过氧化氢及硫酸亚铁诱导洋葱表皮细胞凋亡

安徽农业科学,JournalofAnhuiAgri.Sci.2009,37(11):4898-4899责任编辑　陈红红　责任校对　卢瑶

过氧化氢及硫酸亚铁诱导洋葱表皮细胞凋亡

程志斌,王晓明,唐璐　(北京林业大学,北京100083)

摘要　[目的]探讨过氧化氢与硫酸亚铁对洋葱表皮细胞凋亡的影响。[方法]分别设置4组处理:处理①:2ml蒸馏水(对照组);处理②:1ml蒸馏水+1ml4mmol/LFeSO4;处理③:1ml蒸馏水+1ml2mmol/LH2O2;处理④:1ml2mmol/LH2O2+1ml4mmol/LFeSO4,处理洋葱表皮细胞24h后,观察其凋亡情况。[结果]处理①的细胞正常;处理②的细胞与对照组相似;处理③的细胞处于明显凋亡状态;处理④的细胞未出现明显凋亡。[结论]FeSO4对洋葱表皮细胞凋亡有抑制作用。关键词　凋亡;过氧化氢;硫酸亚铁;促进;抑制中图分类号　S633.2　　文献标识码　A　　文章编号　0517-6611(2009)11-04898-02StudyonApoptosisofOnionEpidermalCellsInducedbyHydrogenPeroxideandFerrousSulfateCHENGZhi2binetal　(BeijingForestUniversity,Beijing100083)

Abstract　[Objective]Thestudyaimedtoinvestigatetheeffectofapoptosisofonionepidermalcellsinducedbyhydrogenperoxideandfer2roussulfate.[Method]Thedividedintofourgroupswith①2mldistilledwater(controlgroup),②1mldistilledwater+1ml2mmol/LhydrogenPeroxide,③1mldistilledwater+1ml4mmol/Lferroussulfate,④1ml2mmol/LhydrogenPeroxide+1ml4mmol/Lferroussulfate.[Result]Thecelloftreatment①werenormal,celloftreatment②weresimilartocontrolgroup,celloftreatment③wereinobvi2ouslyapoptoticstatus,celloftreatment④werenotfoundphenomenonofapoptosis.[Conclusion]Ferroussulfatecaninhibittheapoptosisofonionepidermalcells.

Keywords　Apoptosis;Hydrogenperoxide;Ferroussulfate;Promotioninhibition

　　细胞凋亡(或细胞程序性死亡)最早被定义为一种有秩序、受控制,并按某种预定程序发展的生理性自然死亡过程,贯穿于有机体的整个生命周期,完成新旧细胞的生死交替,它对机体的发育、存活及维持正常生理功能具有重要意义

[1]

4mmol/LFeSO4。

1.2.2　撕取,分别放入4

h。

1.2.,制片观察。制

。诱导细胞凋亡的方法有多种,如抗肿瘤药物、1、2、3、4,将取出的洋葱表,将其展平,滴加1～2滴改良苯酚品红染液,2min后,盖上盖玻片,置于普通光学显微镜下观察。

2　结果与分析

损伤、激素等。近年来,有研究表明,细胞坏死,因此,,再通过一,1　材料与方法

1.1　材料　供试材料为洋葱;试剂为蒸馏水、2mmol/LH2O2溶液、4mmol/LFeSO4溶液、改良苯酚品红染液;试验

经观察,试验结果为:由图1可知,对照组的细胞膜完整,细胞核呈球形,染色均匀,细胞质均匀透明,从细胞核大都倚靠边缘可推断液泡依然完整;处理②(图2)的细胞膜完整,细胞核呈球形、染色均匀,与对照组基本一致;处理③(图

3)的细胞核有裂解现象,中间出现空泡,有的呈半月形。出

仪器为25℃恒温摇床、显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、离心管。

1.2　方法

1.2.1　试验设计。取4只离心管,分别编号为1、2、3、4,即

现轻度质壁分离,并且细胞核大都不再处于边缘,这说明液泡可能开始萎缩甚至裂解。由于是植物细胞凋亡,虽然没有直接看到凋亡小体,但根据已有现象,可以确定该组细胞已明显开始处于凋亡状态;处理④(图4)

的个别细胞核均匀度

分别为4组处理,处理①:2ml蒸馏水(对照组);处理②:1

ml蒸馏水+1ml4mmol/LFeSO4;处理③:1ml蒸馏水+1ml2mmol/LH2O2;处理④:1ml2mmol/LH2O2+1ml

图1　处理①的洋葱表皮细胞

Fig.1　Theepidermiscellsofonionundertreatment①

作者简介　程志斌(1987-),男,山西运城人,本科生,专业:生物科学。收稿日期　2009202201

37卷11期　　　　　　　　　　　　　　　　程志斌等　过氧化氢及硫酸亚铁诱导洋葱表皮细胞凋亡4899

图2　处理②的洋葱表皮细胞

Fig.2　Theepidermiscellsofonionundertreatment

②

图3　i

epidertreatment③

合H2O2与FeSO4共同处理时(处理④),细胞凋亡现象也减弱,这说明FeSO4对H2O2诱导的细胞凋亡有抑制作用。

(2)H2O2属于反应性氧类,被认为是细胞凋亡启动信号

转导途径之一,可直接或间接诱导细胞凋亡。该研究也观察到其处理细胞24h后发生凋亡现象。由于铁参与机体氧化应激过程中反应性氧的生成,因此推测铁可能有诱导细胞凋亡的作用,这在一些试验中也得到了证实

[2]

。但该研究显

示,与H2O2单独作用相比,同时加入H2O2与FeSO4组(处理④)的细胞凋亡比例不但没有增加,反而有明显降低,这表明铁剂抑制了H2O2诱导细胞凋亡的作用,对细胞有保护作用。

图4　处理④的洋葱表皮细胞

Fig.4　Theepidermiscellsofonionundertreatment④

这也提示可能由于铁剂在植物与动物体内有多种作用,在不同的研究体系与不同条件下起主导的作用不同,从而导致对细胞凋亡的影响截然不同。参考文献

[1]谭碧君,洪亚辉.植物细胞凋亡的研究现状与发展趋势[J].长沙电力

学院学报:自然科学版,2005,20(1):93-96.[2]VELEZ2PARDOC,DELRIOMJ,EBINGERG,etal.Monoamineand

iron2relatedtoxicity:from“senonin—bindingprotein”tolipidperoxidationandapoptosisinPC12cells[J].GenPhamacol,1998,31:19-24.

有所下降,但大多数细胞核仍正常,鲜有质壁分离现象,这说明该组未出现明显凋亡。

3　结论与讨论

(1)结果表明,处理③的细胞凋亡现象明显,这说明H2O2可以诱导细胞凋亡。处理②未出现凋亡情况。然而,混

(上接第4895页)

[4]林英任,唐燕平.松树上的七种散斑壳[J].真菌学报,1988,7(3):129-137.

[5]JOHNSTONPR.Anundescribedpatternofascocarpdevelopmentinsome

non2coniferousLophodermiumspecies[J].Mycotaxon,1988,31(2):383-394.

[6]匡治州,许杨.核糖体rDNAITS区序列在真菌学研究中的应用[J].生

命的化学,2004,24(2):120-125.

[7]SERGESOKOLSKI,YVESPICH∗,JEANAB∗RUB∗.Lophodermium

maccisp.nov.,anewspeciesonsenescedfoliageoffive2needlepines[J].Mycologia,2004,96(6):1261-1267.

[8]马荣群,黄粤,宋正旭,等.辣椒炭疽病3病原核糖体基因ITS区的序列测定及分析[J].西南农业学报,2007,20(6):1234-1236.

安徽农业科学,JournalofAnhuiAgri.Sci.2009,37(11):4898-4899责任编辑　陈红红　责任校对　卢瑶

过氧化氢及硫酸亚铁诱导洋葱表皮细胞凋亡

程志斌,王晓明,唐璐　(北京林业大学,北京100083)

摘要　[目的]探讨过氧化氢与硫酸亚铁对洋葱表皮细胞凋亡的影响。[方法]分别设置4组处理:处理①:2ml蒸馏水(对照组);处理②:1ml蒸馏水+1ml4mmol/LFeSO4;处理③:1ml蒸馏水+1ml2mmol/LH2O2;处理④:1ml2mmol/LH2O2+1ml4mmol/LFeSO4,处理洋葱表皮细胞24h后,观察其凋亡情况。[结果]处理①的细胞正常;处理②的细胞与对照组相似;处理③的细胞处于明显凋亡状态;处理④的细胞未出现明显凋亡。[结论]FeSO4对洋葱表皮细胞凋亡有抑制作用。关键词　凋亡;过氧化氢;硫酸亚铁;促进;抑制中图分类号　S633.2　　文献标识码　A　　文章编号　0517-6611(2009)11-04898-02StudyonApoptosisofOnionEpidermalCellsInducedbyHydrogenPeroxideandFerrousSulfateCHENGZhi2binetal　(BeijingForestUniversity,Beijing100083)

Abstract　[Objective]Thestudyaimedtoinvestigatetheeffectofapoptosisofonionepidermalcellsinducedbyhydrogenperoxideandfer2roussulfate.[Method]Thedividedintofourgroupswith①2mldistilledwater(controlgroup),②1mldistilledwater+1ml2mmol/LhydrogenPeroxide,③1mldistilledwater+1ml4mmol/Lferroussulfate,④1ml2mmol/LhydrogenPeroxide+1ml4mmol/Lferroussulfate.[Result]Thecelloftreatment①werenormal,celloftreatment②weresimilartocontrolgroup,celloftreatment③wereinobvi2ouslyapoptoticstatus,celloftreatment④werenotfoundphenomenonofapoptosis.[Conclusion]Ferroussulfatecaninhibittheapoptosisofonionepidermalcells.

Keywords　Apoptosis;Hydrogenperoxide;Ferroussulfate;Promotioninhibition

　　细胞凋亡(或细胞程序性死亡)最早被定义为一种有秩序、受控制,并按某种预定程序发展的生理性自然死亡过程,贯穿于有机体的整个生命周期,完成新旧细胞的生死交替,它对机体的发育、存活及维持正常生理功能具有重要意义

[1]

4mmol/LFeSO4。

1.2.2　撕取,分别放入4

h。

1.2.,制片观察。制

。诱导细胞凋亡的方法有多种,如抗肿瘤药物、1、2、3、4,将取出的洋葱表,将其展平,滴加1～2滴改良苯酚品红染液,2min后,盖上盖玻片,置于普通光学显微镜下观察。

2　结果与分析

损伤、激素等。近年来,有研究表明,细胞坏死,因此,,再通过一,1　材料与方法

1.1　材料　供试材料为洋葱;试剂为蒸馏水、2mmol/LH2O2溶液、4mmol/LFeSO4溶液、改良苯酚品红染液;试验

经观察,试验结果为:由图1可知,对照组的细胞膜完整,细胞核呈球形,染色均匀,细胞质均匀透明,从细胞核大都倚靠边缘可推断液泡依然完整;处理②(图2)的细胞膜完整,细胞核呈球形、染色均匀,与对照组基本一致;处理③(图

3)的细胞核有裂解现象,中间出现空泡,有的呈半月形。出

仪器为25℃恒温摇床、显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、离心管。

1.2　方法

1.2.1　试验设计。取4只离心管,分别编号为1、2、3、4,即

现轻度质壁分离,并且细胞核大都不再处于边缘,这说明液泡可能开始萎缩甚至裂解。由于是植物细胞凋亡,虽然没有直接看到凋亡小体,但根据已有现象,可以确定该组细胞已明显开始处于凋亡状态;处理④(图4)

的个别细胞核均匀度

分别为4组处理,处理①:2ml蒸馏水(对照组);处理②:1

ml蒸馏水+1ml4mmol/LFeSO4;处理③:1ml蒸馏水+1ml2mmol/LH2O2;处理④:1ml2mmol/LH2O2+1ml

图1　处理①的洋葱表皮细胞

Fig.1　Theepidermiscellsofonionundertreatment①

作者简介　程志斌(1987-),男,山西运城人,本科生,专业:生物科学。收稿日期　2009202201

37卷11期　　　　　　　　　　　　　　　　程志斌等　过氧化氢及硫酸亚铁诱导洋葱表皮细胞凋亡4899

图2　处理②的洋葱表皮细胞

Fig.2　Theepidermiscellsofonionundertreatment

②

图3　i

epidertreatment③

合H2O2与FeSO4共同处理时(处理④),细胞凋亡现象也减弱,这说明FeSO4对H2O2诱导的细胞凋亡有抑制作用。

(2)H2O2属于反应性氧类,被认为是细胞凋亡启动信号

转导途径之一,可直接或间接诱导细胞凋亡。该研究也观察到其处理细胞24h后发生凋亡现象。由于铁参与机体氧化应激过程中反应性氧的生成,因此推测铁可能有诱导细胞凋亡的作用,这在一些试验中也得到了证实

[2]

。但该研究显

示,与H2O2单独作用相比,同时加入H2O2与FeSO4组(处理④)的细胞凋亡比例不但没有增加,反而有明显降低,这表明铁剂抑制了H2O2诱导细胞凋亡的作用,对细胞有保护作用。

图4　处理④的洋葱表皮细胞

Fig.4　Theepidermiscellsofonionundertreatment④

这也提示可能由于铁剂在植物与动物体内有多种作用,在不同的研究体系与不同条件下起主导的作用不同,从而导致对细胞凋亡的影响截然不同。参考文献

[1]谭碧君,洪亚辉.植物细胞凋亡的研究现状与发展趋势[J].长沙电力

学院学报:自然科学版,2005,20(1):93-96.[2]VELEZ2PARDOC,DELRIOMJ,EBINGERG,etal.Monoamineand

iron2relatedtoxicity:from“senonin—bindingprotein”tolipidperoxidationandapoptosisinPC12cells[J].GenPhamacol,1998,31:19-24.

有所下降,但大多数细胞核仍正常,鲜有质壁分离现象,这说明该组未出现明显凋亡。

3　结论与讨论

(1)结果表明,处理③的细胞凋亡现象明显,这说明H2O2可以诱导细胞凋亡。处理②未出现凋亡情况。然而,混

(上接第4895页)

[4]林英任,唐燕平.松树上的七种散斑壳[J].真菌学报,1988,7(3):129-137.

[5]JOHNSTONPR.Anundescribedpatternofascocarpdevelopmentinsome

non2coniferousLophodermiumspecies[J].Mycotaxon,1988,31(2):383-394.

[6]匡治州,许杨.核糖体rDNAITS区序列在真菌学研究中的应用[J].生

命的化学,2004,24(2):120-125.

[7]SERGESOKOLSKI,YVESPICH∗,JEANAB∗RUB∗.Lophodermium

maccisp.nov.,anewspeciesonsenescedfoliageoffive2needlepines[J].Mycologia,2004,96(6):1261-1267.

[8]马荣群,黄粤,宋正旭,等.辣椒炭疽病3病原核糖体基因ITS区的序列测定及分析[J].西南农业学报,2007,20(6):1234-1236.