试剂的配制
常用试剂的规格 级别 一级 二级 三级 四级
中文名称 优级纯 分析纯 化学纯 实验纯
英文名称 Guaranteed reagent G.R. Analytical reagent A.R. Chemically Pure C.P. Laboratory Pure L.R.
标签颜色 绿 红 蓝 黄
主要用途 精确分析实验 一般分析实验 一般化学实验 生物/医药化学实验
此外,还有基准试剂,光谱纯试剂,色谱纯试剂等试剂。 试剂的保管
试剂或者保管不当,会变质失效,不仅造成浪费,甚至会引起事故。一般的化学试剂应保存在通风良好、干净、干燥的房子里,以防止被水分、灰尘和其他物质污染。同时,应根据试剂的不同性质而采取不同的保管方法。
容易侵蚀玻璃而影响试剂纯度的试剂,如氢氟酸、含氟盐(氟化钾、氟化钠、氟化铵)和苛性碱(氢氧化钾、氢氧化钠),应保存在聚乙烯塑料瓶或涂有石蜡的玻璃瓶中。
见光会逐渐分解的试剂(如过氧化氢、硝酸银、焦性没食子酸、高锰酸钾、草酸、铋酸钠等)、与空气接触易逐渐被氧化的试剂(如氯化亚锡、硫酸亚铁、硫代硫酸钠、亚硫酸钠等)以及易挥发的试剂(如溴、氨水及乙醇等),应放在棕色瓶内置冷暗处。
吸水性强的试剂,如无水碳酸盐、苛性钠、过氧化钠等应严格密封(应该蜡封)。 相互易作用的试剂,如挥发性的酸与氨,氧化剂与还原剂应分开存放。易烯的试剂,如乙醇、乙醚、苯、丙酮与易爆炸的试剂,如高氯酸、过氧化氢、硝基化合物,应分开贮存在阴凉通风、不受阳光直射的地方。
剧毒试剂,如氰化钾、氰化钠、氢氟酸、二氯化汞、三氧化二砷(砒霜)等,应特别注意由专人妥善保管,严格做好记录,经一定手续取用,以免发生事故。
极易挥发并有毒的试剂可放在通风橱内,当室内温度较高时,可放在冷藏室内保存。 试剂滴液的配制
试剂的配制应该根据节约的原则,按实验的要求,分别选用不同规格的试剂。不要认为试剂越纯越好,超越具体条件盲目追求高纯度而造成浪费。当然也不能随意降低规格而影响测定结果的准确度。
配制试剂溶液时,首先根据所配制试剂纯度的要求,选用不同等级试剂,再根据配制溶液的浓度和数量,计算出试剂的用量。经称量后的试剂置于烧杯中加少量水,搅拌溶解,必要时可加热促使其溶解,再加水至所需的体积,摇匀,即得所配制的溶液。用液态试剂或浓溶液稀释成稀溶液时,需先计量试剂或浓溶液的相对密度,再量取其体积,加入所需的水搅拌均匀即成。
配制饱和溶液时,试剂量应稍多于计算量,加热使之溶解、冷却,待结晶析出后使用。 配制易水解盐溶液时,应先用相应的酸溶液,如溶解SbCl3、Bi(NO3)3等;或碱溶液,如溶解Na2S等,以抑制水解。
配制易氧化的盐溶液时,不仅需要酸化溶液,还需加入相应的纯金属,使溶液稳定。例如,配制FeSO4、SnCl2溶液时,需分别加入金属铁、金属锡。
配制好的溶液盛装在试剂瓶或滴瓶中,摇匀后贴上标签,注意标明溶液名称、浓度和配制日期。
对于大量使用的溶液,可预先配制出比预定浓度约大10倍的贮备液,用时再行稀释。 液体试剂的取用
取下试剂瓶瓶塞,把它仰放在台上,用左手的拇指、食指和中指拿住容器(如试管、量筒等)。用右手拿起试剂瓶,注意使试剂瓶上的标签对着手心,慢慢倒出所需要量的试剂。倒完后,应该将试剂瓶口在容器上靠一下,再使瓶子竖直,这样可以避免遗留在瓶口的试剂从瓶口流到试剂瓶的外壁。
如盛装容器是烧杯,则应左手持玻棒,让试剂瓶口靠在玻棒上,使滴液顺玻璃棒流入烧
杯。倒毕,应将瓶口顺玻棒向上提一下再离开玻棒,使瓶口残留的溶液顺玻棒流入烧杯。必须注意倒完试剂后,瓶塞须立刻盖在原来试剂瓶上,把试剂瓶放回原处,并使瓶上的标签朝外。
从滴瓶中取用少量试剂时,先提起滴管,使管口离开液面,用手指捏紧滴管上部的橡皮头,以赶出滴管中的空气。然后把滴管伸入试剂瓶中,放开手指,吸入试剂,再提起滴管,将试剂滴入试管或烧杯中。使用滴瓶时,必须注意下列事项。
① 将试剂滴入试管中时,必须用无名指和中指夹住滴管,将它悬空地放在靠近试管口的上方,然后用拇指和食指挤捏橡皮头,使试剂滴入试管中。绝对禁止将滴管伸入试管中,否则滴管的管端将很容易碰到试管壁上而沾附其他溶液。如果再将此滴管放回试剂瓶中,则试剂将被污染,不能再使用。滴管口不能朝上,以防管内溶液流入橡皮头内与橡皮发生作用,腐蚀橡皮头并沾污滴瓶内的溶液。
② 滴瓶上的滴管只能专用,不能和其他滴瓶上的滴管搞错,因此,使用后应立即将滴管插回原来的滴瓶中,勿张冠李戴。一旦插错了滴管,必须将该滴瓶中的试剂全部倒掉,洗净滴瓶及滴管,重新装入纯净的试剂溶液。
③ 试剂应按次序排列,取用试剂时不得将瓶从架上取下,以免搞乱顺序,寻找困难。 固体试剂的取法
固体试剂一般都用药匙取用。药匙用牛角、塑料或不锈钢制成,两端分别为大小两个匙,取大量固体用大匙,取少量固体时用小匙。取用的固体要加入小试管里时,也必须用小匙。使用的药匙,必须保持干燥而洁净,且专匙专用。
试剂取用后应立即将瓶塞盖严,并放回原处。 要求称取一定重量的固体试剂时,可把固体放在干净的称量纸上或表面皿上,再根据要求在台秤或分析天平上进行称量。具有腐蚀性或易潮解的固体不能放在纸上,而应放在下班玻璃容器(小烧杯或表面皿)内进行称量。
单位换算
单位的换算一般为: 分(d) 10-1 十分之一 厘(c) 10-2 百分之一 毫(m) 10-3 千分之一 微(μ) 10-6 百万分之一 纳(n) 10-9 皮(p) 10-12 飞(f) 10-15 阿(a) 10-18
例:1摩尔=103毫摩尔=106微摩尔
1 mol=103 mmol=106 μmol或1 M=103 mM=106 μM 1升=103毫升=106微升 1 L=103 mL=106 μL 固体药品的配制
根据分子量进行计算,计算公式:
c=
mn
n= VM
例:50 mmol/L磷酸氢二钠500 mL
Na2HPO4·12H2O,M=358.22 g/mol n=0.05 mol/L×1 L=0.05 mol
m=0.05 mol×358.22 g/mol=17.911 g
要配1 L溶液,需要磷酸氢二钠的质量17.911 g。
现只需要500 mL,称取8.9555 g磷酸氢二钠,用蒸馏水溶解后转入500 mL容量瓶中,定容至刻度即可。
(单位物质的量的物质所具有的质量称为摩尔质量,用M表示。当物质的质量以克为单位时,摩尔质量的单位为g/mol,在数值上等于该物质的相对原子质量或相对分子质量)
根据质量进行计算,计算公式:
溶质质量
×溶液的质量百分比浓度(%)
溶液质量
例:4.0 mg·mL-1 阿卡波糖10 mL
精确称取0.040 g阿卡波糖于50 mL烧杯中,用蒸馏水溶解后转入10 mL容量瓶中,定容至刻度即可。
例:7.5%Na2CO3 500 mL
精确称取37.5 g Na2CO3,用蒸馏水溶解后转入500 mL容量瓶中,定容至刻度即可。 药品的溶解
难溶的药品可先用溶剂浸泡一段时间再用玻棒搅拌; 使用磁力搅拌器; 恒温水浴; 超声溶解。 试剂的配制
根据分子量和液体的密度进行计算,计算公式:
ρ=
m V
例:0.05 mol/L 乙酸(HAC) 50 mL
乙酸(HAC),M=60.05 g/mol,密度1.0492 g/mL n=0.05 mol/L×1 L=0.05 mol
m=0.05 mol×60.05 g/mol=3.0025 g
需要乙酸的体积V=3.0025/1.0492=2.8617 mL,将2.8617 mL乙酸用蒸馏水稀释至1 L,配成溶液就是0.05 mol/L的乙酸。
现只需要50 mL,量取143 uL乙酸,用蒸馏水稀释至50 mL即可。 试剂的稀释 计算公式:
C低浓度V所需高浓度体积
=
C高浓度V稀释后总体积
例:4.0 mg·mL-1 阿卡波糖稀释至体系100 μL,浓度1000 μg/mL
25 μL阿卡波糖溶液与75 μL蒸馏水混合即可,或将25 μL阿卡波糖溶液加入体系中。 例:用无水乙醇(AR)配制75%的酒精溶液100 mL 75 mL无水乙醇加25 mL蒸馏水配成。
例:用95%的酒精配制75%的酒精溶液100 mL
78.95 mL 95%酒精加21.05 mL蒸馏水就是75%酒精。
同样,100 mL 95%酒精配制成75%酒精,需要26.66 mL蒸馏水,加上原有的100 mL的95%酒精。
醋酸-醋酸钠缓冲液的配制
0.2 mol/L 0.2 mol/L 0.2 mol/L 0.2 mol/L
pH pH
NaAC(mL) HAC(mL) NaAC(mL) HAC(mL)
3.6 0.75 9.25 4.8 5.90 4.10
3.8 4.0 4.2 4.4 4.6
1.20 1.80 2.65 3.70 4.90
8.80 8.20 7.35 6.30 5.10
5.0 5.2 5.4 5.6 5.8
7.00 7.90 8.60 9.10 9.40
3.00 2.10 1.40 0.90 0.60
NaAC·3H2O,Mr=136.09;NaAC,Mr=82.03;HAC,Mr=60.05。 磷酸缓冲盐溶液的配制(PBS)
磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline, PBS),作为溶剂,起溶解保护试剂的作用。
pH 5.7 5.8 5.9 6.0 6.1 6.2 6.3 6.4 6.5 6.6 6.7 6.8
0.2 mol/L 0.2 mol/L NaHPO(mL) NaHPO(mL)
6.5 93.5
8.0 10.0 12.3 15.0 18.5 22.5 26.5 31.5 37.5 43.5 49.0
92.0 90.0 87.7 85.0 81.5 77.5 73.5 68.5 62.5 56.5 51.0
pH 6.9 7.0 7.1 7.2 7.3 7.4 7.5 7.6 7.7 7.8 7.9 8.0
0.2 mol/L 0.2 mol/L
NaHPO(mL) NaHPO(mL)
55.0 45.0
61.0 67.0 72.0 77.0 81.0 84.0 87.0 89.5 91.5 93.0 94.7
39.0 33.0 28.0 23.0 19.0 16.0 13.0 10.5 8.5 7.0 5.3
Na2HPO4·2H2O,Mr=178.05;Na2HPO4·12H2O,Mr=358.22;
NaH2PO4·H2O,Mr=138.01;NaH2PO4·2H2O,Mr=156.03。 注意事项
1. 配制好的碱性试剂要用橡胶塞,酸性试剂要用玻璃塞或软木塞。也可将试剂放入蓝盖试剂瓶中。碱性试剂若用玻璃塞,可在玻璃塞处垫一纸片。若出现磨口玻璃塞打不开,可把瓶口泡在水中或稀盐酸中,经过一段时间后可以打开。
2. 配制或使用极易挥发并有毒的试剂时,如三氯甲烷(氯仿)等,应在通风橱中进行,佩戴口罩、手套,以免有毒有害等物质对人体造成伤害。
实验方案的制定
以制定分析实验为例。
管号 BHT浓度(μg/mL) 无水乙醇(μL) BHT(μL) 无水乙醇(mL) DPPH(mL) 乙酸缓冲液(mL)
1 0 1000 0 1 1 2
2 125 968.75 31.25 1 1 2
3 250 937.5 62.5 1 1 2
4 500 875 125 1 1 2
5
1000 750 250 1 1 2
6 2000 500 500 1 1 2
室温避光放置30 min,波长517 nm处测定吸光度值
1. 反应体系所用溶剂应保持一致,或所用试剂能互溶。如上例中体系所用溶剂为乙醇,其中BHT和DPPH均用乙醇配制,乙酸缓冲液用蒸馏水配制,样品应用蒸馏水或乙醇溶解。若样品用其他溶剂溶解,可能与乙醇体系冲突,导致混浊或沉淀,那么就要调整实验方案。
2. 样品的添加量是按体系总体积来确定的,如上例中BHT浓度为20 mg/mL,表格中BHT浓度(μg/mL)对应的添加量是按体系为5 mL来计算的。
试剂的配制
常用试剂的规格 级别 一级 二级 三级 四级
中文名称 优级纯 分析纯 化学纯 实验纯
英文名称 Guaranteed reagent G.R. Analytical reagent A.R. Chemically Pure C.P. Laboratory Pure L.R.
标签颜色 绿 红 蓝 黄
主要用途 精确分析实验 一般分析实验 一般化学实验 生物/医药化学实验
此外,还有基准试剂,光谱纯试剂,色谱纯试剂等试剂。 试剂的保管
试剂或者保管不当,会变质失效,不仅造成浪费,甚至会引起事故。一般的化学试剂应保存在通风良好、干净、干燥的房子里,以防止被水分、灰尘和其他物质污染。同时,应根据试剂的不同性质而采取不同的保管方法。
容易侵蚀玻璃而影响试剂纯度的试剂,如氢氟酸、含氟盐(氟化钾、氟化钠、氟化铵)和苛性碱(氢氧化钾、氢氧化钠),应保存在聚乙烯塑料瓶或涂有石蜡的玻璃瓶中。
见光会逐渐分解的试剂(如过氧化氢、硝酸银、焦性没食子酸、高锰酸钾、草酸、铋酸钠等)、与空气接触易逐渐被氧化的试剂(如氯化亚锡、硫酸亚铁、硫代硫酸钠、亚硫酸钠等)以及易挥发的试剂(如溴、氨水及乙醇等),应放在棕色瓶内置冷暗处。
吸水性强的试剂,如无水碳酸盐、苛性钠、过氧化钠等应严格密封(应该蜡封)。 相互易作用的试剂,如挥发性的酸与氨,氧化剂与还原剂应分开存放。易烯的试剂,如乙醇、乙醚、苯、丙酮与易爆炸的试剂,如高氯酸、过氧化氢、硝基化合物,应分开贮存在阴凉通风、不受阳光直射的地方。
剧毒试剂,如氰化钾、氰化钠、氢氟酸、二氯化汞、三氧化二砷(砒霜)等,应特别注意由专人妥善保管,严格做好记录,经一定手续取用,以免发生事故。
极易挥发并有毒的试剂可放在通风橱内,当室内温度较高时,可放在冷藏室内保存。 试剂滴液的配制
试剂的配制应该根据节约的原则,按实验的要求,分别选用不同规格的试剂。不要认为试剂越纯越好,超越具体条件盲目追求高纯度而造成浪费。当然也不能随意降低规格而影响测定结果的准确度。
配制试剂溶液时,首先根据所配制试剂纯度的要求,选用不同等级试剂,再根据配制溶液的浓度和数量,计算出试剂的用量。经称量后的试剂置于烧杯中加少量水,搅拌溶解,必要时可加热促使其溶解,再加水至所需的体积,摇匀,即得所配制的溶液。用液态试剂或浓溶液稀释成稀溶液时,需先计量试剂或浓溶液的相对密度,再量取其体积,加入所需的水搅拌均匀即成。
配制饱和溶液时,试剂量应稍多于计算量,加热使之溶解、冷却,待结晶析出后使用。 配制易水解盐溶液时,应先用相应的酸溶液,如溶解SbCl3、Bi(NO3)3等;或碱溶液,如溶解Na2S等,以抑制水解。
配制易氧化的盐溶液时,不仅需要酸化溶液,还需加入相应的纯金属,使溶液稳定。例如,配制FeSO4、SnCl2溶液时,需分别加入金属铁、金属锡。
配制好的溶液盛装在试剂瓶或滴瓶中,摇匀后贴上标签,注意标明溶液名称、浓度和配制日期。
对于大量使用的溶液,可预先配制出比预定浓度约大10倍的贮备液,用时再行稀释。 液体试剂的取用
取下试剂瓶瓶塞,把它仰放在台上,用左手的拇指、食指和中指拿住容器(如试管、量筒等)。用右手拿起试剂瓶,注意使试剂瓶上的标签对着手心,慢慢倒出所需要量的试剂。倒完后,应该将试剂瓶口在容器上靠一下,再使瓶子竖直,这样可以避免遗留在瓶口的试剂从瓶口流到试剂瓶的外壁。
如盛装容器是烧杯,则应左手持玻棒,让试剂瓶口靠在玻棒上,使滴液顺玻璃棒流入烧
杯。倒毕,应将瓶口顺玻棒向上提一下再离开玻棒,使瓶口残留的溶液顺玻棒流入烧杯。必须注意倒完试剂后,瓶塞须立刻盖在原来试剂瓶上,把试剂瓶放回原处,并使瓶上的标签朝外。
从滴瓶中取用少量试剂时,先提起滴管,使管口离开液面,用手指捏紧滴管上部的橡皮头,以赶出滴管中的空气。然后把滴管伸入试剂瓶中,放开手指,吸入试剂,再提起滴管,将试剂滴入试管或烧杯中。使用滴瓶时,必须注意下列事项。
① 将试剂滴入试管中时,必须用无名指和中指夹住滴管,将它悬空地放在靠近试管口的上方,然后用拇指和食指挤捏橡皮头,使试剂滴入试管中。绝对禁止将滴管伸入试管中,否则滴管的管端将很容易碰到试管壁上而沾附其他溶液。如果再将此滴管放回试剂瓶中,则试剂将被污染,不能再使用。滴管口不能朝上,以防管内溶液流入橡皮头内与橡皮发生作用,腐蚀橡皮头并沾污滴瓶内的溶液。
② 滴瓶上的滴管只能专用,不能和其他滴瓶上的滴管搞错,因此,使用后应立即将滴管插回原来的滴瓶中,勿张冠李戴。一旦插错了滴管,必须将该滴瓶中的试剂全部倒掉,洗净滴瓶及滴管,重新装入纯净的试剂溶液。
③ 试剂应按次序排列,取用试剂时不得将瓶从架上取下,以免搞乱顺序,寻找困难。 固体试剂的取法
固体试剂一般都用药匙取用。药匙用牛角、塑料或不锈钢制成,两端分别为大小两个匙,取大量固体用大匙,取少量固体时用小匙。取用的固体要加入小试管里时,也必须用小匙。使用的药匙,必须保持干燥而洁净,且专匙专用。
试剂取用后应立即将瓶塞盖严,并放回原处。 要求称取一定重量的固体试剂时,可把固体放在干净的称量纸上或表面皿上,再根据要求在台秤或分析天平上进行称量。具有腐蚀性或易潮解的固体不能放在纸上,而应放在下班玻璃容器(小烧杯或表面皿)内进行称量。
单位换算
单位的换算一般为: 分(d) 10-1 十分之一 厘(c) 10-2 百分之一 毫(m) 10-3 千分之一 微(μ) 10-6 百万分之一 纳(n) 10-9 皮(p) 10-12 飞(f) 10-15 阿(a) 10-18
例:1摩尔=103毫摩尔=106微摩尔
1 mol=103 mmol=106 μmol或1 M=103 mM=106 μM 1升=103毫升=106微升 1 L=103 mL=106 μL 固体药品的配制
根据分子量进行计算,计算公式:
c=
mn
n= VM
例:50 mmol/L磷酸氢二钠500 mL
Na2HPO4·12H2O,M=358.22 g/mol n=0.05 mol/L×1 L=0.05 mol
m=0.05 mol×358.22 g/mol=17.911 g
要配1 L溶液,需要磷酸氢二钠的质量17.911 g。
现只需要500 mL,称取8.9555 g磷酸氢二钠,用蒸馏水溶解后转入500 mL容量瓶中,定容至刻度即可。
(单位物质的量的物质所具有的质量称为摩尔质量,用M表示。当物质的质量以克为单位时,摩尔质量的单位为g/mol,在数值上等于该物质的相对原子质量或相对分子质量)
根据质量进行计算,计算公式:
溶质质量
×溶液的质量百分比浓度(%)
溶液质量
例:4.0 mg·mL-1 阿卡波糖10 mL
精确称取0.040 g阿卡波糖于50 mL烧杯中,用蒸馏水溶解后转入10 mL容量瓶中,定容至刻度即可。
例:7.5%Na2CO3 500 mL
精确称取37.5 g Na2CO3,用蒸馏水溶解后转入500 mL容量瓶中,定容至刻度即可。 药品的溶解
难溶的药品可先用溶剂浸泡一段时间再用玻棒搅拌; 使用磁力搅拌器; 恒温水浴; 超声溶解。 试剂的配制
根据分子量和液体的密度进行计算,计算公式:
ρ=
m V
例:0.05 mol/L 乙酸(HAC) 50 mL
乙酸(HAC),M=60.05 g/mol,密度1.0492 g/mL n=0.05 mol/L×1 L=0.05 mol
m=0.05 mol×60.05 g/mol=3.0025 g
需要乙酸的体积V=3.0025/1.0492=2.8617 mL,将2.8617 mL乙酸用蒸馏水稀释至1 L,配成溶液就是0.05 mol/L的乙酸。
现只需要50 mL,量取143 uL乙酸,用蒸馏水稀释至50 mL即可。 试剂的稀释 计算公式:
C低浓度V所需高浓度体积
=
C高浓度V稀释后总体积
例:4.0 mg·mL-1 阿卡波糖稀释至体系100 μL,浓度1000 μg/mL
25 μL阿卡波糖溶液与75 μL蒸馏水混合即可,或将25 μL阿卡波糖溶液加入体系中。 例:用无水乙醇(AR)配制75%的酒精溶液100 mL 75 mL无水乙醇加25 mL蒸馏水配成。
例:用95%的酒精配制75%的酒精溶液100 mL
78.95 mL 95%酒精加21.05 mL蒸馏水就是75%酒精。
同样,100 mL 95%酒精配制成75%酒精,需要26.66 mL蒸馏水,加上原有的100 mL的95%酒精。
醋酸-醋酸钠缓冲液的配制
0.2 mol/L 0.2 mol/L 0.2 mol/L 0.2 mol/L
pH pH
NaAC(mL) HAC(mL) NaAC(mL) HAC(mL)
3.6 0.75 9.25 4.8 5.90 4.10
3.8 4.0 4.2 4.4 4.6
1.20 1.80 2.65 3.70 4.90
8.80 8.20 7.35 6.30 5.10
5.0 5.2 5.4 5.6 5.8
7.00 7.90 8.60 9.10 9.40
3.00 2.10 1.40 0.90 0.60
NaAC·3H2O,Mr=136.09;NaAC,Mr=82.03;HAC,Mr=60.05。 磷酸缓冲盐溶液的配制(PBS)
磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline, PBS),作为溶剂,起溶解保护试剂的作用。
pH 5.7 5.8 5.9 6.0 6.1 6.2 6.3 6.4 6.5 6.6 6.7 6.8
0.2 mol/L 0.2 mol/L NaHPO(mL) NaHPO(mL)
6.5 93.5
8.0 10.0 12.3 15.0 18.5 22.5 26.5 31.5 37.5 43.5 49.0
92.0 90.0 87.7 85.0 81.5 77.5 73.5 68.5 62.5 56.5 51.0
pH 6.9 7.0 7.1 7.2 7.3 7.4 7.5 7.6 7.7 7.8 7.9 8.0
0.2 mol/L 0.2 mol/L
NaHPO(mL) NaHPO(mL)
55.0 45.0
61.0 67.0 72.0 77.0 81.0 84.0 87.0 89.5 91.5 93.0 94.7
39.0 33.0 28.0 23.0 19.0 16.0 13.0 10.5 8.5 7.0 5.3
Na2HPO4·2H2O,Mr=178.05;Na2HPO4·12H2O,Mr=358.22;
NaH2PO4·H2O,Mr=138.01;NaH2PO4·2H2O,Mr=156.03。 注意事项
1. 配制好的碱性试剂要用橡胶塞,酸性试剂要用玻璃塞或软木塞。也可将试剂放入蓝盖试剂瓶中。碱性试剂若用玻璃塞,可在玻璃塞处垫一纸片。若出现磨口玻璃塞打不开,可把瓶口泡在水中或稀盐酸中,经过一段时间后可以打开。
2. 配制或使用极易挥发并有毒的试剂时,如三氯甲烷(氯仿)等,应在通风橱中进行,佩戴口罩、手套,以免有毒有害等物质对人体造成伤害。
实验方案的制定
以制定分析实验为例。
管号 BHT浓度(μg/mL) 无水乙醇(μL) BHT(μL) 无水乙醇(mL) DPPH(mL) 乙酸缓冲液(mL)
1 0 1000 0 1 1 2
2 125 968.75 31.25 1 1 2
3 250 937.5 62.5 1 1 2
4 500 875 125 1 1 2
5
1000 750 250 1 1 2
6 2000 500 500 1 1 2
室温避光放置30 min,波长517 nm处测定吸光度值
1. 反应体系所用溶剂应保持一致,或所用试剂能互溶。如上例中体系所用溶剂为乙醇,其中BHT和DPPH均用乙醇配制,乙酸缓冲液用蒸馏水配制,样品应用蒸馏水或乙醇溶解。若样品用其他溶剂溶解,可能与乙醇体系冲突,导致混浊或沉淀,那么就要调整实验方案。
2. 样品的添加量是按体系总体积来确定的,如上例中BHT浓度为20 mg/mL,表格中BHT浓度(μg/mL)对应的添加量是按体系为5 mL来计算的。