多头带绦虫Ｔｍ７基因的表达及间接ＥＬＩＳＡ检测方法的建立
安晓雪１，杨光友１王颖旺１，牟静１，阳爱国３古小彬１，
杨应东２，韦雷飞２，文建国２，王淑贤１，边尧４
１．四川农业大学动物医学院，雅安 ６２５０１４；２．四川省攀枝花市农林科学研究院畜牧水产所，攀枝花 ６１７０６１；３．四川省动物疫病预防控制中心，成都 ６１００４１；４．四川省雅安市雨城区畜牧局，雅安 ６２５０００
摘要：以多头带绦虫Ｔｍ７重组蛋白为抗原，建立动物多头蚴病早期诊断方法。本研究从羊脑多头蚴原头节提取总ＲＮＡ，采用ＲＴ－ＰＣＲ技术首次扩增出Ｔｍ７基因的全序列，该基因的开放阅读框为２０７ ｂｐ，编码６８个氨基酸。将此基因克隆到ｐＥＴ－３２ａ（＋）载体，构建重组表达质粒ｐＥＴ－３２ａ－Ｔｍ７，经转化大肠杆菌ＢＬ２１（ ＤＥ３）后ＩＰＴＧ诱导表达，用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ检测表达产物。以纯化后的表达蛋白作为抗原，建立检测羊脑多头蚴病抗体的重组蛋白间接ＥＬＩＳＡ方法。研究结果表明，Ｔｍ７基因在大肠杆菌中成功表达，表达产物为约２７ ｋｕ的融合表达蛋白，该蛋白能识别羊脑多头蚴病阳性血清。建立的间接ＥＬＩＳＡ方法，检测敏感性可达９３．３％，特异性达９４．１％，研
究结果表明Ｔｍ７重组蛋白可作为脑多头蚴病的诊断抗原。
脑多头蚴；重组抗原；Ｔｍ７；间接ＥＬＩＳＡ
Ｓ８５２．７３４
Ａ
０３６６－６９６４（２０１１）０９－１３０２－０７
Ｐｒｏｋａｒｙｏｔｉｃ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｔｍ７ Ｇｅｎｅ ｏｆ Ｔａｅｎｉａ ｍｕｌｔｉｃｅｐｓ ａｎｄ Ｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔ ｏｆ Ｉｎｄｉｒｅｃｔ ＥＬＩＳＡ Ｕｓｉｎｇ ｔｈｅ Ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ Ｐｒｏｔｅｉｎ
ＡＮ Ｘｉａｏ－ｘｕｅＹＡＮＧ Ｇｕａｎｇ－ｙｏｕＷＡＮＧ Ｙｉｎｇ－ｗａｎｇＭＵ Ｊｉｎｇ
Ｕ Ｘｉａｏ－ｂｉｎＹＹＡＮＧ Ａｉ－ｇｕｏＧＡＮＧ Ｙｉｎｇ－ｄｏｎｇ， ＷＥＩ Ｌｅｉ－ｆｅｉ，
ＷＥＮ Ｊｉａｎ－ｇｕｏ， ＷＡＮＧ Ｓｈｕ－ｘｉａｎ， ＢＩＡＮ Ｙａｏ
２０１１－０１－２６
教育部“长江学者和创新团队发展计划”创新团队项目（ＩＲＴＯ８４８）
安晓雪（１９８４－），女，四川成都人，硕士，从事动物寄生虫病学研究，Ｅ－ｍａｉｌ： ｃａｋｅ１２２０＠ １２６． ｃｏｍ
Ｔ４连接酶
（ＡＦ４８１８８４）和ＥＦ－ｈａｎ６
图４ Ｔｍ７蛋白表Ｆ ｉ ｇ ．４ Ｂ ＬＴｈ２ｅ１ （ＳＤＤＳＥ
多头蚴病的血清、５份
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Ｔｓ８Ｂ２ ａｎｄ Ｔｓ８Ｂ３， ｔｈｒｅｅ ｎｅｗ ｍｅｍｂｅｒｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｔａｅｎｉａ
ｓｏｌｉｕｍ ｍｅｔａｃｅｓｔｏｄｅ ８ｋＤａ ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｆａｍｉｌｙ
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ｏｆ ｈｕｍａｎ ｃｙｓｔｉｃ ｅｃｈｉｎｏｃｏｃｃｏｓｉｓ ｉｎ ｙｏｕｎｇ ｐａｔｉｅｎｔｓ［Ｊ］．
Ｔｒａｎｓ Ｒ Ｓｏｃ Ｔｒｏｐ Ｍｅｄ Ｈｙｇ ， ２００９， １０３ （４） ： ３５５－
３６４．
多头带绦虫Tm7基因的表达及间接ELISA检测方法的建立
作者：
安晓雪， 杨光友， 王颖旺， 牟静， 阳爱国， 古小彬， 杨应东， 韦雷飞， 文建国， 王淑贤， 边尧， ANXiao-xue， YANG Guang-you， WANG Ying-wang， MU Jing， YANG Ai-guo， GU Xiao-bin， YANG Ying-dong，WEI Lei-fei， WEN Jian-guo， WANG Shu-xian， BIAN Yao
安晓雪,杨光友,王颖旺,牟静,古小彬,王淑贤,AN Xiao-xue,YANG Guang-you,WANG Ying-wang,MU Jing,GU Xiao-bin,WANG Shu-xian(四川农业大学动物医学院,雅安,625014)， 阳爱国,YANG Ai-guo(四川省动物疫病预防控制中心,成都,610041)， 杨应东,韦雷飞,文建国,YANG Ying-dong,WEI Lei-fei,WEN Jian-guo(四川省攀枝花市农林科学研究院畜牧水产所,攀枝花,617061)， 边尧,BIAN Yao(四川省雅安市雨城区畜牧局,雅安,625000)畜牧兽医学报
Acta Veterinaria Et Zootechnica Sinica2011,42(9)
作者单位：
刊名：英文刊名：年，卷(期)：
参考文献(19条)
1.IBECHUKWU B I;ONWUKEME K E Intraocular coenurosis:a case report 1991(07)
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本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_xmsyxb201109015.aspx
多头带绦虫Ｔｍ７基因的表达及间接ＥＬＩＳＡ检测方法的建立
安晓雪１，杨光友１王颖旺１，牟静１，阳爱国３古小彬１，
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１．四川农业大学动物医学院，雅安 ６２５０１４；２．四川省攀枝花市农林科学研究院畜牧水产所，攀枝花 ６１７０６１；３．四川省动物疫病预防控制中心，成都 ６１００４１；４．四川省雅安市雨城区畜牧局，雅安 ６２５０００
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究结果表明Ｔｍ７重组蛋白可作为脑多头蚴病的诊断抗原。
脑多头蚴；重组抗原；Ｔｍ７；间接ＥＬＩＳＡ
Ｓ８５２．７３４
Ａ
０３６６－６９６４（２０１１）０９－１３０２－０７
Ｐｒｏｋａｒｙｏｔｉｃ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｔｍ７ Ｇｅｎｅ ｏｆ Ｔａｅｎｉａ ｍｕｌｔｉｃｅｐｓ ａｎｄ Ｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔ ｏｆ Ｉｎｄｉｒｅｃｔ ＥＬＩＳＡ Ｕｓｉｎｇ ｔｈｅ Ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ Ｐｒｏｔｅｉｎ
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Ｕ Ｘｉａｏ－ｂｉｎＹＹＡＮＧ Ａｉ－ｇｕｏＧＡＮＧ Ｙｉｎｇ－ｄｏｎｇ， ＷＥＩ Ｌｅｉ－ｆｅｉ，
ＷＥＮ Ｊｉａｎ－ｇｕｏ， ＷＡＮＧ Ｓｈｕ－ｘｉａｎ， ＢＩＡＮ Ｙａｏ
２０１１－０１－２６
教育部“长江学者和创新团队发展计划”创新团队项目（ＩＲＴＯ８４８）
安晓雪（１９８４－），女，四川成都人，硕士，从事动物寄生虫病学研究，Ｅ－ｍａｉｌ： ｃａｋｅ１２２０＠ １２６． ｃｏｍ
Ｔ４连接酶
（ＡＦ４８１８８４）和ＥＦ－ｈａｎ６
图４ Ｔｍ７蛋白表Ｆ ｉ ｇ ．４ Ｂ ＬＴｈ２ｅ１ （ＳＤＤＳＥ
多头蚴病的血清、５份
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Ｔｓ８Ｂ２ ａｎｄ Ｔｓ８Ｂ３， ｔｈｒｅｅ ｎｅｗ ｍｅｍｂｅｒｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｔａｅｎｉａ
ｓｏｌｉｕｍ ｍｅｔａｃｅｓｔｏｄｅ ８ｋＤａ ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｆａｍｉｌｙ
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多头带绦虫Tm7基因的表达及间接ELISA检测方法的建立
作者：
安晓雪， 杨光友， 王颖旺， 牟静， 阳爱国， 古小彬， 杨应东， 韦雷飞， 文建国， 王淑贤， 边尧， ANXiao-xue， YANG Guang-you， WANG Ying-wang， MU Jing， YANG Ai-guo， GU Xiao-bin， YANG Ying-dong，WEI Lei-fei， WEN Jian-guo， WANG Shu-xian， BIAN Yao
安晓雪,杨光友,王颖旺,牟静,古小彬,王淑贤,AN Xiao-xue,YANG Guang-you,WANG Ying-wang,MU Jing,GU Xiao-bin,WANG Shu-xian(四川农业大学动物医学院,雅安,625014)， 阳爱国,YANG Ai-guo(四川省动物疫病预防控制中心,成都,610041)， 杨应东,韦雷飞,文建国,YANG Ying-dong,WEI Lei-fei,WEN Jian-guo(四川省攀枝花市农林科学研究院畜牧水产所,攀枝花,617061)， 边尧,BIAN Yao(四川省雅安市雨城区畜牧局,雅安,625000)畜牧兽医学报
Acta Veterinaria Et Zootechnica Sinica2011,42(9)
作者单位：
刊名：英文刊名：年，卷(期)：
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本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_xmsyxb201109015.aspx