3种放散试验在新生儿ABO溶血病检测中的效果比较

·128·

2011，Vol．24，No．02中国输血杂志2011年02月第24卷第02期Chin J Blood Transfusion Feb ，

·实验研究·

3种放散试验在新生儿ABO 溶血病检测中的效果比较

戴维

摘要:目的

陈剑

朱凯

凤婧(四川大学华西第二医院检验科，四川成都610041)

观察比较冷冻复融放散试验、三氯乙烯-三氯甲烷放散试验和传统热放散试验在新生儿ABO 溶血

共收集104例新生儿或脐血标本，同时进行冷冻复融放散、三氯乙烯-三氯甲烷放散和热

冷冻复融放散试验阳性为29例，阴性为75例; 三氯乙

病检测中的效果。方法

放散试验，比较三者之间差异与临床诊断的吻合度。结果

烯-三氯甲烷放散试验阳性为3例，阴性为101例; 热放散试验阳性为28例，阴性为76例。冷冻复融放散试验与热放散试验间差异无统计学意义(P ＞0. 05) ，而三氯乙烯-三氯甲烷放散试验和热放散试验间差异有统计学意义(P ＜0. 05) 。104例标本中临床确诊新生儿ABO 溶血病共28例，未明确黄疸病因而诊断为新生儿高间接胆红素血症的为6例，排除溶血诊断的有70例，冷冻复融放散试验的灵敏度为100%，特异性为98. 68%; 三氯乙烯-三氯甲烷放散试验的灵敏度为37. 5%，特异性为100%。结论的手工操作，更适用于大批量标本同时进行检测。

关键词:新生儿; ABO 溶血病; 病理性黄疸; 血清学检测; 抗体释放试验中图分类号:R457. 1+1

R722. 18

文献标识码:A

549X (2011) 02-0128-02文章编号:1004-［1］［2］

《全国临床检验操作规程》《输血技术手册》和进行操作。

对新生儿ABO 溶血病，三氯乙烯-三氯甲烷放散试验的灵敏度

明显偏低，冷冻复融放散试验和传统热放散试验的检测效果并无差别，且冷冻复融放散试验操作过程中无需全程

新生儿ABO 溶血病的血清学检测方法主要有直接抗球蛋白试验、游离试验和放散试验。放散试验和直抗试验同为检测红细胞上致敏的抗体，但由于放散试验所用的红细胞是直抗的几百倍，所以放散试验是3项试验中最为敏感的一项试验，也是判定新生儿ABO 溶血病最有力的证据。我们比较了3种不同的放散试验在新生儿ABO 溶血病检测中的应用效果，以及与临床诊断的吻合度，报道如下。

1. 61. 7

试管法间接抗球蛋白试验将3种放散液同时与2%

2

3%标准红细胞进行试管法间接抗球蛋白试验。

统计学方法使用SPSS10. 0统计学软件，采用χ检验比P ＜0.05为差异有统计学意义。较3种试验方法检测效果差异，22. 1

结果

3种放散方法104例标本的检测结果表1

阳性数

29328

11. 1

见表1。

阳性率(%) 27. 882．8826．92

材料与方法标本来源

选取2009年5 6月于本院检验科进行新

104例标本3种放散方法的检测结果

其中新生儿(日生儿ABO 溶血病检测的标本共计104例，

龄:0 15d ) 静脉血标本29例，母亲为O 型血的新生儿脐血标本75例。最终临床确诊新生儿ABO 溶血病共28例，未明确黄疸病因而诊断为新生儿高间接胆红素血症的为6例，排除溶血诊断的有70例。1. 2

试剂与仪器

W21-420S ，数显电热恒温水浴箱(HH-上

海跃进医疗器械厂) ; －80ħ 超低温冰箱(ThermoForma702，40，美国伯乐) 、离心机(KDC-科大创新) 、三氯乙烯-三氯甲烷(分析纯) 、三氯乙烯(分析纯) 、单克隆抗球蛋白IgG (批0. 9%生理盐水(四号:20081128，上海生物医药有限公司) 、2% 3%标准ABO 细胞悬液(自配) 。川美大康佳乐公司) 、1. 3

放散细胞准备

将标本1700g 离心3min 后吸出浓缩

红细胞，用生理盐水洗涤4 6遍(留取最后一次洗液) ，待同时进行3种放散试验检测。1. 4

冷冻复融放散试验

取洗涤浓缩红细胞5 6滴于试

管中，加入2 4滴生理盐水混合，放置于－80ħ 超低温冰箱中冷冻10min ，取出于37ħ 水浴5min ，再以1700g 离心3min ，所得上清液即为放散液。1. 5

三氯乙烯-三氯甲烷放散试验和热放散试验

均按照

冷冻复融放散试验

三氯乙烯-三氯甲烷放散试验

热放散试验

P ＞0. 05; 注:冷冻复融放散试验与传统热放散试验比较χ2=0. 113，三氯乙烯-三氯甲烷放散试验与传统热放散试验检测效果差异有统P ＜0. 05计学意义，χ2=4. 33，

2. 2冷冻复融放散试验与最终临床诊断的比较由表2可

知，冷冻复融放散试验的灵敏度为100%，特异性为98. 68%。但由于临床通常根据血清学检测结果做出诊断，当无法明确黄疸原因时，只能做出新生儿高间接胆红素血症的诊断，而冷冻复融放散试验中所出现的1例假阳性可能是从而检出6例新生儿高间接胆由于灵敏度高于传统热放散，

红素血症中有1例存在IgG 红细胞抗体。

表2

冷冻复融放散试验与临床诊断的比较

新生儿ABO

溶血数28028

新生儿高间接胆红素血症与排除溶血诊断例数

17576

合计2975104

阳性标本数阴性标本数

合计

2. 3三氯乙烯-三氯甲烷放散试验与最终临床诊断的比较

由表3可知，三氯乙烯-三氯甲烷放散试验的灵敏度为37. 5%，特异性为100%。

2011，Vol．24，No．02中国输血杂志2011年02月第24卷第02期Chin J Blood Transfusion Feb ，

·129·

表3三氯乙烯-三氯甲烷放散试验与临床诊断的比较

新生儿ABO 新生儿高间接胆红素血症

合计

溶血数与排除溶血诊断例数[**************]04

振摇充分，且批处理标本量加大，放散液分离时间也会增长，这些环节都有可能影响检测结果。冷冻复融放散试验的原理主要是靠低温冷冻和37ħ 水浴复融的物理方法使红细胞破坏溶血，从而使结合在红细胞膜上的抗体释放出来，为保证试验效果，需保证红细胞完全溶血。与传统热放散试验新临床吻合度生儿ABO 溶血病检测结果具有很高的一致性，

夜很高，且试验操作过程简便，无需全程的手工操作及特殊仪器设备，无化学危害，更适用于大批量标本同时进行检测; 处理批量标本与单个标本相比，无需更多的时间或步骤。但冷冻复融放散试验所得的放散液颜色较深，不能进行凝聚胺或者微柱凝胶卡检测，此为该试验的不足之处。而三氯乙烯-三氯甲烷放散试验的灵敏度明显偏低，操作过程中需要通风装置，且化学试剂对操作人员存在潜在危害，不适用于新生儿ABO 溶血病检测。

参

考

文

献

阳性标本数

阴性标本数

合计

3讨论

新生儿ABO 溶血病是早期新生儿高胆红素血症的重要

病因之一，其病情进展快，程度重，严重病例可致脑干听觉传导通路损害和胆红素脑病，危及患儿生命，影响其生存质量

［3］

。因此如何早期对其进行诊断和治疗，避免并发症的发

生，具有重要意义。目前临床主要依赖血清学检测结果对其进行诊断，主要包括直接抗球蛋白试验(DAT ) 、游离试验和放散试验。由于新生儿红细胞ABO 抗原发育尚未成熟，红细胞上致敏的IgG 抗体数量少。DAT 常呈阴性(偶有弱阳性) ，若新生儿体内导致溶血的ABO 抗体浓度低。其血清游离抗体试验也会阴性，所以热放散试验是新生儿ABO 溶血病诊断最重要的经典试验。曹霞等等

［5］

［4］

［1］陈宏础．血型血清学常用检测方法//叶应妩，王毓三．全国临床

1997:100．检验操作规程．2版．南京:东南大学出版社，

［2］胡开瑞．吸收放散试验//肖星甫，才生嘎，王培华，等．输血技术

1992:503-504．手册．成都:四川科学技术出版社，

［3］陈平，唐安洲，孙华，等．新生儿高胆红素血症199例听损伤特

2005，20(2) :107-109．征分析．中国实用儿科杂志，

［4］曹霞，郑珊，王兴勇，等．ABO 溶血病新生儿142例血清学检测

2008，23(14) :71-72．及其意义．实用儿科临床杂志，

［5］罗洪清，元霞，郑静敏．142例新生儿溶血病血清学检测结果分

2008，21(5) :428-429．析．中国生物制品学杂志，

(2010-09-28收稿，2011-02-18修回)

本文编辑:尚云

对重庆地区142例母

婴ABO 血型不合病例的临床资料进行回顾性分析和罗洪清

对韶关地区142例新生儿ABO 溶血病血清学检测结果分析表明，放散试验的阳性率均达到100%，在ABO 溶血病的血清学检测中最具价值。

在日常工作中，我们发现传统热放散试验操作有几个关键之处。首先，红细胞悬液在56ħ 水浴中振摇一定要非常充分，否则放散下的抗体数量较少将会导致最终试管法抗球蛋白试验出现假阴性; 其次，在离心时试管外最好能有装有56ħ 水的套筒，且离心后需立即将放散液分离出来，否则会因为环境温度降低而致使抗体重新结合到红细胞上，影响最终结果。临床实验室的批量标本很难做到对每一个标本都

·实验研究·

干片式快速检测系统在无偿献血者ALT 初筛中的应用

朱楷

摘要:目的

梁中会(运城市中心血站，山西运城044000)

探讨干片式快速检测系统(包括片式快速检测仪及配套ALT 干片检测板) 对无偿献血者进行献

随机选取献血者230

干片式快速检测系统的精密度较好，其正常值

血前ALT 初筛的适用性，考察该系统与全自动生化分析仪速率法检测结果的相关性。方法名，对其进行献血前ALT 检测，并与速率法进行对比与分析。结果P ＞0. 05) 。结论无统计学差异(t =0. 285，初筛工作。

关键词:干片式快速检测系统; ALT ; 献血初筛中图分类号:R457. 1

R446. 6

文献标识码:A

和病理值样本的变异系数分别为为5. 6%和5. 1%; 与速率法的相关性良好(r =0. 9885) ，且这两种方法的检测结果

干片式快速检测系统准确、快速，适合用于血站对无偿献血者的ALT

549X (2011) 02-0129-02文章编号:1004-进行，规范献血前初筛工作，选择合适的ALT 快速检测方法，

可以有效地为献血者提供检测服务，合理利用血液资源。本站近期采用干片式快速检测系统(包括干片式快速检测仪及配套ALT 干片检测板) 对献血者进行了献血前ALT 快速检

丙氨酸氨基转移酶(ALT ) 主要存在于肝脏细胞中，是肝

［1］

功能检测的重要指标，也是献血者血液必检项目之一。然而献血者ALT 检测不合格是目前造成血站血液报废的最主

［2］

要原因。目前无偿献血多在街头献血点或流动献血车上

·128·

2011，Vol．24，No．02中国输血杂志2011年02月第24卷第02期Chin J Blood Transfusion Feb ，

·实验研究·

3种放散试验在新生儿ABO 溶血病检测中的效果比较

戴维

摘要:目的

陈剑

朱凯

凤婧(四川大学华西第二医院检验科，四川成都610041)

观察比较冷冻复融放散试验、三氯乙烯-三氯甲烷放散试验和传统热放散试验在新生儿ABO 溶血

共收集104例新生儿或脐血标本，同时进行冷冻复融放散、三氯乙烯-三氯甲烷放散和热

冷冻复融放散试验阳性为29例，阴性为75例; 三氯乙

病检测中的效果。方法

放散试验，比较三者之间差异与临床诊断的吻合度。结果

烯-三氯甲烷放散试验阳性为3例，阴性为101例; 热放散试验阳性为28例，阴性为76例。冷冻复融放散试验与热放散试验间差异无统计学意义(P ＞0. 05) ，而三氯乙烯-三氯甲烷放散试验和热放散试验间差异有统计学意义(P ＜0. 05) 。104例标本中临床确诊新生儿ABO 溶血病共28例，未明确黄疸病因而诊断为新生儿高间接胆红素血症的为6例，排除溶血诊断的有70例，冷冻复融放散试验的灵敏度为100%，特异性为98. 68%; 三氯乙烯-三氯甲烷放散试验的灵敏度为37. 5%，特异性为100%。结论的手工操作，更适用于大批量标本同时进行检测。

关键词:新生儿; ABO 溶血病; 病理性黄疸; 血清学检测; 抗体释放试验中图分类号:R457. 1+1

R722. 18

文献标识码:A

549X (2011) 02-0128-02文章编号:1004-［1］［2］

《全国临床检验操作规程》《输血技术手册》和进行操作。

对新生儿ABO 溶血病，三氯乙烯-三氯甲烷放散试验的灵敏度

明显偏低，冷冻复融放散试验和传统热放散试验的检测效果并无差别，且冷冻复融放散试验操作过程中无需全程

新生儿ABO 溶血病的血清学检测方法主要有直接抗球蛋白试验、游离试验和放散试验。放散试验和直抗试验同为检测红细胞上致敏的抗体，但由于放散试验所用的红细胞是直抗的几百倍，所以放散试验是3项试验中最为敏感的一项试验，也是判定新生儿ABO 溶血病最有力的证据。我们比较了3种不同的放散试验在新生儿ABO 溶血病检测中的应用效果，以及与临床诊断的吻合度，报道如下。

1. 61. 7

试管法间接抗球蛋白试验将3种放散液同时与2%

2

3%标准红细胞进行试管法间接抗球蛋白试验。

统计学方法使用SPSS10. 0统计学软件，采用χ检验比P ＜0.05为差异有统计学意义。较3种试验方法检测效果差异，22. 1

结果

3种放散方法104例标本的检测结果表1

阳性数

29328

11. 1

见表1。

阳性率(%) 27. 882．8826．92

材料与方法标本来源

选取2009年5 6月于本院检验科进行新

104例标本3种放散方法的检测结果

其中新生儿(日生儿ABO 溶血病检测的标本共计104例，

龄:0 15d ) 静脉血标本29例，母亲为O 型血的新生儿脐血标本75例。最终临床确诊新生儿ABO 溶血病共28例，未明确黄疸病因而诊断为新生儿高间接胆红素血症的为6例，排除溶血诊断的有70例。1. 2

试剂与仪器

W21-420S ，数显电热恒温水浴箱(HH-上

海跃进医疗器械厂) ; －80ħ 超低温冰箱(ThermoForma702，40，美国伯乐) 、离心机(KDC-科大创新) 、三氯乙烯-三氯甲烷(分析纯) 、三氯乙烯(分析纯) 、单克隆抗球蛋白IgG (批0. 9%生理盐水(四号:20081128，上海生物医药有限公司) 、2% 3%标准ABO 细胞悬液(自配) 。川美大康佳乐公司) 、1. 3

放散细胞准备

将标本1700g 离心3min 后吸出浓缩

红细胞，用生理盐水洗涤4 6遍(留取最后一次洗液) ，待同时进行3种放散试验检测。1. 4

冷冻复融放散试验

取洗涤浓缩红细胞5 6滴于试

管中，加入2 4滴生理盐水混合，放置于－80ħ 超低温冰箱中冷冻10min ，取出于37ħ 水浴5min ，再以1700g 离心3min ，所得上清液即为放散液。1. 5

三氯乙烯-三氯甲烷放散试验和热放散试验

均按照

冷冻复融放散试验

三氯乙烯-三氯甲烷放散试验

热放散试验

P ＞0. 05; 注:冷冻复融放散试验与传统热放散试验比较χ2=0. 113，三氯乙烯-三氯甲烷放散试验与传统热放散试验检测效果差异有统P ＜0. 05计学意义，χ2=4. 33，

2. 2冷冻复融放散试验与最终临床诊断的比较由表2可

知，冷冻复融放散试验的灵敏度为100%，特异性为98. 68%。但由于临床通常根据血清学检测结果做出诊断，当无法明确黄疸原因时，只能做出新生儿高间接胆红素血症的诊断，而冷冻复融放散试验中所出现的1例假阳性可能是从而检出6例新生儿高间接胆由于灵敏度高于传统热放散，

红素血症中有1例存在IgG 红细胞抗体。

表2

冷冻复融放散试验与临床诊断的比较

新生儿ABO

溶血数28028

新生儿高间接胆红素血症与排除溶血诊断例数

17576

合计2975104

阳性标本数阴性标本数

合计

2. 3三氯乙烯-三氯甲烷放散试验与最终临床诊断的比较

由表3可知，三氯乙烯-三氯甲烷放散试验的灵敏度为37. 5%，特异性为100%。

2011，Vol．24，No．02中国输血杂志2011年02月第24卷第02期Chin J Blood Transfusion Feb ，

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表3三氯乙烯-三氯甲烷放散试验与临床诊断的比较

新生儿ABO 新生儿高间接胆红素血症

合计

溶血数与排除溶血诊断例数[**************]04

振摇充分，且批处理标本量加大，放散液分离时间也会增长，这些环节都有可能影响检测结果。冷冻复融放散试验的原理主要是靠低温冷冻和37ħ 水浴复融的物理方法使红细胞破坏溶血，从而使结合在红细胞膜上的抗体释放出来，为保证试验效果，需保证红细胞完全溶血。与传统热放散试验新临床吻合度生儿ABO 溶血病检测结果具有很高的一致性，

夜很高，且试验操作过程简便，无需全程的手工操作及特殊仪器设备，无化学危害，更适用于大批量标本同时进行检测; 处理批量标本与单个标本相比，无需更多的时间或步骤。但冷冻复融放散试验所得的放散液颜色较深，不能进行凝聚胺或者微柱凝胶卡检测，此为该试验的不足之处。而三氯乙烯-三氯甲烷放散试验的灵敏度明显偏低，操作过程中需要通风装置，且化学试剂对操作人员存在潜在危害，不适用于新生儿ABO 溶血病检测。

参

考

文

献

阳性标本数

阴性标本数

合计

3讨论

新生儿ABO 溶血病是早期新生儿高胆红素血症的重要

病因之一，其病情进展快，程度重，严重病例可致脑干听觉传导通路损害和胆红素脑病，危及患儿生命，影响其生存质量

［3］

。因此如何早期对其进行诊断和治疗，避免并发症的发

生，具有重要意义。目前临床主要依赖血清学检测结果对其进行诊断，主要包括直接抗球蛋白试验(DAT ) 、游离试验和放散试验。由于新生儿红细胞ABO 抗原发育尚未成熟，红细胞上致敏的IgG 抗体数量少。DAT 常呈阴性(偶有弱阳性) ，若新生儿体内导致溶血的ABO 抗体浓度低。其血清游离抗体试验也会阴性，所以热放散试验是新生儿ABO 溶血病诊断最重要的经典试验。曹霞等等

［5］

［4］

［1］陈宏础．血型血清学常用检测方法//叶应妩，王毓三．全国临床

1997:100．检验操作规程．2版．南京:东南大学出版社，

［2］胡开瑞．吸收放散试验//肖星甫，才生嘎，王培华，等．输血技术

1992:503-504．手册．成都:四川科学技术出版社，

［3］陈平，唐安洲，孙华，等．新生儿高胆红素血症199例听损伤特

2005，20(2) :107-109．征分析．中国实用儿科杂志，

［4］曹霞，郑珊，王兴勇，等．ABO 溶血病新生儿142例血清学检测

2008，23(14) :71-72．及其意义．实用儿科临床杂志，

［5］罗洪清，元霞，郑静敏．142例新生儿溶血病血清学检测结果分

2008，21(5) :428-429．析．中国生物制品学杂志，

(2010-09-28收稿，2011-02-18修回)

本文编辑:尚云

对重庆地区142例母

婴ABO 血型不合病例的临床资料进行回顾性分析和罗洪清

对韶关地区142例新生儿ABO 溶血病血清学检测结果分析表明，放散试验的阳性率均达到100%，在ABO 溶血病的血清学检测中最具价值。

在日常工作中，我们发现传统热放散试验操作有几个关键之处。首先，红细胞悬液在56ħ 水浴中振摇一定要非常充分，否则放散下的抗体数量较少将会导致最终试管法抗球蛋白试验出现假阴性; 其次，在离心时试管外最好能有装有56ħ 水的套筒，且离心后需立即将放散液分离出来，否则会因为环境温度降低而致使抗体重新结合到红细胞上，影响最终结果。临床实验室的批量标本很难做到对每一个标本都

·实验研究·

干片式快速检测系统在无偿献血者ALT 初筛中的应用

朱楷

摘要:目的

梁中会(运城市中心血站，山西运城044000)

探讨干片式快速检测系统(包括片式快速检测仪及配套ALT 干片检测板) 对无偿献血者进行献

随机选取献血者230

干片式快速检测系统的精密度较好，其正常值

血前ALT 初筛的适用性，考察该系统与全自动生化分析仪速率法检测结果的相关性。方法名，对其进行献血前ALT 检测，并与速率法进行对比与分析。结果P ＞0. 05) 。结论无统计学差异(t =0. 285，初筛工作。

关键词:干片式快速检测系统; ALT ; 献血初筛中图分类号:R457. 1

R446. 6

文献标识码:A

和病理值样本的变异系数分别为为5. 6%和5. 1%; 与速率法的相关性良好(r =0. 9885) ，且这两种方法的检测结果

干片式快速检测系统准确、快速，适合用于血站对无偿献血者的ALT

549X (2011) 02-0129-02文章编号:1004-进行，规范献血前初筛工作，选择合适的ALT 快速检测方法，

可以有效地为献血者提供检测服务，合理利用血液资源。本站近期采用干片式快速检测系统(包括干片式快速检测仪及配套ALT 干片检测板) 对献血者进行了献血前ALT 快速检

丙氨酸氨基转移酶(ALT ) 主要存在于肝脏细胞中，是肝

［1］

功能检测的重要指标，也是献血者血液必检项目之一。然而献血者ALT 检测不合格是目前造成血站血液报废的最主

［2］

要原因。目前无偿献血多在街头献血点或流动献血车上