５４０
第２５卷第５期２００７年１０月
广东医学院学报
ＪＯＵＲＮＡＬＯＦＧＵＡＮＧＤＯＮＧＭＥＤＩＣＡＬＣＯＬＬＥＧＥ
ｖ０１．２５Ｎｏ．５
Ｏｃｔ．２００７
中性粒细胞碱性磷酸酶染色在血液病诊断中的应用
黄湘宁
（广州新海医院检验科，广东广州５１０３００）
摘要：目的探讨中性粒细胞碱性磷酸酶（ＮＡＰ）染色在血液系统疾病患者诊断与鉴别诊断中的应用意义。方法对３６ｆｉ例血液系统疾病患者的血涂片用改良戈氏钙一钻法进行染色并作积分刿龋，并以３０倒健康体检者作正常对照。结果
急性髓细胞白血病（ＡＭｔ。）、慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）慢性期和加速期、巨幼细胞贫血患者的ＮＡＰ阳性率和积分均
明显低于正常对照组（Ｐ＜００１）；而急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）、骨髓增殖性疾病ＭＰＤ、再生障碍性贫血（ＡＡ）、淋巴瘤白血病期、慢性淋巴细胞性白血病（ｃｕ。）、多发性骨链瘤（ＭＭ）、类白血病患者的ＮＡＰ阳性率和积分赠明显高于正常对照组（Ｐ＜Ｏ．００，且以类白血病者最高；ＣＭＬ急变期、嗜酸细胞增多症、骨髓增生异常综合症（ＭＤｓ）者与正常对照组比较则差异无统计学意义（Ｐ＞Ｏ．０５）。结论标。
关键词：碱性磷酸酶；中性粒细胞碱性磷酸酶染色；血液病；诊断中图分类号：Ｒ
４４６．１１
根据ＮＡＰ活性的特性在很多血液疾病中都可以把其作为诊断及鉴别诊断的判断指
文献标识码：Ｂ文章编号：１００５－４０５７（２００７）０５．０５４０．０２
中性粒细胞碱性磷酸酶（ＮＡＰ）是一种能水解磷酸脂的水解酶，在中性粒细胞中含量最多，随着细胞的成熟。酶的活性也逐渐增强。在病理情况下，ＮＡＰ活性的变化常有助于某些疾病的诊断和鉴别诊断。本文通过对３６６例血液系统疾瘸患者ＮＡＰ活性观察，进行对比分析，以探讨其在血液系统疾病诊断和鉴别诊断中的应用意义。１对象和方法１．１对象
选择笔者进修医院（广东省人民医院）２００５年度收治的血液系统疾病患者３６６例，全部病例依据骨髓穿刺涂片细胞学检查、骨髓活检病理检查及有关实验室检查并结合临床参照文献确诊－１Ｊ。其中男１９９例，女１６７例。病种：急性髓细胞白血病（ＡＭＬ）９８例，急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）４ｌ例，慢性粒细胞白血病
质：３０９／Ｌ甘油磷酸钠ｌＯｍＬ。２０９／Ｌ巴比妥钠ｌＯｍＬ，２０９／Ｌ氯化钙（干燥）ｌＯｍＬ，２０９／Ｌ硫酸镁２ｍＬ，蒸馏水２０ｍＬ，混合后用１ｍｏｌ／Ｌ氢氧化钠校正至ｐＨ９．４；２０９／Ｌ硝酸钴；２０９／Ｌ硫化铵（新鲜配制）；５９／Ｌ伊红。ｌ，２．２仪器显微镜。３７℃恒温水浴箱。电子计数器，电子计时钟。１．３细胞染色
采用改良Ｇｏｍｏｒｉ氏法：将血涂片用新鲜配制的９５％乙醇固定１０ｍｉｎ，蒸馏水轻洗，待干；基质液按上
述方法配好后（以精密ＰＨ试纸测ｐＨ９．４～９．６）放
３７１２恒温水浴箱３０ｒａｉｎ，再将固定好的血片置基质中温浴５ｈ以上；取出后在蒸馏水中轻洗，自然于燥后放入２０９／Ｌ硝酸钴中５ｍｉｎ；蒸馏水轻洗，自然干燥后放入２０９／Ｌ硫化铵５ｍｉｎ；流水冲洗，干燥后置５９／Ｌ伊红复染５ｍｉｎ，自来水冲洗，待干燥后镜检。
１．４记录方法
（ＣＭＬ）慢性期、加速期、急变期分别２７、７、２７例，骨髓
增殖性疾病（ＭＰＤ）１９例，骨髓增生异常综合症（ＭＤｓ）３５例，再生障碍性贫血（ＡＡ）３２例，淋巴瘤白血病期１０例，巨幼细胞贫血４例，慢性淋巴细胞性白血病（ＣＬＬ）１０侧，多发性骨髓瘤（ＭＭ）３２例，嗜酸细胞增多症１８例，类自血病６例。以患者新鲜末梢血制备血涂片。另取３０例（男２０例，女１０例）健康体检者的血涂片作正常对照。１．２试剂及仪器
１．２，１试剂９５％乙醇（用无水乙醇新鲜配制）；基
显微镜油镜观察１００个中性粒细胞，以阳性率、积分记录结果。１．５统计学处理
数据以；±ｊ表示。多组与对照组问的比较采用Ｄｕｎｎｅｔｔ一￡检验，组问的两两比较采用方差分析及ｑ检验。
２结果
２．１正常健康人群ＮＡＰ阳性率和积分的测定
本组正常健康人群中男性的ＮＡＰ阳性率为２５．Ｏ％，积分为３７．５；女性ＮＡＰ阳性率为２８．Ｏ％，积分为４０．２。对正常健康人群中男性和女性ＮＡＰ阳性率和积分结果进行比较，差异均无统计学意义（Ｐ＞
收稿日期：２００７—０６—０６；修订日期：２００７—０９．１２作者简介；黄湘宁（１９７８一），女，学士，主管检验师。
第５期０．０５）。
黄湘宁，等．在于宫中性粒细胞碱性磷酸酶染色在血液病诊断中的应用
５４１
的非特异性水解酶。ＮＡＰ活力可反映成熟粒细胞的成熟程度和功能，当中性粒细胞活化后，ＮＡＰ阳性率及积分升高【２Ｉ。
２．２各型血液系统痰病的ＮＡＰ阳性率和积分与对照组
ＡＭＬ、ＣＩＶＩＬ慢性期和加速期、巨幼细胞贫血患者的ＮＡＰ阳性率和积分均明显低于正常对照组（Ｐ＜０．０１）；而ＡＬＬ、ＭＰＤ、ＡＰｔ、淋巴瘤自血病期、ＣＬＬ、ＭＭ、类白血病患者的ＮＡＰ染色阳性率和积分则明显高于正常对照组（Ｐ＜Ｏ．０１），且以类白血病者最高。
ＣＩＶＩＬ急变期、嗜酸细胞增多症、ＭＤＳ者与正常对照组比较则差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。
表１各型血液系统疾病的ＮＡＰ阳性率和积分与对照组的比较
本组急性白血病中，ＡＭＬ患者的ＮＡＰ积分值减
低，ＡＬＬ者则增高，这可作为急性自血病类型的鉴
别［…。ＣＭＬ慢性期和加速期患者的ＮＡＰ积分均明显
低于正常对照组；而ＭＰＤ组明显高于正常对照组。有文献报道¨Ｊ细胞持异性激酶ｐ５５ｃ－ｆｇｒ可反映中性粒
细胞的成熟度，故ＮＡＰ活性可能与之有关。有作者认
为，其机制是ＣＭＬ患者的特异性激酶ｐ５５ｃ．ｆｇｒ呈下调状态，而其他ＭＰＤ患者的特异性激酶ｐ５５ｃ—ｆｇｒ上调。另就ＣＩＶＩＬ不同各期比较，ＮＡＰ积分减低或为零是ＣＭＬ慢性期的特点；ＣＩＶＩＬ急变期在无感染和未用皮
质激素时，ＮＡＰ积分从原来的减低或缺如转为正常或
增高。
其他血液病中，淋巴瘤白血病期、ＣＬＬ、ＡＡ、ＭＭ
等患者的ＮＡＰ活性增高，类白血病者的ＮＡＰ活性则极度增高。另有嗜酸细胞增多症时ＮＡＰ活性与正常
对照无明显差异，可能嗜酸细胞增多常与病毒感染有关．而病毒感染时ＮＡＰ活性在正常范围或偏低【３Ｊ。本文４例巨幼细胞贫血患者ＮＡＰ活性均明显减低，与该疾病为营养缺乏所致细胞成熟障碍性疾病相符，但例数偏少。统计学意义不大。
综上所述，ＮＡＰ括性观察对血液系统疾病的诊断与鉴别诊断有非常重要的意义。参考文献：
［１］姚尔固，林风茹，郭晓楠，等．恶性血液病的诊断与治疗
［Ｍ］．北京：人民军医出版社，２００４：１．
［２］丛玉隆，冉宝春，邓新立，等．中性粒细胞碱性磷酸酶在传染
与正常对ｊｌｉＩ组比较，除＊Ｐ＞００５，其余Ｐ＜０
Ｏｌ。
性非典型肺炎诊断与鉴别诊断中的价值［Ｊ］．中华检验医学杂志，２００５，２８（１）：３４．３６．
［３］陈文彬诊断学［Ｍ］．北京：人民卫生出版社。２００２：１１．［４］曹鹏飞，刘友生，柳永和．中性粒细胞碱性磷酸酶在骨髓增
生性疾病诊断及疗教观察中的价值［Ｊ］．白血病・淋巴瘤，
２００６，１５（６）：４３７．
３讨论
ＮＡＰ是中性粒细胞的标志酶，主要存在于成熟中性粒细胞内，是其胞质特殊颗粒释放的一种在碱性条件（ｐＨ９．３－－９，６）能催化各种醇和酚的单磷酸酯水解
５４０
第２５卷第５期２００７年１０月
广东医学院学报
ＪＯＵＲＮＡＬＯＦＧＵＡＮＧＤＯＮＧＭＥＤＩＣＡＬＣＯＬＬＥＧＥ
ｖ０１．２５Ｎｏ．５
Ｏｃｔ．２００７
中性粒细胞碱性磷酸酶染色在血液病诊断中的应用
黄湘宁
（广州新海医院检验科，广东广州５１０３００）
摘要：目的探讨中性粒细胞碱性磷酸酶（ＮＡＰ）染色在血液系统疾病患者诊断与鉴别诊断中的应用意义。方法对３６ｆｉ例血液系统疾病患者的血涂片用改良戈氏钙一钻法进行染色并作积分刿龋，并以３０倒健康体检者作正常对照。结果
急性髓细胞白血病（ＡＭｔ。）、慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）慢性期和加速期、巨幼细胞贫血患者的ＮＡＰ阳性率和积分均
明显低于正常对照组（Ｐ＜００１）；而急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）、骨髓增殖性疾病ＭＰＤ、再生障碍性贫血（ＡＡ）、淋巴瘤白血病期、慢性淋巴细胞性白血病（ｃｕ。）、多发性骨链瘤（ＭＭ）、类白血病患者的ＮＡＰ阳性率和积分赠明显高于正常对照组（Ｐ＜Ｏ．００，且以类白血病者最高；ＣＭＬ急变期、嗜酸细胞增多症、骨髓增生异常综合症（ＭＤｓ）者与正常对照组比较则差异无统计学意义（Ｐ＞Ｏ．０５）。结论标。
关键词：碱性磷酸酶；中性粒细胞碱性磷酸酶染色；血液病；诊断中图分类号：Ｒ
４４６．１１
根据ＮＡＰ活性的特性在很多血液疾病中都可以把其作为诊断及鉴别诊断的判断指
文献标识码：Ｂ文章编号：１００５－４０５７（２００７）０５．０５４０．０２
中性粒细胞碱性磷酸酶（ＮＡＰ）是一种能水解磷酸脂的水解酶，在中性粒细胞中含量最多，随着细胞的成熟。酶的活性也逐渐增强。在病理情况下，ＮＡＰ活性的变化常有助于某些疾病的诊断和鉴别诊断。本文通过对３６６例血液系统疾瘸患者ＮＡＰ活性观察，进行对比分析，以探讨其在血液系统疾病诊断和鉴别诊断中的应用意义。１对象和方法１．１对象
选择笔者进修医院（广东省人民医院）２００５年度收治的血液系统疾病患者３６６例，全部病例依据骨髓穿刺涂片细胞学检查、骨髓活检病理检查及有关实验室检查并结合临床参照文献确诊－１Ｊ。其中男１９９例，女１６７例。病种：急性髓细胞白血病（ＡＭＬ）９８例，急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）４ｌ例，慢性粒细胞白血病
质：３０９／Ｌ甘油磷酸钠ｌＯｍＬ。２０９／Ｌ巴比妥钠ｌＯｍＬ，２０９／Ｌ氯化钙（干燥）ｌＯｍＬ，２０９／Ｌ硫酸镁２ｍＬ，蒸馏水２０ｍＬ，混合后用１ｍｏｌ／Ｌ氢氧化钠校正至ｐＨ９．４；２０９／Ｌ硝酸钴；２０９／Ｌ硫化铵（新鲜配制）；５９／Ｌ伊红。ｌ，２．２仪器显微镜。３７℃恒温水浴箱。电子计数器，电子计时钟。１．３细胞染色
采用改良Ｇｏｍｏｒｉ氏法：将血涂片用新鲜配制的９５％乙醇固定１０ｍｉｎ，蒸馏水轻洗，待干；基质液按上
述方法配好后（以精密ＰＨ试纸测ｐＨ９．４～９．６）放
３７１２恒温水浴箱３０ｒａｉｎ，再将固定好的血片置基质中温浴５ｈ以上；取出后在蒸馏水中轻洗，自然于燥后放入２０９／Ｌ硝酸钴中５ｍｉｎ；蒸馏水轻洗，自然干燥后放入２０９／Ｌ硫化铵５ｍｉｎ；流水冲洗，干燥后置５９／Ｌ伊红复染５ｍｉｎ，自来水冲洗，待干燥后镜检。
１．４记录方法
（ＣＭＬ）慢性期、加速期、急变期分别２７、７、２７例，骨髓
增殖性疾病（ＭＰＤ）１９例，骨髓增生异常综合症（ＭＤｓ）３５例，再生障碍性贫血（ＡＡ）３２例，淋巴瘤白血病期１０例，巨幼细胞贫血４例，慢性淋巴细胞性白血病（ＣＬＬ）１０侧，多发性骨髓瘤（ＭＭ）３２例，嗜酸细胞增多症１８例，类自血病６例。以患者新鲜末梢血制备血涂片。另取３０例（男２０例，女１０例）健康体检者的血涂片作正常对照。１．２试剂及仪器
１．２，１试剂９５％乙醇（用无水乙醇新鲜配制）；基
显微镜油镜观察１００个中性粒细胞，以阳性率、积分记录结果。１．５统计学处理
数据以；±ｊ表示。多组与对照组问的比较采用Ｄｕｎｎｅｔｔ一￡检验，组问的两两比较采用方差分析及ｑ检验。
２结果
２．１正常健康人群ＮＡＰ阳性率和积分的测定
本组正常健康人群中男性的ＮＡＰ阳性率为２５．Ｏ％，积分为３７．５；女性ＮＡＰ阳性率为２８．Ｏ％，积分为４０．２。对正常健康人群中男性和女性ＮＡＰ阳性率和积分结果进行比较，差异均无统计学意义（Ｐ＞
收稿日期：２００７—０６—０６；修订日期：２００７—０９．１２作者简介；黄湘宁（１９７８一），女，学士，主管检验师。
第５期０．０５）。
黄湘宁，等．在于宫中性粒细胞碱性磷酸酶染色在血液病诊断中的应用
５４１
的非特异性水解酶。ＮＡＰ活力可反映成熟粒细胞的成熟程度和功能，当中性粒细胞活化后，ＮＡＰ阳性率及积分升高【２Ｉ。
２．２各型血液系统痰病的ＮＡＰ阳性率和积分与对照组
ＡＭＬ、ＣＩＶＩＬ慢性期和加速期、巨幼细胞贫血患者的ＮＡＰ阳性率和积分均明显低于正常对照组（Ｐ＜０．０１）；而ＡＬＬ、ＭＰＤ、ＡＰｔ、淋巴瘤自血病期、ＣＬＬ、ＭＭ、类白血病患者的ＮＡＰ染色阳性率和积分则明显高于正常对照组（Ｐ＜Ｏ．０１），且以类白血病者最高。
ＣＩＶＩＬ急变期、嗜酸细胞增多症、ＭＤＳ者与正常对照组比较则差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。
表１各型血液系统疾病的ＮＡＰ阳性率和积分与对照组的比较
本组急性白血病中，ＡＭＬ患者的ＮＡＰ积分值减
低，ＡＬＬ者则增高，这可作为急性自血病类型的鉴
别［…。ＣＭＬ慢性期和加速期患者的ＮＡＰ积分均明显
低于正常对照组；而ＭＰＤ组明显高于正常对照组。有文献报道¨Ｊ细胞持异性激酶ｐ５５ｃ－ｆｇｒ可反映中性粒
细胞的成熟度，故ＮＡＰ活性可能与之有关。有作者认
为，其机制是ＣＭＬ患者的特异性激酶ｐ５５ｃ．ｆｇｒ呈下调状态，而其他ＭＰＤ患者的特异性激酶ｐ５５ｃ—ｆｇｒ上调。另就ＣＩＶＩＬ不同各期比较，ＮＡＰ积分减低或为零是ＣＭＬ慢性期的特点；ＣＩＶＩＬ急变期在无感染和未用皮
质激素时，ＮＡＰ积分从原来的减低或缺如转为正常或
增高。
其他血液病中，淋巴瘤白血病期、ＣＬＬ、ＡＡ、ＭＭ
等患者的ＮＡＰ活性增高，类白血病者的ＮＡＰ活性则极度增高。另有嗜酸细胞增多症时ＮＡＰ活性与正常
对照无明显差异，可能嗜酸细胞增多常与病毒感染有关．而病毒感染时ＮＡＰ活性在正常范围或偏低【３Ｊ。本文４例巨幼细胞贫血患者ＮＡＰ活性均明显减低，与该疾病为营养缺乏所致细胞成熟障碍性疾病相符，但例数偏少。统计学意义不大。
综上所述，ＮＡＰ括性观察对血液系统疾病的诊断与鉴别诊断有非常重要的意义。参考文献：
［１］姚尔固，林风茹，郭晓楠，等．恶性血液病的诊断与治疗
［Ｍ］．北京：人民军医出版社，２００４：１．
［２］丛玉隆，冉宝春，邓新立，等．中性粒细胞碱性磷酸酶在传染
与正常对ｊｌｉＩ组比较，除＊Ｐ＞００５，其余Ｐ＜０
Ｏｌ。
性非典型肺炎诊断与鉴别诊断中的价值［Ｊ］．中华检验医学杂志，２００５，２８（１）：３４．３６．
［３］陈文彬诊断学［Ｍ］．北京：人民卫生出版社。２００２：１１．［４］曹鹏飞，刘友生，柳永和．中性粒细胞碱性磷酸酶在骨髓增
生性疾病诊断及疗教观察中的价值［Ｊ］．白血病・淋巴瘤，
２００６，１５（６）：４３７．
３讨论
ＮＡＰ是中性粒细胞的标志酶，主要存在于成熟中性粒细胞内，是其胞质特殊颗粒释放的一种在碱性条件（ｐＨ９．３－－９，６）能催化各种醇和酚的单磷酸酯水解