二轮实验复习 3-6页
一、实验试剂
1. 用到酒精的实验
(1)叶绿素的提取:无水酒精用于提取光合色素
(2)物质鉴定实验:50%酒精用于洗去浮色(苏丹III和IV)
(3)DNA粗提取:95%冷酒精用于析出DNA
(4)观察有丝分裂:95%酒精与15%盐酸1:1混合(解离液)用于使组织细胞分散开
(5)微生物培养、植物组培、动物细胞培养等中的无菌操作:75%酒精用于消毒
(6)土壤中小动物类群丰富度的研究:70%酒精用于保存土壤中的小动物
(7)萨克斯的叶片遮光实验:用95%酒精煮叶片达到脱色
2. 用到盐酸的实验
(1)观察有丝分裂:95%酒精与15%盐酸1:1混合(解离液)用于使组织细胞分散开
(2)观察细胞中DNA与RNA的分布:8%盐酸用于①增大细胞膜对甲基绿、吡罗红的通透性;②让DNA更好地与甲基绿结合
(3)探究影响酶活性的调节:5%盐酸用于调节反应体系的pH
(4)植物组织培养技术:盐酸用于调节培养基的pH
(5)微生物的纯化与培养:盐酸用于调节培养基的pH
(6)生物维持pH稳定的机制:0.1mol/L盐酸用于改变溶液体系的pH
(7)促胰液素的发现:斯他林和贝利斯用盐酸刺激使小肠粘膜产生促胰液素
3. 用到NaOH的实验
(1)探究影响酶活性的调节:5%的NaOH用于调节反应体系的pH
(2)植物组织培养技术:NaOH用于调节培养基的pH
(3)微生物的纯化与培养:NaOH用于调节培养基的pH
(4)生物维持pH稳定的机制:0.1mol/L的NaOH用于改变溶液体系的pH
(5)物质鉴定实验:0.1g/mL的NaOH用于配置斐林试剂和双缩脲试剂
(6)探究酵母菌的呼吸方式:10%的NaOH用于吸收CO2
(7)细胞大小与物质运输的关系:将含有酚酞的琼脂块浸入NaOH溶液中
4. 用到蒸馏水(清水)、无菌水的实验
(1)使用高倍显微镜观察细胞:蒸馏水用于制作植物细胞的临时装片,也用于洗去某些多余的染液
(2)制备细胞膜:蒸馏水用于涨破红细胞
(3)DNA的粗提取:①蒸馏水用于涨破动物细胞以获取含DNA的混合溶液;②蒸馏水用于稀释2mol/L的NaCl溶液。
(3)观察植物细胞质壁分离及复原:清水用于制作临时装片和使细胞发生质壁分离复原
(4)微生物的纯化与培养:无菌水用于稀释菌液
(5)蒸馏水、清水经常作为植物为材料的探究实验中的空白对照
(6)观察细胞的有丝分裂、减数分裂:漂洗细胞,防止过度解离以及影响染色
5. 用到特定酶的实验
(1)植物体细胞杂交:果胶酶和纤维素酶用于水解细胞壁
(2)动物细胞培养技术:胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)用于分散动物细胞
(3)基因工程:限制酶用于剪切DNA,DNA连接酶用于目的基因与载体的连接
(4)PCR技术:耐高温的DNA聚合酶(Taq酶)用于催化DNA的延伸
(5)比较过氧化氢的分解:肝脏研磨液中的过氧化氢酶用于催化过氧化氢的分解
(6)探究影响酶活性的条件:淀粉酶、过氧化氢酶分别用于探究温度、pH对酶活性的影响
(7)DNA的粗提取:嫩肉粉中的木瓜蛋白酶可以水解蛋白质
(8)艾弗里的肺炎双球菌转化实验:DNA酶用于水解DNA,验证DNA是转化因子
二、实验器材
1. 用到显微镜的实验
(1)使用高倍显微镜观察细胞
(2)物质鉴定实验:检测脂肪时用于观察细胞中被染色的脂肪粒
(3)观察DNA与RNA在细胞中的分布
(4)制备细胞膜:用于观察涨破前后的血红细胞
(5)观察线粒体和叶绿体、观察细胞质环流
(6)观察植物细胞质壁分离及复原
(7)生物膜结构的探索:罗伯特森用电子显微镜观察细胞膜,光学显微镜观察人鼠融合细胞
(8)观察细胞的有丝分裂、减数分裂
(9)低温诱导植物染色体数目的变化
(10)培养液中酵母菌种群数量的变化
2.用离心机的实验
(1)分离细胞器:差速离心用于分离不同重量的细胞器
(2)制备细胞膜:将涨破的细胞膜离心至沉淀中
(3)赫尔希、蔡斯的噬菌体侵染实验:将细菌离心至沉淀中,观察放射性的分布
(4)探究DNA的复制方式:密度梯度离心用于观察子代DNA的重量差异
(5)PCR技术:离心用于反应体系的混合
(6)植物体细胞杂交、动物细胞融合:离心可以诱导原生质体或动物细胞融合
三、实验材料
1. 对实验材料有特殊要求的实验
(1)物质鉴定实验:实验材料本身无色或颜色浅
(2)制备细胞膜:哺乳动物红细胞
(3)DNA的粗提取:DNA含量较高且较易提取(不能是哺乳动物的血细胞)
(4)观察细胞的有丝分裂、低温诱导染色体加倍:植物根尖分生区细胞
(5)观察细胞的减数分裂:植物的花药、动物的雄性生殖器官(精巢或睾丸)
(6)观察植物细胞质壁分离及复原:成熟的、液泡中有颜色的植物细胞
(7)调查人群中的遗传病:调查发病率需要对人群进行随机抽样,调查遗传方式需要找患者家系
(8)植物组织培养:分化程度低,全能性高的植物外植体
(9)动物细胞培养:胚胎或幼龄动物的组织、器官(分裂能力强)
2. 需要保持实验材料活性的实验(活体实验)
3. 实验操作导致实验材料死亡的实验
四、实验条件
需要控制温度条件的实验
(1)物质鉴定实验:鉴定还原糖和DNA需要水浴加热
(2)探究影响酶活性的条件:温度对酶活性的影响(水浴)
(3)传统发酵技术:果酒要求18~25℃,果醋要求30~35℃,腐乳要求15~18℃,泡菜要求室温
(4)探究环境对光合作用的影响:温度条件相同且适宜
(5)低温诱导染色体加倍:4℃诱导36h
(6)微生物的纯化与培养:高压蒸汽灭菌一般121℃维持15~30min,保存菌种一般在4℃以下,倒平板需要让固体培养基凝固(50℃以下),巴氏消毒法(60~82℃长时间)
(7)PCR技术:90℃左右变性,55℃左右退火(复性),70℃左右延伸
(8)动物细胞培养:培养细胞所对应的动物体体温,哺乳动物一般是36.5±0.5℃
(9)植物组织培养:一般是18~22℃
(10)萨克斯叶片遮光实验:在用95%酒精中煮浴叶片脱色
五、实验操作
需要进行筛选的实验
(1)微生物的分离与纯化:筛选土壤中的尿素分解菌和纤维素分解菌
(2)低温诱导染色体加倍:筛选染色体加倍的细胞
(3)植物体细胞杂交和动物细胞融合:筛选融合的杂种细胞
(4)单克隆抗体的制备:两次筛选①筛选出杂交瘤细胞②筛选出特定的(能产生单一抗体的单克隆的)杂交瘤细胞
(5)基因工程技术:筛选出转化了表达载体的受体细胞,筛选出能产生目的蛋白质的转基因生物
(6)单倍体育种:筛选出所需性状的纯合体
六、实验方法
1. 利用同位素标记法的实验
(1)探究分泌蛋白的合成与运输路径:用3H-亮氨酸标记氨基酸
(2)探究光合作用的科学发现史:鲁宾和卡门用18O分别标记H2O和CO2,卡尔文用14C标记CO2
(3)赫尔希和蔡斯的噬菌体侵染实验:用32P标记DNA,用35S标记蛋白质
(4)探究DNA的复制方式:用15N、14N分别培养大肠杆菌(无放射性)
(5)核酸分子杂交技术:标记基因探针,检测目的基因是否导入受体细胞和目的基因是否转录
(6)蛋白质分子杂交技术:标记抗体,检测目的基因是否导入表达,杂交瘤细胞的筛选、单抗诊盒和生物导弹
2.利用分子杂交技术的实验
七、实验思想
用假说-演绎法思想进行的实验
(1)孟德尔的豌豆杂交实验
(2)摩尔根的果蝇杂交实验
(3)DNA是遗传物质(艾弗里、赫尔希)
(4)DNA的复制方式
(5)遗传密码的破译(选学)
(6)促胰液素的发现
二轮实验复习 3-6页
一、实验试剂
1. 用到酒精的实验
(1)叶绿素的提取:无水酒精用于提取光合色素
(2)物质鉴定实验:50%酒精用于洗去浮色(苏丹III和IV)
(3)DNA粗提取:95%冷酒精用于析出DNA
(4)观察有丝分裂:95%酒精与15%盐酸1:1混合(解离液)用于使组织细胞分散开
(5)微生物培养、植物组培、动物细胞培养等中的无菌操作:75%酒精用于消毒
(6)土壤中小动物类群丰富度的研究:70%酒精用于保存土壤中的小动物
(7)萨克斯的叶片遮光实验:用95%酒精煮叶片达到脱色
2. 用到盐酸的实验
(1)观察有丝分裂:95%酒精与15%盐酸1:1混合(解离液)用于使组织细胞分散开
(2)观察细胞中DNA与RNA的分布:8%盐酸用于①增大细胞膜对甲基绿、吡罗红的通透性;②让DNA更好地与甲基绿结合
(3)探究影响酶活性的调节:5%盐酸用于调节反应体系的pH
(4)植物组织培养技术:盐酸用于调节培养基的pH
(5)微生物的纯化与培养:盐酸用于调节培养基的pH
(6)生物维持pH稳定的机制:0.1mol/L盐酸用于改变溶液体系的pH
(7)促胰液素的发现:斯他林和贝利斯用盐酸刺激使小肠粘膜产生促胰液素
3. 用到NaOH的实验
(1)探究影响酶活性的调节:5%的NaOH用于调节反应体系的pH
(2)植物组织培养技术:NaOH用于调节培养基的pH
(3)微生物的纯化与培养:NaOH用于调节培养基的pH
(4)生物维持pH稳定的机制:0.1mol/L的NaOH用于改变溶液体系的pH
(5)物质鉴定实验:0.1g/mL的NaOH用于配置斐林试剂和双缩脲试剂
(6)探究酵母菌的呼吸方式:10%的NaOH用于吸收CO2
(7)细胞大小与物质运输的关系:将含有酚酞的琼脂块浸入NaOH溶液中
4. 用到蒸馏水(清水)、无菌水的实验
(1)使用高倍显微镜观察细胞:蒸馏水用于制作植物细胞的临时装片,也用于洗去某些多余的染液
(2)制备细胞膜:蒸馏水用于涨破红细胞
(3)DNA的粗提取:①蒸馏水用于涨破动物细胞以获取含DNA的混合溶液;②蒸馏水用于稀释2mol/L的NaCl溶液。
(3)观察植物细胞质壁分离及复原:清水用于制作临时装片和使细胞发生质壁分离复原
(4)微生物的纯化与培养:无菌水用于稀释菌液
(5)蒸馏水、清水经常作为植物为材料的探究实验中的空白对照
(6)观察细胞的有丝分裂、减数分裂:漂洗细胞,防止过度解离以及影响染色
5. 用到特定酶的实验
(1)植物体细胞杂交:果胶酶和纤维素酶用于水解细胞壁
(2)动物细胞培养技术:胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)用于分散动物细胞
(3)基因工程:限制酶用于剪切DNA,DNA连接酶用于目的基因与载体的连接
(4)PCR技术:耐高温的DNA聚合酶(Taq酶)用于催化DNA的延伸
(5)比较过氧化氢的分解:肝脏研磨液中的过氧化氢酶用于催化过氧化氢的分解
(6)探究影响酶活性的条件:淀粉酶、过氧化氢酶分别用于探究温度、pH对酶活性的影响
(7)DNA的粗提取:嫩肉粉中的木瓜蛋白酶可以水解蛋白质
(8)艾弗里的肺炎双球菌转化实验:DNA酶用于水解DNA,验证DNA是转化因子
二、实验器材
1. 用到显微镜的实验
(1)使用高倍显微镜观察细胞
(2)物质鉴定实验:检测脂肪时用于观察细胞中被染色的脂肪粒
(3)观察DNA与RNA在细胞中的分布
(4)制备细胞膜:用于观察涨破前后的血红细胞
(5)观察线粒体和叶绿体、观察细胞质环流
(6)观察植物细胞质壁分离及复原
(7)生物膜结构的探索:罗伯特森用电子显微镜观察细胞膜,光学显微镜观察人鼠融合细胞
(8)观察细胞的有丝分裂、减数分裂
(9)低温诱导植物染色体数目的变化
(10)培养液中酵母菌种群数量的变化
2.用离心机的实验
(1)分离细胞器:差速离心用于分离不同重量的细胞器
(2)制备细胞膜:将涨破的细胞膜离心至沉淀中
(3)赫尔希、蔡斯的噬菌体侵染实验:将细菌离心至沉淀中,观察放射性的分布
(4)探究DNA的复制方式:密度梯度离心用于观察子代DNA的重量差异
(5)PCR技术:离心用于反应体系的混合
(6)植物体细胞杂交、动物细胞融合:离心可以诱导原生质体或动物细胞融合
三、实验材料
1. 对实验材料有特殊要求的实验
(1)物质鉴定实验:实验材料本身无色或颜色浅
(2)制备细胞膜:哺乳动物红细胞
(3)DNA的粗提取:DNA含量较高且较易提取(不能是哺乳动物的血细胞)
(4)观察细胞的有丝分裂、低温诱导染色体加倍:植物根尖分生区细胞
(5)观察细胞的减数分裂:植物的花药、动物的雄性生殖器官(精巢或睾丸)
(6)观察植物细胞质壁分离及复原:成熟的、液泡中有颜色的植物细胞
(7)调查人群中的遗传病:调查发病率需要对人群进行随机抽样,调查遗传方式需要找患者家系
(8)植物组织培养:分化程度低,全能性高的植物外植体
(9)动物细胞培养:胚胎或幼龄动物的组织、器官(分裂能力强)
2. 需要保持实验材料活性的实验(活体实验)
3. 实验操作导致实验材料死亡的实验
四、实验条件
需要控制温度条件的实验
(1)物质鉴定实验:鉴定还原糖和DNA需要水浴加热
(2)探究影响酶活性的条件:温度对酶活性的影响(水浴)
(3)传统发酵技术:果酒要求18~25℃,果醋要求30~35℃,腐乳要求15~18℃,泡菜要求室温
(4)探究环境对光合作用的影响:温度条件相同且适宜
(5)低温诱导染色体加倍:4℃诱导36h
(6)微生物的纯化与培养:高压蒸汽灭菌一般121℃维持15~30min,保存菌种一般在4℃以下,倒平板需要让固体培养基凝固(50℃以下),巴氏消毒法(60~82℃长时间)
(7)PCR技术:90℃左右变性,55℃左右退火(复性),70℃左右延伸
(8)动物细胞培养:培养细胞所对应的动物体体温,哺乳动物一般是36.5±0.5℃
(9)植物组织培养:一般是18~22℃
(10)萨克斯叶片遮光实验:在用95%酒精中煮浴叶片脱色
五、实验操作
需要进行筛选的实验
(1)微生物的分离与纯化:筛选土壤中的尿素分解菌和纤维素分解菌
(2)低温诱导染色体加倍:筛选染色体加倍的细胞
(3)植物体细胞杂交和动物细胞融合:筛选融合的杂种细胞
(4)单克隆抗体的制备:两次筛选①筛选出杂交瘤细胞②筛选出特定的(能产生单一抗体的单克隆的)杂交瘤细胞
(5)基因工程技术:筛选出转化了表达载体的受体细胞,筛选出能产生目的蛋白质的转基因生物
(6)单倍体育种:筛选出所需性状的纯合体
六、实验方法
1. 利用同位素标记法的实验
(1)探究分泌蛋白的合成与运输路径:用3H-亮氨酸标记氨基酸
(2)探究光合作用的科学发现史:鲁宾和卡门用18O分别标记H2O和CO2,卡尔文用14C标记CO2
(3)赫尔希和蔡斯的噬菌体侵染实验:用32P标记DNA,用35S标记蛋白质
(4)探究DNA的复制方式:用15N、14N分别培养大肠杆菌(无放射性)
(5)核酸分子杂交技术:标记基因探针,检测目的基因是否导入受体细胞和目的基因是否转录
(6)蛋白质分子杂交技术:标记抗体,检测目的基因是否导入表达,杂交瘤细胞的筛选、单抗诊盒和生物导弹
2.利用分子杂交技术的实验
七、实验思想
用假说-演绎法思想进行的实验
(1)孟德尔的豌豆杂交实验
(2)摩尔根的果蝇杂交实验
(3)DNA是遗传物质(艾弗里、赫尔希)
(4)DNA的复制方式
(5)遗传密码的破译(选学)
(6)促胰液素的发现