7 陈宇轩, 吕春堂, 雷德林, 等1生物可吸收材料L /DL2聚乳酸的生物
als, 1990; 11(7) :501251
・1699・
相容性及体内降解〔J 〕1第四军医大学学报, 2000; 21(4) :142251
8 Vasenius J, Vaini onpaa S, V iht onen K, et al 1Comparis on of in vitr o hy 2
dr olysis, subcutaneous and intra medullary i m p lantati on t o evaluate the strength retenti on of abs orbable osteosynthesis i m p lants 〔J 〕1B i omateri 2
〔2010203216收稿 2010204220修回〕
(编辑 袁左鸣)
周丽霞 黄宏妙 李 灵 罗佩卓 梁晓艳 黄 焕 ( 530001)
〔摘 要〕 目的 ((MAO ) 的影响。方法 48只S D 大鼠随机分为无药无手术组、无药手术组、给药手术组、12只10m l/kg。14d 后手术组采用“四血管阻断法”建立脑缺血再灌注模型, 肾、CAT 、MAO 的活力。结果 给药组大鼠各器官组织中CAT 活性均显著大于无药组(P
〔关键词〕 ; ; 过氧化氢酶; 单胺氧化酶
〔中图分类号〕 R28515 〔文献标识码〕 A 〔文章编号〕 100529202(2010) 1221699202
板栗毛壳是壳斗科植物板栗(castanea mollissi m a blu me ) 的总苞。据《中华本草》记载, 板栗毛壳具健脾益气、补肾强筋、清热散结、止血之功效, 治疗丹毒、肿毒等疾病〔1〕。板栗壳含有黄酮类、微量元素、多糖、氨基酸等多种化学成分消炎作用和抗凝血、升高白细胞等生物活性板栗壳色素具一定的抗氧化作用
〔6〕
〔2〕
苏省金坛市医疗仪器) ; WXH 微型旋涡混合器(上海跃进医疗器械厂) 。
112 方法
11211 板栗毛壳水提液的制备 将洗净干燥后的板栗毛壳粉
, 板栗壳及板
〔5〕
栗毛壳的水煎液、醇溶物、乙酸乙酯提取物还具有极强的抗菌、
〔3, 4〕
碎, 称取干燥粉末100g, 用8倍量纯净水浸泡1h, 加热煮沸
30m in, 滤出水煎液, 继续分别加6倍量纯净水再煮2次, 合并
, 而且低毒。
, 但其毛壳的抗氧化、抗衰
水煎液, 浓缩至100m l (相当于1g 生药/ml ) 。
11212 动物分组 将48只S D 大鼠随机分为4组:无药无手
老作用迄今未见有报道。本研究将通过观察板栗毛壳水提液在大鼠脑缺血再灌注损伤后对过氧化氢酶(C AT ) 、单胺氧化酶
(MAO ) 的影响, 初步研究其抗氧化、抗衰老的作用, 使其药用价
术组(空白对照组) 、无药手术组、给药手术组、给药无手术组。给药组:每天按10m l/kg鼠, 用板栗毛壳水提液灌胃。无药组:每天灌服等量生理盐水。灌胃14d 后进行实验。
11213 脑缺血再灌注模型的建立 采用四血管阻断法
〔7〕
值得到有效开发。
1 材料与方法111 材料
11111 药物与试剂 双缩脲试剂盒、MAO 测定试剂盒、C AT
, 即
将麻醉大鼠定位头颅, 电凝阻断左右椎动脉; 再仰卧定位, 挂线结扎双侧颈总动脉15m in, 灌注3h 后断头处死。
11214 组织匀浆的制备 处死大鼠后, 速取其脑、肝、肾、心,
测定试剂盒均为南京建成生物工程研究所产品; 板栗毛壳采集于广西隆安县那桐乡那重村, 经广西中医学院药用植物学教研室刘寿养教授鉴定为壳斗科植物板栗(Castanea mollissi m a
B lu me ) 的总苞。
11112 动物 健康S D 大白鼠48只, 雌雄各半, 体重(200±20) g, 由广西中医学院实验动物中心提供。
113 主要仪器 紫外可见分光光度计UV 2160(日本shi m adzu
用4℃生理盐水洗净, 吸干, 准确称重, 加入9倍量生理盐水, 冰冷条件下以3000r/min 制成10%的匀浆。在4～6℃条件下高速低温离心20m in, 取上清液, 置冰箱4℃保存备用。
11215 蛋白质、C AT 、MAO 含量的测定 参照蛋白定量(双缩
脲法) 、C AT 、MAO 测试盒说明书。
11216 统计方法及软件 数据用x ±s 表示, 采用组间t 检验,
用中国医学百科统计软件包(PE MS V211) 进行统计分析。
2 结 果
211 板栗毛壳水提液对大鼠脑、肝、肾、心中C AT 活性的影响
公司) ; 1411高频小电刀(上海医疗器械高技术公司) ; 江弯2Ⅰ型C 通用立体定向器(第二军医大学) ; TG L 216型台式高速冷冻离心机(上海安亭科学仪器厂) ; FSH 2Ⅱ高速电动匀浆器(江
基金项目:桂教科(2006226) ; 广西高校人才小高地建设创新团队资助
计划(200522)
通讯作者:罗佩卓(19542) , 女, 副教授, 硕士生导师, 主要从事中药抗自
由基作用研究。
第一作者:周丽霞(19612) , 女, 实验师, 主要从事中药抗氧化作用研究。
见表1。
212 蛋白定量测定结果 见表1。各组大鼠各组织蛋白量均
比较接近, 各组间比较差异无统计学意义(P >0105) 。
213 板栗毛壳水提液对大鼠心、脑、肝、肾中MAO 活性的影响
见表1。
・1700・表1 板栗毛壳水提液对大鼠器官组织匀浆CAT 、蛋白含量、M AO 活力的影响(±s, n =6)
脑
组别无药无手术组无药手术组给药手术组给药无手术组
组别无药无手术组无药手术组给药手术组给药无手术组
CAT 蛋白MAO
(U /gp r ot ) (mg/ml ) (-1・m l -1) 8193±11765124±11222) 4) 10105±21201) 12118±21121
) 4)
肝
CAT 蛋白MAO
(U /gp r ot ) (mg/ml ) (-1・m l -1) 112170±219257132±01802) 4) 97156±31301) 177198±51301
) 4)
2116±01182130±01032112±01182105±0104
8184±114110177±21461) 7105±11404) 4140±01324
)
10153±014111154±014812134±013894129±01155174±01141) 3139±01113) 1152±01074
)
肾
CAT 蛋白MAO
(U /gp r ot ) (mg/ml ) (-1・m l -1) 117115±415299150±31322) 4) 127128±31943) 156138±41871
MAO
(/g) l ) (-1・m l -1) 1901161±11222) 4) 26116±21824) 35179±11691
) 4)
5150±01235134±[1**********]
11041321) 18) 0146±01194
)
3125±01144133±01354119±01123161±0116
1105±01151140±01141) 0192±01133) 0161±01134
)
与无药无手术组比较05, 2) 01与无药手术组比较:3) P
3 讨 论
(NE ) 浓度下降, 以致出现卒中症状的一个重要原因〔10〕。而给
蛋白定量测定主要是为了求出各组织匀浆蛋白浓度, 给
CAT 和MAO 含量的计算提供数据。由表2数据可知, 与无药
予板栗毛壳水提液灌胃后, 能有效抑制MAO 的活性, 以减少神经元的损害, 达到延缓衰老的效果。
板栗毛壳水提液能提高CAT 活性, 显著降低MAO 活性。其醇溶性物质是否也具同样作用? 其降低神经元坏死的程度、减少脑缺血再灌注损伤后的卒中症状, 还有待于进一步研究。本研究希望能为药材的功效、进一步的开发利用提供一定的科学依据。
4 参考文献
1 国家中药管理局1中华本草〔M 〕1上海:上海科学技术出版社,
1999:24221
2 赵德义, 高文海, 花成文, 等1板栗壳化学成分的初步研究〔J 〕1陕西
无手术组(空白对照组) 比较, 无药手术组的C AT 活力明显降低(P
脑缺血再灌注损伤是指脑缺血致脑细胞损伤, 恢复血液再灌注后, 其缺血性损伤反而进一步加重的现象〔8〕。脑缺血再灌注引起脑组织损害的病理机制包括自由基产生、细胞内钙超载、能量耗竭、免疫介质产生、谷氨酸盐释放、离子稳态破坏、酸中毒、凋亡通路激活等。其中, 自由基连锁反应是脑缺血再灌注损伤的核心环节, 而钙超载则可能是导致神经元死亡的最后通路
〔9〕
林业科技, 2003; (2) :43271
3 吴龙云, 凌桂生, 许学健, 等1板栗毛壳的抗菌活性成分〔J 〕1中草
药, 1991; 22(8) :3701
4 吴龙云, 凌桂生, 许振朝1板栗壳浸膏抗菌抗炎作用及对胃肠平滑肌
运动的影响〔J 〕1广西中医药, 2002; 25(4) :541
5 李爱媛, 贝伟剑, 赵 一, 等1板栗毛壳长期毒性的实验研究〔J 〕1湖
南中医药导报, 1996; 2(4) :311
6 何玲玲, 王 新, 石中亮, 等1水提板栗壳色素对羟自由基和超氧阴
。自由基的过量产生或抗氧化物酶的活性降低都可引
离子自由基的清除作用〔J 〕1食品与机械, 2006; 6:562571
7 刘亚君, 崔 鹤, 谢东萍, 等1Bcl 2和Bax 在缺血预处理保护海马神
起不同程度的细胞毒性及瞬时不可逆损失。因此, 只有及时治疗, 促进体内抗氧化物酶活性的增强, 清除氧自由基、抑制脂质过氧化反应, 才能消除炎症、减轻组织缺血再灌注造成的损伤。 CAT 的测定结果提示, 在脑缺血再灌注损伤后, 大鼠脑、肝、肾、心组织中, 具有清除自由基作用的C AT 活性减弱, 会导致自由基大量产生而对组织造成损伤。而给予板栗毛壳水提液灌胃后, 可提高大鼠脑、肝、肾、心组织中CAT 的活性, 增强机体抗氧化能力, 从而减轻脑缺血再灌注造成的损伤。
MAO 的测定结果提示, 在脑缺血再灌注损伤后, 大鼠脑、肝、肾、心组织可能由于大量自由基的产生增强了MAO 的活性。MAO 活性上升会引起中枢儿茶酚胺水平下降造成生化损害。MAO 活性增高, 是导致急性脑缺血早期脑内去甲肾上腺素
经元缺血再灌损伤中的作用〔J 〕1山东大学学报(医学版) , 2006; 44
(3) :2272301
8 韩 敏, 刘艳凯, 薛 茜1脑缺血再灌注损伤的研究进展〔J 〕1河北
北方学院学报(医学版) , 2006; 23(10) :75281
9 Cristina T, Rosaria G, Dechun W , et al 1N itr oglycerin induces hyperalgesia
in rats a ti m e course study 〔J 〕1Eur J Phar macol, 2003; 464(223) :1592621
10 许世凯1抗衰老药物学〔M 〕1北京:中国医药科技出版社, 1994:
1581
〔2009210229收稿 2010204201修回〕
(编辑 曲 莉)
7 陈宇轩, 吕春堂, 雷德林, 等1生物可吸收材料L /DL2聚乳酸的生物
als, 1990; 11(7) :501251
・1699・
相容性及体内降解〔J 〕1第四军医大学学报, 2000; 21(4) :142251
8 Vasenius J, Vaini onpaa S, V iht onen K, et al 1Comparis on of in vitr o hy 2
dr olysis, subcutaneous and intra medullary i m p lantati on t o evaluate the strength retenti on of abs orbable osteosynthesis i m p lants 〔J 〕1B i omateri 2
〔2010203216收稿 2010204220修回〕
(编辑 袁左鸣)
周丽霞 黄宏妙 李 灵 罗佩卓 梁晓艳 黄 焕 ( 530001)
〔摘 要〕 目的 ((MAO ) 的影响。方法 48只S D 大鼠随机分为无药无手术组、无药手术组、给药手术组、12只10m l/kg。14d 后手术组采用“四血管阻断法”建立脑缺血再灌注模型, 肾、CAT 、MAO 的活力。结果 给药组大鼠各器官组织中CAT 活性均显著大于无药组(P
〔关键词〕 ; ; 过氧化氢酶; 单胺氧化酶
〔中图分类号〕 R28515 〔文献标识码〕 A 〔文章编号〕 100529202(2010) 1221699202
板栗毛壳是壳斗科植物板栗(castanea mollissi m a blu me ) 的总苞。据《中华本草》记载, 板栗毛壳具健脾益气、补肾强筋、清热散结、止血之功效, 治疗丹毒、肿毒等疾病〔1〕。板栗壳含有黄酮类、微量元素、多糖、氨基酸等多种化学成分消炎作用和抗凝血、升高白细胞等生物活性板栗壳色素具一定的抗氧化作用
〔6〕
〔2〕
苏省金坛市医疗仪器) ; WXH 微型旋涡混合器(上海跃进医疗器械厂) 。
112 方法
11211 板栗毛壳水提液的制备 将洗净干燥后的板栗毛壳粉
, 板栗壳及板
〔5〕
栗毛壳的水煎液、醇溶物、乙酸乙酯提取物还具有极强的抗菌、
〔3, 4〕
碎, 称取干燥粉末100g, 用8倍量纯净水浸泡1h, 加热煮沸
30m in, 滤出水煎液, 继续分别加6倍量纯净水再煮2次, 合并
, 而且低毒。
, 但其毛壳的抗氧化、抗衰
水煎液, 浓缩至100m l (相当于1g 生药/ml ) 。
11212 动物分组 将48只S D 大鼠随机分为4组:无药无手
老作用迄今未见有报道。本研究将通过观察板栗毛壳水提液在大鼠脑缺血再灌注损伤后对过氧化氢酶(C AT ) 、单胺氧化酶
(MAO ) 的影响, 初步研究其抗氧化、抗衰老的作用, 使其药用价
术组(空白对照组) 、无药手术组、给药手术组、给药无手术组。给药组:每天按10m l/kg鼠, 用板栗毛壳水提液灌胃。无药组:每天灌服等量生理盐水。灌胃14d 后进行实验。
11213 脑缺血再灌注模型的建立 采用四血管阻断法
〔7〕
值得到有效开发。
1 材料与方法111 材料
11111 药物与试剂 双缩脲试剂盒、MAO 测定试剂盒、C AT
, 即
将麻醉大鼠定位头颅, 电凝阻断左右椎动脉; 再仰卧定位, 挂线结扎双侧颈总动脉15m in, 灌注3h 后断头处死。
11214 组织匀浆的制备 处死大鼠后, 速取其脑、肝、肾、心,
测定试剂盒均为南京建成生物工程研究所产品; 板栗毛壳采集于广西隆安县那桐乡那重村, 经广西中医学院药用植物学教研室刘寿养教授鉴定为壳斗科植物板栗(Castanea mollissi m a
B lu me ) 的总苞。
11112 动物 健康S D 大白鼠48只, 雌雄各半, 体重(200±20) g, 由广西中医学院实验动物中心提供。
113 主要仪器 紫外可见分光光度计UV 2160(日本shi m adzu
用4℃生理盐水洗净, 吸干, 准确称重, 加入9倍量生理盐水, 冰冷条件下以3000r/min 制成10%的匀浆。在4～6℃条件下高速低温离心20m in, 取上清液, 置冰箱4℃保存备用。
11215 蛋白质、C AT 、MAO 含量的测定 参照蛋白定量(双缩
脲法) 、C AT 、MAO 测试盒说明书。
11216 统计方法及软件 数据用x ±s 表示, 采用组间t 检验,
用中国医学百科统计软件包(PE MS V211) 进行统计分析。
2 结 果
211 板栗毛壳水提液对大鼠脑、肝、肾、心中C AT 活性的影响
公司) ; 1411高频小电刀(上海医疗器械高技术公司) ; 江弯2Ⅰ型C 通用立体定向器(第二军医大学) ; TG L 216型台式高速冷冻离心机(上海安亭科学仪器厂) ; FSH 2Ⅱ高速电动匀浆器(江
基金项目:桂教科(2006226) ; 广西高校人才小高地建设创新团队资助
计划(200522)
通讯作者:罗佩卓(19542) , 女, 副教授, 硕士生导师, 主要从事中药抗自
由基作用研究。
第一作者:周丽霞(19612) , 女, 实验师, 主要从事中药抗氧化作用研究。
见表1。
212 蛋白定量测定结果 见表1。各组大鼠各组织蛋白量均
比较接近, 各组间比较差异无统计学意义(P >0105) 。
213 板栗毛壳水提液对大鼠心、脑、肝、肾中MAO 活性的影响
见表1。
・1700・表1 板栗毛壳水提液对大鼠器官组织匀浆CAT 、蛋白含量、M AO 活力的影响(±s, n =6)
脑
组别无药无手术组无药手术组给药手术组给药无手术组
组别无药无手术组无药手术组给药手术组给药无手术组
CAT 蛋白MAO
(U /gp r ot ) (mg/ml ) (-1・m l -1) 8193±11765124±11222) 4) 10105±21201) 12118±21121
) 4)
肝
CAT 蛋白MAO
(U /gp r ot ) (mg/ml ) (-1・m l -1) 112170±219257132±01802) 4) 97156±31301) 177198±51301
) 4)
2116±01182130±01032112±01182105±0104
8184±114110177±21461) 7105±11404) 4140±01324
)
10153±014111154±014812134±013894129±01155174±01141) 3139±01113) 1152±01074
)
肾
CAT 蛋白MAO
(U /gp r ot ) (mg/ml ) (-1・m l -1) 117115±415299150±31322) 4) 127128±31943) 156138±41871
MAO
(/g) l ) (-1・m l -1) 1901161±11222) 4) 26116±21824) 35179±11691
) 4)
5150±01235134±[1**********]
11041321) 18) 0146±01194
)
3125±01144133±01354119±01123161±0116
1105±01151140±01141) 0192±01133) 0161±01134
)
与无药无手术组比较05, 2) 01与无药手术组比较:3) P
3 讨 论
(NE ) 浓度下降, 以致出现卒中症状的一个重要原因〔10〕。而给
蛋白定量测定主要是为了求出各组织匀浆蛋白浓度, 给
CAT 和MAO 含量的计算提供数据。由表2数据可知, 与无药
予板栗毛壳水提液灌胃后, 能有效抑制MAO 的活性, 以减少神经元的损害, 达到延缓衰老的效果。
板栗毛壳水提液能提高CAT 活性, 显著降低MAO 活性。其醇溶性物质是否也具同样作用? 其降低神经元坏死的程度、减少脑缺血再灌注损伤后的卒中症状, 还有待于进一步研究。本研究希望能为药材的功效、进一步的开发利用提供一定的科学依据。
4 参考文献
1 国家中药管理局1中华本草〔M 〕1上海:上海科学技术出版社,
1999:24221
2 赵德义, 高文海, 花成文, 等1板栗壳化学成分的初步研究〔J 〕1陕西
无手术组(空白对照组) 比较, 无药手术组的C AT 活力明显降低(P
脑缺血再灌注损伤是指脑缺血致脑细胞损伤, 恢复血液再灌注后, 其缺血性损伤反而进一步加重的现象〔8〕。脑缺血再灌注引起脑组织损害的病理机制包括自由基产生、细胞内钙超载、能量耗竭、免疫介质产生、谷氨酸盐释放、离子稳态破坏、酸中毒、凋亡通路激活等。其中, 自由基连锁反应是脑缺血再灌注损伤的核心环节, 而钙超载则可能是导致神经元死亡的最后通路
〔9〕
林业科技, 2003; (2) :43271
3 吴龙云, 凌桂生, 许学健, 等1板栗毛壳的抗菌活性成分〔J 〕1中草
药, 1991; 22(8) :3701
4 吴龙云, 凌桂生, 许振朝1板栗壳浸膏抗菌抗炎作用及对胃肠平滑肌
运动的影响〔J 〕1广西中医药, 2002; 25(4) :541
5 李爱媛, 贝伟剑, 赵 一, 等1板栗毛壳长期毒性的实验研究〔J 〕1湖
南中医药导报, 1996; 2(4) :311
6 何玲玲, 王 新, 石中亮, 等1水提板栗壳色素对羟自由基和超氧阴
。自由基的过量产生或抗氧化物酶的活性降低都可引
离子自由基的清除作用〔J 〕1食品与机械, 2006; 6:562571
7 刘亚君, 崔 鹤, 谢东萍, 等1Bcl 2和Bax 在缺血预处理保护海马神
起不同程度的细胞毒性及瞬时不可逆损失。因此, 只有及时治疗, 促进体内抗氧化物酶活性的增强, 清除氧自由基、抑制脂质过氧化反应, 才能消除炎症、减轻组织缺血再灌注造成的损伤。 CAT 的测定结果提示, 在脑缺血再灌注损伤后, 大鼠脑、肝、肾、心组织中, 具有清除自由基作用的C AT 活性减弱, 会导致自由基大量产生而对组织造成损伤。而给予板栗毛壳水提液灌胃后, 可提高大鼠脑、肝、肾、心组织中CAT 的活性, 增强机体抗氧化能力, 从而减轻脑缺血再灌注造成的损伤。
MAO 的测定结果提示, 在脑缺血再灌注损伤后, 大鼠脑、肝、肾、心组织可能由于大量自由基的产生增强了MAO 的活性。MAO 活性上升会引起中枢儿茶酚胺水平下降造成生化损害。MAO 活性增高, 是导致急性脑缺血早期脑内去甲肾上腺素
经元缺血再灌损伤中的作用〔J 〕1山东大学学报(医学版) , 2006; 44
(3) :2272301
8 韩 敏, 刘艳凯, 薛 茜1脑缺血再灌注损伤的研究进展〔J 〕1河北
北方学院学报(医学版) , 2006; 23(10) :75281
9 Cristina T, Rosaria G, Dechun W , et al 1N itr oglycerin induces hyperalgesia
in rats a ti m e course study 〔J 〕1Eur J Phar macol, 2003; 464(223) :1592621
10 许世凯1抗衰老药物学〔M 〕1北京:中国医药科技出版社, 1994:
1581
〔2009210229收稿 2010204201修回〕
(编辑 曲 莉)