2009年第44卷第12期生物学通报49
分离植物叶片上、下表皮新方法
张立荣
（北京大学附属中学陈北京南100190）
摘要有很多植物的叶片不能直接用镊子将表皮撕取下来，通常用指甲油、琼脂等物质的
印拓法和次氯酸钠离析法，但这些方法不适用于像北极植物矮桦和北极柳这样很小的叶片，笔者改用502胶粘贴的办法很好地解决了这一难题。并发现此方法简便，适用于各种大小材质的叶片，很值得广泛应用。
关键词叶片表皮502胶粘贴方法
中国图书分类号：G633.91文献标识码：B
自然界中有很多种植物的叶片直接用镊子撕
取上、下表皮是不可能的，而在生物基础科学研究
中经常会涉及到这些植物。为了能观察到表皮细
胞和统计气孔密度，通常会用到指甲油、琼脂等物
质的印拓方法和次氯酸钠离析方法。笔者在研究
北极植物矮桦和北极柳的过程中，上述几种方法
都做了尝试，指甲油和琼脂的印拓方法适用于部
分植物（如小叶黄杨），但对于矮桦和北极柳植物
不适用，印拓后的指甲油和琼脂在显微镜下影像
模糊，气孔数据统计不准确。相比较次氯酸钠离析
法获得的叶表皮细胞影像清晰，效果好。但此方法
离析后在剥离上下表皮时非常麻烦，尤其是像矮
桦和北极柳这样非常小的叶片更加困难。针对此
情况，通过反复实验，在次氯酸钠离析方法的基础
上，改用502胶粘贴叶片分离上下表皮的办法很
好地解决了这一难题。
具体方法如下（以浸制的小叶片为例）：片。8)将此下表皮用番红染色，镜下可清晰观察到表皮细胞和气孔（见封三图3）。若想获得上表皮，第4步粘贴时将叶片正面朝下即可（见封三图4）。若想获得更为清晰的影像，可将上述502胶粘贴的表皮浸泡于水中2d，再用镊子从胶上撕下一块表皮，制成临时装片镜下观察即可（见封三图5、6、7、8）。若要制成永久装片，也要同样从胶上撕取一块表皮再制作。不能直接连同502胶一起脱水和封片，因为二甲苯能溶解502胶。此方法有如下优点：1）此方法解决了叶片上、下表皮的剥离难题，尤其是像北极植物矮桦和北极柳这样很小的叶2）此方法在次氯酸钠离析时不用像以往那样严格控制时间，只要叶片褪色即可。甚至褪色后再
离析1~2d也可以（干叶片离析1周都可以，见封
三图7和图8）。1）水洗载玻片，擦干水分。2）在载玻片一侧滴2滴502胶。
3）用另一个载玻片45度角向另一侧将胶推成
一薄层。3）干叶片不用煮，但一定要是压平的。将其直接粘贴于502胶上便可离析(见封三图7和图8)。
4）立即将已用吸水纸擦去浸制液的叶片粘贴
在胶上，注意叶片背面朝下。4）应用范围广，适用于各种不同大小的叶片材料。小叶片可直接粘贴，大叶片剪取一部分粘
贴。刚采下的新鲜叶片、浸泡很久的浸制叶片（见
封三图1、2、3、4、5）和蜡叶标本压平的干叶片都
适用(见封三图7和图8)。5）等胶完全风干后，将其放入50%的次氯酸钠溶液中离析。6）等到叶片的颜色完全退却后便可取出，用
清水将次氯酸钠冲洗干净。5）在离析过程中502胶脱离了载玻片也没关
系，502胶干后有一定硬度且是透明的，不影响后
面的操作和观察。7)再将其放入盛有清水的培养皿中，用牙刷在体视镜下轻轻刷去叶肉和上表皮，留下的就是
粘贴于502胶上的下表皮。6）可完整地将整个小叶片的上、下表皮剥离
50生物学通报2009年第44卷第12期
应用果皮提取液探究紫外线诱变原理的实验活动
左芳许超陈铭德*
上海（华东师范大学生命科学学院200062）
摘要紫外线是一种物理诱变剂。通过观察富含抗氧化剂的果皮提取液对暴露于紫外线
下大肠杆菌（EscherichiaColi）的保护作用，证实了紫外线的诱变原理。实验基于教材中“细胞
的癌变”一节内容而设计，学生可在深入理解知识的同时，掌握微生物学实验的基本技术，应
用到科学探究的一般方法。
关键词紫外线诱变果皮提取液抗氧化剂科学探究
中国图书分类号：G633.91文献标识码：B
此时，教师可提供给学生一种解释和一个常
识：紫外线辐射可使细胞产生活性氧和自由基，二
者极不稳定，易发生一系列的氧化连锁反应，反应
产物氧化性碱基修饰物8-OH-dG可导致基因突
变甚至癌变；果皮提取液中含有可阻止氧化连锁
反应的抗氧化剂。
在此基础上，学生会联想到：如若上述紫外线
诱发癌变的解释成立，那么果皮提取液中的抗氧
化剂则可保护细胞免受紫外线辐射的伤害。进而
可在教师的引导下作出假设：果皮提取液可保护
细胞避免紫外线导致的损伤，暴露于紫外线下浸
有果皮提取液的细胞将表现出高存活率。紫外线可以诱导突变，进而引发细胞癌变致死。细胞于紫外线辐射下会产生不稳定的活性氧（包括单线态分子氧1O2-、过氧化氢H2O2和脂过氧化物LOOH）与自由基（包括超氧阴离子O2-和羟自由基·OH、HO2-）［1］。此二者为达稳定易同其他物质发生氧化连锁反应，作用于DNA时便诱生氧化性碱基修饰物8-OH-dG，该物质可诱发碱基突变以致细胞癌变死亡［2］。而果皮提取液中所富含的抗氧化剂能够阻止氧化连锁反应的发生，保护细胞免受紫外线所造成的光损害［3］。本实验［4］根据这一原理而设计，学生通过实验可以观察到添加有果皮提取液培养基上的大肠杆菌较之未添加
的，于紫外线辐射下表现出高存活率，从而验证了
紫外线的诱变原理。此外，作为基于课内知识的拓
展实验，本文也为学生巩固与操练科学探究的方
法论知识提供了新的实验内容载体。3制定计划制定计划时，教师要有意识地锻炼学生分析实验设计中的自变量、因变量和无关变量。自变量是可变的：细菌是否暴露于紫外灯下，
果皮的种类。
因变量是可测的：菌落的数量。
无关变量是可控的：细菌的种类，紫外线的波
长，紫外灯与细菌间的距离，辐射的时长，提取液
的用量。1提出问题教材在处理“细胞的癌变”这节内容时，以紫外线过度辐射可导致皮肤癌作为“问题探讨”专栏来引入教学。由于教材的这一设置，学生自然会问“为什么紫外线过度辐射会导致皮肤癌呢？”
2作出假设4实施计划
2009年第44卷第12期生物学通报49
分离植物叶片上、下表皮新方法
张立荣
（北京大学附属中学陈北京南100190）
摘要有很多植物的叶片不能直接用镊子将表皮撕取下来，通常用指甲油、琼脂等物质的
印拓法和次氯酸钠离析法，但这些方法不适用于像北极植物矮桦和北极柳这样很小的叶片，笔者改用502胶粘贴的办法很好地解决了这一难题。并发现此方法简便，适用于各种大小材质的叶片，很值得广泛应用。
关键词叶片表皮502胶粘贴方法
中国图书分类号：G633.91文献标识码：B
自然界中有很多种植物的叶片直接用镊子撕
取上、下表皮是不可能的，而在生物基础科学研究
中经常会涉及到这些植物。为了能观察到表皮细
胞和统计气孔密度，通常会用到指甲油、琼脂等物
质的印拓方法和次氯酸钠离析方法。笔者在研究
北极植物矮桦和北极柳的过程中，上述几种方法
都做了尝试，指甲油和琼脂的印拓方法适用于部
分植物（如小叶黄杨），但对于矮桦和北极柳植物
不适用，印拓后的指甲油和琼脂在显微镜下影像
模糊，气孔数据统计不准确。相比较次氯酸钠离析
法获得的叶表皮细胞影像清晰，效果好。但此方法
离析后在剥离上下表皮时非常麻烦，尤其是像矮
桦和北极柳这样非常小的叶片更加困难。针对此
情况，通过反复实验，在次氯酸钠离析方法的基础
上，改用502胶粘贴叶片分离上下表皮的办法很
好地解决了这一难题。
具体方法如下（以浸制的小叶片为例）：片。8)将此下表皮用番红染色，镜下可清晰观察到表皮细胞和气孔（见封三图3）。若想获得上表皮，第4步粘贴时将叶片正面朝下即可（见封三图4）。若想获得更为清晰的影像，可将上述502胶粘贴的表皮浸泡于水中2d，再用镊子从胶上撕下一块表皮，制成临时装片镜下观察即可（见封三图5、6、7、8）。若要制成永久装片，也要同样从胶上撕取一块表皮再制作。不能直接连同502胶一起脱水和封片，因为二甲苯能溶解502胶。此方法有如下优点：1）此方法解决了叶片上、下表皮的剥离难题，尤其是像北极植物矮桦和北极柳这样很小的叶2）此方法在次氯酸钠离析时不用像以往那样严格控制时间，只要叶片褪色即可。甚至褪色后再
离析1~2d也可以（干叶片离析1周都可以，见封
三图7和图8）。1）水洗载玻片，擦干水分。2）在载玻片一侧滴2滴502胶。
3）用另一个载玻片45度角向另一侧将胶推成
一薄层。3）干叶片不用煮，但一定要是压平的。将其直接粘贴于502胶上便可离析(见封三图7和图8)。
4）立即将已用吸水纸擦去浸制液的叶片粘贴
在胶上，注意叶片背面朝下。4）应用范围广，适用于各种不同大小的叶片材料。小叶片可直接粘贴，大叶片剪取一部分粘
贴。刚采下的新鲜叶片、浸泡很久的浸制叶片（见
封三图1、2、3、4、5）和蜡叶标本压平的干叶片都
适用(见封三图7和图8)。5）等胶完全风干后，将其放入50%的次氯酸钠溶液中离析。6）等到叶片的颜色完全退却后便可取出，用
清水将次氯酸钠冲洗干净。5）在离析过程中502胶脱离了载玻片也没关
系，502胶干后有一定硬度且是透明的，不影响后
面的操作和观察。7)再将其放入盛有清水的培养皿中，用牙刷在体视镜下轻轻刷去叶肉和上表皮，留下的就是
粘贴于502胶上的下表皮。6）可完整地将整个小叶片的上、下表皮剥离
50生物学通报2009年第44卷第12期
应用果皮提取液探究紫外线诱变原理的实验活动
左芳许超陈铭德*
上海（华东师范大学生命科学学院200062）
摘要紫外线是一种物理诱变剂。通过观察富含抗氧化剂的果皮提取液对暴露于紫外线
下大肠杆菌（EscherichiaColi）的保护作用，证实了紫外线的诱变原理。实验基于教材中“细胞
的癌变”一节内容而设计，学生可在深入理解知识的同时，掌握微生物学实验的基本技术，应
用到科学探究的一般方法。
关键词紫外线诱变果皮提取液抗氧化剂科学探究
中国图书分类号：G633.91文献标识码：B
此时，教师可提供给学生一种解释和一个常
识：紫外线辐射可使细胞产生活性氧和自由基，二
者极不稳定，易发生一系列的氧化连锁反应，反应
产物氧化性碱基修饰物8-OH-dG可导致基因突
变甚至癌变；果皮提取液中含有可阻止氧化连锁
反应的抗氧化剂。
在此基础上，学生会联想到：如若上述紫外线
诱发癌变的解释成立，那么果皮提取液中的抗氧
化剂则可保护细胞免受紫外线辐射的伤害。进而
可在教师的引导下作出假设：果皮提取液可保护
细胞避免紫外线导致的损伤，暴露于紫外线下浸
有果皮提取液的细胞将表现出高存活率。紫外线可以诱导突变，进而引发细胞癌变致死。细胞于紫外线辐射下会产生不稳定的活性氧（包括单线态分子氧1O2-、过氧化氢H2O2和脂过氧化物LOOH）与自由基（包括超氧阴离子O2-和羟自由基·OH、HO2-）［1］。此二者为达稳定易同其他物质发生氧化连锁反应，作用于DNA时便诱生氧化性碱基修饰物8-OH-dG，该物质可诱发碱基突变以致细胞癌变死亡［2］。而果皮提取液中所富含的抗氧化剂能够阻止氧化连锁反应的发生，保护细胞免受紫外线所造成的光损害［3］。本实验［4］根据这一原理而设计，学生通过实验可以观察到添加有果皮提取液培养基上的大肠杆菌较之未添加
的，于紫外线辐射下表现出高存活率，从而验证了
紫外线的诱变原理。此外，作为基于课内知识的拓
展实验，本文也为学生巩固与操练科学探究的方
法论知识提供了新的实验内容载体。3制定计划制定计划时，教师要有意识地锻炼学生分析实验设计中的自变量、因变量和无关变量。自变量是可变的：细菌是否暴露于紫外灯下，
果皮的种类。
因变量是可测的：菌落的数量。
无关变量是可控的：细菌的种类，紫外线的波
长，紫外灯与细菌间的距离，辐射的时长，提取液
的用量。1提出问题教材在处理“细胞的癌变”这节内容时，以紫外线过度辐射可导致皮肤癌作为“问题探讨”专栏来引入教学。由于教材的这一设置，学生自然会问“为什么紫外线过度辐射会导致皮肤癌呢？”
2作出假设4实施计划