案例分析
病例简介
病例介绍：CCU 患者，男，52岁，因反复胸痛收治入院，入院诊断为冠心病、主动脉夹层、高血压，有痛风史，无输血史。入院常规检测血型发现正反定型不一致。
分析：正定型非常弱，0.5+判断是真阳性还是假阳性1、红细胞洗涤后检测2、血型卡重复试验3、患者DAT 试验
强生血型卡：血型鉴定结果
重复血型鉴定
洗涤后重做的结果, 抗A 0.5+患者DAT ：阴性
排除假阳性，可以确定为真阳性。
试管法复查
试管法血型鉴定结果---试剂1
试管法复查结果，抗A 、B 血清厂家：南京欣迪
正定
反应条件
IS 多次4℃*30min
-A 000
-B 4+4+4+
Ac 1+1+S
Bc 00反定
Oc 00
自身c 00
结果显示：A 抗原阴性，与卡式结果不一致。
分析：考虑是否是亚型抗原由于某些抗原位点的缺失，与某些单克隆血清反应，与某些单克隆不反应。
换一个厂家的抗A 、B 血清
试管法血型鉴定结果—试剂2
换用上海血生的抗血清检测
正定
反应条件
IS 多次4℃*30min
-A 0.5+0.5+1+
-B 4+4+4+
Ac 1+1+S
Bc 00反定
Oc 00
自身c 00
结果显示：A 抗原也很弱，与卡式结果一致。分析：正定型AB 型，反定B 型，正反定型不一致，A 抗原很弱，可能为A 亚B ，如果是A 亚B ，红细胞上应该是A 亚型抗原而不是正常A 抗原，反定中的抗A 应该是不规则抗A1，而不是抗A 。
亚型试剂鉴定
亚型试剂检测原理
亚型试剂
抗-A1
鉴定红细胞是A1抗原还是A 亚型抗原红细胞被抗AB 凝集的程度
抗-AB
抗-H
红细胞的H 反应性程度
A2C
血清内有无抗A1抗体
抗-A1的应用
用抗-A1血清验证红细胞上A 亚型抗原
PC
抗-A1
A1C （阳性对照）+
A2C （阴性对照）0
确定为A 亚型抗原，而不是A 抗原
也有可能抗原太弱而出现假阴性结果（不能排除）
A2C的应用
用A2C 来鉴定血清中的是抗A 还是抗A1
抗A
A1C A2C
++
抗A1+0
结果如下（由于A2C 已过期，加做了阴性和阳性对照）PS+A2C0
抗A1+A2C（阴性对照）0
单抗A+A2C（阳人源抗A+A2C性对照）（阳性对照）4+
1+
阴阳对照相符，可判断该抗体为抗A1抗体
抗H的应用
用
抗-H 进一步验证亚型红细胞上的H 抗原
H
抗原强弱：O>A亚/B亚> B > AB亚型> A1 > A1B
PC
抗-H
2+W
OC 3+S
BC 2+
A1BC 1+
反应结果介于Bc 和A1Bc 之间
此鉴定目的主要与B （A ）/O相区别：B （A ）/O与抗H 呈强阳性反应3-4+，相当于O 细胞反应强度。
吸收放散试验
综上所述：红细胞上有很弱的A 抗原，正常B 抗原，血清中有不规则抗A1。
可定为A 亚B 型
与临床沟通：该患者曾在甲院住过院，患者自己不清楚既往的血型。与甲院联系：该患者2012年在甲院的血型鉴定为B 型为进一步确定A 抗原的存在，进行吸收放散试验。
？
吸收放散试验的检测原理：由于A 抗原很弱用常规血清学方法鉴定很弱或未能鉴定出来时，可通过抗A 血清来吸收待检红细胞，如果存在A 抗原，就会将血清中的抗A 吸附在红细胞上，然后再将红细胞上的抗A 放散下来，将放散液再与A 型试剂红细胞反应，如果有凝集，证实A 抗原的存在，如果阴性，不能证实A 抗原的存在。同时用O 细胞做阴性对照
吸收放散试验---抗A的选择
1、单抗效价高，需稀释，另需验证（能与亚型红细胞反应）
2、多抗（人源），可以用于亚型的鉴定和吸收，但效价低。
选择：上血抗A ，4倍稀释
献血者B 型血浆作为人源抗A
吸收放散试验---单-A
单-A PC
OC 4℃1h 离心吸出上清
立即离心56℃热放散
10min 4℃NS 洗涤6次
吸出上清液
（放散液）再次离心与AC 反应，离心看
结果
证明有A 抗原存在Ac
二次PC 放2+OC 放0
吸收放散试验---人-A
人-A PC
OC 4℃1h 离心吸出上清
立即离心56℃热放散
10min 4℃NS 洗涤6次
吸出上清液
（放散液）
Ac
IS
4℃过夜PC 放00再次离心放散液中加入AC ，4 ℃过夜OC 放00离心看结果未能成功吸收
吸收放散试验
人-A 吸收前后效价
对比：无明显差异
吸收前效价：16
吸收后效价：8
考虑人源抗A 效价
太低，未能成功
吸收弱A 抗原，但
单抗A 能成功吸收，
放散阳性。
血清学结论：A 亚B ，血清中有不规则抗A1。
输血或备血建议：O 型或B 型洗涤红；AB 型血浆
血型基因检测
基因型克隆测序结果核苷酸取代氨基酸置换
BA04/B101BA640/B*01A640G Met214Val
B （A ）*04是核苷酸序列在B 基因基础上发生单碱基错义突
变（A 被G 取代），nt640位的核苷酸突变导致214位氨基酸
的置换，Met214Val 。
B（A）血清学特点
1、较弱的A 抗原和接近正常的B 抗原特异性，红细胞与抗A1、一些单克隆抗A 发生弱凝集，与抗B 发生较强凝集。
2、血清中存在针对弱抗原产生的比较强不规则抗A ，可以凝集A1C 和部分A2C 。
3、红细胞与抗H 反应强度根据不同的基因型反应有所不同，当基因型为B （A ）/O时，与抗H 反应强度仅次于甚至接近与O 细胞，当基因型为B （A ）/B时，与抗H 反应强度比较弱。
此例患者基因型为B （A ）/B，与抗H 的凝集强度介于Bc
和A1Bc 之间，呈2+W的弱凝集。
总结：由于不同单克隆抗A 、B 血清对亚型抗原检出能力有差别，会出现弱抗原漏检的现象，本例患者，用A 厂家检测正定型为B 型，该患者两年前在其他医院也误定为B 型，用B 、C 厂家鉴定正定型为AwB 型，通过吸收放散试验进一步验证了A 抗原的存在。在临床输血工作中，对正反定型不符者使用多个厂家单克隆试剂以及试管法进行正反定型，疑为亚型时做吸收放散等血型血清学检测，可避免对血型的误判。
案例分析
病例简介
病例介绍：CCU 患者，男，52岁，因反复胸痛收治入院，入院诊断为冠心病、主动脉夹层、高血压，有痛风史，无输血史。入院常规检测血型发现正反定型不一致。
分析：正定型非常弱，0.5+判断是真阳性还是假阳性1、红细胞洗涤后检测2、血型卡重复试验3、患者DAT 试验
强生血型卡：血型鉴定结果
重复血型鉴定
洗涤后重做的结果, 抗A 0.5+患者DAT ：阴性
排除假阳性，可以确定为真阳性。
试管法复查
试管法血型鉴定结果---试剂1
试管法复查结果，抗A 、B 血清厂家：南京欣迪
正定
反应条件
IS 多次4℃*30min
-A 000
-B 4+4+4+
Ac 1+1+S
Bc 00反定
Oc 00
自身c 00
结果显示：A 抗原阴性，与卡式结果不一致。
分析：考虑是否是亚型抗原由于某些抗原位点的缺失，与某些单克隆血清反应，与某些单克隆不反应。
换一个厂家的抗A 、B 血清
试管法血型鉴定结果—试剂2
换用上海血生的抗血清检测
正定
反应条件
IS 多次4℃*30min
-A 0.5+0.5+1+
-B 4+4+4+
Ac 1+1+S
Bc 00反定
Oc 00
自身c 00
结果显示：A 抗原也很弱，与卡式结果一致。分析：正定型AB 型，反定B 型，正反定型不一致，A 抗原很弱，可能为A 亚B ，如果是A 亚B ，红细胞上应该是A 亚型抗原而不是正常A 抗原，反定中的抗A 应该是不规则抗A1，而不是抗A 。
亚型试剂鉴定
亚型试剂检测原理
亚型试剂
抗-A1
鉴定红细胞是A1抗原还是A 亚型抗原红细胞被抗AB 凝集的程度
抗-AB
抗-H
红细胞的H 反应性程度
A2C
血清内有无抗A1抗体
抗-A1的应用
用抗-A1血清验证红细胞上A 亚型抗原
PC
抗-A1
A1C （阳性对照）+
A2C （阴性对照）0
确定为A 亚型抗原，而不是A 抗原
也有可能抗原太弱而出现假阴性结果（不能排除）
A2C的应用
用A2C 来鉴定血清中的是抗A 还是抗A1
抗A
A1C A2C
++
抗A1+0
结果如下（由于A2C 已过期，加做了阴性和阳性对照）PS+A2C0
抗A1+A2C（阴性对照）0
单抗A+A2C（阳人源抗A+A2C性对照）（阳性对照）4+
1+
阴阳对照相符，可判断该抗体为抗A1抗体
抗H的应用
用
抗-H 进一步验证亚型红细胞上的H 抗原
H
抗原强弱：O>A亚/B亚> B > AB亚型> A1 > A1B
PC
抗-H
2+W
OC 3+S
BC 2+
A1BC 1+
反应结果介于Bc 和A1Bc 之间
此鉴定目的主要与B （A ）/O相区别：B （A ）/O与抗H 呈强阳性反应3-4+，相当于O 细胞反应强度。
吸收放散试验
综上所述：红细胞上有很弱的A 抗原，正常B 抗原，血清中有不规则抗A1。
可定为A 亚B 型
与临床沟通：该患者曾在甲院住过院，患者自己不清楚既往的血型。与甲院联系：该患者2012年在甲院的血型鉴定为B 型为进一步确定A 抗原的存在，进行吸收放散试验。
？
吸收放散试验的检测原理：由于A 抗原很弱用常规血清学方法鉴定很弱或未能鉴定出来时，可通过抗A 血清来吸收待检红细胞，如果存在A 抗原，就会将血清中的抗A 吸附在红细胞上，然后再将红细胞上的抗A 放散下来，将放散液再与A 型试剂红细胞反应，如果有凝集，证实A 抗原的存在，如果阴性，不能证实A 抗原的存在。同时用O 细胞做阴性对照
吸收放散试验---抗A的选择
1、单抗效价高，需稀释，另需验证（能与亚型红细胞反应）
2、多抗（人源），可以用于亚型的鉴定和吸收，但效价低。
选择：上血抗A ，4倍稀释
献血者B 型血浆作为人源抗A
吸收放散试验---单-A
单-A PC
OC 4℃1h 离心吸出上清
立即离心56℃热放散
10min 4℃NS 洗涤6次
吸出上清液
（放散液）再次离心与AC 反应，离心看
结果
证明有A 抗原存在Ac
二次PC 放2+OC 放0
吸收放散试验---人-A
人-A PC
OC 4℃1h 离心吸出上清
立即离心56℃热放散
10min 4℃NS 洗涤6次
吸出上清液
（放散液）
Ac
IS
4℃过夜PC 放00再次离心放散液中加入AC ，4 ℃过夜OC 放00离心看结果未能成功吸收
吸收放散试验
人-A 吸收前后效价
对比：无明显差异
吸收前效价：16
吸收后效价：8
考虑人源抗A 效价
太低，未能成功
吸收弱A 抗原，但
单抗A 能成功吸收，
放散阳性。
血清学结论：A 亚B ，血清中有不规则抗A1。
输血或备血建议：O 型或B 型洗涤红；AB 型血浆
血型基因检测
基因型克隆测序结果核苷酸取代氨基酸置换
BA04/B101BA640/B*01A640G Met214Val
B （A ）*04是核苷酸序列在B 基因基础上发生单碱基错义突
变（A 被G 取代），nt640位的核苷酸突变导致214位氨基酸
的置换，Met214Val 。
B（A）血清学特点
1、较弱的A 抗原和接近正常的B 抗原特异性，红细胞与抗A1、一些单克隆抗A 发生弱凝集，与抗B 发生较强凝集。
2、血清中存在针对弱抗原产生的比较强不规则抗A ，可以凝集A1C 和部分A2C 。
3、红细胞与抗H 反应强度根据不同的基因型反应有所不同，当基因型为B （A ）/O时，与抗H 反应强度仅次于甚至接近与O 细胞，当基因型为B （A ）/B时，与抗H 反应强度比较弱。
此例患者基因型为B （A ）/B，与抗H 的凝集强度介于Bc
和A1Bc 之间，呈2+W的弱凝集。
总结：由于不同单克隆抗A 、B 血清对亚型抗原检出能力有差别，会出现弱抗原漏检的现象，本例患者，用A 厂家检测正定型为B 型，该患者两年前在其他医院也误定为B 型，用B 、C 厂家鉴定正定型为AwB 型，通过吸收放散试验进一步验证了A 抗原的存在。在临床输血工作中，对正反定型不符者使用多个厂家单克隆试剂以及试管法进行正反定型，疑为亚型时做吸收放散等血型血清学检测，可避免对血型的误判。