MS 母液的配制与保存
一、 目的要求:通过MS 培养基母液的配制,掌握配制与保存培养
基母液的基本技能。
二、 设备用品:
1、 设备:百分之一天平,万分之一天平,电磁炉,家用冰
箱
2、 用品:称量纸(大小都要),玻璃烧杯250ml ,容量瓶500ml
和250ml ,广口瓶500ml250ml ,标签纸,洗瓶,药匙,玻璃棒,搪瓷杯,纯水,95%酒精,纸巾,笔。
三、 方法步骤
计算方式:称取量=规定量×浓缩倍数×母液体积
1、MS1大量元素母液配制(0.5L )
化合物 原配方量 扩大倍数 称取量 母液体积 NH 4NO 3 1650mg/L 20倍 16.5g 0.5L KNO 3 1900mg/L 20倍 19g 0.5L MgSO 4. 7H 2O 370mg/L 20倍 3.7g 0.5L KH 2PO 4 170mg/L 20倍 1.7g 0.5L CaCl 2.2H 2O 440mg/L 20倍 4.4g 0,5L 配制方法:用百分之一天平称取NH 4NO 316.5g ,KNO 319g ,MgSO 4. 7H 2O3.7g ,KH 2PO 41.7g ;将纯水装入搪瓷杯中放到电磁炉上加热,把药品分别放入玻璃烧杯中加热水玻璃棒搅拌至药品完全溶解,
次玻璃烧杯,以免药品残留。用此方式分别将药品溶解然后引流至容量瓶中,最后将容量瓶定溶至500ml 刻度线,待冷却后倒入广口瓶中放置冰箱内保存。
注意:CaCl 2.2H 2O 是放热性药品所以单独配制,称取药品4.4g 放入玻璃烧杯中用冷水将药品溶解,用同样的方法将CaCl 2.2H 2O 定溶,待冷却后倒入广口瓶中放置冰箱内保存。在MS 母液瓶上贴标签,注明母液名称,浓缩倍数,配制日期,配制人以及吸取量。
2、 MS2微量元素母液的配制(0.25L )
化合物
KI
H 3BO 3
MnSO 4. 4H2O
ZnSO 4. 7H2O 原配方量 0.83mg/L 6.2mg/L 22.3mg/L 8.6mg/L 扩大倍数 200倍 200倍 200倍 200倍
200倍
200倍 200倍 称取量 0.0415g 0.31g 1.115g 0.43g 0.0125g 0.00125g 0.00125g 母液体积 0.25L , 0.25L 0.25L 0.25L 0.25L 0.25L 0.25L Na 2MoO 4.2 H2O 0.25mg/L CuSO 4. 5H2O CoCl 2. 6H2O
0.025mg/L 0.025mg/L
配制方法:用万分之一天平称取KI 0.0415g ,H 3BO 30.31g ,MnSO 4. 4H2O 1.115g ,Na 2MoO 4.2 H2O 0.0125g ,ZnSO 4. 7H2O 0.43g ,CuSO 4. 5H2O 0.00125g ,CoCl 2. 6H2O 0.00125g ;将纯水装入搪瓷杯中放到电磁炉上加热,把药品分别放入玻璃烧杯中加热水玻璃棒搅拌至药
洗瓶清洗3次玻璃烧杯,以免药品残留。用此方式分别将药品溶解然后引流至容量瓶中,最后将容量瓶定溶至250ml 刻度线,待冷却后倒入广口瓶中放置冰箱内保存。在MS 母液瓶上贴标签,注明母液名称,浓缩倍数,配制日期,配制人以及吸取量。
3、 MS 铁盐母液的配制(0.25L )
化合物
Na 2-ENTA 原配方量 37.3g 扩大倍数 200倍
200倍 称取量 1.865g 1.39g 母液体积 0.25L 0.25L FeSO 4. 7H2O 27.8g
配制方法:用百分之一天平称取Na 2-ENTA 1.865g ,FeSO 4. 7H2O 1.39g 将纯水装入搪瓷杯中放到电磁炉上加热,把药品分别放入玻璃烧杯中加热水玻璃棒搅拌至药品完全溶解,用玻璃棒交叉引流的方式将溶解完的药品倒入容量瓶中,用洗瓶清洗3次玻璃烧杯,以免药品残留。用此方式分别将药品溶解然后引流至容量瓶中,最后将容量瓶定溶至250ml 刻度线,待冷却后倒入广口瓶中放置冰箱内保存。在MS 母液瓶上贴标签,注明母液名称,浓缩倍数,配制日期,配制人以及吸取量。
4、 MS4有机物母液的配制(0.5L )
化合物
烟酸 原配方量 0.5g 扩大倍数 100倍
100倍
100倍 称取量 0.025g 0,025g 0.005g 母液体积 0.5L 0.5L 0.5L 盐酸吡哆醇 0.5g 盐酸硫胺酸 0.1g
肌醇
甘氨酸 100g 2.0g 100倍 100倍 5g 0.1g 0.5L 0.5L
配制方法:用电子分析天平称取烟酸0.025g ,盐酸吡哆醇0,025g ,盐酸硫胺酸0.005g ,甘氨酸0.1g ,将纯水装入搪瓷杯中放到电磁炉上加热,把药品分别放入玻璃烧杯中加热水玻璃棒搅拌至药品完全溶解,用玻璃棒交叉引流的方式将溶解完的药品倒入容量瓶中,用洗瓶清洗3次玻璃烧杯,以免药品残留。用此方式分别将药品溶解然后引流至容量瓶中,最后将容量瓶定溶至500ml 刻度线,待冷却后倒入广口瓶中放置冰箱内保存。在MS 母液瓶上贴标签,注明母液名称,浓缩倍数,配制日期,配制人以及吸取量。
注意:肌醇单独配制,配制方式与其他母液配制方式相同。
5、 植物调节剂NAA 母液的配制(0.25L )浓度为0.5mg/ml
0.25L =250ml
称取0.175g (0.5mg/ml×250ml =0.175g )萘乙酸(NAA ),用少量95%酒精助溶,再用纯水定溶至250ml ,摇匀倒入广口瓶中,在激素母液瓶上贴标签,注明母液名称,浓缩倍数,配制日期,配制人以及吸取量。
MS 母液的配制与保存
一、 目的要求:通过MS 培养基母液的配制,掌握配制与保存培养
基母液的基本技能。
二、 设备用品:
1、 设备:百分之一天平,万分之一天平,电磁炉,家用冰
箱
2、 用品:称量纸(大小都要),玻璃烧杯250ml ,容量瓶500ml
和250ml ,广口瓶500ml250ml ,标签纸,洗瓶,药匙,玻璃棒,搪瓷杯,纯水,95%酒精,纸巾,笔。
三、 方法步骤
计算方式:称取量=规定量×浓缩倍数×母液体积
1、MS1大量元素母液配制(0.5L )
化合物 原配方量 扩大倍数 称取量 母液体积 NH 4NO 3 1650mg/L 20倍 16.5g 0.5L KNO 3 1900mg/L 20倍 19g 0.5L MgSO 4. 7H 2O 370mg/L 20倍 3.7g 0.5L KH 2PO 4 170mg/L 20倍 1.7g 0.5L CaCl 2.2H 2O 440mg/L 20倍 4.4g 0,5L 配制方法:用百分之一天平称取NH 4NO 316.5g ,KNO 319g ,MgSO 4. 7H 2O3.7g ,KH 2PO 41.7g ;将纯水装入搪瓷杯中放到电磁炉上加热,把药品分别放入玻璃烧杯中加热水玻璃棒搅拌至药品完全溶解,
次玻璃烧杯,以免药品残留。用此方式分别将药品溶解然后引流至容量瓶中,最后将容量瓶定溶至500ml 刻度线,待冷却后倒入广口瓶中放置冰箱内保存。
注意:CaCl 2.2H 2O 是放热性药品所以单独配制,称取药品4.4g 放入玻璃烧杯中用冷水将药品溶解,用同样的方法将CaCl 2.2H 2O 定溶,待冷却后倒入广口瓶中放置冰箱内保存。在MS 母液瓶上贴标签,注明母液名称,浓缩倍数,配制日期,配制人以及吸取量。
2、 MS2微量元素母液的配制(0.25L )
化合物
KI
H 3BO 3
MnSO 4. 4H2O
ZnSO 4. 7H2O 原配方量 0.83mg/L 6.2mg/L 22.3mg/L 8.6mg/L 扩大倍数 200倍 200倍 200倍 200倍
200倍
200倍 200倍 称取量 0.0415g 0.31g 1.115g 0.43g 0.0125g 0.00125g 0.00125g 母液体积 0.25L , 0.25L 0.25L 0.25L 0.25L 0.25L 0.25L Na 2MoO 4.2 H2O 0.25mg/L CuSO 4. 5H2O CoCl 2. 6H2O
0.025mg/L 0.025mg/L
配制方法:用万分之一天平称取KI 0.0415g ,H 3BO 30.31g ,MnSO 4. 4H2O 1.115g ,Na 2MoO 4.2 H2O 0.0125g ,ZnSO 4. 7H2O 0.43g ,CuSO 4. 5H2O 0.00125g ,CoCl 2. 6H2O 0.00125g ;将纯水装入搪瓷杯中放到电磁炉上加热,把药品分别放入玻璃烧杯中加热水玻璃棒搅拌至药
洗瓶清洗3次玻璃烧杯,以免药品残留。用此方式分别将药品溶解然后引流至容量瓶中,最后将容量瓶定溶至250ml 刻度线,待冷却后倒入广口瓶中放置冰箱内保存。在MS 母液瓶上贴标签,注明母液名称,浓缩倍数,配制日期,配制人以及吸取量。
3、 MS 铁盐母液的配制(0.25L )
化合物
Na 2-ENTA 原配方量 37.3g 扩大倍数 200倍
200倍 称取量 1.865g 1.39g 母液体积 0.25L 0.25L FeSO 4. 7H2O 27.8g
配制方法:用百分之一天平称取Na 2-ENTA 1.865g ,FeSO 4. 7H2O 1.39g 将纯水装入搪瓷杯中放到电磁炉上加热,把药品分别放入玻璃烧杯中加热水玻璃棒搅拌至药品完全溶解,用玻璃棒交叉引流的方式将溶解完的药品倒入容量瓶中,用洗瓶清洗3次玻璃烧杯,以免药品残留。用此方式分别将药品溶解然后引流至容量瓶中,最后将容量瓶定溶至250ml 刻度线,待冷却后倒入广口瓶中放置冰箱内保存。在MS 母液瓶上贴标签,注明母液名称,浓缩倍数,配制日期,配制人以及吸取量。
4、 MS4有机物母液的配制(0.5L )
化合物
烟酸 原配方量 0.5g 扩大倍数 100倍
100倍
100倍 称取量 0.025g 0,025g 0.005g 母液体积 0.5L 0.5L 0.5L 盐酸吡哆醇 0.5g 盐酸硫胺酸 0.1g
肌醇
甘氨酸 100g 2.0g 100倍 100倍 5g 0.1g 0.5L 0.5L
配制方法:用电子分析天平称取烟酸0.025g ,盐酸吡哆醇0,025g ,盐酸硫胺酸0.005g ,甘氨酸0.1g ,将纯水装入搪瓷杯中放到电磁炉上加热,把药品分别放入玻璃烧杯中加热水玻璃棒搅拌至药品完全溶解,用玻璃棒交叉引流的方式将溶解完的药品倒入容量瓶中,用洗瓶清洗3次玻璃烧杯,以免药品残留。用此方式分别将药品溶解然后引流至容量瓶中,最后将容量瓶定溶至500ml 刻度线,待冷却后倒入广口瓶中放置冰箱内保存。在MS 母液瓶上贴标签,注明母液名称,浓缩倍数,配制日期,配制人以及吸取量。
注意:肌醇单独配制,配制方式与其他母液配制方式相同。
5、 植物调节剂NAA 母液的配制(0.25L )浓度为0.5mg/ml
0.25L =250ml
称取0.175g (0.5mg/ml×250ml =0.175g )萘乙酸(NAA ),用少量95%酒精助溶,再用纯水定溶至250ml ,摇匀倒入广口瓶中,在激素母液瓶上贴标签,注明母液名称,浓缩倍数,配制日期,配制人以及吸取量。