素（又名瑞香素）为其主要活性成分之一。查阅大量文献资料，祖师麻甲素的高效液相含量测定报道很少[2]，并且通过实验发现，其方法不是很理想。为更加方便和准确的控制制剂质量，我们经过反复实验，最终选用HPLC 法进行试验，并在文献报道的基础上改进了方法，为该制剂建立方便、稳定和可控的质量标准提供了依据。
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