制作冰冻切片的体会

龙源期刊网 http://www.qikan.com.cn

制作冰冻切片的体会

作者:吴增辉

来源:《医学美学美容·中旬刊》2013年第11期

【摘要】无论是在组织胚胎学等医学基础课中,还是在临床检验工作中,冰冻切片都有着举足轻重的作用,冰冻切片被广泛的运用在科研、教学和临床诊断中。所谓冰冻切片就是组织在低温状态下在很短的时间内变硬并进行切片。在临床外科手术中常常需要进行快速病理诊断,而冰冻切片就是一个很好的方法。

【关键词】冰冻切片;制作;体会

【中图分类号】R197.324【文献标识码】A 【文章编号】1004-4949(2013)11-71-02 冰冻切片是一种在低温的条件下使组织快速冷冻到一定的硬度然后进行切片的方法。其制作过程简单方便快捷,在手术中快速进行病理诊断从而为手术在中快速确定组织性质,对医生的手术方案具有指导意义。冰冻切片的组织在送检前不需要进行处理,其组织没有发生变化,使得原来的生活形态得以保持,特别是在免疫组织化学染色中,组织中的糖、酶、抗原、脂类等成分由于没有受到干扰而存在,组织中的细胞抗原的免疫性也得到了保存,对于需要检测糖、酶、抗原、脂类的不会受到影响。但是,冰冻切片的制作过程要比普通的蜡切片难度大、要求高,而且组织冰冻的程度不好把握,在切片的过程中组织较易破碎,很难切成符合要求的薄片,在染色的过程中很容易脱片,所有以上这些因素都会影响到切片的质量,从而影响到了检测结果。对于如何能有效快速高质量的制作符合要求的冰冻切片一直使我们面对的问题。 1材料和方法

1.1 材料: 恒冷切片机,切片刀,固定液,胶水,实验用用的新鲜组织如肝、肾、脾、皮肤、食管、胃、淋巴结、心肌、脑、卵巢、小肠等组织。

1.2 方法: 采用新鲜的实验用的新鲜组织,取一块大小为1.5cm×1.5cm×3cm 的新鲜实验用组织,去除组织中的脂肪组织,在取组织的时候要注意保持干燥以免引起组织细胞发生变性和变化,把组织放在低温液氮中快速冷冻放置于冰冻台上。在切片机内快速冰冻2分钟之后待切。如果组织的体积较大冰冻时间相应延长,如果所取组织体积较小则相应的缩短冰冻时间,切片刀的温度控制在零下25℃-零下30℃之间。在开始切片之前要对切片刀和防卷板之间的角度进行调整以防切出来的组织薄片卷曲。使用有粘结剂的载玻片把切下来的薄片直接吸附,这个过程要迅速的完成,以免产生皱折,随后立即放入固定液中1分钟。把固定好的切片在自来水中稍作洗涤,随后放入已经预热到40℃的苏木素染色液中染色1分钟,水洗之后使用1%的盐酸乙醇分化,再次水洗后放入37℃的温水中蓝化,随后放入到37℃复制伊红染液中染色1分钟,上行递度酒精(70%、80%、95%、100%)加温到37℃左右逐级脱水,电吹风吹干,不用二甲苯透明,中性树胶直接封周即可。

龙源期刊网 http://www.qikan.com.cn

制作冰冻切片的体会

作者:吴增辉

来源:《医学美学美容·中旬刊》2013年第11期

【摘要】无论是在组织胚胎学等医学基础课中,还是在临床检验工作中,冰冻切片都有着举足轻重的作用,冰冻切片被广泛的运用在科研、教学和临床诊断中。所谓冰冻切片就是组织在低温状态下在很短的时间内变硬并进行切片。在临床外科手术中常常需要进行快速病理诊断,而冰冻切片就是一个很好的方法。

【关键词】冰冻切片;制作;体会

【中图分类号】R197.324【文献标识码】A 【文章编号】1004-4949(2013)11-71-02 冰冻切片是一种在低温的条件下使组织快速冷冻到一定的硬度然后进行切片的方法。其制作过程简单方便快捷,在手术中快速进行病理诊断从而为手术在中快速确定组织性质,对医生的手术方案具有指导意义。冰冻切片的组织在送检前不需要进行处理,其组织没有发生变化,使得原来的生活形态得以保持,特别是在免疫组织化学染色中,组织中的糖、酶、抗原、脂类等成分由于没有受到干扰而存在,组织中的细胞抗原的免疫性也得到了保存,对于需要检测糖、酶、抗原、脂类的不会受到影响。但是,冰冻切片的制作过程要比普通的蜡切片难度大、要求高,而且组织冰冻的程度不好把握,在切片的过程中组织较易破碎,很难切成符合要求的薄片,在染色的过程中很容易脱片,所有以上这些因素都会影响到切片的质量,从而影响到了检测结果。对于如何能有效快速高质量的制作符合要求的冰冻切片一直使我们面对的问题。 1材料和方法

1.1 材料: 恒冷切片机,切片刀,固定液,胶水,实验用用的新鲜组织如肝、肾、脾、皮肤、食管、胃、淋巴结、心肌、脑、卵巢、小肠等组织。

1.2 方法: 采用新鲜的实验用的新鲜组织,取一块大小为1.5cm×1.5cm×3cm 的新鲜实验用组织,去除组织中的脂肪组织,在取组织的时候要注意保持干燥以免引起组织细胞发生变性和变化,把组织放在低温液氮中快速冷冻放置于冰冻台上。在切片机内快速冰冻2分钟之后待切。如果组织的体积较大冰冻时间相应延长,如果所取组织体积较小则相应的缩短冰冻时间,切片刀的温度控制在零下25℃-零下30℃之间。在开始切片之前要对切片刀和防卷板之间的角度进行调整以防切出来的组织薄片卷曲。使用有粘结剂的载玻片把切下来的薄片直接吸附,这个过程要迅速的完成,以免产生皱折,随后立即放入固定液中1分钟。把固定好的切片在自来水中稍作洗涤,随后放入已经预热到40℃的苏木素染色液中染色1分钟,水洗之后使用1%的盐酸乙醇分化,再次水洗后放入37℃的温水中蓝化,随后放入到37℃复制伊红染液中染色1分钟,上行递度酒精(70%、80%、95%、100%)加温到37℃左右逐级脱水,电吹风吹干,不用二甲苯透明,中性树胶直接封周即可。


相关文章

  • 冰冻切片免疫荧光细胞技术的改良
  • 中国实用医药2011年1月第6卷第3期ChinaPracMed,Jan2011,Vol.6,No.3 ·119· (3/69),有效率2.9%(2/69),无效5.8%(4/69),总有效率 94.2%(61/69). 所有患者在复查时均行 ...查看


  • 脂肪组织冰冻切片简易操作技术
  • 第18卷第6期 2009年12月 中国组织化学与细胞化学杂志 CHINESEJOURNALOFHISTOCHEMISTRY AND VoI.18.No.6Dec.2009 CYTOCHEMISTRY 脂肪组织冰冻切片简易操作技术 徐林丽 陈 ...查看


  • 冰冻切片的制作方法 Microsoft Word 文档
  • 冰冻切片的制作方法 一.概述 所谓冰冻法(Freezing method),就是先将组织块进行冰冻,水分成为包埋介质,组织块在一定温度和时间内变硬,然后使用切片机进行薄片切割的一种方法. (一) 冰冻切片法分类 一般冰冻切片机:用Co2气. ...查看


  • 冰冻切片制作方法与注意事项
  • 冰冻切片制作方法与注意事项 一.固定: 固定即借助化学试剂是组织和细胞中的有机和无机成分凝固或沉淀,停止发生死后组织变化,尽量保持其活体状态的过程. 固定的方法有浸泡固定法,注射.灌注固定法,蒸汽固定法,本实验用的是注射.关注固定法:某些组 ...查看


  • 制作临床快速冰冻切片的质量控制
  • ・846・ [2] 徐叔云.临床药理学[M].第1版.北京:人民卫生出版社,1989: 54261. [3] 吴莱文.治疗药物监测[M].北京:人民卫生出版社,1989:295.[4] 李 .实用临床药物动力学[M].成都:四川大学出版社, ...查看


  • 临床病理基本知识
  • 临床病理基本知识 病理学教研室 王连唐 ? 在临床实际工作中,许多疾病的确诊有赖于病理检查. ? 送检标本和临床资料由手术科室医生提供,而病理诊断则由病理医生作出.标本的采集.处理和所提供的临床资料是否得当,直接影响病理诊断的准确性. 本章 ...查看


  • 上海生物样本库样本处理标准规范
  • 最佳实践规范及标准操作流程文件汇编 V2.01 上海生物样本库 最佳实践规范及标准操作流程 文件汇编 (第二版) 2010年5月 最佳实践规范及标准操作流程文件汇编 V2.01 样本库最佳实践规范 第2章 样本 目 录 2.样本...... ...查看


  • 病理科评审办法
  • 1 十七.病理管理与持续改进 评审标准 评审要点 4. 17. 病理科设置. 1 布局. 设备设施符合 <病理科建设与管理指南 (试行) > 的要求,服务项目满足临床诊疗需要. [C] 4.17.1.1 病理科应具有与 1.病理 ...查看


  • 4.16.6.1病理技术规范
  • 病理技术规范 1. 标本的接收.清点制度: 1.1 巨检结束后病理医师应向技术组当面交付组织块,并点清块数,记录签收.有要求特殊 处理的标本(如脱钙.糖原染色等)应当面向技术组说明,以便加以特殊处理. 1.2 组织包埋完成后必须进行清点蜡块 ...查看


热门内容