培养基名称:营养琼脂(普通肉汤琼脂培养基)
品种编号:022020
培养基英译名称:Nutrient Agar
培养基规格: 250g
营养琼脂(用途:用于细菌总数测定、保存菌种及纯培养,也可用于消毒效果测定。
营养琼脂使用原理:
蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源; 渗透压; 琼脂是培养基的凝固剂。
配方(每升) :
蛋白胨10g
牛肉膏粉3g
氯化钠 5g
琼脂15g
最终pH 7.3±0.2
营养琼脂( 1,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全15min ,备用。
225克(或25mL) ,放入含有225mL 灭菌生理(瓶内预置适当数量的玻璃珠) ,充分振摇,即为1:1:100,1:1000……稀释液。
3、根据对样品污染情况的估计,选择2—3个合适的稀释度,分别在做10倍稀释的同时,吸取1mL 稀释液于灭菌平皿中,每个稀释度做2个平皿。
4、稀释液移入平皿后应及时将凉至46℃左右的培养基注入平皿约15mL ,并转动平皿使混合均匀,同时将营养琼脂培养基倾入加有1mL 稀释液的灭菌平皿内作空白对照。待琼脂凝固后,倒置于36±1℃温箱中培养48±2h。
5、观察结果。
6、菌落计数方法:
做平板菌落计数时,可用肉眼观察,必要时用放大镜检查,以防遗漏,在计下各平板的菌落数后,求出同稀释度的各平板平均菌落总数。
7、菌落计数的报告:
选取菌落数在30—300之间的平板作为菌落总数测定标准。一个稀释度使用两个平板,应采用两个平板平均数,其中一个平板有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数,若片状菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布又很均匀,以代表全皿菌落数。平皿内如有我链状菌落生长时(菌落之间无明显界线) 条链,可视为一个菌落; A :稀释度的选择:
应选择平均菌落数在30—300
若有两个稀释度. 其生长的菌落数无均在30来决定。若其比值小于或等于22则报告其较小的数字。
以稀释倍数报告之。
30,则应按稀释度最底的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。 1乘以最底稀释倍数报告之。
30—300之间,其中一部分大于300或小于3030或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。
100以内时,按其实有数报告,大于100时,采用二位有效数字,在二位数字后面的有效数值,以四舍五入法计算。为了缩短数字后面的零数,也可以用10的指数来表示。
稀释度选择及菌落数报告方式
例次稀释液及菌落数两稀释液之比菌落总数个/g或mL 报告方式个/g或mL 10-110-210-3
1多不可计16420——16 40016 000或1.6×104
2多不可计295461.637 7503 8000或3.8×104
3多不可计271602.2 ——27 10027 000或2.7×104
4多不可计多不可计313 ——31 300 31 0000或3.1×105
527115 ——270270或2.7×102
6 000 ——
7多不可计30512——30 500 31 000或3.1×104
质量控制:
本品接种下列菌株,置于36±1℃温箱中培养 菌 名 菌 号 生长状况 菌落特征
大肠埃希氏菌 ATCC25922 齐,表面光滑,湿润。
金黄色葡萄球菌 ATCC6538 黄色,圆形,边缘整齐,表面光滑、湿润,不透明。
三年。
培养基名称:营养琼脂(普通肉汤琼脂培养基)
品种编号:022020
培养基英译名称:Nutrient Agar
培养基规格: 250g
营养琼脂(用途:用于细菌总数测定、保存菌种及纯培养,也可用于消毒效果测定。
营养琼脂使用原理:
蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源; 渗透压; 琼脂是培养基的凝固剂。
配方(每升) :
蛋白胨10g
牛肉膏粉3g
氯化钠 5g
琼脂15g
最终pH 7.3±0.2
营养琼脂( 1,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全15min ,备用。
225克(或25mL) ,放入含有225mL 灭菌生理(瓶内预置适当数量的玻璃珠) ,充分振摇,即为1:1:100,1:1000……稀释液。
3、根据对样品污染情况的估计,选择2—3个合适的稀释度,分别在做10倍稀释的同时,吸取1mL 稀释液于灭菌平皿中,每个稀释度做2个平皿。
4、稀释液移入平皿后应及时将凉至46℃左右的培养基注入平皿约15mL ,并转动平皿使混合均匀,同时将营养琼脂培养基倾入加有1mL 稀释液的灭菌平皿内作空白对照。待琼脂凝固后,倒置于36±1℃温箱中培养48±2h。
5、观察结果。
6、菌落计数方法:
做平板菌落计数时,可用肉眼观察,必要时用放大镜检查,以防遗漏,在计下各平板的菌落数后,求出同稀释度的各平板平均菌落总数。
7、菌落计数的报告:
选取菌落数在30—300之间的平板作为菌落总数测定标准。一个稀释度使用两个平板,应采用两个平板平均数,其中一个平板有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数,若片状菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布又很均匀,以代表全皿菌落数。平皿内如有我链状菌落生长时(菌落之间无明显界线) 条链,可视为一个菌落; A :稀释度的选择:
应选择平均菌落数在30—300
若有两个稀释度. 其生长的菌落数无均在30来决定。若其比值小于或等于22则报告其较小的数字。
以稀释倍数报告之。
30,则应按稀释度最底的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。 1乘以最底稀释倍数报告之。
30—300之间,其中一部分大于300或小于3030或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。
100以内时,按其实有数报告,大于100时,采用二位有效数字,在二位数字后面的有效数值,以四舍五入法计算。为了缩短数字后面的零数,也可以用10的指数来表示。
稀释度选择及菌落数报告方式
例次稀释液及菌落数两稀释液之比菌落总数个/g或mL 报告方式个/g或mL 10-110-210-3
1多不可计16420——16 40016 000或1.6×104
2多不可计295461.637 7503 8000或3.8×104
3多不可计271602.2 ——27 10027 000或2.7×104
4多不可计多不可计313 ——31 300 31 0000或3.1×105
527115 ——270270或2.7×102
6 000 ——
7多不可计30512——30 500 31 000或3.1×104
质量控制:
本品接种下列菌株,置于36±1℃温箱中培养 菌 名 菌 号 生长状况 菌落特征
大肠埃希氏菌 ATCC25922 齐,表面光滑,湿润。
金黄色葡萄球菌 ATCC6538 黄色,圆形,边缘整齐,表面光滑、湿润,不透明。
三年。