广东饲料第２４卷第９期２０１５年９月
何绮霞・季天荣，‘林雪贤１续倩２何媛怡２
（１．广东省农业科学院农产品公共监测中心，广东广州５１０６４０）（２．农业部农产品质量安全风险评估实验室（广州），广东广州５１０６４０）
【中图分类号】Ｓ８１６．１７
【文献标识码】Ａ
【文章编号】１００５—８６１３（２０１５）０８一００４３—０４
【摘要】本文通过比较ＧＢ／Ｔ
５００９．４４—２００３、ｓｃ／Ｔ
３０３２—２００７和欧盟１４９号决议（９５／１４９／Ｅｃ）、ＡｏＡｃ等国内外收载的测
定挥发性盐基氮（ＴｖＢ—Ｎ）的方法，确定我国饲料中ＴⅦ一Ｎ的含量测定方法。本实验用ｏ．６ｍｏｌ／Ｌ高氯酸溶液浸提样品，将
浸提液调至碱性，蒸馏，用硼酸吸收液吸收，再以盐酸标准溶液滴定。结果表明：该方法具有良好的准确度和精密度，回收率在９５．２％一１０６．２％，ＲｓＤ在ｏ．５％～９．２％，而且样品的前处理方法操作简单，易于推广应用。
【关键词】饲料；挥发性盐基氮；含量测定
挥发性盐基氮是指肉品中的蛋白质在酶和细菌的作用下，分解产生的氨（ＮＨ。）和胺类（Ｒ—ＮＨ２）等一大类碱性含氮物，此类物质有毒，可以和组织内的酸性物质结合，形成挥发性的ＮＨ４＋・Ｒ即盐基态氮，故称挥发性盐基氮（ＴＶＢ—Ｎ）。经长期检测发现，鱼粉、肉粉中挥发性盐基氮的含量与其新鲜程度有明显的相关性。ＴｖＢ—Ｎ值是国标中用于评价肉质鲜度的理化指标之一，饲料行业中经常使用该指标评估动物性产品的质量。
目前我国国家标准已经规定了饲料用鱼粉、肉骨粉、血粉等原料的ＴＶＢ—Ｎ限量值，但是采用的检测方法是参考ＧＢ，Ｉ’５００９．４４—２００３《肉与肉制品卫生标准的分析方法》或水产品行业标准ＳＣ／１１３０３２—２００７《水产品中挥发性盐基氮的测定》，尚没有对饲料中挥发性盐基氮含量进行测定的方法。欧
盟于１９９５年颁布了１４９号决议（ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎＤｅｃｉ—ｓｉｏｎ９５／１４９／ＥＣ０ｆ８Ｍａｒｃｈ１９９５）《水产品中挥发性盐基氮的限量标准及其测定方法》、ＡＯＡＣ采用的方法有蒸馏法和铵离子选择性电极法。因此，为了满足我国饲料行业对挥发性盐基氮的测定的需求，本文探索并制订了《饲料中挥发性盐基氮的测定》的国家标准，使饲料行业在生产、经营过程中，对饲料产品质量的控制有法可依，以保证动物的健康和人类食品的质量安全。
１材料和方法１．１仪器
样品粉碎机或研钵、分样筛（孑Ｌ径０．４５ｍｍ）、分析天平（感量０．１ｍｇ）、电炉、离心机（３５００ｒ，ｍｉｎ）、微量酸式滴定管（最小分度值为Ｏ．０１ｍＬ）、半微量定氮装置。
１．２试剂和溶液
ｏ．６
ｍｏｌ／Ｌ高氯酸溶液（高氯酸５０ｍＬ，加水定
『收稿日期１２０１５—０８—１６
【项目基金】广东省科技型中小企业技术创新专项资金项目（项目编号：２０１３８１１２０１４０９）资助。
【作者简介】何绮霞，女，１９６３年生，广东广州人，主任药师，主要从事农产品质量安全监测与标准研究工作。
【通讯作者】季天荣，女，１９８１年出生，山西人，助理研究员，主要从事饲料质量安全与动物营养研究。
容至１０００ｍＬ）；４％氢氧化钠溶液；０．０１ｍ０１几盐酸
滴定液；１％硼酸吸收液；硅油消泡剂；混合指示剂（甲基红０．１％乙醇溶液与溴甲酚绿０．５％乙醇溶液等体积混合，临用前配制）；１％甲基红指示剂（称取甲基红指示剂１９，溶解于１００
１．３实验方法
ｍＬ
９５％乙醇中）。
・４３・
万方数据
广东饲料第２４卷第９期２０１５年９月
取饲料样品用四分法缩分、粉碎并通过０．４５ｍｍ孔径分析筛。称取试样５ｇ（精确至０．１ｍｇ）
２．１常用蛋白原料与饲料中挥发性盐基氮测定
的回收率与精密度
ｍｏ儿高氯酸溶液４０
ｍＬ，振摇３０ｍｉｎ，用０．６ｍｏ此高氯酸溶液定容，摇
至５０ｍＬ容量瓶中，加入Ｏ．６
依据ＧＢ／ｒＩＩ２７４０４—２００８《实验室质量控制规范食品理化检测规程》附录Ｆ之检测方法确认的技术要求，本实验采用中华鳖配合饲料、血球粉、鱼粉、血粉、肉骨粉等五个样品进行Ｔ—ＶＢＮ含量测定的回收率与精密度考察，结果见表１，平均回收率在
９５．２％～１０６．２％，ＲＳＤ在０．５％～９．２％。
匀。取此浸提液约３０ｍＬ于５０ｍＬ离心管中，离心
５
ｍｉｎ，精密吸取浸提上清液１０．００ｍＬ，注入半微量另取１％硼酸吸收液３０ｍＬ置锥形瓶内，加混
定氮器反应室内。
合指示剂２—３滴，并将锥形瓶置于半微量定氮器冷凝管下端，使其下端插人硼酸吸收液的液面下。
在蒸汽发生装置中加人１％甲基红指示剂１—２滴，在样品反应装置中加入硅油消泡剂１—２滴和４％氢氧化钠溶液１０ｍＬ，然后迅速加塞，并加水密封，防止漏气。通入蒸汽，当馏出液达到１５０ｍＬ后，将冷凝管末端离开吸收液面，再蒸１ｍｉｎ，用蒸馏水冲洗冷凝管末端，洗液并人锥形瓶内，然后停止蒸
馏。用０．０１
２．２其他有机胺的添加回收试验
在鱼粉中分别添加磷酸组胺、酪胺盐酸、三甲胺盐酸盐和盐酸二甲胺各１００ｍ｛；，１００９和１５０ｍ∥１００９两个水平，测定Ｔ—ＶＢＮ含量的回收率与精密度。结果表明：磷酸组胺和酪胺盐酸没有蒸馏出来，添加回收率几乎为０；而盐酸二甲胺和三甲胺盐酸盐的添加回收率在规定范围内，详见表２。
３讨论
３．１方法的适用性
ｍｏ儿盐酸滴定液滴定，溶液由蓝绿色变
为灰红色为终点。同时用０．６ｍ洲Ｌ高氯酸溶液
１０．００
通过选取含有不同动物性蛋白原料的饲料产品进行挥发性盐基氮的测定，其含量详见表３。结果表明，本法可用于动物性蛋白饲料原料和含有动物
ｍＬ代替浸提上清液进行空白试验。
２结果
表１
饲料中Ｔ—ＶＢＮ的回收率与精密度（ｎ＝６）
添加划州”了…＿…２竽塑掣…ｒ…了一一平：：巍７回嚣，％ＲｓＤ，％
０
４０．１１７３．７６８９．８６１４４＿３４
１０．９１
３９．５６７２．４４
９０．４５
４４．６１６９．５０８８．３５
１４１．５８９．２３
４０．５５６８．３８８９．５５１４３．２５
１０．２１
４２．１５６９．１５８８．５１１４４．５２９．５８１９．７４３４．７８
６０．１５
４４．２５７０．７８９０．０１１４０．４５８．９０２０．９５３３．５５６０．７８２０４．２５
２５２．１４
４１．８７７０．６７８９．４６１４２．８５
９．５６２０．１８
—
５．１７２．９４Ｏ．９５
１．１１９．１８２．７３
中华鳖配合饲料
３０５０
９６．００９５．１８１００．９８
１４２．９８８．５３２０．４６３２．７４
５６．２８
—
１０６．２０９６．８３９７．９６
２０．５４１９．８５３３．５９
５８．５１
１９．５４３５．２１５９．２５２０５．８２２５４．５１２９７．１５３５２．４６４１９．７８
４６５．１５
血球粉
３２．７４
５６．２８２０４．３７
３３．７７
５８．５４
３．０５３．２７１．０４１．５４０．９６０．５０
１．１６
２００．２８２５７．５８２９４．４１３４８．９９
４２９．１１４８０．０２
２０２．２４２５８．２５２９８．５６３５０．５８
４２４．８０
２０１．２３２５０．０１３００．０１３５０．５２４３０．２９４８５．５２５２７．１６５８８．２５２０６．２４２６０．５８３０８．４２３６２．０５
２０３．０３２５５．４７２９８．８１３４９．８３４２４．８３４７４．７０５２８．８１５７７－２３２０９．００２６１．１６３０７．５４３６５．５４
—
１０４．８７９５．７８９７．８６
２６０．３１
鱼粉
㈣一∞丛∞一。的姗
１５０
０
２９９．８７３４８．９９
４１８．１６４７５．７３
３０２．８７
３４７．４１
４２６．８５４８０．５８５２８．１５５８５．４０２０５．３８２５９．９６３０４．０５３７０．１４
—
１００．２４１０３．９８１０１．６０
５０
４６１．２１５２５．７３５６５．２２２０３．０１２６０．０２３１１．４０３５５．５２
２．０１０．９３１．７０２．６５Ｏ．６１
１＿３２１．６６
血粉
１００１５０Ｏ５０
５３３＿３２５７０．１４２１８．６４２６０．７６３０９．４２３６８．０９
５２２．６６５８４．１２２０９．８９２６１．４０
３１０．７９
５３５．８４５７０．２５２１０．８１２６４．２１３０１．１５３６５．２５
—
１０４．３１９８．５４１０４．３６
肉骨粉
１００１５０
３７２．１８
・４４・
万方数据
广东饲料第２４卷第９期
２０１５年９月口重衄
１６６．４０２７０．５４３１５．８４
１６４．１５２７０．５４３１５．８４
Ｏ１６４．９０２６３．４２３１７．３１１６２．６５
２６３．４２３１７．３１
１６４．９０２６６．２７３１７．３１
１６５．６５２６６．２７３１７＿３１
１６３．４０２７０．５４３１８．７８１６４．１５２６７．７０
３１４．３７
１６４．９０２６７．７０３１２．９０１６１．１５
２６６．２７３１７．３１
１６１．９０２６４．８５３１５．８４１６５．６５
２６９．１２３１５．８４
１６４．４０２６７．２２３１６．３３１６３．９０
２６７．２２３１６．３３
～
１０２．８２１０１．２９
１．５５２．９４２．９４２．０１１．７５
２．４９０．０１
盐酸
１００１００
二甲胺
１５０
０
—
１０３．３２１０１．６２
三甲
１００
胺盐酸盐
１５０
性蛋白原料制成的饲料产品。
３．２已收载挥发性盐基氮的饲料产品
目前，我国已规定了多种饲料产品的’ＩｖＢ—Ｎ最高限量值（ＭＲＬ）（见表４）。
表４各种饲料产品中ＴＶＢ—Ｎ的ＭＲＬ值
ｍｏ此和１．２ｍｏｌ／Ｌ）对鱼粉、血粉和中华鳖配合饲料
进行测定，结果表明：提取试剂浓度为０．６ｍｏｌ／Ｌ时ＴＶＢ—Ｎ含量比较稳定。
３．３．３提取时间的确定
采用不同的提取时间对鱼粉、血粉和中华鳖配合饲料进行测定，结果表明：提取时间为３０ｍｉｎ比较合适。
３．３．４提取液的稳定性
样品用高氯酸溶液提取后分别放置４ｈ、２４ｈ、４８ｈ、７２ｈ后测定ＴＶＢ—Ｎ含量，结果：随着放置时间的延长，鱼粉、血粉及中华鳖配合饲料的ＴｖＢ—Ｎ含量有增加的趋势；其中，鱼粉和血粉的增幅未超过各时间段ＴｖＢ—Ｎ均值的１０％，但中华鳖配合饲料
３．３提取条件的优化３．３．１提取剂的选择
参考ＧＢ厂ｒ５００９．４４、ＳＣ／１’３０３２和欧盟方法，分别比较了以水和不同浓度高氯酸溶液为提取剂，对鱼粉、血粉、肉骨粉及中华鳖配合饲料中ＴＶＢ—Ｎ进行测定，结果显示：一、高氯酸提取液比水提取液更容易过滤；二、以高氯酸溶液为提取剂，滤液的ｐＨ较低，能抑制微生物生长，减少腐败的继续发生，从而保证测定结果的真实性。所以选用高氯酸提取更合适。
３．３．２提取剂浓度的确定
采用不同浓度的高氯酸溶液（０．１
ｍ０１／Ｌ、０．６
的提取液在放置４８ｈ后，与４ｈ内相比，ＴＶＢ—Ｎ含量高于平均值的１０％。因此，本实验拟选择样品提取液的放置时间为＜２４ｈ。
３．３．５浸提液的分离方法
样品加入０．６ｍｏｌ／Ｌ高氯酸溶液浸提后，通过比较过滤和离心两种分离方法发现，离心方法更适合于配合饲料的测定。
３．４蒸馏条件的确定
本实验研究了馏出液分别达到１００ｍＬ、１５０ｍＬ和２００ｍＬ时，对鱼粉、血粉及中华鳖配合饲料中ＴＶＢ—Ｎ含量测定的影响，结果发现，当蒸馏液体积为１００ｍＬ时，所得各饲料ＴＶＢ—Ｎ含量仅为蒸馏液
・４５・
万方数据
广东饲料第２４卷第９期２０１５年９月
曹小华
（广东粤海饲料集团，广东湛江５２４０１７）
【中图分类号】Ｓ８１６．１
【文献标识码】Ａ
【文章编号】１００５—８６１３（２０１５）０８—００４６—０３
【摘要】鱼粉作为优质的高蛋白水产饲料原料，在营养配方与成本调控上具有举足轻重的地位，对鱼粉营养特性及其新鲜度评价方法进行研究与探索，对于实现鱼粉的有效替代和高效利用，具有非常重要的意义。本文对鱼粉的营养特性及新鲜度
评价指标进行了总结概述。
【关键词】鱼粉；氨基酸；新鲜度；丙二醛；霉变
（续上期）
２鱼粉的新鲜度评价
鱼粉是鱼或其加工的下脚料经蒸煮、压榨、脱脂、干燥、粉碎、包装等方式加工而成，鱼粉的营养价值主要取决于制作鱼粉的原料及加工工艺。鱼粉的新鲜度是影响鱼粉养殖效果和安全性的重要因素，鱼粉新鲜度不好主要是在原料鱼或鱼粉加工、储存、运输等过程中，由于微生物污染、脂肪酸变质、鱼粉自燃等因素，导致蛋白质分解、腐败、脂肪酸酸败、蛋白质“焦化”等变质反应。因此，评价鱼粉的新鲜度主要从蛋白质鲜度、油脂鲜度和霉变等方面综合分析。表为６国家饲料卫生标准中所涉及的新鲜度指标要求（李晓川等，２００４）。
２．１蛋白质鲜度
生物的氧化分解，产生一些有毒物质如组胺、挥发性盐基氮、生物胺（酪胺、腐胺、尸胺、草丙胺等）、吲哚、硫醇、硫化氢、粪臭素等。评价鱼粉蛋白质鲜度的主要指标有挥发性盐基氮、组胺及生物胺等。
２．１．１挥发性盐基氮
挥发性盐基氮（ＶＢＮ）是由于酶和细菌的作用，在腐败过程中使蛋白质分解而产生氨以及胺类等碱性含氮物质。此类物质具有挥发性，其含量越高，表明氨基酸被破坏的越多，特别是蛋氨酸和酪氨酸等稳定性较弱的重要氨基酸。挥发性盐基氮的产生造成蛋白质中氨基酸的平衡失调，降低了有效蛋白质率和氨基酸的吸收利用，影响饲养动物的生长率。
测定鱼粉ｖＢＮ主要采用半微量定氮法，其操作简单、快速，水产饲料企业普遍将ＶＢＮ作为鱼粉新鲜度的首要监测指标。新鲜鱼粉的ＶＢＮ一般不超过１５０ｍｇ／ｌ【ｇ，当然不同的加工方式、以及包装、运输过程、贮存环境的湿度和温度差别对蛋白质的质量影响很大，红鱼粉的ＶＢＮ含量比低温低压生产
－＋－＋－＋一＋－＋一＋－＋一十－＋一＋一＋－＋一＋－＋－＋－—－卜－—＋．
鱼粉的蛋白质腐败主要由于腐败菌等有害微
【收稿日期】２叭５一０６—１８
【作者简介】曹小华，男，汉族，本科，广东南雄人，主要从事水
产饲料的检测与开发。
一＋一＋－＋一＋＊＋”—・｝
体积为１５０ｍＬ时的８０％～８５％；当蒸馏液体积达到１５０ｍＬ和２００ｍＬ时，鱼粉、血粉及中华鳖配合饲料中挥发性盐基氮含量变化不大，所以选择蒸馏液体积达到１５０ｍＬ较为合适。
４结论
・４６・
本实验建立了饲料中挥发性盐基氮的含量测定方法。该法的前处理简单易行，方法的灵敏度、精密度好，回收率高。可作为饲料行业对饲料新鲜程度的常规分析、监控手段之一。
参考文献：（略）
万方数据
广东饲料第２４卷第９期２０１５年９月
何绮霞・季天荣，‘林雪贤１续倩２何媛怡２
（１．广东省农业科学院农产品公共监测中心，广东广州５１０６４０）（２．农业部农产品质量安全风险评估实验室（广州），广东广州５１０６４０）
【中图分类号】Ｓ８１６．１７
【文献标识码】Ａ
【文章编号】１００５—８６１３（２０１５）０８一００４３—０４
【摘要】本文通过比较ＧＢ／Ｔ
５００９．４４—２００３、ｓｃ／Ｔ
３０３２—２００７和欧盟１４９号决议（９５／１４９／Ｅｃ）、ＡｏＡｃ等国内外收载的测
定挥发性盐基氮（ＴｖＢ—Ｎ）的方法，确定我国饲料中ＴⅦ一Ｎ的含量测定方法。本实验用ｏ．６ｍｏｌ／Ｌ高氯酸溶液浸提样品，将
浸提液调至碱性，蒸馏，用硼酸吸收液吸收，再以盐酸标准溶液滴定。结果表明：该方法具有良好的准确度和精密度，回收率在９５．２％一１０６．２％，ＲｓＤ在ｏ．５％～９．２％，而且样品的前处理方法操作简单，易于推广应用。
【关键词】饲料；挥发性盐基氮；含量测定
挥发性盐基氮是指肉品中的蛋白质在酶和细菌的作用下，分解产生的氨（ＮＨ。）和胺类（Ｒ—ＮＨ２）等一大类碱性含氮物，此类物质有毒，可以和组织内的酸性物质结合，形成挥发性的ＮＨ４＋・Ｒ即盐基态氮，故称挥发性盐基氮（ＴＶＢ—Ｎ）。经长期检测发现，鱼粉、肉粉中挥发性盐基氮的含量与其新鲜程度有明显的相关性。ＴｖＢ—Ｎ值是国标中用于评价肉质鲜度的理化指标之一，饲料行业中经常使用该指标评估动物性产品的质量。
目前我国国家标准已经规定了饲料用鱼粉、肉骨粉、血粉等原料的ＴＶＢ—Ｎ限量值，但是采用的检测方法是参考ＧＢ，Ｉ’５００９．４４—２００３《肉与肉制品卫生标准的分析方法》或水产品行业标准ＳＣ／１１３０３２—２００７《水产品中挥发性盐基氮的测定》，尚没有对饲料中挥发性盐基氮含量进行测定的方法。欧
盟于１９９５年颁布了１４９号决议（ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎＤｅｃｉ—ｓｉｏｎ９５／１４９／ＥＣ０ｆ８Ｍａｒｃｈ１９９５）《水产品中挥发性盐基氮的限量标准及其测定方法》、ＡＯＡＣ采用的方法有蒸馏法和铵离子选择性电极法。因此，为了满足我国饲料行业对挥发性盐基氮的测定的需求，本文探索并制订了《饲料中挥发性盐基氮的测定》的国家标准，使饲料行业在生产、经营过程中，对饲料产品质量的控制有法可依，以保证动物的健康和人类食品的质量安全。
１材料和方法１．１仪器
样品粉碎机或研钵、分样筛（孑Ｌ径０．４５ｍｍ）、分析天平（感量０．１ｍｇ）、电炉、离心机（３５００ｒ，ｍｉｎ）、微量酸式滴定管（最小分度值为Ｏ．０１ｍＬ）、半微量定氮装置。
１．２试剂和溶液
ｏ．６
ｍｏｌ／Ｌ高氯酸溶液（高氯酸５０ｍＬ，加水定
『收稿日期１２０１５—０８—１６
【项目基金】广东省科技型中小企业技术创新专项资金项目（项目编号：２０１３８１１２０１４０９）资助。
【作者简介】何绮霞，女，１９６３年生，广东广州人，主任药师，主要从事农产品质量安全监测与标准研究工作。
【通讯作者】季天荣，女，１９８１年出生，山西人，助理研究员，主要从事饲料质量安全与动物营养研究。
容至１０００ｍＬ）；４％氢氧化钠溶液；０．０１ｍ０１几盐酸
滴定液；１％硼酸吸收液；硅油消泡剂；混合指示剂（甲基红０．１％乙醇溶液与溴甲酚绿０．５％乙醇溶液等体积混合，临用前配制）；１％甲基红指示剂（称取甲基红指示剂１９，溶解于１００
１．３实验方法
ｍＬ
９５％乙醇中）。
・４３・
万方数据
广东饲料第２４卷第９期２０１５年９月
取饲料样品用四分法缩分、粉碎并通过０．４５ｍｍ孔径分析筛。称取试样５ｇ（精确至０．１ｍｇ）
２．１常用蛋白原料与饲料中挥发性盐基氮测定
的回收率与精密度
ｍｏ儿高氯酸溶液４０
ｍＬ，振摇３０ｍｉｎ，用０．６ｍｏ此高氯酸溶液定容，摇
至５０ｍＬ容量瓶中，加入Ｏ．６
依据ＧＢ／ｒＩＩ２７４０４—２００８《实验室质量控制规范食品理化检测规程》附录Ｆ之检测方法确认的技术要求，本实验采用中华鳖配合饲料、血球粉、鱼粉、血粉、肉骨粉等五个样品进行Ｔ—ＶＢＮ含量测定的回收率与精密度考察，结果见表１，平均回收率在
９５．２％～１０６．２％，ＲＳＤ在０．５％～９．２％。
匀。取此浸提液约３０ｍＬ于５０ｍＬ离心管中，离心
５
ｍｉｎ，精密吸取浸提上清液１０．００ｍＬ，注入半微量另取１％硼酸吸收液３０ｍＬ置锥形瓶内，加混
定氮器反应室内。
合指示剂２—３滴，并将锥形瓶置于半微量定氮器冷凝管下端，使其下端插人硼酸吸收液的液面下。
在蒸汽发生装置中加人１％甲基红指示剂１—２滴，在样品反应装置中加入硅油消泡剂１—２滴和４％氢氧化钠溶液１０ｍＬ，然后迅速加塞，并加水密封，防止漏气。通入蒸汽，当馏出液达到１５０ｍＬ后，将冷凝管末端离开吸收液面，再蒸１ｍｉｎ，用蒸馏水冲洗冷凝管末端，洗液并人锥形瓶内，然后停止蒸
馏。用０．０１
２．２其他有机胺的添加回收试验
在鱼粉中分别添加磷酸组胺、酪胺盐酸、三甲胺盐酸盐和盐酸二甲胺各１００ｍ｛；，１００９和１５０ｍ∥１００９两个水平，测定Ｔ—ＶＢＮ含量的回收率与精密度。结果表明：磷酸组胺和酪胺盐酸没有蒸馏出来，添加回收率几乎为０；而盐酸二甲胺和三甲胺盐酸盐的添加回收率在规定范围内，详见表２。
３讨论
３．１方法的适用性
ｍｏ儿盐酸滴定液滴定，溶液由蓝绿色变
为灰红色为终点。同时用０．６ｍ洲Ｌ高氯酸溶液
１０．００
通过选取含有不同动物性蛋白原料的饲料产品进行挥发性盐基氮的测定，其含量详见表３。结果表明，本法可用于动物性蛋白饲料原料和含有动物
ｍＬ代替浸提上清液进行空白试验。
２结果
表１
饲料中Ｔ—ＶＢＮ的回收率与精密度（ｎ＝６）
添加划州”了…＿…２竽塑掣…ｒ…了一一平：：巍７回嚣，％ＲｓＤ，％
０
４０．１１７３．７６８９．８６１４４＿３４
１０．９１
３９．５６７２．４４
９０．４５
４４．６１６９．５０８８．３５
１４１．５８９．２３
４０．５５６８．３８８９．５５１４３．２５
１０．２１
４２．１５６９．１５８８．５１１４４．５２９．５８１９．７４３４．７８
６０．１５
４４．２５７０．７８９０．０１１４０．４５８．９０２０．９５３３．５５６０．７８２０４．２５
２５２．１４
４１．８７７０．６７８９．４６１４２．８５
９．５６２０．１８
—
５．１７２．９４Ｏ．９５
１．１１９．１８２．７３
中华鳖配合饲料
３０５０
９６．００９５．１８１００．９８
１４２．９８８．５３２０．４６３２．７４
５６．２８
—
１０６．２０９６．８３９７．９６
２０．５４１９．８５３３．５９
５８．５１
１９．５４３５．２１５９．２５２０５．８２２５４．５１２９７．１５３５２．４６４１９．７８
４６５．１５
血球粉
３２．７４
５６．２８２０４．３７
３３．７７
５８．５４
３．０５３．２７１．０４１．５４０．９６０．５０
１．１６
２００．２８２５７．５８２９４．４１３４８．９９
４２９．１１４８０．０２
２０２．２４２５８．２５２９８．５６３５０．５８
４２４．８０
２０１．２３２５０．０１３００．０１３５０．５２４３０．２９４８５．５２５２７．１６５８８．２５２０６．２４２６０．５８３０８．４２３６２．０５
２０３．０３２５５．４７２９８．８１３４９．８３４２４．８３４７４．７０５２８．８１５７７－２３２０９．００２６１．１６３０７．５４３６５．５４
—
１０４．８７９５．７８９７．８６
２６０．３１
鱼粉
㈣一∞丛∞一。的姗
１５０
０
２９９．８７３４８．９９
４１８．１６４７５．７３
３０２．８７
３４７．４１
４２６．８５４８０．５８５２８．１５５８５．４０２０５．３８２５９．９６３０４．０５３７０．１４
—
１００．２４１０３．９８１０１．６０
５０
４６１．２１５２５．７３５６５．２２２０３．０１２６０．０２３１１．４０３５５．５２
２．０１０．９３１．７０２．６５Ｏ．６１
１＿３２１．６６
血粉
１００１５０Ｏ５０
５３３＿３２５７０．１４２１８．６４２６０．７６３０９．４２３６８．０９
５２２．６６５８４．１２２０９．８９２６１．４０
３１０．７９
５３５．８４５７０．２５２１０．８１２６４．２１３０１．１５３６５．２５
—
１０４．３１９８．５４１０４．３６
肉骨粉
１００１５０
３７２．１８
・４４・
万方数据
广东饲料第２４卷第９期
２０１５年９月口重衄
１６６．４０２７０．５４３１５．８４
１６４．１５２７０．５４３１５．８４
Ｏ１６４．９０２６３．４２３１７．３１１６２．６５
２６３．４２３１７．３１
１６４．９０２６６．２７３１７．３１
１６５．６５２６６．２７３１７＿３１
１６３．４０２７０．５４３１８．７８１６４．１５２６７．７０
３１４．３７
１６４．９０２６７．７０３１２．９０１６１．１５
２６６．２７３１７．３１
１６１．９０２６４．８５３１５．８４１６５．６５
２６９．１２３１５．８４
１６４．４０２６７．２２３１６．３３１６３．９０
２６７．２２３１６．３３
～
１０２．８２１０１．２９
１．５５２．９４２．９４２．０１１．７５
２．４９０．０１
盐酸
１００１００
二甲胺
１５０
０
—
１０３．３２１０１．６２
三甲
１００
胺盐酸盐
１５０
性蛋白原料制成的饲料产品。
３．２已收载挥发性盐基氮的饲料产品
目前，我国已规定了多种饲料产品的’ＩｖＢ—Ｎ最高限量值（ＭＲＬ）（见表４）。
表４各种饲料产品中ＴＶＢ—Ｎ的ＭＲＬ值
ｍｏ此和１．２ｍｏｌ／Ｌ）对鱼粉、血粉和中华鳖配合饲料
进行测定，结果表明：提取试剂浓度为０．６ｍｏｌ／Ｌ时ＴＶＢ—Ｎ含量比较稳定。
３．３．３提取时间的确定
采用不同的提取时间对鱼粉、血粉和中华鳖配合饲料进行测定，结果表明：提取时间为３０ｍｉｎ比较合适。
３．３．４提取液的稳定性
样品用高氯酸溶液提取后分别放置４ｈ、２４ｈ、４８ｈ、７２ｈ后测定ＴＶＢ—Ｎ含量，结果：随着放置时间的延长，鱼粉、血粉及中华鳖配合饲料的ＴｖＢ—Ｎ含量有增加的趋势；其中，鱼粉和血粉的增幅未超过各时间段ＴｖＢ—Ｎ均值的１０％，但中华鳖配合饲料
３．３提取条件的优化３．３．１提取剂的选择
参考ＧＢ厂ｒ５００９．４４、ＳＣ／１’３０３２和欧盟方法，分别比较了以水和不同浓度高氯酸溶液为提取剂，对鱼粉、血粉、肉骨粉及中华鳖配合饲料中ＴＶＢ—Ｎ进行测定，结果显示：一、高氯酸提取液比水提取液更容易过滤；二、以高氯酸溶液为提取剂，滤液的ｐＨ较低，能抑制微生物生长，减少腐败的继续发生，从而保证测定结果的真实性。所以选用高氯酸提取更合适。
３．３．２提取剂浓度的确定
采用不同浓度的高氯酸溶液（０．１
ｍ０１／Ｌ、０．６
的提取液在放置４８ｈ后，与４ｈ内相比，ＴＶＢ—Ｎ含量高于平均值的１０％。因此，本实验拟选择样品提取液的放置时间为＜２４ｈ。
３．３．５浸提液的分离方法
样品加入０．６ｍｏｌ／Ｌ高氯酸溶液浸提后，通过比较过滤和离心两种分离方法发现，离心方法更适合于配合饲料的测定。
３．４蒸馏条件的确定
本实验研究了馏出液分别达到１００ｍＬ、１５０ｍＬ和２００ｍＬ时，对鱼粉、血粉及中华鳖配合饲料中ＴＶＢ—Ｎ含量测定的影响，结果发现，当蒸馏液体积为１００ｍＬ时，所得各饲料ＴＶＢ—Ｎ含量仅为蒸馏液
・４５・
万方数据
广东饲料第２４卷第９期２０１５年９月
曹小华
（广东粤海饲料集团，广东湛江５２４０１７）
【中图分类号】Ｓ８１６．１
【文献标识码】Ａ
【文章编号】１００５—８６１３（２０１５）０８—００４６—０３
【摘要】鱼粉作为优质的高蛋白水产饲料原料，在营养配方与成本调控上具有举足轻重的地位，对鱼粉营养特性及其新鲜度评价方法进行研究与探索，对于实现鱼粉的有效替代和高效利用，具有非常重要的意义。本文对鱼粉的营养特性及新鲜度
评价指标进行了总结概述。
【关键词】鱼粉；氨基酸；新鲜度；丙二醛；霉变
（续上期）
２鱼粉的新鲜度评价
鱼粉是鱼或其加工的下脚料经蒸煮、压榨、脱脂、干燥、粉碎、包装等方式加工而成，鱼粉的营养价值主要取决于制作鱼粉的原料及加工工艺。鱼粉的新鲜度是影响鱼粉养殖效果和安全性的重要因素，鱼粉新鲜度不好主要是在原料鱼或鱼粉加工、储存、运输等过程中，由于微生物污染、脂肪酸变质、鱼粉自燃等因素，导致蛋白质分解、腐败、脂肪酸酸败、蛋白质“焦化”等变质反应。因此，评价鱼粉的新鲜度主要从蛋白质鲜度、油脂鲜度和霉变等方面综合分析。表为６国家饲料卫生标准中所涉及的新鲜度指标要求（李晓川等，２００４）。
２．１蛋白质鲜度
生物的氧化分解，产生一些有毒物质如组胺、挥发性盐基氮、生物胺（酪胺、腐胺、尸胺、草丙胺等）、吲哚、硫醇、硫化氢、粪臭素等。评价鱼粉蛋白质鲜度的主要指标有挥发性盐基氮、组胺及生物胺等。
２．１．１挥发性盐基氮
挥发性盐基氮（ＶＢＮ）是由于酶和细菌的作用，在腐败过程中使蛋白质分解而产生氨以及胺类等碱性含氮物质。此类物质具有挥发性，其含量越高，表明氨基酸被破坏的越多，特别是蛋氨酸和酪氨酸等稳定性较弱的重要氨基酸。挥发性盐基氮的产生造成蛋白质中氨基酸的平衡失调，降低了有效蛋白质率和氨基酸的吸收利用，影响饲养动物的生长率。
测定鱼粉ｖＢＮ主要采用半微量定氮法，其操作简单、快速，水产饲料企业普遍将ＶＢＮ作为鱼粉新鲜度的首要监测指标。新鲜鱼粉的ＶＢＮ一般不超过１５０ｍｇ／ｌ【ｇ，当然不同的加工方式、以及包装、运输过程、贮存环境的湿度和温度差别对蛋白质的质量影响很大，红鱼粉的ＶＢＮ含量比低温低压生产
－＋－＋－＋一＋－＋一＋－＋一十－＋一＋一＋－＋一＋－＋－＋－—－卜－—＋．
鱼粉的蛋白质腐败主要由于腐败菌等有害微
【收稿日期】２叭５一０６—１８
【作者简介】曹小华，男，汉族，本科，广东南雄人，主要从事水
产饲料的检测与开发。
一＋一＋－＋一＋＊＋”—・｝
体积为１５０ｍＬ时的８０％～８５％；当蒸馏液体积达到１５０ｍＬ和２００ｍＬ时，鱼粉、血粉及中华鳖配合饲料中挥发性盐基氮含量变化不大，所以选择蒸馏液体积达到１５０ｍＬ较为合适。
４结论
・４６・
本实验建立了饲料中挥发性盐基氮的含量测定方法。该法的前处理简单易行，方法的灵敏度、精密度好，回收率高。可作为饲料行业对饲料新鲜程度的常规分析、监控手段之一。
参考文献：（略）
万方数据