实验一 细胞凝集反应
班级：09生科3班 学号：[1**********]7 姓名：俞华军 时间：11/03/04
一、实验目的
1. 了解细胞凝集反应的原理和作用机理。
2. 学会无菌方法抽取兔子静脉血液。
二、实验原理
细胞膜是双层脂镶嵌蛋白质结构，脂和蛋白质又能与糖分子结合为细胞表面的分枝状糖外被。目前认为：细胞间的联系，细胞的生长和分化，免疫反应和肿瘤发生都和细胞表面的分枝状糖分子有关。
凝集素是一类含糖的（少数例外）并能与糖专一结合的蛋白质，它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。凝集素使细胞凝集是由于细胞表面的糖分子连接，在细胞间形成在细胞间形成“桥”的结果，加入凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集，也可加入抗凝剂抑制细胞凝集。
凝集反应分为两类，一类是直接凝集反应：颗粒状的抗原与抗体结合；第二类是间接凝集反应：可溶性的抗原，吸附载体，再与抗体结合，具有灵敏度高，操作简单，方面的特点。
三、实验材料
试剂：PBS 缓冲液、生理盐水、土豆凝集素、1%的红细胞。
用具：显微镜、粗天平、双凹片、滴管2支、离心管2支、离心机、6试管。
四、实验步骤
1. 取土豆皮块茎2支，加10mlPBS 缓冲液，浸泡2小时，浸出的提取液中即含哟可溶性土豆凝集素。
2. 抽取兔子静脉血（加抗凝剂）1ml ，加生理盐水3ml ，在1000r/min条件下，离心5分钟，重复2-3次，最后按压积（沉淀）红细胞体积用生理盐水配成1%红细胞悬液。
3. 用滴管吸取土豆凝集素和1%红细胞悬液各一滴，置双凹片的左孔内，充分混匀，静置10min 后，在显微镜下观察，记录实验结果。
4. 同时以PBS 缓冲液加1%红细胞悬液各一滴，置双凹片右孔做对照实验，在显微镜下观察，记录实验结果。
五、实验结果
1．实验结果图
PBS 缓冲液+1%红细胞悬液（10x4）土豆凝集素+1%红细胞悬液（10x4）
2. 实验结果记录表
六、实验分析及结论
1. 配制1%的红细胞悬液时应用生理盐水而不是蒸馏水或自来水，因为自来水或蒸馏水会使红细胞破裂，从而影响实验结果。
2.
滴加土豆凝集素、PBS 缓冲液、红细胞悬液时要注意量，过多则会在摇匀的过程中使液体溢出，从而影响在显微镜下的观察。
3. 刚开始时由于红细胞悬液稀释度过大，导致肉眼无法辨别实验结果，因此，红细胞稀释要得当，否则难以观察实验现象。
4. 在摇匀过程中要注意方法，否则会使液体溢出，另外，必须要摇匀，意识加快反应，二是使实验现象明显。
静置10min 后的双凹片
实验一 细胞凝集反应
班级：09生科3班 学号：[1**********]7 姓名：俞华军 时间：11/03/04
一、实验目的
1. 了解细胞凝集反应的原理和作用机理。
2. 学会无菌方法抽取兔子静脉血液。
二、实验原理
细胞膜是双层脂镶嵌蛋白质结构，脂和蛋白质又能与糖分子结合为细胞表面的分枝状糖外被。目前认为：细胞间的联系，细胞的生长和分化，免疫反应和肿瘤发生都和细胞表面的分枝状糖分子有关。
凝集素是一类含糖的（少数例外）并能与糖专一结合的蛋白质，它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。凝集素使细胞凝集是由于细胞表面的糖分子连接，在细胞间形成在细胞间形成“桥”的结果，加入凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集，也可加入抗凝剂抑制细胞凝集。
凝集反应分为两类，一类是直接凝集反应：颗粒状的抗原与抗体结合；第二类是间接凝集反应：可溶性的抗原，吸附载体，再与抗体结合，具有灵敏度高，操作简单，方面的特点。
三、实验材料
试剂：PBS 缓冲液、生理盐水、土豆凝集素、1%的红细胞。
用具：显微镜、粗天平、双凹片、滴管2支、离心管2支、离心机、6试管。
四、实验步骤
1. 取土豆皮块茎2支，加10mlPBS 缓冲液，浸泡2小时，浸出的提取液中即含哟可溶性土豆凝集素。
2. 抽取兔子静脉血（加抗凝剂）1ml ，加生理盐水3ml ，在1000r/min条件下，离心5分钟，重复2-3次，最后按压积（沉淀）红细胞体积用生理盐水配成1%红细胞悬液。
3. 用滴管吸取土豆凝集素和1%红细胞悬液各一滴，置双凹片的左孔内，充分混匀，静置10min 后，在显微镜下观察，记录实验结果。
4. 同时以PBS 缓冲液加1%红细胞悬液各一滴，置双凹片右孔做对照实验，在显微镜下观察，记录实验结果。
五、实验结果
1．实验结果图
PBS 缓冲液+1%红细胞悬液（10x4）土豆凝集素+1%红细胞悬液（10x4）
2. 实验结果记录表
六、实验分析及结论
1. 配制1%的红细胞悬液时应用生理盐水而不是蒸馏水或自来水，因为自来水或蒸馏水会使红细胞破裂，从而影响实验结果。
2.
滴加土豆凝集素、PBS 缓冲液、红细胞悬液时要注意量，过多则会在摇匀的过程中使液体溢出，从而影响在显微镜下的观察。
3. 刚开始时由于红细胞悬液稀释度过大，导致肉眼无法辨别实验结果，因此，红细胞稀释要得当，否则难以观察实验现象。
4. 在摇匀过程中要注意方法，否则会使液体溢出，另外，必须要摇匀，意识加快反应，二是使实验现象明显。
静置10min 后的双凹片