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江苏农业科学 2005年第3期
星花凤梨的组织培养和快速繁殖
郑淑萍,徐建新,丁 峰,顾敏燕
(江苏省张家港市农业试验站,江苏张家港215616)
摘要:用星花凤梨短缩茎作外植体培养,,接种在MS培养基上诱导侧芽萌发;侧芽在MS+6-BA31;不定芽在MS+NAA0.5mg/L+IBA0.5mg/L 关键词:凤梨;组织培养;快繁技术
中图分类号:S6823-1302(2005)03-0094-02
,植株莲座状,叶
宽带状,,叶丛呈筒状。穗状花序由叶筒中央抽出,色彩多变,姿态各异,是一种室内观叶观花花卉,花期达半年之久,深受大众喜爱,市场需求量较大。为实现观赏凤梨种苗的国产化生产,对该花进行了组织培养和快速繁殖研究。1 材料与方法1.1 材料来源
13h,光照强度2000lx左右。2 结果与分析2.1 芽的诱导
将消毒好的叶片与茎尖分别接种到诱导培养基
上,先暗培养10d(暗培养有助于减少褐化现象),然后在设计的光照下进行培养。40d后茎尖基部开始膨大,60d后可形成含有10～15个以上的不定芽,等芽长至1～2cm时切下转入分化培养基。叶片诱导芽,同样在培养40d后,发现叶片边缘开始膨大,到58d后已开始形成愈伤组织,形成的愈伤组织为淡黄绿色,较疏松,然后将形成的愈伤组织切成小块转接于诱导培养基上,形成丛生芽。经试验,诱导培养基以不加任何激素的MS培养基效果较好,所产生的芽生长迅速且粗壮。2.2 芽的增殖
将诱导出的丛生芽在相同成分的培养基上不断切分继代,即可获得大量不定芽。本试验所筛选出的最佳分化及继代培养基为MS+6-BA3mg/L+NAA0.1mg/L,连续继代培养4次,平均增殖系数
试验材料取自张家港市港美园艺有限公司星花类凤梨侧芽。试验在张家港市农业试验站组培室进行。1.2 试验方法从凤梨母株上分取当年生侧芽后,用清水冲净外面的赃物,流水下边冲洗边剥去外面老的叶鞘,取其短缩茎,保留1～2cm幼嫩叶鞘,用70%酒精浸泡15s,然后用0.1%升汞消毒液浸泡12min,无菌水冲洗6～8次,吸干其表面的水分,剥去短缩茎外面的叶片,取里面一部分下部的嫩叶,然后再剥取茎尖,分别接种到MS基本培养基上进行诱导,经过数天培养可获得丛生芽,以后用丛生芽不断切分继代使芽大量增殖。再用不定芽生根培养即可获得完整植株。待植株长至5cm时,出瓶移栽到育苗盘中育苗。1.3 培养条件以MS培养基为基本培养基,附加3%蔗糖、0.75%琼脂及不同种类和浓度的激素,pH值调至5.5～6.0。在培养过程中温度25℃左右,每日光照
收稿日期:2005-01-24
作者简介:郑淑萍(1959—),女,江苏张家港人,助理农艺师,主要从事植物组织培养研究。Tel:(0512)58478270。
为5。对粉叶红穗凤梨不定芽的形成及增殖效果都
很好(表1)。本试验中,星花凤梨类中的紫心花与黄
表1 不同培养基对粉叶红穗凤梨丛生芽分化及增殖的影响培养基
MSMSMSMSMS
6-BA
(mg/L)1.01.52.02.03.0
NAA
体数芽数
(mg/L)
(个)(个)0.40.50.51.00.1
[**************]
2.63.53.84.18.5
外植平均
芽的形态效果
黄绿色芽弱差淡绿色芽弱差淡绿色芽偏弱一般褐绿色芽粗壮一般嫩绿色芽略壮好
注:分化培养45d后观察的结果。
郑淑萍等:星花凤梨的组织培养和快速繁殖
—95—
心花凤梨的诱导和增殖方法与其他星花凤梨类品种的研究结果有明显差异,其原因有待于进一步研究。2.3 生根培养
不定芽长至3cm左右时,将不定芽由芽丛单个切下,转入生根培养基培养15～20d开始生根,培养约30～40d,小苗高5cm左右时即可移栽。生根培养基在本试验中以MS基本培养基加入不同浓度的IBA和NAA两种生长素构成若干种不同组合的培养基,对粉叶红穗凤梨不定芽进行壮苗生根培养(表2)。
表2 不同IBA和NAA培养基
NAA
(mg/L)
A()
系比较粗壮,平均根数为4.5条,平均根长为1.0cm。健壮的瓶苗是移栽成活的基础。2.4 移栽
将生根良好的瓶苗打开瓶盖,在室内炼苗3d左右,取出小苗,洗清培养基后移栽到育苗盘中。具体育苗技术还待进一步研究完善。3 讨论
,、增殖、生根等。无菌苗快繁体系的关键是:(1)外植体的选择和消毒。应选用当年生侧芽作外殖体,这样既保证了母株的生存,又容易消毒。(2)由于所取的外殖体生长发育情况和生理状态不同,会导致接种后不同程度褐化及萌动速度不一。所以一般以取较小的侧芽作为外殖体材料,所切取的茎段可明显减轻褐化现象,诱导效果也较好。(3)接种后先要暗培养一段时间,暗培养可有效减少外殖体的褐化现象。
(张/)(条/株)(cm)
3.
3.3.2.05850.0.0.0.5587MS00.4.01/2MS0.504.5MS0.304.01/2MS0.103.1 注:生根壮苗培养35d后观察的结果。
结果表明,MS+IBA0.5mg/L+NAA0.5mg/L是较好的生根培养基,生根效果比其他组合要好,根
江苏省农业科学院举办水稻条纹病毒免疫检测技术培训班
继去年成功举办第一期水稻条纹病毒免疫检测技术培训班后,江苏省农科院植物保护研究所于2005年4月4日、6日再次在南京举办第二、第三期
的要求,非常适合于在基层单位推广应用。
培训期间由主讲人周益军研究员详细讲解植物病毒免疫检测的原理和水稻条纹病毒的斑点免疫检测方法,研究小组的多位专业技术人员进行了现场技术指导。参加培训人员从华东地区各病区采集了当地灰飞虱,于现场进行了检测并获得成功,检测结果显示江苏、上海、安徽和浙江各地灰飞虱带毒率为2%～58%,平均达28.1%。结合今年灰飞虱虫量基本与去年同期持平或有所增加的现状,2005年将是继2004年后的又一个水稻条纹叶枯病大发生年,病害的防治形势将异常严峻。
水稻条纹叶枯病的防治是华东地区特别是江苏省内水稻病害防治上的头等大事,病害预测预报的准确性和防治的有效性有赖于我们对灰飞虱带毒情况认识的超前性和精确性。水稻条纹病毒免疫检测技术在基层农技推广人员中的迅速普及,可以提前掌握田间灰飞虱带毒率的动态消长,不仅能提早预测病害的发生情况,还有利于提高防治的针对性和有效性,具有重大的实用价值。
(周益军 周 彤)
水稻条纹病毒免疫检测技术培训班。共有来自江
苏、上海、安徽和浙江四省市的32名中青年农业技术骨干参加了培训。
水稻条纹叶枯病是当前华东地区水稻生产上最为重要的病害之一,是由灰飞虱传播的一种病毒病害,病害严重发生时往往导致田块绝收,仅江苏省2004年发生面积就达2300万亩,造成了巨大的损失。传毒介体灰飞虱的带毒率是病害发生流行的重要指标,也是病害预测预报工作中必须进行的内容之一。在本培训班举办之前,这一测报工作仅能在有条件的实验室进行,极大地限制了对水稻条纹叶枯病开展预测预报工作的进行。江苏省农科院植物保护研究所植物病毒实验室通过多年的技术攻关,研制出水稻条纹病毒的特异性抗体,并建立了一套灰飞虱带毒率斑点免疫检测(Dot-ELISA)技术体系。该方法除具有快速、灵敏、经济等特点外,还经过优化、简化检测技术方法,降低了试验条件和设备
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江苏农业科学 2005年第3期
星花凤梨的组织培养和快速繁殖
郑淑萍,徐建新,丁 峰,顾敏燕
(江苏省张家港市农业试验站,江苏张家港215616)
摘要:用星花凤梨短缩茎作外植体培养,,接种在MS培养基上诱导侧芽萌发;侧芽在MS+6-BA31;不定芽在MS+NAA0.5mg/L+IBA0.5mg/L 关键词:凤梨;组织培养;快繁技术
中图分类号:S6823-1302(2005)03-0094-02
,植株莲座状,叶
宽带状,,叶丛呈筒状。穗状花序由叶筒中央抽出,色彩多变,姿态各异,是一种室内观叶观花花卉,花期达半年之久,深受大众喜爱,市场需求量较大。为实现观赏凤梨种苗的国产化生产,对该花进行了组织培养和快速繁殖研究。1 材料与方法1.1 材料来源
13h,光照强度2000lx左右。2 结果与分析2.1 芽的诱导
将消毒好的叶片与茎尖分别接种到诱导培养基
上,先暗培养10d(暗培养有助于减少褐化现象),然后在设计的光照下进行培养。40d后茎尖基部开始膨大,60d后可形成含有10～15个以上的不定芽,等芽长至1～2cm时切下转入分化培养基。叶片诱导芽,同样在培养40d后,发现叶片边缘开始膨大,到58d后已开始形成愈伤组织,形成的愈伤组织为淡黄绿色,较疏松,然后将形成的愈伤组织切成小块转接于诱导培养基上,形成丛生芽。经试验,诱导培养基以不加任何激素的MS培养基效果较好,所产生的芽生长迅速且粗壮。2.2 芽的增殖
将诱导出的丛生芽在相同成分的培养基上不断切分继代,即可获得大量不定芽。本试验所筛选出的最佳分化及继代培养基为MS+6-BA3mg/L+NAA0.1mg/L,连续继代培养4次,平均增殖系数
试验材料取自张家港市港美园艺有限公司星花类凤梨侧芽。试验在张家港市农业试验站组培室进行。1.2 试验方法从凤梨母株上分取当年生侧芽后,用清水冲净外面的赃物,流水下边冲洗边剥去外面老的叶鞘,取其短缩茎,保留1～2cm幼嫩叶鞘,用70%酒精浸泡15s,然后用0.1%升汞消毒液浸泡12min,无菌水冲洗6～8次,吸干其表面的水分,剥去短缩茎外面的叶片,取里面一部分下部的嫩叶,然后再剥取茎尖,分别接种到MS基本培养基上进行诱导,经过数天培养可获得丛生芽,以后用丛生芽不断切分继代使芽大量增殖。再用不定芽生根培养即可获得完整植株。待植株长至5cm时,出瓶移栽到育苗盘中育苗。1.3 培养条件以MS培养基为基本培养基,附加3%蔗糖、0.75%琼脂及不同种类和浓度的激素,pH值调至5.5～6.0。在培养过程中温度25℃左右,每日光照
收稿日期:2005-01-24
作者简介:郑淑萍(1959—),女,江苏张家港人,助理农艺师,主要从事植物组织培养研究。Tel:(0512)58478270。
为5。对粉叶红穗凤梨不定芽的形成及增殖效果都
很好(表1)。本试验中,星花凤梨类中的紫心花与黄
表1 不同培养基对粉叶红穗凤梨丛生芽分化及增殖的影响培养基
MSMSMSMSMS
6-BA
(mg/L)1.01.52.02.03.0
NAA
体数芽数
(mg/L)
(个)(个)0.40.50.51.00.1
[**************]
2.63.53.84.18.5
外植平均
芽的形态效果
黄绿色芽弱差淡绿色芽弱差淡绿色芽偏弱一般褐绿色芽粗壮一般嫩绿色芽略壮好
注:分化培养45d后观察的结果。
郑淑萍等:星花凤梨的组织培养和快速繁殖
—95—
心花凤梨的诱导和增殖方法与其他星花凤梨类品种的研究结果有明显差异,其原因有待于进一步研究。2.3 生根培养
不定芽长至3cm左右时,将不定芽由芽丛单个切下,转入生根培养基培养15～20d开始生根,培养约30～40d,小苗高5cm左右时即可移栽。生根培养基在本试验中以MS基本培养基加入不同浓度的IBA和NAA两种生长素构成若干种不同组合的培养基,对粉叶红穗凤梨不定芽进行壮苗生根培养(表2)。
表2 不同IBA和NAA培养基
NAA
(mg/L)
A()
系比较粗壮,平均根数为4.5条,平均根长为1.0cm。健壮的瓶苗是移栽成活的基础。2.4 移栽
将生根良好的瓶苗打开瓶盖,在室内炼苗3d左右,取出小苗,洗清培养基后移栽到育苗盘中。具体育苗技术还待进一步研究完善。3 讨论
,、增殖、生根等。无菌苗快繁体系的关键是:(1)外植体的选择和消毒。应选用当年生侧芽作外殖体,这样既保证了母株的生存,又容易消毒。(2)由于所取的外殖体生长发育情况和生理状态不同,会导致接种后不同程度褐化及萌动速度不一。所以一般以取较小的侧芽作为外殖体材料,所切取的茎段可明显减轻褐化现象,诱导效果也较好。(3)接种后先要暗培养一段时间,暗培养可有效减少外殖体的褐化现象。
(张/)(条/株)(cm)
3.
3.3.2.05850.0.0.0.5587MS00.4.01/2MS0.504.5MS0.304.01/2MS0.103.1 注:生根壮苗培养35d后观察的结果。
结果表明,MS+IBA0.5mg/L+NAA0.5mg/L是较好的生根培养基,生根效果比其他组合要好,根
江苏省农业科学院举办水稻条纹病毒免疫检测技术培训班
继去年成功举办第一期水稻条纹病毒免疫检测技术培训班后,江苏省农科院植物保护研究所于2005年4月4日、6日再次在南京举办第二、第三期
的要求,非常适合于在基层单位推广应用。
培训期间由主讲人周益军研究员详细讲解植物病毒免疫检测的原理和水稻条纹病毒的斑点免疫检测方法,研究小组的多位专业技术人员进行了现场技术指导。参加培训人员从华东地区各病区采集了当地灰飞虱,于现场进行了检测并获得成功,检测结果显示江苏、上海、安徽和浙江各地灰飞虱带毒率为2%～58%,平均达28.1%。结合今年灰飞虱虫量基本与去年同期持平或有所增加的现状,2005年将是继2004年后的又一个水稻条纹叶枯病大发生年,病害的防治形势将异常严峻。
水稻条纹叶枯病的防治是华东地区特别是江苏省内水稻病害防治上的头等大事,病害预测预报的准确性和防治的有效性有赖于我们对灰飞虱带毒情况认识的超前性和精确性。水稻条纹病毒免疫检测技术在基层农技推广人员中的迅速普及,可以提前掌握田间灰飞虱带毒率的动态消长,不仅能提早预测病害的发生情况,还有利于提高防治的针对性和有效性,具有重大的实用价值。
(周益军 周 彤)
水稻条纹病毒免疫检测技术培训班。共有来自江
苏、上海、安徽和浙江四省市的32名中青年农业技术骨干参加了培训。
水稻条纹叶枯病是当前华东地区水稻生产上最为重要的病害之一,是由灰飞虱传播的一种病毒病害,病害严重发生时往往导致田块绝收,仅江苏省2004年发生面积就达2300万亩,造成了巨大的损失。传毒介体灰飞虱的带毒率是病害发生流行的重要指标,也是病害预测预报工作中必须进行的内容之一。在本培训班举办之前,这一测报工作仅能在有条件的实验室进行,极大地限制了对水稻条纹叶枯病开展预测预报工作的进行。江苏省农科院植物保护研究所植物病毒实验室通过多年的技术攻关,研制出水稻条纹病毒的特异性抗体,并建立了一套灰飞虱带毒率斑点免疫检测(Dot-ELISA)技术体系。该方法除具有快速、灵敏、经济等特点外,还经过优化、简化检测技术方法,降低了试验条件和设备