第17卷第2期2005年6月
塔里木大学学报
Journalof
Tarim
V01.17No.2
University
Jun.2005
文章编号:1009—0568(2005)02—0025—02
野生巴楚蘑菇多糖提取及含量测定
侯旭杰
杨保求
张娜
熊素英
胡建伟4
(塔里木大学农业工程学院,新疆阿拉尔843300)
摘要用稀酸、稀碱、蒸馏水分别提取巴楚蘑菇多糖,结果表明,用水提法具有简便易行、提取率高等优点。以水为提取剂,同时选用果胶酶处理显著提高了多糖提取率,用蒽酮法测得巴楚蘑菇多糖平均含量达8.7%左右。关键词
巴楚蘑菇;多糖;提取;含量测定
文献标识码:B
中图分类号:TS275.4
PolysaccharideDrawingandItsContents
of
Hou
Determination
Wild
Bachu
Mushroom
XiongSuying
HuJianwei
Xujie
YangBaoqiu
ZhangNa
(College
Abstract
Polysaccharide
was
ofAgricultureEngineering,Tarim
rare
University,Alar,Xinjiang,843300)
water
separatelydrawnwith
acid,rarealkalianddistilled
can
fromwildBachumushroom.Theresult
to
showedthatthemethoddrawingpolysaccharidewithdistilledwater,whichmertwo;andticenzyme.Itods.
at
bedonesimplyandconveniently,issuperior
rate
thefor-
thesametimeitwas
notablyimprovedinincreasingpolysaccharidedrawing
content
withwater
formulation,dealtwithpec—
was
determinedthataveragepolysaceharide
inBachumushroomreachedabout
8.7%byanthraceneketonemeth—
Keywordsbachumushroom,polysaccharide,drawing,contentdetermination
巴楚蘑菇是主要分布于新疆塔里木盆地北缘
的一种珍稀美味子囊菌,因产地主要在巴楚县而得
皮质激素分泌,增强人体应激能力、溶血栓、降低胆固醇等多种保健作用。由于南疆地区昼夜温差大促进了巴楚蘑菇多糖的积累,据我们测定,其多糖含量高于一般食用菌,且产地不同,多糖含量有较大不同
差异。当地干旱的自然条件不利于其他野生食用菌生长,但巴楚蘑菇在长期的野外生长过程中已适应了当地的土壤、气候条件,每年有较大的生长量。目
名,是当地著名的土特产。在系统分类学上,巴楚蘑
菇属于子囊菌纲(Ascomycetes)盘菌目(Pezizales)马
鞍菌科(Helvellaceae)马鞍菌属(Helvella)。暂定
名,白柄马鞍菌(Helvellaalbella)。该菌子实体香气
浓郁、味道鲜美、质地细腻、其营养价值高于常见的平菇、香菇及黑木耳等担子菌,与粗柄羊肚菌相当。
据测定,巴楚蘑菇蛋白质含量,氨基酸含量及氨基酸
前该菌的人工驯化引种还未成功,致使其市场价格较高,每公斤干品达100~180元。因此,巴楚蘑菇人工引种及其产品的开发具有巨大的市场前景和经
济效益。1
1.1
组成中必需氨基酸所占比率均高于平菇、香菇及黑木耳,与粗柄羊肚菌相似。巴楚蘑菇中粗脂肪含量及不饱和脂肪酸在脂肪中所占比率均高于平菇、香菇、黑木耳、双孢蘑菇及粗柄羊肚菌…。巴楚蘑菇不但具有较高的食用价值,长期食用,还有提高人体
免疫力,促进大脑发育、防止脑动脉硬化、促进副肾
材料与方法
材料
巴楚蘑菇干品,购于当地市场。
①收稿13期:2005—04—29
基金项目:新疆兵团科委基金资助项目(编号:GKB03TNDGJ08JG)
t为通讯联系人
作者简介:侯旭杰(1968一),男,讲师,硕士,主要从事农产品深加工及当地特色资源开发研究工作。
万方数据
塔里木大学学报第17卷
1.2仪器与试剂721分光光度计,粉碎机,恒温水浴锅,1/万天
平。蒽酮,95%乙醇,果胶酶(PectolyaseY一23,日
本),葡萄糖,浓硫酸等。
1.3方法
1.3.1
蒽酮试剂配置
称取0.259蒽酮,59硫脲,溶解于500m166%
(V/V)硫酸中,加热至80~90℃,使其完全溶解,放冷后,保存于0~40C备用
1.3.2
粗多糖提取
将巴楚蘑菇干品表层的尘土刷干净,用粉碎机粉碎,准确称取样品209,在索氏提取器中用乙醚抽
提8h,渣连同滤纸烘干,加60ml水,加果胶酶制剂lOmg,400C保温2h,再加100ml水,升温到1000C,浸提2h,滤出。第二次加水100ml浸提1h,滤出。第
三次加水50ml,浸提30min,合并三次滤液。减压浓
缩至体积缩小至原来的1/4左右,用Sevag法除蛋
白,4c|C放置过夜,抽滤,滤液加三倍体积的乙醇,4。C静置过夜,分离沉淀,60。C烘干,即得蘑菇多糖样品。
1.3.3
标准曲线的制备
精密称取105oC干燥至恒重的葡萄糖0.19,加适量水溶解,转移至100ml容量瓶中,加水定容,然
后分别将其浓度稀释为20ppm,40ppm,60ppm,
80ppm,100ppm,120ppm。抽取每种浓度的稀释液
各lml于不同试管中,各加蒽酮试剂10ml,在沸水
浴中煮沸15min,放人冷水中迅速冷却,在暗处放置20—30min,用721分光光度计在620nm处比色,用所测得的吸光值绘制标准曲线。
1.3.4
换算因素测定
精密称取干燥至恒重的巴楚蘑菇多糖50mg,水
溶解后定容至100ml,准确吸取此溶液1ml,同上述操作用蒽酮比色法测定吸光值,将吸光值代人回归方程求得蘑菇多糖样品的浓度值。
1.3.5
蘑菇样品多糖提取及测定
准确称取粉碎的巴楚蘑菇干品0.59,同1.3.2操作,用Sevag法除蛋白后,抽滤,将滤液加蒸馏水定容至100ml,吸取此溶液1ml同上述操作用蒽酮
比色法测定吸光值,吸光值代人回归方程求得样品
提取液的浓度。2
结果
2.1
不同浓度葡萄糖溶液对应吸光值(见表1)
万
方数据表1为不同浓度的葡萄糖液对应的吸光值,由表1
得到曲线的回归方程为Y=0.0024x+0.0055,戈为
葡萄糖溶液浓度,Y为吸光值,回归后的标准曲线相关系数r=0.9994。
表1
不同浓度葡萄糖溶液对应吸光值
浓度(ppm)
20
406080
100
120平均吸光值0.057
0.104
0.147
0.1960.245
0.292
2.2
巴楚蘑菇多糖液及样品提取液吸光值及对应
浓度(见表2)
表2
巴楚蘑菇多糖液及样品提取液吸光值及对应浓度
表2为根据测得的平均吸光值计算出对应的样
品浓度。
2.3
换算因子及多糖含量测定结果(见表3)
表3
巴楚蘑菇多糖含量及换算因子
换算因子计算:f=m/c
多糖含量计算:c%=f×Cm/W×100%
(f为换算因子,In为多糖重,w为蘑菇样品重,c为多糖液中葡萄糖浓度,c。为样品提取液对应浓度)。
3
讨论
3.1用稀酸、稀碱和蒸馏水分别提取巴楚蘑菇多糖,结果显示,用蒸馏水提取具有提取方法简便,提取率高等优点。同时,大多数研究者认为酸、碱提取可能造成对糖苷键的破坏,从而影响多糖的提取率及多糖的活性结构悼J。本实验以蒸馏水结合果胶酶处理的方法进行提取,结果测得巴楚蘑菇多糖含
量为8.7%。
3.2
用蒸馏水为溶剂,同时使用果胶酶制剂可以明显提高蘑菇多糖的提取率。
3.3
目前对多糖的研究不断深入,但对当地产野
生巴楚蘑菇多糖结构组成及药理活性的研究还未见
报道,有待进一步研究。
参考文献[1]
朱铭莪,、薛泉宏等.巴楚蘑菇研究,西北农业学报.1999,8(3):77~80.
[2]
陈石良,谷文英等.水溶性蛋白聚糖AP一1的分离和鉴定.无锡轻工、lk大学学报.2000,19(1):50—53.
第17卷第2期2005年6月
塔里木大学学报
Journalof
Tarim
V01.17No.2
University
Jun.2005
文章编号:1009—0568(2005)02—0025—02
野生巴楚蘑菇多糖提取及含量测定
侯旭杰
杨保求
张娜
熊素英
胡建伟4
(塔里木大学农业工程学院,新疆阿拉尔843300)
摘要用稀酸、稀碱、蒸馏水分别提取巴楚蘑菇多糖,结果表明,用水提法具有简便易行、提取率高等优点。以水为提取剂,同时选用果胶酶处理显著提高了多糖提取率,用蒽酮法测得巴楚蘑菇多糖平均含量达8.7%左右。关键词
巴楚蘑菇;多糖;提取;含量测定
文献标识码:B
中图分类号:TS275.4
PolysaccharideDrawingandItsContents
of
Hou
Determination
Wild
Bachu
Mushroom
XiongSuying
HuJianwei
Xujie
YangBaoqiu
ZhangNa
(College
Abstract
Polysaccharide
was
ofAgricultureEngineering,Tarim
rare
University,Alar,Xinjiang,843300)
water
separatelydrawnwith
acid,rarealkalianddistilled
can
fromwildBachumushroom.Theresult
to
showedthatthemethoddrawingpolysaccharidewithdistilledwater,whichmertwo;andticenzyme.Itods.
at
bedonesimplyandconveniently,issuperior
rate
thefor-
thesametimeitwas
notablyimprovedinincreasingpolysaccharidedrawing
content
withwater
formulation,dealtwithpec—
was
determinedthataveragepolysaceharide
inBachumushroomreachedabout
8.7%byanthraceneketonemeth—
Keywordsbachumushroom,polysaccharide,drawing,contentdetermination
巴楚蘑菇是主要分布于新疆塔里木盆地北缘
的一种珍稀美味子囊菌,因产地主要在巴楚县而得
皮质激素分泌,增强人体应激能力、溶血栓、降低胆固醇等多种保健作用。由于南疆地区昼夜温差大促进了巴楚蘑菇多糖的积累,据我们测定,其多糖含量高于一般食用菌,且产地不同,多糖含量有较大不同
差异。当地干旱的自然条件不利于其他野生食用菌生长,但巴楚蘑菇在长期的野外生长过程中已适应了当地的土壤、气候条件,每年有较大的生长量。目
名,是当地著名的土特产。在系统分类学上,巴楚蘑
菇属于子囊菌纲(Ascomycetes)盘菌目(Pezizales)马
鞍菌科(Helvellaceae)马鞍菌属(Helvella)。暂定
名,白柄马鞍菌(Helvellaalbella)。该菌子实体香气
浓郁、味道鲜美、质地细腻、其营养价值高于常见的平菇、香菇及黑木耳等担子菌,与粗柄羊肚菌相当。
据测定,巴楚蘑菇蛋白质含量,氨基酸含量及氨基酸
前该菌的人工驯化引种还未成功,致使其市场价格较高,每公斤干品达100~180元。因此,巴楚蘑菇人工引种及其产品的开发具有巨大的市场前景和经
济效益。1
1.1
组成中必需氨基酸所占比率均高于平菇、香菇及黑木耳,与粗柄羊肚菌相似。巴楚蘑菇中粗脂肪含量及不饱和脂肪酸在脂肪中所占比率均高于平菇、香菇、黑木耳、双孢蘑菇及粗柄羊肚菌…。巴楚蘑菇不但具有较高的食用价值,长期食用,还有提高人体
免疫力,促进大脑发育、防止脑动脉硬化、促进副肾
材料与方法
材料
巴楚蘑菇干品,购于当地市场。
①收稿13期:2005—04—29
基金项目:新疆兵团科委基金资助项目(编号:GKB03TNDGJ08JG)
t为通讯联系人
作者简介:侯旭杰(1968一),男,讲师,硕士,主要从事农产品深加工及当地特色资源开发研究工作。
万方数据
塔里木大学学报第17卷
1.2仪器与试剂721分光光度计,粉碎机,恒温水浴锅,1/万天
平。蒽酮,95%乙醇,果胶酶(PectolyaseY一23,日
本),葡萄糖,浓硫酸等。
1.3方法
1.3.1
蒽酮试剂配置
称取0.259蒽酮,59硫脲,溶解于500m166%
(V/V)硫酸中,加热至80~90℃,使其完全溶解,放冷后,保存于0~40C备用
1.3.2
粗多糖提取
将巴楚蘑菇干品表层的尘土刷干净,用粉碎机粉碎,准确称取样品209,在索氏提取器中用乙醚抽
提8h,渣连同滤纸烘干,加60ml水,加果胶酶制剂lOmg,400C保温2h,再加100ml水,升温到1000C,浸提2h,滤出。第二次加水100ml浸提1h,滤出。第
三次加水50ml,浸提30min,合并三次滤液。减压浓
缩至体积缩小至原来的1/4左右,用Sevag法除蛋
白,4c|C放置过夜,抽滤,滤液加三倍体积的乙醇,4。C静置过夜,分离沉淀,60。C烘干,即得蘑菇多糖样品。
1.3.3
标准曲线的制备
精密称取105oC干燥至恒重的葡萄糖0.19,加适量水溶解,转移至100ml容量瓶中,加水定容,然
后分别将其浓度稀释为20ppm,40ppm,60ppm,
80ppm,100ppm,120ppm。抽取每种浓度的稀释液
各lml于不同试管中,各加蒽酮试剂10ml,在沸水
浴中煮沸15min,放人冷水中迅速冷却,在暗处放置20—30min,用721分光光度计在620nm处比色,用所测得的吸光值绘制标准曲线。
1.3.4
换算因素测定
精密称取干燥至恒重的巴楚蘑菇多糖50mg,水
溶解后定容至100ml,准确吸取此溶液1ml,同上述操作用蒽酮比色法测定吸光值,将吸光值代人回归方程求得蘑菇多糖样品的浓度值。
1.3.5
蘑菇样品多糖提取及测定
准确称取粉碎的巴楚蘑菇干品0.59,同1.3.2操作,用Sevag法除蛋白后,抽滤,将滤液加蒸馏水定容至100ml,吸取此溶液1ml同上述操作用蒽酮
比色法测定吸光值,吸光值代人回归方程求得样品
提取液的浓度。2
结果
2.1
不同浓度葡萄糖溶液对应吸光值(见表1)
万
方数据表1为不同浓度的葡萄糖液对应的吸光值,由表1
得到曲线的回归方程为Y=0.0024x+0.0055,戈为
葡萄糖溶液浓度,Y为吸光值,回归后的标准曲线相关系数r=0.9994。
表1
不同浓度葡萄糖溶液对应吸光值
浓度(ppm)
20
406080
100
120平均吸光值0.057
0.104
0.147
0.1960.245
0.292
2.2
巴楚蘑菇多糖液及样品提取液吸光值及对应
浓度(见表2)
表2
巴楚蘑菇多糖液及样品提取液吸光值及对应浓度
表2为根据测得的平均吸光值计算出对应的样
品浓度。
2.3
换算因子及多糖含量测定结果(见表3)
表3
巴楚蘑菇多糖含量及换算因子
换算因子计算:f=m/c
多糖含量计算:c%=f×Cm/W×100%
(f为换算因子,In为多糖重,w为蘑菇样品重,c为多糖液中葡萄糖浓度,c。为样品提取液对应浓度)。
3
讨论
3.1用稀酸、稀碱和蒸馏水分别提取巴楚蘑菇多糖,结果显示,用蒸馏水提取具有提取方法简便,提取率高等优点。同时,大多数研究者认为酸、碱提取可能造成对糖苷键的破坏,从而影响多糖的提取率及多糖的活性结构悼J。本实验以蒸馏水结合果胶酶处理的方法进行提取,结果测得巴楚蘑菇多糖含
量为8.7%。
3.2
用蒸馏水为溶剂,同时使用果胶酶制剂可以明显提高蘑菇多糖的提取率。
3.3
目前对多糖的研究不断深入,但对当地产野
生巴楚蘑菇多糖结构组成及药理活性的研究还未见
报道,有待进一步研究。
参考文献[1]
朱铭莪,、薛泉宏等.巴楚蘑菇研究,西北农业学报.1999,8(3):77~80.
[2]
陈石良,谷文英等.水溶性蛋白聚糖AP一1的分离和鉴定.无锡轻工、lk大学学报.2000,19(1):50—53.