保健食品系列之总黄酮的含量测定方法
黄酮类化合物是广泛存在于植物界的一大类天然产物，种类繁多，大多数黄酮类化合物与葡萄糖或鼠李糖结合成苷，部分为游离态或与鞣质结合存在。黄酮化合物系色原烷或色原酮的2-或3-苯基衍生物，一般具有C6-C3-C6的基本骨架结构。近年来，黄酮类化合物以其它广谱的药理作用倍受青睐，人们对含有黄酮类的化合物进行大量研究，以期获得黄酮含量较高的中草药。因此黄酮的含量测定成为研究的关键步骤。
一、保健食品总黄酮常用测定方法
1、总黄酮：①《保健食品检验与评价技术规范》（2003版）
②征求意见稿方法
2、总黄酮醇苷：《中国药典》（2010年）版一部“银杏叶”（银杏叶提取物）项下含量测定
3、游离黄酮醇苷：游离槲皮素、山奈素、异鼠李素检查项补充检验方法
二、总黄酮含量测定原理
①游离黄酮被乙醇提取后，经聚酰胺柱子洗脱杂质后收集甲醇洗脱液，采用分光光度法在360nm 波长处测定吸光度，以芦丁为对照品，采用标准曲线法计算样品中总黄酮的含量。 ②试样经预处理除杂后，以甲醇或60%乙醇溶液提取黄酮类成分。试样中的黄酮类成分可被亚硝酸钠还原，与硝酸铝生成络合物，在氢氧化钠溶液碱性条件下开环，生成2-羟基查尔酮而使溶液显特征的橙红色，采用分光光度法在510nm 波长处测定吸光度，以芦丁为对照品，采用标准曲线法计算样品中总黄酮的含量。
2、试样经25%盐酸水解甲醇提取，使用反相高效液相色谱进行分离，紫外检测器（UV ）检测，根据色谱峰的保留时间定性，外标法定量进行结果计算。
3、试样用80%甲醇溶液提取游离槲皮素、山奈素、异鼠李素后，使用反相高效液相色谱进行分离，紫外检测器（UV ）检测，根据色谱峰的保留时间定性，外标法定量进行结果计算。
三、方法比较
1. 《保健食品检验与评价技术规范》（2003版）方法操作简单，重现性好，试验首选方法。
2. 保健食品功能因子协作组方法（第一次会议推荐）耗时，试验不常用。
3. 总黄酮醇苷《中国药典》（2010年）版一部方法具有权威性，控制好注意事项，试验结果较好。
4. 游离槲皮素、山奈素、异鼠李素检查项补充检验方法用于判别原料是否人为添加游离黄酮，鉴别原料真伪。
保健食品系列之总黄酮的含量测定方法
黄酮类化合物是广泛存在于植物界的一大类天然产物，种类繁多，大多数黄酮类化合物与葡萄糖或鼠李糖结合成苷，部分为游离态或与鞣质结合存在。黄酮化合物系色原烷或色原酮的2-或3-苯基衍生物，一般具有C6-C3-C6的基本骨架结构。近年来，黄酮类化合物以其它广谱的药理作用倍受青睐，人们对含有黄酮类的化合物进行大量研究，以期获得黄酮含量较高的中草药。因此黄酮的含量测定成为研究的关键步骤。
一、保健食品总黄酮常用测定方法
1、总黄酮：①《保健食品检验与评价技术规范》（2003版）
②征求意见稿方法
2、总黄酮醇苷：《中国药典》（2010年）版一部“银杏叶”（银杏叶提取物）项下含量测定
3、游离黄酮醇苷：游离槲皮素、山奈素、异鼠李素检查项补充检验方法
二、总黄酮含量测定原理
①游离黄酮被乙醇提取后，经聚酰胺柱子洗脱杂质后收集甲醇洗脱液，采用分光光度法在360nm 波长处测定吸光度，以芦丁为对照品，采用标准曲线法计算样品中总黄酮的含量。 ②试样经预处理除杂后，以甲醇或60%乙醇溶液提取黄酮类成分。试样中的黄酮类成分可被亚硝酸钠还原，与硝酸铝生成络合物，在氢氧化钠溶液碱性条件下开环，生成2-羟基查尔酮而使溶液显特征的橙红色，采用分光光度法在510nm 波长处测定吸光度，以芦丁为对照品，采用标准曲线法计算样品中总黄酮的含量。
2、试样经25%盐酸水解甲醇提取，使用反相高效液相色谱进行分离，紫外检测器（UV ）检测，根据色谱峰的保留时间定性，外标法定量进行结果计算。
3、试样用80%甲醇溶液提取游离槲皮素、山奈素、异鼠李素后，使用反相高效液相色谱进行分离，紫外检测器（UV ）检测，根据色谱峰的保留时间定性，外标法定量进行结果计算。
三、方法比较
1. 《保健食品检验与评价技术规范》（2003版）方法操作简单，重现性好，试验首选方法。
2. 保健食品功能因子协作组方法（第一次会议推荐）耗时，试验不常用。
3. 总黄酮醇苷《中国药典》（2010年）版一部方法具有权威性，控制好注意事项，试验结果较好。
4. 游离槲皮素、山奈素、异鼠李素检查项补充检验方法用于判别原料是否人为添加游离黄酮，鉴别原料真伪。