茶叶中有效成分的提取以及含量的测定

一,器材与材料的预处理

1,材料:茶叶,乙醇,蒸馏水;电炉,圆底烧瓶(磨口),铁架台,酒精灯,漏斗,滤纸,滤布,烧杯,量筒,玻棒,旋转减压蒸馏器等。

配置:称取10g 茶叶, 用200ml 的量筒量取80%乙醇200ml

预处理:将茶叶碾碎

二,方法

1,称取茶叶10克揉碎再加80%乙醇100ml 在40℃水浴中提取1h 。

2,过滤收集滤液,再向滤渣中加入80%乙醇100ml 在40℃水浴中提取1h 。过滤收集滤液,并去滤渣。

3,将2次的滤液混合,减压浓缩至40ml ,将乙醇回收。在

浓缩也中加等体积氯仿萃取,静置30分钟。分离,有机

相为咖啡碱(减压蒸馏至15ml 回收有机物,将15ml 的咖

啡碱溶液于收集图1,收集方法:将残留液 (大约l0~15ml)

倾入蒸发皿中, 烧瓶用少量乙醇洗涤, 洗涤液也倒人蒸

发皿中, 蒸发至近干。加入4g 生石灰粉, 搅拌均匀, 用

电热套加热(100~120V), 蒸发至干, 除去全部水分。冷却后, 擦去沾在边上的粉末, 以免升华时污染产物。将一张刺有许多小孔的圆形滤纸盖在蒸发皿上, 取一只大小合适的玻璃漏斗罩于其上, 漏斗颈部疏松地塞一团棉花。用电热套小心加热蒸发皿, 慢慢升高温度, 使咖啡因升华。咖啡因通过滤纸孔遇到漏斗内壁凝为固体, 附着于漏斗内壁和滤纸上。当纸上出现白色针 状晶体时, 暂停加热, 冷至 100 ℃左右, 揭开漏斗和滤纸, 仔细用小刀把附着于滤纸及漏斗壁上的咖啡因刮入表面皿中。将蒸发皿内的残渣加以搅拌, 重新放好滤纸和漏斗, 用较高的温度再加热升华一次。此时 ,温度也不宜太高, 否则蒸发皿内大量冒烟, 产品既受污染又遭损失。合并两次升华所收集的咖啡因。待测定,用高效液相色谱法对咖啡因进行测定。),水相主要为茶多酚。

4,向水相中加入等体积乙酸乙酯采取分离,水相为色素去掉,有机相减压蒸馏并干燥保存。

三,茶多酚含量的测定

材料:分光光度仪,蒸馏水,酒石酸亚铁溶液,pH7.5磷酸缓冲液

预处理:讲风光光度仪设定波长为540nm 处预热

配置:1,酒石酸亚铁溶液:称取1g (准确至0.0001g) 硫酸亚铁(GB 664-77)和5g (准确至 0.0001g) 酒石酸钾钠(GB 1288-81),用水溶解并定容至1L 。

2,pH7.5磷酸缓冲液:称取23.377g 磷酸氢二钠(GB 1263-77), 加水溶解后定容至1L ;称取9.078g 磷酸二氢钾(GB 1274-77),加水溶解后定容至1L 。取方法:上述的磷酸氢二钾溶液85ml 和磷酸二氢钾溶液混合均匀。

取茶多酚0.1g 加10水配置城溶液。

取茶多酚溶液1ml+水4ml+5ml酒石酸业铁溶液+缓冲液于25ml 容量瓶中

用10mm 比色杯, 在波长540nm 处, 以试剂空白溶液作参比, 测定吸光度(A) Mg=A1.957/0.5

一,器材与材料的预处理

1,材料:茶叶,乙醇,蒸馏水;电炉,圆底烧瓶(磨口),铁架台,酒精灯,漏斗,滤纸,滤布,烧杯,量筒,玻棒,旋转减压蒸馏器等。

配置:称取10g 茶叶, 用200ml 的量筒量取80%乙醇200ml

预处理:将茶叶碾碎

二,方法

1,称取茶叶10克揉碎再加80%乙醇100ml 在40℃水浴中提取1h 。

2,过滤收集滤液,再向滤渣中加入80%乙醇100ml 在40℃水浴中提取1h 。过滤收集滤液,并去滤渣。

3,将2次的滤液混合,减压浓缩至40ml ,将乙醇回收。在

浓缩也中加等体积氯仿萃取,静置30分钟。分离,有机

相为咖啡碱(减压蒸馏至15ml 回收有机物,将15ml 的咖

啡碱溶液于收集图1,收集方法:将残留液 (大约l0~15ml)

倾入蒸发皿中, 烧瓶用少量乙醇洗涤, 洗涤液也倒人蒸

发皿中, 蒸发至近干。加入4g 生石灰粉, 搅拌均匀, 用

电热套加热(100~120V), 蒸发至干, 除去全部水分。冷却后, 擦去沾在边上的粉末, 以免升华时污染产物。将一张刺有许多小孔的圆形滤纸盖在蒸发皿上, 取一只大小合适的玻璃漏斗罩于其上, 漏斗颈部疏松地塞一团棉花。用电热套小心加热蒸发皿, 慢慢升高温度, 使咖啡因升华。咖啡因通过滤纸孔遇到漏斗内壁凝为固体, 附着于漏斗内壁和滤纸上。当纸上出现白色针 状晶体时, 暂停加热, 冷至 100 ℃左右, 揭开漏斗和滤纸, 仔细用小刀把附着于滤纸及漏斗壁上的咖啡因刮入表面皿中。将蒸发皿内的残渣加以搅拌, 重新放好滤纸和漏斗, 用较高的温度再加热升华一次。此时 ,温度也不宜太高, 否则蒸发皿内大量冒烟, 产品既受污染又遭损失。合并两次升华所收集的咖啡因。待测定,用高效液相色谱法对咖啡因进行测定。),水相主要为茶多酚。

4,向水相中加入等体积乙酸乙酯采取分离,水相为色素去掉,有机相减压蒸馏并干燥保存。

三,茶多酚含量的测定

材料:分光光度仪,蒸馏水,酒石酸亚铁溶液,pH7.5磷酸缓冲液

预处理:讲风光光度仪设定波长为540nm 处预热

配置:1,酒石酸亚铁溶液:称取1g (准确至0.0001g) 硫酸亚铁(GB 664-77)和5g (准确至 0.0001g) 酒石酸钾钠(GB 1288-81),用水溶解并定容至1L 。

2,pH7.5磷酸缓冲液:称取23.377g 磷酸氢二钠(GB 1263-77), 加水溶解后定容至1L ;称取9.078g 磷酸二氢钾(GB 1274-77),加水溶解后定容至1L 。取方法:上述的磷酸氢二钾溶液85ml 和磷酸二氢钾溶液混合均匀。

取茶多酚0.1g 加10水配置城溶液。

取茶多酚溶液1ml+水4ml+5ml酒石酸业铁溶液+缓冲液于25ml 容量瓶中

用10mm 比色杯, 在波长540nm 处, 以试剂空白溶液作参比, 测定吸光度(A) Mg=A1.957/0.5


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