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制作冰冻切片的体会
作者:吴增辉
来源:《医学美学美容·中旬刊》2013年第11期
【摘要】无论是在组织胚胎学等医学基础课中,还是在临床检验工作中,冰冻切片都有着举足轻重的作用,冰冻切片被广泛的运用在科研、教学和临床诊断中。所谓冰冻切片就是组织在低温状态下在很短的时间内变硬并进行切片。在临床外科手术中常常需要进行快速病理诊断,而冰冻切片就是一个很好的方法。
【关键词】冰冻切片;制作;体会
【中图分类号】R197.324【文献标识码】A 【文章编号】1004-4949(2013)11-71-02 冰冻切片是一种在低温的条件下使组织快速冷冻到一定的硬度然后进行切片的方法。其制作过程简单方便快捷,在手术中快速进行病理诊断从而为手术在中快速确定组织性质,对医生的手术方案具有指导意义。冰冻切片的组织在送检前不需要进行处理,其组织没有发生变化,使得原来的生活形态得以保持,特别是在免疫组织化学染色中,组织中的糖、酶、抗原、脂类等成分由于没有受到干扰而存在,组织中的细胞抗原的免疫性也得到了保存,对于需要检测糖、酶、抗原、脂类的不会受到影响。但是,冰冻切片的制作过程要比普通的蜡切片难度大、要求高,而且组织冰冻的程度不好把握,在切片的过程中组织较易破碎,很难切成符合要求的薄片,在染色的过程中很容易脱片,所有以上这些因素都会影响到切片的质量,从而影响到了检测结果。对于如何能有效快速高质量的制作符合要求的冰冻切片一直使我们面对的问题。 1材料和方法
1.1 材料: 恒冷切片机,切片刀,固定液,胶水,实验用用的新鲜组织如肝、肾、脾、皮肤、食管、胃、淋巴结、心肌、脑、卵巢、小肠等组织。
1.2 方法: 采用新鲜的实验用的新鲜组织,取一块大小为1.5cm×1.5cm×3cm 的新鲜实验用组织,去除组织中的脂肪组织,在取组织的时候要注意保持干燥以免引起组织细胞发生变性和变化,把组织放在低温液氮中快速冷冻放置于冰冻台上。在切片机内快速冰冻2分钟之后待切。如果组织的体积较大冰冻时间相应延长,如果所取组织体积较小则相应的缩短冰冻时间,切片刀的温度控制在零下25℃-零下30℃之间。在开始切片之前要对切片刀和防卷板之间的角度进行调整以防切出来的组织薄片卷曲。使用有粘结剂的载玻片把切下来的薄片直接吸附,这个过程要迅速的完成,以免产生皱折,随后立即放入固定液中1分钟。把固定好的切片在自来水中稍作洗涤,随后放入已经预热到40℃的苏木素染色液中染色1分钟,水洗之后使用1%的盐酸乙醇分化,再次水洗后放入37℃的温水中蓝化,随后放入到37℃复制伊红染液中染色1分钟,上行递度酒精(70%、80%、95%、100%)加温到37℃左右逐级脱水,电吹风吹干,不用二甲苯透明,中性树胶直接封周即可。
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制作冰冻切片的体会
作者:吴增辉
来源:《医学美学美容·中旬刊》2013年第11期
【摘要】无论是在组织胚胎学等医学基础课中,还是在临床检验工作中,冰冻切片都有着举足轻重的作用,冰冻切片被广泛的运用在科研、教学和临床诊断中。所谓冰冻切片就是组织在低温状态下在很短的时间内变硬并进行切片。在临床外科手术中常常需要进行快速病理诊断,而冰冻切片就是一个很好的方法。
【关键词】冰冻切片;制作;体会
【中图分类号】R197.324【文献标识码】A 【文章编号】1004-4949(2013)11-71-02 冰冻切片是一种在低温的条件下使组织快速冷冻到一定的硬度然后进行切片的方法。其制作过程简单方便快捷,在手术中快速进行病理诊断从而为手术在中快速确定组织性质,对医生的手术方案具有指导意义。冰冻切片的组织在送检前不需要进行处理,其组织没有发生变化,使得原来的生活形态得以保持,特别是在免疫组织化学染色中,组织中的糖、酶、抗原、脂类等成分由于没有受到干扰而存在,组织中的细胞抗原的免疫性也得到了保存,对于需要检测糖、酶、抗原、脂类的不会受到影响。但是,冰冻切片的制作过程要比普通的蜡切片难度大、要求高,而且组织冰冻的程度不好把握,在切片的过程中组织较易破碎,很难切成符合要求的薄片,在染色的过程中很容易脱片,所有以上这些因素都会影响到切片的质量,从而影响到了检测结果。对于如何能有效快速高质量的制作符合要求的冰冻切片一直使我们面对的问题。 1材料和方法
1.1 材料: 恒冷切片机,切片刀,固定液,胶水,实验用用的新鲜组织如肝、肾、脾、皮肤、食管、胃、淋巴结、心肌、脑、卵巢、小肠等组织。
1.2 方法: 采用新鲜的实验用的新鲜组织,取一块大小为1.5cm×1.5cm×3cm 的新鲜实验用组织,去除组织中的脂肪组织,在取组织的时候要注意保持干燥以免引起组织细胞发生变性和变化,把组织放在低温液氮中快速冷冻放置于冰冻台上。在切片机内快速冰冻2分钟之后待切。如果组织的体积较大冰冻时间相应延长,如果所取组织体积较小则相应的缩短冰冻时间,切片刀的温度控制在零下25℃-零下30℃之间。在开始切片之前要对切片刀和防卷板之间的角度进行调整以防切出来的组织薄片卷曲。使用有粘结剂的载玻片把切下来的薄片直接吸附,这个过程要迅速的完成,以免产生皱折,随后立即放入固定液中1分钟。把固定好的切片在自来水中稍作洗涤,随后放入已经预热到40℃的苏木素染色液中染色1分钟,水洗之后使用1%的盐酸乙醇分化,再次水洗后放入37℃的温水中蓝化,随后放入到37℃复制伊红染液中染色1分钟,上行递度酒精(70%、80%、95%、100%)加温到37℃左右逐级脱水,电吹风吹干,不用二甲苯透明,中性树胶直接封周即可。