月华手 外 科 杂
志年
月
第
第卷
期
种 异同体 肌 腿 移植与 腿肌库 的 建
立新 生
尹 高庆
大 瑞侠
金张友
乐
孟 琴
书克杨
非褚
靖为
朱
伟
。
胡琪
席
越
摘要
、
目
的为 临 床应 用异 体肌键移 提 植实 供 依验据 以 及介 绍肌键库 建 立
、
的 方 法用 经深低 温
冷。
冷 冻 干 燥冻不 加 处理 同的种异体 肌 键 和体 白 肌 移 膛 修植 原性 复和生力物学测定 形学态织组观学察
,、
,
大 鼠跟
缺 损
键术后
、
周
行免 疫,
。
结
果 经 深 低温 冷 冻与 冷冻干 燥 处 的异 体理膛肌有 显 明降
。
低
组织 抗 原性的 作 用 并 留 了保键 织 组的 生 学 特 性 床 物近期疗效较为意满 〔
,
结论 深 低 温 冷冻 保 的 存 体异肌 健 可应 用 临
’于
〕。
关
键
词
腿
移植同 种
,
键库
肌 温保低
藏,
,
,
,印
,
一
,
!
,
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! ∀
罗
b.i o lo g i e al ef at rue sI t 1 5e o ne lu d e d
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n肌键 缺 损 的 修复 目 仍前以 自 体肌 键 移植 为 主但自 体 肌臆 供 体 来源 有
限 ,,。
,
先进 的无 菌设 施 环境 和 受过 严 格 训练 的 业专 技术 伍队,
。
、人
工 键肌虽
必要设 备 为一 8℃深 低 温 0冰
, ,7 3
已有 临床 应 用的 报 道 其 材但 和 与料 受 体 肌
箱腿 真 空 冻冷 干 燥 设 备 量较 大容的 隔热 保温 性能 好良 生 物的 保存液 罐
CO氮
,
愈 合等问 尚 题未完全 解 决
,
,,
”
。〔
我们 于 19 29
℃
恒温水 浴 和
年 起箱对 经 深低 温 冻 冷 存 的 同种 异 保 体肌 腿 移 植进 行实 了验 研 究并建 立 了 肌 腔库 已; 成 功地 应 用 于 临床至 今共应 用 低深 温冷 冻 腿肌27
,
4
孵 箱育
等
、
。
异 二体腿 的 源 来及选择
。
. 供体 来 源1主 要 为 健 康 志 愿捐 者 献 外
,伤
条 冷冻肌 腿 5 修复条 部肌 膛手缺损 2 3 例6 0
, ,
. ,最长 随访时 间 为 后术 3 5年 效疗 意满,
截肢
无 件 条再 植的废 弃 肢体
.2
。 合供 格体应 具备阴 性 史病和 阴 性 的 感 。
肌
健 库 的建 立一
肌键 库的 必 备 条件
、
染 控监资料
,
经
生 微 学 血物 清学 ( 包括 艾
滋
。
、
)病检 测 病理组
织 查均检 为阴 性 应
立即废 该弃 体供的 全部材 料
. 3 , , 。
,如
发现 阳 性
在
肌腿 组 织 记登 本 上 细 记详 录供 体 的
。 。
作者 单 位1:00 0 35
、、
北京
市 创 伤 科骨研究 所 骨 库 (高新 生 尹
、
、、
资 料存 日放期 编号 肌 键 类型 和 测检结果
以便 于 寻 符合找 受体 的 肌 膛 .
,4,
庆大 瑞侠金 褚靖 为;北 )京积水 潭 医院手外 科( 张 友乐 杨 非克
朱伟
胡
、
琪
) 理 病科 孟(书琴
席,
、
)
越由
专人 控 复监 核 发 登放记
。临 应床
,用
时
体 需签 受 署意 同 选 择 供书腿 时 供 受料材
夕
旦鱼
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J
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,
99
6
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1
, 2
No
Z
要尽 可能 匹 相
、
配。
三
异 体 键肌 的 制备和 贮 存 .1 切 取在 无 菌: 室对 供 行 体严 格 消的 毒,
一实 验方 法
,
、
手
臂 纵切口 取切 屈肌 键 尽 可 能保 留 其 膛 周组织
。
取
SD 年成 大 鼠0 6只 体 重 005 一 070 雌 雄9 不:拘 共 分4 组 深组 低温 冷 冻组 ( 1 鼠 ) 只 在全 麻2
,, , 。 。
A
需 带如 鞘管 仔细 分 离管 鞘外组织 在 剥 离,
, 。
,
,
下切 双 除侧跟 键复 温将后 的 深 低 温经冷 冻保 存的 肌
,
鞘管骨 鞘面壁 时需 连同 骨 膜 一 同剥 离 保 证 鞘
键 移植
于 缺 处损“
8
” ,
管
的整 完
性20c
m
5。肌 腔 长 度尽 可 能 长 的 约 为1 一,
,
无 ,伤 缝 合 创线 采 用 :法术 肢体 后 制不 组 冷 冻干 动燥 组字 合
缝0
。
缝
合料 为 7材
一
,。
B
长肌 经 生腿理 盐 漂 洗水2 3一 后 次置 于M E M 或1 6 营养 4 中液 一11 分 钟 后 置0 5
0, ,
。
21
(将 经过 水 和 处理 冷的 冻干 燥肌 膛 植 至 移: 大鼠 双 侧 跟 键缺 损处 组 对照组 (2只 ) 鼠 不将4
。
只 )鼠
。
,
。C
于无 容菌器 内密 封装闭 标贴 签 记录 取材 日
肌 期键 类 型 项 目
等.
2
作 何任 理处 1的只 鼠 2 条 跟键 直接植移 到 外 1 2 2另4 : 只 鼠的双 侧 跟键缺损 处 组自 体 肌键 植 组移 ( 只 1
。 2
D,
:
异体 腿 的制肌 备(l 低 深 温冷冻 肌 ) 的腿制 备 :肌 膛 经生 盐 水理 漂洗2 一 次 3 浸后 泡0 M在E 溶 M液( 含1 小% 血牛清 ) 或 614营 0 ,
鼠
。
)
行体白 左 侧 跟 右 腔 互相交 换移植
,。
、
。B
、
C和 D,
手组术 方 法同 A 组,
术后 均 不 制 动 允 许 自由活 动 按
。
分组笼 饲 养 正 常 食饮
、5
养 中液 泡浸 1一 1 分 后 置 钟 于无 容器菌内 密 0
,
闭封
贴装 标签记 录 取 日材 期肌腿 类 型 等项
目0 8
。
,
,
观 察二 项 目结与果 . 1 异 肌 体 体 键 液 免 疫水 监平测 采: 用依 赖
补体
抗置 于 可控深 温低 冰箱 内逐 步 温 至
,降
,
一
体的量微淋 巴细 胞 毒 反 应 试验监 测移 植 体键液 免 疫水
平。
,
℃
或 逐降温至
。 步 2
(一 1
9
6)
液℃ 中
氮。
01
天后
体操具作 方 同张法友 乐等 〔 〕 道
报
。’
。
量微淋 巴
,
即 可细作 为移 用植
冷
冻干 肌燥 键 的制 备
,,
:
毒反 应胞 结果 见 表 1、
经 统计 学处 理 ( 检F验 )深 低温
,0
肌 键 用生 理盐 水冲 洗后 浸 在 1 泡%甘 油 E M与 合 液混 中1 钟 后分分 装取 出 人 放 封 M 密0
冻 冷 组 冷 冻 干燥 组与 不 作 理 处组间 差 异 有 显 著 意 义
. ( 值 F 4 二8,
p
容器 中置
于
一8
0℃
深低 温 箱 冰内 冷
冻,
。
0
天
1
。(F “ 住 0 7
值,
. 尹
> 005)
。
和
自 体腔 移 植组比 无 明 显差 异
深 。 温低冷 冻 组 和 体 肌自 移键
,
后
取出置 人 真 空冷 冻 干燥机 内 进行 干燥 处 理0 5 控 条 制件 为 一4 ℃ 1 P a 5 小 /时后 肌 键 内约
4
植2组 结 更果为 接 近
经 深
低 温 冻 处 理 的 冷 体 肌异键
。
其
织组 抗原 性明显降 低 表
组1 ~ 川别
保留 5% 左右 水 分 时 此将 其 置人密 玻闭 安璃 中瓶在 4 或℃ 室 温下避 光 保 供 腔存 移植时 ,
。,
各 移 植 组
淋 巴细 胞 反 应毒 结 怀 士果s )
后术 3周 术 8 周
后 胞细毒 指数 细 胞 死 % 二数
12亡 00士 5 0
石1二二; 二 二 二 ;;; 二‘ 丁
二;
二二 二二 二 二二;:丁- 苏 几 ;二 二 二百 万二篇二二
荞使用
。细胞死 亡 %
细 胞 数毒指数
100士 0 0 6 . . 0 16 士0 1 1. 90石 士7 0 0
. 0 1 0士 0 3刀
四
异 肌体键 的 复 处苏理
、
组
B CA D
.1 4 . 0 士04 5 0
0 16士 004 . . 0 2 4 士 0 0 5 722 0 土 1 5 月 0
深1 低 温冷 冻 的 复 苏 :从 腿冰 中箱 取 出符
.
组
组
受合 体的 肌 腿 后首先 检查 包装 无 破 有 损泄 漏 术 30 前 分在钟 手 室术中 按无 菌 作操取 出
。,
,
,
组.
25.00 士 61 0. 士 .9 5 0 22 7 110. 士 8 8 . 00
8.
1 7 00 士 15 0
.8 76 卫 土 024 5 0
.11 0 士4 . 740
.0 1 士0 0 5
0
6 肌键 于置 一12 ℃ 理生 盐水 乳或 酸 林 格液 0氏 0 中(5含 10 叫 m l庆大 霉 素 ) 融化1 一1 分钟 当
,,
2
.
:形 学观态察 后 3
术
,、
8
暴周 露 各 组移 键 直
植 ,
。,
,
视 下 观察 大 形体 态 及 周围 组织 变化然 后 取 材 行石 蜡 切片 表2
。
肌键恢复 弹 性 后经生 理 盐 漂水洗 后 即 可 用 使 :冷冻 干 燥 肌腿 的复 苏 术 前 4 小时 无.
,2
,。
,H E
染 色 后光 镜下行 组 织 胞 细学观 察
果见
结6
菌 条件 下 取出 肌 腿置 于1 一 2 ℃ 理生 水 或盐 01 0叫m0 l
庆大霉素 一) 乳酸 林 格 液氏中( 加
可,
2,
3 .肌腔 学力测 试 : 术后 8 周 行 肌 键 负 载拉 伸 测
,4
小时 后 腿肌重 新水 和 弹性 复恢 后 经生 理
。盐
,
,试 结果 其以部 腔分纤 维 开始 现 断裂出 时测所 得 的 :拉组 ( 不作 处 理 组 因) 术后 发 力 (生 单位牛 顿 表 示)
, 。C
,
,
水
漂洗 即 可 使用
坏
死无 法 行 拉伸试
验
其 它 。各组 肌腔 的拉 强 伸度 相
材料 与 方
法
似
。
中华
手 外科 杂 1志99
6年 6
月第 1 卷第 2 2期
2
组表
术
后 各组 形 态组 织 学 观 察 结果组
织 变学化
。 3
、别
态形学 变 化
周3 : 移 植段表 而 光滑色泽 好吻合 有 粘 处连健
, 8
体自健 移组
植( D组
周 )肌:健 胶原纤 维 列 整 排齐 吻合 端已 新 生毛被细 血
,
、
: 周移 植 健吻处 合已 合 外观愈 同正 健常组 织
、
。
管成 纤维细胞 及 充间质细 胞连
接 ,
8。
周 : 生
维 细 纤 趋胞 成向 与肌 胜熟长 轴平 行排 列 形 新 ,
。
成 胶原 束
深低 温 冷冻组
A 组( )
3 ;切周
日
皮肤 愈
合 好良无 出渗 无 红肿 局 部 稍起隆 ;,
,, 。
3
周; 健连 结处 可见 大 量 成 维 细纤 胞毛 细血管 及 间充,
。
肌
腿吻 合 处 愈已合 稍 膨 有 大粘 :连 周 部 局组 织质 软 腿 表 而 滑 光 泽 光存在 质 和地韧 ,
,,
8
8
质 生 周 :增 成 维纤细 胞沿 腔长
长 人轴异 体 束触 间 肌腿 中 心
, ,、
性
同正 常 组 触织
。
部有
局 灶 性 胶纤 维原变性坏 死 有并 断裂 钙
化,,
3
。 冻干 冷 燥组
B(组
)后 术3
、8
周
移植 部外观 同 深低 温 冷冻 组近 似 仅局 部,
。
周
:成纤 维 胞细 排 列整齐 体异键 结 略构疏松 吻 合端
, 。
隆 起 大稍 于 低 温深冷冻 组
毛
细 血 管间 质 及 细胞增 生 活跃 8
周:大 量致密 排的 列整齐 的健 仍 束 见 可 成维 纤细
, 胞, ,。
排列 于健 板 内外 结合部 列 不排 整齐 较 紊
组乱织 结构 同 常健 组 正织 不处 对 理组 照C(组 ) 3 周 :局部 肤皮 红 包块 明 显肿 开 切 有黄渗 色出 液 束键
,,, 3。
移植段
周
健 :组织变 坏 死性结构 消 失 胶 原 维破纤碎 周
围,, ,。
松疏部 分 坏 吻死 端合未 合愈 周有 一 纤 围维 膜包周 ; 切 开 皮 肤仍 有 少 渗量出 液 腔 束不 清 组织 糜
烂,
,
。
呈
炎 反性 应 大量淋 巴 细有 胞 浸
润
8
,,
,
8
周 :
移 植 腔组 织 溶 解 吸 伴 结收缔 组织 生 增 仍 有大量
。
, 结 合部 分部 呈 瘫化 改痕 变
。
巴 淋细胞 浸润
A
.
(组深 低 温冷 冻 组 )拉 力为 1 1 0 士1
20
呀
s 下士 )
,同
。
高
组了织相 容
性
、。
B
组
( 冷 冻干 燥 组 ) 拉力为 9 8 士 1
.0士 1 50
,.0 2
,
D
组 自(体健移 植
二异体 腿 移 植 后肌的 修 复 方 式异 体腿 经肌 深 低 冷温冻 处 理 后的 组织 特
组 )力拉 为1 20
实验 果结 显 经 示 深 低温冷 和冻 冷冻 干 燥 处 理的
异 体腔肌 织组 原抗 性明 显 降 而低 保留 了腔 生 活物
,
性
是决 定 能功能否 恢 复 的组 织 学 基础
, ,
,
。
,本实
验 , 的 织 组学观 察结 果 实证 深 低 温 冻 冷存 保的
异 体 肌健移 植后 虽 失 去 了代谢 功能 但保 了持
性
为 床 临 用应 供提 了可 靠依 据
,
。
讨、
肌论键 的 连 续性 肌为 键 重新 血 管 和 化活细 胞 化 奠定 结了基构础
、
,
,。
我 们
观 察 大 到量新 生 成纤 维,
,
一
异体肌腿移 植 的抗 性 问 题
原细胞 缔结组 织 细 胞和 毛 细血 管 两 端 沿 键 肌
,表
异体肌 临 腿 应 用 床 功成的 键关是移 植 后 排 斥反 应的强 和弱键 组 织 的 间合愈,
面 及。 束 间 键侵 人移 植键表 面及 周 围 组 其 织修
根
据 用相
复随 时 的 推移 而间趋 向 熟 成 最终 变演为 排列整
齐呈 波 浪形 的 原胶 纤 维 束使 植移腿 段 成 为
,,
应
性抗原刺激 即 能产 生相应 抗体 的 疫 学免原 理 采 用 依赖 补
体 抗体的 量 微 淋巴细 胞毒反 应
具有 活 胞细代 谢 功能 的 键 组 织 过程同 自肌 体 键植 组移 相似、
。
修复其及 愈合
试 验 监 测 术后3 周 和8周 二个 不 时 同受间 体,
。 体 的液 免水疫 平,
,。
果结 显示 经 冷冻处 理的异 体
三
种 异 体 同 键肌不 处 同 方 式 理的修 复 速
肌 其 组腿 织抗 原性 明 显 低于 未 冷 经冻 处 理
同 的种 异体 肌 腿 结此果 和 其 他学 者的 实验结 果一致
3 一〔 ”〕
。6 l P et e [s ,
度
两 种 深
低温 冷 冻 处 理 后 异的体 肌 键 移 后植 新 重活 速化 度略有 差 异
。, ,
〕
认 肌 为腿 组 织抗 原 主 要性,
深 低
温 冷冻组 肌键
。 ,
存
在于 腔 细 表 胞面 通过 冷冻 处 理 改 变 了 胞细 表膜面 抗 原 结 而 构降低 原抗性 ;使 植 人 键的组
织不 足以 起 受引 发体 生 强烈 的免 疫排 斥反 应
,, 。
移植 后 重 的 新 管化 比血冷冻 干燥 组 要快 些
,
其 原 因 是 低 温经保 存理处 腿的 组 织 中 有活 存细胞
存的 在 植移后 借 助 周 围组 织液 营 养及两端 血 的管 迅 长速人 使 活 细胞 存复苏增 殖 分裂 ,
,随
人 时 植间的 移 推疫免 反 逐 应渐 弱 减从而 提
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直 接纤向 维细 胞腿 细 转化胞共
同 参修复 过与
程 故 愈键合 度 较 速 燥 处 干组理要 迅
, ,速, 。
、
,床 用应 中华 科杂 外志
oPw e r s . DL G l u tu r a
.
,
1
,
9 9 533
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5. 39
干燥
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处 理组 的l 组 腔 织中无活 存细 胞 但 有 具些 某 活 蛋性 白物质 并 未 活 可失能 有 诱 导周 围 组 细
织
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9胞增 殖
分 化功能 并 速 使迅 间质充细 胞 腔 细
胞向 分化 类 骨 似移 植的骨中 形 蛋 白 的态作 用 故 ,
,
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其修 速复 度较 慢,
。
但对异 体 肌键移 植后 修 复 速
。 ,,
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3
6 . 8: 88
度 的
机理尚 有 待于进 一 步 研究 自 1 929 年起经 临 床 应 用 结 果 实 证深 低
温冷 冻 和 冷 冻 燥 干 两种方法 理处贮 的异存 肌体
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9 1,7 3
.
: 7
腿5 移 后 能 植为 受体 所接 受 并 迅速 血 管 化 而
发生 组 织间 的 愈合 具 有抗张 力 的 功能 动活 作
用 ,。
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其
结 果 自与体肌 键移 植相
似,,
。
体肌异键库 的 建。
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立
为 临 床 提 供 了 修 肌 腿复 或 带韧 损 缺 可的靠 材 料对移 植肌腿 的 来 源 开辟了 一 个 新径途参
张
乐 友杨克 非 朱
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,
文
献
(收 稿 :(199 一 6i
一
0
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)
: 本 文编辑 郑 忆 柳
)
伟等 异体肌 腔 移 植 的实验 究研 与临
一 例双拇 伤外 性 损缺延 迟 一 期 再
造周 荣礼患者
女
,
8 2
周新
江,
王
伟,
李
峻吴
容
。
岁
。
双 拇
指 冲床轧被 掉 1小 于 时 :局 检部 查 双拇 经指近 节指骨
。
,合
再 造双
拇指全部成 活
,
院住5 出天 院出 院时 对
4
。
,
1 9 年 8 月57 人 院
日
,
。
功 能 良好 继 指续功能 训
练完 全
离 断 断离 远端 毁损 无再 条植件
诊
断为 双拇
指。
讨 论: 双 拇指外 伤 性缺 急诊损一 期再 造比 较
少,
四 型第 外 伤性缺 损
。
拟行游离 足 趾 移 植,
当
病人时及
,
见。
因 一般 需 要3个手术 组 至 少 耍 有 位8 医师上 手
,,
、家
属对 治疗意 见 统不 先一作 双 拇指清术 用 庆创霉
大素 生 理 盐水纱布 湿敷包扎 静 脉点 广滴 抗谱 生素 , ,
。
术台还 需要 有较 具 的 强 微 显外 手外科科技术
,
。
这
在第
2一 般
院尤医 其 基在单位层 难 以实现 我 仅 们 一 手用 术 组延 一迟期 再 双造拇指 经 过顺 利 获得功
,成
,天
全 身及 局部 无感染 迹象患 者及 家 属 意 行同第 2 趾,
,
,
,
。
植 再 造移 双拇指 ,
。
先
行 右 拇 指再 切 取造右 第2 趾 移 ,
延迟一 期 造再的 念 概即 先作清 术创局 创 面部用
植 1 拓第动脉 为背I 型 游 离 后 将 第 2趾 趾 骨右与, ,
抗
生素 生 理盐 水 纱 湿 布 敷静 脉滴点广 抗 谱 素
生,、
,
。待
,
.拇 指指骨 残 端 1 2m m用 克 针 作 氏髓内 固 定
,
,
。
背足动
病 情稳 定局 部渗出 肿 胀 始开 轻减 明无显 染 感 现
象 身全条件 允 即许可行 延 期 术手 后 一 27 天进 行内。 。
,
脉一 挠 脉 大 动隐静 脉 一头静 脉 在 右手 烟鼻窝 处吻
延 手期 术 取 在争 创
清合
。
趾* 指 神 经行外 膜缝 合 缝趾 接 指 伸 一 屈肌
,触、
后 缝
合
,创
,
口。
拇 重右建 后 3第天 再 右造 拇 血指循
,
, 良
好, 病 情稳 定 即行 左 拇指 造 左 足再背 动 亦 属脉 l
型
。 适:应 证 l( 身 全 情 况 允不许 诊 一 急 期手 术(;2 )局 ) 部情 况 复 杂污 染严 重 能不除厌氧 排菌 感 染 者(;) 人 3,
,
以 法同再 造 左 拇 指 术手利顺
,
。
术
后 伤
口
一期
4愈员 及 术技 力量 不 ;足 )( 医 生病 人 家属 的意见 一 时 能不统 一 (;) 精 神 自残者病 酒醉 不作者合5
、、
,
。作 者 单 位20:90 0
4海上市吴 淞
, }
‘
心医院宝 震 手外 科 微 外
,
显
((
收
稿:1 996
一1 1
一0 7
)科 中
心
: 本文 编辑宋 浩东 )
月华手 外 科 杂
志年
月
第
第卷
期
种 异同体 肌 腿 移植与 腿肌库 的 建
立新 生
尹 高庆
大 瑞侠
金张友
乐
孟 琴
书克杨
非褚
靖为
朱
伟
。
胡琪
席
越
摘要
、
目
的为 临 床应 用异 体肌键移 提 植实 供 依验据 以 及介 绍肌键库 建 立
、
的 方 法用 经深低 温
冷。
冷 冻 干 燥冻不 加 处理 同的种异体 肌 键 和体 白 肌 移 膛 修植 原性 复和生力物学测定 形学态织组观学察
,、
,
大 鼠跟
缺 损
键术后
、
周
行免 疫,
。
结
果 经 深 低温 冷 冻与 冷冻干 燥 处 的异 体理膛肌有 显 明降
。
低
组织 抗 原性的 作 用 并 留 了保键 织 组的 生 学 特 性 床 物近期疗效较为意满 〔
,
结论 深 低 温 冷冻 保 的 存 体异肌 健 可应 用 临
’于
〕。
关
键
词
腿
移植同 种
,
键库
肌 温保低
藏,
,
,
,印
,
一
,
!
,
!
! ∀
罗
b.i o lo g i e al ef at rue sI t 1 5e o ne lu d e d
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一
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o
n肌键 缺 损 的 修复 目 仍前以 自 体肌 键 移植 为 主但自 体 肌臆 供 体 来源 有
限 ,,。
,
先进 的无 菌设 施 环境 和 受过 严 格 训练 的 业专 技术 伍队,
。
、人
工 键肌虽
必要设 备 为一 8℃深 低 温 0冰
, ,7 3
已有 临床 应 用的 报 道 其 材但 和 与料 受 体 肌
箱腿 真 空 冻冷 干 燥 设 备 量较 大容的 隔热 保温 性能 好良 生 物的 保存液 罐
CO氮
,
愈 合等问 尚 题未完全 解 决
,
,,
”
。〔
我们 于 19 29
℃
恒温水 浴 和
年 起箱对 经 深低 温 冻 冷 存 的 同种 异 保 体肌 腿 移 植进 行实 了验 研 究并建 立 了 肌 腔库 已; 成 功地 应 用 于 临床至 今共应 用 低深 温冷 冻 腿肌27
,
4
孵 箱育
等
、
。
异 二体腿 的 源 来及选择
。
. 供体 来 源1主 要 为 健 康 志 愿捐 者 献 外
,伤
条 冷冻肌 腿 5 修复条 部肌 膛手缺损 2 3 例6 0
, ,
. ,最长 随访时 间 为 后术 3 5年 效疗 意满,
截肢
无 件 条再 植的废 弃 肢体
.2
。 合供 格体应 具备阴 性 史病和 阴 性 的 感 。
肌
健 库 的建 立一
肌键 库的 必 备 条件
、
染 控监资料
,
经
生 微 学 血物 清学 ( 包括 艾
滋
。
、
)病检 测 病理组
织 查均检 为阴 性 应
立即废 该弃 体供的 全部材 料
. 3 , , 。
,如
发现 阳 性
在
肌腿 组 织 记登 本 上 细 记详 录供 体 的
。 。
作者 单 位1:00 0 35
、、
北京
市 创 伤 科骨研究 所 骨 库 (高新 生 尹
、
、、
资 料存 日放期 编号 肌 键 类型 和 测检结果
以便 于 寻 符合找 受体 的 肌 膛 .
,4,
庆大 瑞侠金 褚靖 为;北 )京积水 潭 医院手外 科( 张 友乐 杨 非克
朱伟
胡
、
琪
) 理 病科 孟(书琴
席,
、
)
越由
专人 控 复监 核 发 登放记
。临 应床
,用
时
体 需签 受 署意 同 选 择 供书腿 时 供 受料材
夕
旦鱼
s
e HJa n d Sur g ,
J
u
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e1
,
99
6
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1
, 2
No
Z
要尽 可能 匹 相
、
配。
三
异 体 键肌 的 制备和 贮 存 .1 切 取在 无 菌: 室对 供 行 体严 格 消的 毒,
一实 验方 法
,
、
手
臂 纵切口 取切 屈肌 键 尽 可 能保 留 其 膛 周组织
。
取
SD 年成 大 鼠0 6只 体 重 005 一 070 雌 雄9 不:拘 共 分4 组 深组 低温 冷 冻组 ( 1 鼠 ) 只 在全 麻2
,, , 。 。
A
需 带如 鞘管 仔细 分 离管 鞘外组织 在 剥 离,
, 。
,
,
下切 双 除侧跟 键复 温将后 的 深 低 温经冷 冻保 存的 肌
,
鞘管骨 鞘面壁 时需 连同 骨 膜 一 同剥 离 保 证 鞘
键 移植
于 缺 处损“
8
” ,
管
的整 完
性20c
m
5。肌 腔 长 度尽 可 能 长 的 约 为1 一,
,
无 ,伤 缝 合 创线 采 用 :法术 肢体 后 制不 组 冷 冻干 动燥 组字 合
缝0
。
缝
合料 为 7材
一
,。
B
长肌 经 生腿理 盐 漂 洗水2 3一 后 次置 于M E M 或1 6 营养 4 中液 一11 分 钟 后 置0 5
0, ,
。
21
(将 经过 水 和 处理 冷的 冻干 燥肌 膛 植 至 移: 大鼠 双 侧 跟 键缺 损处 组 对照组 (2只 ) 鼠 不将4
。
只 )鼠
。
,
。C
于无 容菌器 内密 封装闭 标贴 签 记录 取材 日
肌 期键 类 型 项 目
等.
2
作 何任 理处 1的只 鼠 2 条 跟键 直接植移 到 外 1 2 2另4 : 只 鼠的双 侧 跟键缺损 处 组自 体 肌键 植 组移 ( 只 1
。 2
D,
:
异体 腿 的制肌 备(l 低 深 温冷冻 肌 ) 的腿制 备 :肌 膛 经生 盐 水理 漂洗2 一 次 3 浸后 泡0 M在E 溶 M液( 含1 小% 血牛清 ) 或 614营 0 ,
鼠
。
)
行体白 左 侧 跟 右 腔 互相交 换移植
,。
、
。B
、
C和 D,
手组术 方 法同 A 组,
术后 均 不 制 动 允 许 自由活 动 按
。
分组笼 饲 养 正 常 食饮
、5
养 中液 泡浸 1一 1 分 后 置 钟 于无 容器菌内 密 0
,
闭封
贴装 标签记 录 取 日材 期肌腿 类 型 等项
目0 8
。
,
,
观 察二 项 目结与果 . 1 异 肌 体 体 键 液 免 疫水 监平测 采: 用依 赖
补体
抗置 于 可控深 温低 冰箱 内逐 步 温 至
,降
,
一
体的量微淋 巴细 胞 毒 反 应 试验监 测移 植 体键液 免 疫水
平。
,
℃
或 逐降温至
。 步 2
(一 1
9
6)
液℃ 中
氮。
01
天后
体操具作 方 同张法友 乐等 〔 〕 道
报
。’
。
量微淋 巴
,
即 可细作 为移 用植
冷
冻干 肌燥 键 的制 备
,,
:
毒反 应胞 结果 见 表 1、
经 统计 学处 理 ( 检F验 )深 低温
,0
肌 键 用生 理盐 水冲 洗后 浸 在 1 泡%甘 油 E M与 合 液混 中1 钟 后分分 装取 出 人 放 封 M 密0
冻 冷 组 冷 冻 干燥 组与 不 作 理 处组间 差 异 有 显 著 意 义
. ( 值 F 4 二8,
p
容器 中置
于
一8
0℃
深低 温 箱 冰内 冷
冻,
。
0
天
1
。(F “ 住 0 7
值,
. 尹
> 005)
。
和
自 体腔 移 植组比 无 明 显差 异
深 。 温低冷 冻 组 和 体 肌自 移键
,
后
取出置 人 真 空冷 冻 干燥机 内 进行 干燥 处 理0 5 控 条 制件 为 一4 ℃ 1 P a 5 小 /时后 肌 键 内约
4
植2组 结 更果为 接 近
经 深
低 温 冻 处 理 的 冷 体 肌异键
。
其
织组 抗原 性明显降 低 表
组1 ~ 川别
保留 5% 左右 水 分 时 此将 其 置人密 玻闭 安璃 中瓶在 4 或℃ 室 温下避 光 保 供 腔存 移植时 ,
。,
各 移 植 组
淋 巴细 胞 反 应毒 结 怀 士果s )
后术 3周 术 8 周
后 胞细毒 指数 细 胞 死 % 二数
12亡 00士 5 0
石1二二; 二 二 二 ;;; 二‘ 丁
二;
二二 二二 二 二二;:丁- 苏 几 ;二 二 二百 万二篇二二
荞使用
。细胞死 亡 %
细 胞 数毒指数
100士 0 0 6 . . 0 16 士0 1 1. 90石 士7 0 0
. 0 1 0士 0 3刀
四
异 肌体键 的 复 处苏理
、
组
B CA D
.1 4 . 0 士04 5 0
0 16士 004 . . 0 2 4 士 0 0 5 722 0 土 1 5 月 0
深1 低 温冷 冻 的 复 苏 :从 腿冰 中箱 取 出符
.
组
组
受合 体的 肌 腿 后首先 检查 包装 无 破 有 损泄 漏 术 30 前 分在钟 手 室术中 按无 菌 作操取 出
。,
,
,
组.
25.00 士 61 0. 士 .9 5 0 22 7 110. 士 8 8 . 00
8.
1 7 00 士 15 0
.8 76 卫 土 024 5 0
.11 0 士4 . 740
.0 1 士0 0 5
0
6 肌键 于置 一12 ℃ 理生 盐水 乳或 酸 林 格液 0氏 0 中(5含 10 叫 m l庆大 霉 素 ) 融化1 一1 分钟 当
,,
2
.
:形 学观态察 后 3
术
,、
8
暴周 露 各 组移 键 直
植 ,
。,
,
视 下 观察 大 形体 态 及 周围 组织 变化然 后 取 材 行石 蜡 切片 表2
。
肌键恢复 弹 性 后经生 理 盐 漂水洗 后 即 可 用 使 :冷冻 干 燥 肌腿 的复 苏 术 前 4 小时 无.
,2
,。
,H E
染 色 后光 镜下行 组 织 胞 细学观 察
果见
结6
菌 条件 下 取出 肌 腿置 于1 一 2 ℃ 理生 水 或盐 01 0叫m0 l
庆大霉素 一) 乳酸 林 格 液氏中( 加
可,
2,
3 .肌腔 学力测 试 : 术后 8 周 行 肌 键 负 载拉 伸 测
,4
小时 后 腿肌重 新水 和 弹性 复恢 后 经生 理
。盐
,
,试 结果 其以部 腔分纤 维 开始 现 断裂出 时测所 得 的 :拉组 ( 不作 处 理 组 因) 术后 发 力 (生 单位牛 顿 表 示)
, 。C
,
,
水
漂洗 即 可 使用
坏
死无 法 行 拉伸试
验
其 它 。各组 肌腔 的拉 强 伸度 相
材料 与 方
法
似
。
中华
手 外科 杂 1志99
6年 6
月第 1 卷第 2 2期
2
组表
术
后 各组 形 态组 织 学 观 察 结果组
织 变学化
。 3
、别
态形学 变 化
周3 : 移 植段表 而 光滑色泽 好吻合 有 粘 处连健
, 8
体自健 移组
植( D组
周 )肌:健 胶原纤 维 列 整 排齐 吻合 端已 新 生毛被细 血
,
、
: 周移 植 健吻处 合已 合 外观愈 同正 健常组 织
、
。
管成 纤维细胞 及 充间质细 胞连
接 ,
8。
周 : 生
维 细 纤 趋胞 成向 与肌 胜熟长 轴平 行排 列 形 新 ,
。
成 胶原 束
深低 温 冷冻组
A 组( )
3 ;切周
日
皮肤 愈
合 好良无 出渗 无 红肿 局 部 稍起隆 ;,
,, 。
3
周; 健连 结处 可见 大 量 成 维 细纤 胞毛 细血管 及 间充,
。
肌
腿吻 合 处 愈已合 稍 膨 有 大粘 :连 周 部 局组 织质 软 腿 表 而 滑 光 泽 光存在 质 和地韧 ,
,,
8
8
质 生 周 :增 成 维纤细 胞沿 腔长
长 人轴异 体 束触 间 肌腿 中 心
, ,、
性
同正 常 组 触织
。
部有
局 灶 性 胶纤 维原变性坏 死 有并 断裂 钙
化,,
3
。 冻干 冷 燥组
B(组
)后 术3
、8
周
移植 部外观 同 深低 温 冷冻 组近 似 仅局 部,
。
周
:成纤 维 胞细 排 列整齐 体异键 结 略构疏松 吻 合端
, 。
隆 起 大稍 于 低 温深冷冻 组
毛
细 血 管间 质 及 细胞增 生 活跃 8
周:大 量致密 排的 列整齐 的健 仍 束 见 可 成维 纤细
, 胞, ,。
排列 于健 板 内外 结合部 列 不排 整齐 较 紊
组乱织 结构 同 常健 组 正织 不处 对 理组 照C(组 ) 3 周 :局部 肤皮 红 包块 明 显肿 开 切 有黄渗 色出 液 束键
,,, 3。
移植段
周
健 :组织变 坏 死性结构 消 失 胶 原 维破纤碎 周
围,, ,。
松疏部 分 坏 吻死 端合未 合愈 周有 一 纤 围维 膜包周 ; 切 开 皮 肤仍 有 少 渗量出 液 腔 束不 清 组织 糜
烂,
,
。
呈
炎 反性 应 大量淋 巴 细有 胞 浸
润
8
,,
,
8
周 :
移 植 腔组 织 溶 解 吸 伴 结收缔 组织 生 增 仍 有大量
。
, 结 合部 分部 呈 瘫化 改痕 变
。
巴 淋细胞 浸润
A
.
(组深 低 温冷 冻 组 )拉 力为 1 1 0 士1
20
呀
s 下士 )
,同
。
高
组了织相 容
性
、。
B
组
( 冷 冻干 燥 组 ) 拉力为 9 8 士 1
.0士 1 50
,.0 2
,
D
组 自(体健移 植
二异体 腿 移 植 后肌的 修 复 方 式异 体腿 经肌 深 低 冷温冻 处 理 后的 组织 特
组 )力拉 为1 20
实验 果结 显 经 示 深 低温冷 和冻 冷冻 干 燥 处 理的
异 体腔肌 织组 原抗 性明 显 降 而低 保留 了腔 生 活物
,
性
是决 定 能功能否 恢 复 的组 织 学 基础
, ,
,
。
,本实
验 , 的 织 组学观 察结 果 实证 深 低 温 冻 冷存 保的
异 体 肌健移 植后 虽 失 去 了代谢 功能 但保 了持
性
为 床 临 用应 供提 了可 靠依 据
,
。
讨、
肌论键 的 连 续性 肌为 键 重新 血 管 和 化活细 胞 化 奠定 结了基构础
、
,
,。
我 们
观 察 大 到量新 生 成纤 维,
,
一
异体肌腿移 植 的抗 性 问 题
原细胞 缔结组 织 细 胞和 毛 细血 管 两 端 沿 键 肌
,表
异体肌 临 腿 应 用 床 功成的 键关是移 植 后 排 斥反 应的强 和弱键 组 织 的 间合愈,
面 及。 束 间 键侵 人移 植键表 面及 周 围 组 其 织修
根
据 用相
复随 时 的 推移 而间趋 向 熟 成 最终 变演为 排列整
齐呈 波 浪形 的 原胶 纤 维 束使 植移腿 段 成 为
,,
应
性抗原刺激 即 能产 生相应 抗体 的 疫 学免原 理 采 用 依赖 补
体 抗体的 量 微 淋巴细 胞毒反 应
具有 活 胞细代 谢 功能 的 键 组 织 过程同 自肌 体 键植 组移 相似、
。
修复其及 愈合
试 验 监 测 术后3 周 和8周 二个 不 时 同受间 体,
。 体 的液 免水疫 平,
,。
果结 显示 经 冷冻处 理的异 体
三
种 异 体 同 键肌不 处 同 方 式 理的修 复 速
肌 其 组腿 织抗 原性 明 显 低于 未 冷 经冻 处 理
同 的种 异体 肌 腿 结此果 和 其 他学 者的 实验结 果一致
3 一〔 ”〕
。6 l P et e [s ,
度
两 种 深
低温 冷 冻 处 理 后 异的体 肌 键 移 后植 新 重活 速化 度略有 差 异
。, ,
〕
认 肌 为腿 组 织抗 原 主 要性,
深 低
温 冷冻组 肌键
。 ,
存
在于 腔 细 表 胞面 通过 冷冻 处 理 改 变 了 胞细 表膜面 抗 原 结 而 构降低 原抗性 ;使 植 人 键的组
织不 足以 起 受引 发体 生 强烈 的免 疫排 斥反 应
,, 。
移植 后 重 的 新 管化 比血冷冻 干燥 组 要快 些
,
其 原 因 是 低 温经保 存理处 腿的 组 织 中 有活 存细胞
存的 在 植移后 借 助 周 围组 织液 营 养及两端 血 的管 迅 长速人 使 活 细胞 存复苏增 殖 分裂 ,
,随
人 时 植间的 移 推疫免 反 逐 应渐 弱 减从而 提
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.
2
直 接纤向 维细 胞腿 细 转化胞共
同 参修复 过与
程 故 愈键合 度 较 速 燥 处 干组理要 迅
, ,速, 。
、
,床 用应 中华 科杂 外志
oPw e r s . DL G l u tu r a
.
,
1
,
9 9 533
:
5. 39
干燥
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处 理组 的l 组 腔 织中无活 存细 胞 但 有 具些 某 活 蛋性 白物质 并 未 活 可失能 有 诱 导周 围 组 细
织
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8 8
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24
9胞增 殖
分 化功能 并 速 使迅 间质充细 胞 腔 细
胞向 分化 类 骨 似移 植的骨中 形 蛋 白 的态作 用 故 ,
,
,
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其修 速复 度较 慢,
。
但对异 体 肌键移 植后 修 复 速
。 ,,
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,
8
3
6 . 8: 88
度 的
机理尚 有 待于进 一 步 研究 自 1 929 年起经 临 床 应 用 结 果 实 证深 低
温冷 冻 和 冷 冻 燥 干 两种方法 理处贮 的异存 肌体
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9 1,7 3
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: 7
腿5 移 后 能 植为 受体 所接 受 并 迅速 血 管 化 而
发生 组 织间 的 愈合 具 有抗张 力 的 功能 动活 作
用 ,。
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结 果 自与体肌 键移 植相
似,,
。
体肌异键库 的 建。
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为 临 床 提 供 了 修 肌 腿复 或 带韧 损 缺 可的靠 材 料对移 植肌腿 的 来 源 开辟了 一 个 新径途参
张
乐 友杨克 非 朱
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考
,
文
献
(收 稿 :(199 一 6i
一
0
5
)
: 本 文编辑 郑 忆 柳
)
伟等 异体肌 腔 移 植 的实验 究研 与临
一 例双拇 伤外 性 损缺延 迟 一 期 再
造周 荣礼患者
女
,
8 2
周新
江,
王
伟,
李
峻吴
容
。
岁
。
双 拇
指 冲床轧被 掉 1小 于 时 :局 检部 查 双拇 经指近 节指骨
。
,合
再 造双
拇指全部成 活
,
院住5 出天 院出 院时 对
4
。
,
1 9 年 8 月57 人 院
日
,
。
功 能 良好 继 指续功能 训
练完 全
离 断 断离 远端 毁损 无再 条植件
诊
断为 双拇
指。
讨 论: 双 拇指外 伤 性缺 急诊损一 期再 造比 较
少,
四 型第 外 伤性缺 损
。
拟行游离 足 趾 移 植,
当
病人时及
,
见。
因 一般 需 要3个手术 组 至 少 耍 有 位8 医师上 手
,,
、家
属对 治疗意 见 统不 先一作 双 拇指清术 用 庆创霉
大素 生 理 盐水纱布 湿敷包扎 静 脉点 广滴 抗谱 生素 , ,
。
术台还 需要 有较 具 的 强 微 显外 手外科科技术
,
。
这
在第
2一 般
院尤医 其 基在单位层 难 以实现 我 仅 们 一 手用 术 组延 一迟期 再 双造拇指 经 过顺 利 获得功
,成
,天
全 身及 局部 无感染 迹象患 者及 家 属 意 行同第 2 趾,
,
,
,
。
植 再 造移 双拇指 ,
。
先
行 右 拇 指再 切 取造右 第2 趾 移 ,
延迟一 期 造再的 念 概即 先作清 术创局 创 面部用
植 1 拓第动脉 为背I 型 游 离 后 将 第 2趾 趾 骨右与, ,
抗
生素 生 理盐 水 纱 湿 布 敷静 脉滴点广 抗 谱 素
生,、
,
。待
,
.拇 指指骨 残 端 1 2m m用 克 针 作 氏髓内 固 定
,
,
。
背足动
病 情稳 定局 部渗出 肿 胀 始开 轻减 明无显 染 感 现
象 身全条件 允 即许可行 延 期 术手 后 一 27 天进 行内。 。
,
脉一 挠 脉 大 动隐静 脉 一头静 脉 在 右手 烟鼻窝 处吻
延 手期 术 取 在争 创
清合
。
趾* 指 神 经行外 膜缝 合 缝趾 接 指 伸 一 屈肌
,触、
后 缝
合
,创
,
口。
拇 重右建 后 3第天 再 右造 拇 血指循
,
, 良
好, 病 情稳 定 即行 左 拇指 造 左 足再背 动 亦 属脉 l
型
。 适:应 证 l( 身 全 情 况 允不许 诊 一 急 期手 术(;2 )局 ) 部情 况 复 杂污 染严 重 能不除厌氧 排菌 感 染 者(;) 人 3,
,
以 法同再 造 左 拇 指 术手利顺
,
。
术
后 伤
口
一期
4愈员 及 术技 力量 不 ;足 )( 医 生病 人 家属 的意见 一 时 能不统 一 (;) 精 神 自残者病 酒醉 不作者合5
、、
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。作 者 单 位20:90 0
4海上市吴 淞
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心医院宝 震 手外 科 微 外
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显
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收
稿:1 996
一1 1
一0 7
)科 中
心
: 本文 编辑宋 浩东 )