1 植株氮、磷、钾测定（H 2SO 4—H 2O 2消煮法）
一．仪器：
三角瓶 小弯颈漏斗 100mL 容量瓶 二．试剂：
1. 浓硫酸 2. 过氧化氢 三．操作步骤：
称取烘干、磨碎植物样品0.5xxxg 左右，置于150mL 小口三角瓶里，（或消煮管里）滴入少许水湿润样品，然后，加8mL 浓硫酸轻轻摇匀，（最好放置过夜），瓶口放一弯颈小漏斗，在电炉（或消煮炉）上先小火消煮，待硫酸分解冒大量白烟后，再升高温度，当溶液呈均匀的棕黑色时取下，（三角瓶上没有什么杂物）稍冷后加10滴过氧化氢，摇匀，再加热至微沸，消煮约5分钟取下，稍冷后，重复加过氧化氢（每次减少2滴）再消煮，直到消煮溶液呈无色或清亮后，取下，冷却。用少量水冲洗弯颈漏斗，洗液流入三角瓶，将消煮液无损地洗入100mL 容量瓶中，用水定容，摇匀。放置澄清后供氮、磷、钾测定。同时做空白试验。
四．注意事项：
1. 加过氧化氢时，直接滴入瓶底溶液中，否则将影响N 、P 、K 的比色测定。
2. 过氧化氢不宜过早加入，每次用量不可过多，加入后的消煮温度不要太高，只要保
持消煮液微沸即可。
1.1 植株全氮测定（定氮仪法）
一．试剂：
1. 甲基红—溴甲酚绿混合指示剂：0.099g 溴甲酚绿和0.066g 甲基红放到玛瑙研钵中混合加入100mL 乙醇（95%乙醇），研磨至指示剂全部溶解。（装滴瓶） 2. 2%硼酸溶液：20g 硼酸溶于1L 水中（P H4.5—5.5之间）。 3. 10 N氢氧化钠：400g 氢氧化钠溶于1L 水中。
4. 0.2N 硫酸标准溶液的配制及标定：吸6mL 浓硫酸置于1L 容量瓶用水定溶。标签上写0.2N 硫酸。然后，标定，用三个150mL 三角瓶分别称（经1600C 烘干2小时 ）无水碳酸钠0.2xxxg 左右, 分别加30mL 水溶解，分别加2滴甲基红—溴甲酚绿混合指示剂，（用尖端没有玻璃球的那一种酸式滴定管滴定）用0.2N 硫酸溶液滴定至溶液由绿色变为紫红色，再煮沸2—3分钟逐尽CO 2，冷却后继续滴定至溶液突变为葡萄酒红色为终点。同时做空白试验；空白：1个150mL 三角瓶加30mL 水，加2滴甲基红—溴甲酚绿混合指示剂，最后滴定算出来的浓度大概为0.2279N 所以，标签上写0.2279N 硫酸氮标液（母液）。
5. 0.01139N硫酸氮标液：吸取0.2279N 硫酸氮标液50mL 置于1L 容量瓶中，用蒸馏水定容。（一般用这个浓度的滴定）
6. 0.02279N 硫酸氮标液：吸取0.2279N 硫酸氮标液100mL 置于1L 容量瓶中，用蒸馏水定容。（这个浓度的一般不需要配）
二．标准溶液的计算公式：
m
(V1-V 2) × 0.05299
N — 硫酸的当量浓度
M — 无水碳酸钠的质量, g V 1 — 硫酸标准溶液用量，mL
V 2— 空白溶液硫酸标准溶液用量，mL 三．操作步骤：
吸取5mL 待测液于半微量蒸馏器中，（定氮仪的长玻璃管）加10N 氢氧化钠20mL 吸取2%硼酸溶液5mL 置于大口三角瓶里，再加2滴甲基红—溴甲酚绿混合指示剂，蒸馏60mL 后，取下。用半微量滴定管滴定，滴定由绿色—白色—桃红。 四．仪器：
定氮仪 150mL 三角瓶（大口） 滴定用半微量滴定管 标定用酸式滴定管 五．计算：
植株全氮（%）= H 2SO 4标准溶液的当量浓度×（滴定试样时消耗H 2SO 4标溶液的体积—
空白试验H 2SO 4标准溶液的体积）×分取倍数×0.014×100
样品重
= H 2SO 4标准溶液的当量浓度×（V 试样-V 空白）×(100/5)×0.014×100 样品重
= H 2SO 4标准溶液的当量浓度×（V 试样-V 空白）×28 样品重
1.2 植株全氮测定（扩散法）
一．试剂：
1. 甲基红—溴甲酚绿混合指示剂：0.099g 溴甲酚绿和0.066g 甲基红放到玛瑙研钵中混合加入100mL 乙醇（95%乙醇），研磨至指示剂全部溶解。（装滴瓶） 2. 2%硼酸溶液：20g 硼酸溶于1L 水中（P H4.5—5.5之间）。 3. 10 N氢氧化钠：400g 氢氧化钠溶于1L 水中。
4. 碱性胶液：60g 阿拉伯树胶粉与90mL 水在烧杯中混合，在水浴锅里温热至70—800C 搅拌1小时后放冷，加入30mL 坩油（丙三醇）和30mL 饱和碳酸钾搅匀，放冷，最好用离心机离心15分钟分离已除去泡沫和不溶物，将清液装入玻璃瓶中。
5. 0.2N 硫酸标准溶液的配制及标定：吸6mL 浓硫酸置于1L 容量瓶用水定溶。标签上写0.2N 硫酸。然后，标定，用三个150mL 三角瓶分别称（经1600C 烘干2小时 ）无水碳酸钠0.2xxxg 左右, 分别加30mL 水溶解，分别加2滴甲基红—溴甲酚绿混合指示剂，（用尖端没有玻璃球的那一种酸式滴定管滴定）用0.2N 硫酸溶液滴定至溶液由绿色变为紫红色，再煮沸2—3分钟逐尽CO 2，冷却后继续滴定至溶液突变为葡萄酒红色为终点。同时做空白试验；空白：1个150mL 三角瓶加30mL 水，加2滴甲基红—溴甲酚绿混合指示剂，最后滴定算出来的浓度大概为0.2279N 所以，标签上写0.2279N 硫酸氮标液（母液）。
6. 0.01139N硫酸氮标液：吸取0.2279N 硫酸氮标液50mL 置于1L 容量瓶中，用蒸馏水
定容。（一般用这个浓度的滴定）
7. 0.02279N 硫酸氮标液：吸取0.2279N 硫酸氮标液100mL 置于1L 容量瓶中，用蒸馏水定容。（这个浓度的一般不需要配） 二．标准溶液的计算公式：
m
N = (V1-V 2) × 0.05299
N — 硫酸的当量浓度
M — 无水碳酸钠的质量, g V 1 — 硫酸标准溶液用量，mL
V 2— 空白溶液硫酸标准溶液用量，mL 三．操作步骤：
吸取2%硼酸溶液3mL 置于扩散皿内室，加甲滴甲基红—溴甲酚绿混合指示剂2滴，再吸取植株待测液2mL 置于扩散皿外室，在扩散皿外室边缘涂上碱性胶液，盖上毛玻璃，再渐渐转开毛玻璃一边，使扩散皿外室露出一条狭缝迅速地加入10N 氢氧化钠2mL 置于扩散皿外室，立即盖严，轻轻转动扩散皿，捆上橡皮筋，放到400C 恒温箱内恒温24小时后取出冷却，用半微量滴定管滴定，硫酸浓度为0.01139N ，滴定由绿色—白色—桃红。 四．仪器：
扩散皿（烘干） 恒温箱 滴定用半微量滴定管 标定用酸式滴定管 五．计算：
H 2SO 4标准溶液的当量浓度×（滴定试样时消耗H 2SO 4标溶液的体积—空白试验H 2SO 4标准溶液的体积）×分取倍数×0.014×100 样品重
= H 2SO 4标准溶液的当量浓度×（V 试样-V 空白）×(100/2)×0.014×100 样品重
= H 2SO 4标准溶液的当量浓度×（V 试样-V 空白）×70 样品重
1.3 植株全磷测定（钒钼黄比色法）
一．试剂：
-10
1. 100µg.mL 磷标准溶液：准确称取经0.4390g 磷酸二氢钾（105C 烘干2小时）溶于
200mL 蒸馏水中，加入5mL 浓硫酸，转入1L 容量瓶中，用水定溶。 2. 钒钼酸铵试剂：溶液①称取钼酸铵12.5g 溶于200mL 水中，溶液②将偏钒酸铵0.625g
溶于150mL 沸水中，冷却后，加入浓硝酸125mL ，再冷却至室温，将溶液①缓慢注入溶液②中，随时搅拌，用水稀释至500mL ，（装棕色瓶保存）。
-1
3. 6 moL氢氧化钠：24g 氢氧化钠溶于100mL 水中。（装滴瓶）。
4. 2，6一二硝基酚指示剂：0.25g 2，6一二硝基酚溶于100mL 水中。（或者2，4一
二硝基酚也可以）（装滴瓶）。
二．操作步骤：
吸取待测液10mL 置于50mL 容量瓶中，加2，6一二硝基酚指示剂2滴，用6 moL 氢氧化钠调至微黄色（大概2—3吸管左右）准确加入10mL 钒钼酸铵溶液，用水定溶。同时做空白试验。15分钟后，在分光光度计上波长450nm 处和1cm 光径的比色杯进行比色测定，以空白溶液调节吸收值的零点。 三．工作曲线绘制：
-1
准确吸取100µg.mL 磷标准溶液 0 1 1.5 2 2.5 3 4mL分别吸入50mL
-1
容量瓶再加2，6一二硝基酚指示剂2滴，用6 moL氢氧化钠调至微黄色，分别准确加入10mL 钒钼酸铵溶液，用水定溶。 四．仪器：
分光光度计 50mL 容量瓶 五．分光光度计的使用方法：
1. 插上电源，开机。
2. 调节波长450nm （如果是钼锑抗比色法用700nm ）。 3. 比较比色杯的差别：
在三个比色皿中装上蒸馏水，用第一个比色皿调节满度，使A 值为0.000, 然后，测定第二个、第三个比色皿的吸光值。注意：打开盖子调零上, 关盖子调 100 . 4. 标准溶液的测定；方法如下： I，在第一个比色皿中装上“0”，在第二个比色皿中装上“1”，在第三个比色皿中装上 “1.5”.
Ⅱ, 将上部的选择旋钮置于“丁”档，打开盖子调“0” ,关盖子调“ 100”（将装有“0”的比色皿推入光路），然后，将上部的选择旋钮置于“A ”档，此时读数应为0.000。
Ⅲ，将装有“1”的比色皿推入光路，读取“A ”置。
Ⅳ，注意，每测几个样品，应把将装有“0” 的比色皿推入光路，调零和调“100”，以免减小误差。
Ⅴ，如此测定样品的“A ”置。 六．计算：
测得显色液中磷质量浓度×显色液体积×分取倍数×100 植株全磷（%）= 烘干样品重×106
= 测得显色液浓度×50×10×100 风干样品重×106
= 测得显色液浓度×0.05
风干样品重
-1
1.4 植株全磷的测定（钼锑抗比色法）
一. 试剂：
-10
1. 100µg.mL 磷标准溶液：准确称取经0.4390g 磷酸二氢钾（105C 烘干2小时）溶于
200mL 蒸馏水中，加入5mL 浓硫酸，转入1L 容量瓶中，用水定溶。（母液）
5PPm 磷标准溶液：吸取100µg.mL 磷标准溶液50mL 置于1L 容量瓶中，用水定溶。 2N 硫酸：6mL 浓硫酸加水定容至100mL 。（装滴瓶）。 4N 氢氧化钠：16g 氢氧化钠溶于100mL 水中。（装滴瓶）。
2，6一二硝基酚指示剂：0.25g 2，6一二硝基酚溶于100mL 水中。（或者2，4一二硝基酚也可以）（装滴瓶）。
6. 钼锑溶液：①称1g 酒石酸氧锑钾，溶于200mL 水中。②称20g 钼酸铵在另一个烧
杯中溶于900mL 水中，缓慢地加入306mL 浓硫酸边加边搅，把①溶液加入到②溶液中。最后加水定容至2000mL 。注意：装棕色瓶里。临用时每100mL 钼锑溶液加1.5g 抗坏血酸。
二. 操作步骤：
吸取待测液1mL 置于50mL 容量瓶中，加水稀释至约30 mL，再加2，6一二硝基酚指示剂2滴，用4N 氢氧化钠和2N 硫酸调至微黄色，加钼锑抗溶液5mL ，用水定容。摇匀，
同时做空白试验。在30C 的条件下放置半小时后，在分光光度计上波长700nm 处和1cm 光径的比色杯进行比色测定。
（在用4N 氢氧化钠和2N 硫酸调色时，最好调至变色点，即“加1滴氢氧化钠变黄色，再加2滴硫酸变无色”，最后溶液的颜色为无色，因为此时pH 为3.3, 显色后蓝色最稳定。）
三 .工作曲线绘制：
准确吸取5PPm 磷标准溶液 0 0.5 1 2 3 4 5mL分别吸入50mL 容量瓶里，再各加空白溶液1mL, 加少量水, 加2，6一二硝基酚指示剂2滴，用4N 氢氧化钠和2N 硫酸调至微黄色，加钼锑抗溶液5mL ，用水定溶。 四．注意：工作曲线的零应该没有颜色。 五．仪器：
分光光度计 50mL 容量瓶 七．计算：
测得显色液中磷质量浓度×显色液体积×分取倍数×100 烘干样品重×106
测得显色液浓度×0.5×水分系数
风干样品重
2. 3. 4. 5.
-1
1.5 植株全钾的测定（火焰光度法）
一．试剂：
1. 100PPm 钾标准溶液：0.1907g KCI（在1100C 烘2h ）溶于水中，定溶至1L 。 二．操作步骤：
吸取待测液5mL 置于50mL 容量瓶中，用水定溶，直接在火焰光度计上测定。 三．工作曲线的绘制：
准确吸取100PPm 钾标准溶液2 4 6 8 12 16 20mL 分别吸入50mL 容量瓶中，再分别加上空白待测液5mL ，用水定溶。 四．仪器：
50mL 容量瓶 火焰光度计 五．火焰光度计的使用方法：
1. 插上电源，打开主机开关，打开空压机开关。
2. 打开液化气开关，按住点火开关，旋转点火旋钮，旋动然气旋钮（增大），直到火
点上，用然气旋钮调节火焰高度，直到火焰高度为3—4cm 。（如火很难点上，可用点火旋钮配合）。
3. 测定时量程应为“1”档。 4. 用三个烧杯分别装水、0、20、（标准曲线）。
5. 把火焰光度计白色的进样管放到装水的烧杯里看是否进样，进好之后用“0”调“0”。 6. 用“20”调满度，然后用水、0、20反复调节，三到四次，使仪器稳定。
7. 先测标准曲线溶液由小到大，读数。再测样品，每测7—8个样品，用水、0、20
调节一次。
8. 关机，旋动然气旋钮至最小，关掉空压机、主机、煤气、关电源。 六．计算：
样品质量×10
测得试液中钾的质量浓度×50×
(100/5)×
100
样品质量×106
1 植株氮、磷、钾测定（H 2SO 4—H 2O 2消煮法）
一．仪器：
三角瓶 小弯颈漏斗 100mL 容量瓶 二．试剂：
1. 浓硫酸 2. 过氧化氢 三．操作步骤：
称取烘干、磨碎植物样品0.5xxxg 左右，置于150mL 小口三角瓶里，（或消煮管里）滴入少许水湿润样品，然后，加8mL 浓硫酸轻轻摇匀，（最好放置过夜），瓶口放一弯颈小漏斗，在电炉（或消煮炉）上先小火消煮，待硫酸分解冒大量白烟后，再升高温度，当溶液呈均匀的棕黑色时取下，（三角瓶上没有什么杂物）稍冷后加10滴过氧化氢，摇匀，再加热至微沸，消煮约5分钟取下，稍冷后，重复加过氧化氢（每次减少2滴）再消煮，直到消煮溶液呈无色或清亮后，取下，冷却。用少量水冲洗弯颈漏斗，洗液流入三角瓶，将消煮液无损地洗入100mL 容量瓶中，用水定容，摇匀。放置澄清后供氮、磷、钾测定。同时做空白试验。
四．注意事项：
1. 加过氧化氢时，直接滴入瓶底溶液中，否则将影响N 、P 、K 的比色测定。
2. 过氧化氢不宜过早加入，每次用量不可过多，加入后的消煮温度不要太高，只要保
持消煮液微沸即可。
1.1 植株全氮测定（定氮仪法）
一．试剂：
1. 甲基红—溴甲酚绿混合指示剂：0.099g 溴甲酚绿和0.066g 甲基红放到玛瑙研钵中混合加入100mL 乙醇（95%乙醇），研磨至指示剂全部溶解。（装滴瓶） 2. 2%硼酸溶液：20g 硼酸溶于1L 水中（P H4.5—5.5之间）。 3. 10 N氢氧化钠：400g 氢氧化钠溶于1L 水中。
4. 0.2N 硫酸标准溶液的配制及标定：吸6mL 浓硫酸置于1L 容量瓶用水定溶。标签上写0.2N 硫酸。然后，标定，用三个150mL 三角瓶分别称（经1600C 烘干2小时 ）无水碳酸钠0.2xxxg 左右, 分别加30mL 水溶解，分别加2滴甲基红—溴甲酚绿混合指示剂，（用尖端没有玻璃球的那一种酸式滴定管滴定）用0.2N 硫酸溶液滴定至溶液由绿色变为紫红色，再煮沸2—3分钟逐尽CO 2，冷却后继续滴定至溶液突变为葡萄酒红色为终点。同时做空白试验；空白：1个150mL 三角瓶加30mL 水，加2滴甲基红—溴甲酚绿混合指示剂，最后滴定算出来的浓度大概为0.2279N 所以，标签上写0.2279N 硫酸氮标液（母液）。
5. 0.01139N硫酸氮标液：吸取0.2279N 硫酸氮标液50mL 置于1L 容量瓶中，用蒸馏水定容。（一般用这个浓度的滴定）
6. 0.02279N 硫酸氮标液：吸取0.2279N 硫酸氮标液100mL 置于1L 容量瓶中，用蒸馏水定容。（这个浓度的一般不需要配）
二．标准溶液的计算公式：
m
(V1-V 2) × 0.05299
N — 硫酸的当量浓度
M — 无水碳酸钠的质量, g V 1 — 硫酸标准溶液用量，mL
V 2— 空白溶液硫酸标准溶液用量，mL 三．操作步骤：
吸取5mL 待测液于半微量蒸馏器中，（定氮仪的长玻璃管）加10N 氢氧化钠20mL 吸取2%硼酸溶液5mL 置于大口三角瓶里，再加2滴甲基红—溴甲酚绿混合指示剂，蒸馏60mL 后，取下。用半微量滴定管滴定，滴定由绿色—白色—桃红。 四．仪器：
定氮仪 150mL 三角瓶（大口） 滴定用半微量滴定管 标定用酸式滴定管 五．计算：
植株全氮（%）= H 2SO 4标准溶液的当量浓度×（滴定试样时消耗H 2SO 4标溶液的体积—
空白试验H 2SO 4标准溶液的体积）×分取倍数×0.014×100
样品重
= H 2SO 4标准溶液的当量浓度×（V 试样-V 空白）×(100/5)×0.014×100 样品重
= H 2SO 4标准溶液的当量浓度×（V 试样-V 空白）×28 样品重
1.2 植株全氮测定（扩散法）
一．试剂：
1. 甲基红—溴甲酚绿混合指示剂：0.099g 溴甲酚绿和0.066g 甲基红放到玛瑙研钵中混合加入100mL 乙醇（95%乙醇），研磨至指示剂全部溶解。（装滴瓶） 2. 2%硼酸溶液：20g 硼酸溶于1L 水中（P H4.5—5.5之间）。 3. 10 N氢氧化钠：400g 氢氧化钠溶于1L 水中。
4. 碱性胶液：60g 阿拉伯树胶粉与90mL 水在烧杯中混合，在水浴锅里温热至70—800C 搅拌1小时后放冷，加入30mL 坩油（丙三醇）和30mL 饱和碳酸钾搅匀，放冷，最好用离心机离心15分钟分离已除去泡沫和不溶物，将清液装入玻璃瓶中。
5. 0.2N 硫酸标准溶液的配制及标定：吸6mL 浓硫酸置于1L 容量瓶用水定溶。标签上写0.2N 硫酸。然后，标定，用三个150mL 三角瓶分别称（经1600C 烘干2小时 ）无水碳酸钠0.2xxxg 左右, 分别加30mL 水溶解，分别加2滴甲基红—溴甲酚绿混合指示剂，（用尖端没有玻璃球的那一种酸式滴定管滴定）用0.2N 硫酸溶液滴定至溶液由绿色变为紫红色，再煮沸2—3分钟逐尽CO 2，冷却后继续滴定至溶液突变为葡萄酒红色为终点。同时做空白试验；空白：1个150mL 三角瓶加30mL 水，加2滴甲基红—溴甲酚绿混合指示剂，最后滴定算出来的浓度大概为0.2279N 所以，标签上写0.2279N 硫酸氮标液（母液）。
6. 0.01139N硫酸氮标液：吸取0.2279N 硫酸氮标液50mL 置于1L 容量瓶中，用蒸馏水
定容。（一般用这个浓度的滴定）
7. 0.02279N 硫酸氮标液：吸取0.2279N 硫酸氮标液100mL 置于1L 容量瓶中，用蒸馏水定容。（这个浓度的一般不需要配） 二．标准溶液的计算公式：
m
N = (V1-V 2) × 0.05299
N — 硫酸的当量浓度
M — 无水碳酸钠的质量, g V 1 — 硫酸标准溶液用量，mL
V 2— 空白溶液硫酸标准溶液用量，mL 三．操作步骤：
吸取2%硼酸溶液3mL 置于扩散皿内室，加甲滴甲基红—溴甲酚绿混合指示剂2滴，再吸取植株待测液2mL 置于扩散皿外室，在扩散皿外室边缘涂上碱性胶液，盖上毛玻璃，再渐渐转开毛玻璃一边，使扩散皿外室露出一条狭缝迅速地加入10N 氢氧化钠2mL 置于扩散皿外室，立即盖严，轻轻转动扩散皿，捆上橡皮筋，放到400C 恒温箱内恒温24小时后取出冷却，用半微量滴定管滴定，硫酸浓度为0.01139N ，滴定由绿色—白色—桃红。 四．仪器：
扩散皿（烘干） 恒温箱 滴定用半微量滴定管 标定用酸式滴定管 五．计算：
H 2SO 4标准溶液的当量浓度×（滴定试样时消耗H 2SO 4标溶液的体积—空白试验H 2SO 4标准溶液的体积）×分取倍数×0.014×100 样品重
= H 2SO 4标准溶液的当量浓度×（V 试样-V 空白）×(100/2)×0.014×100 样品重
= H 2SO 4标准溶液的当量浓度×（V 试样-V 空白）×70 样品重
1.3 植株全磷测定（钒钼黄比色法）
一．试剂：
-10
1. 100µg.mL 磷标准溶液：准确称取经0.4390g 磷酸二氢钾（105C 烘干2小时）溶于
200mL 蒸馏水中，加入5mL 浓硫酸，转入1L 容量瓶中，用水定溶。 2. 钒钼酸铵试剂：溶液①称取钼酸铵12.5g 溶于200mL 水中，溶液②将偏钒酸铵0.625g
溶于150mL 沸水中，冷却后，加入浓硝酸125mL ，再冷却至室温，将溶液①缓慢注入溶液②中，随时搅拌，用水稀释至500mL ，（装棕色瓶保存）。
-1
3. 6 moL氢氧化钠：24g 氢氧化钠溶于100mL 水中。（装滴瓶）。
4. 2，6一二硝基酚指示剂：0.25g 2，6一二硝基酚溶于100mL 水中。（或者2，4一
二硝基酚也可以）（装滴瓶）。
二．操作步骤：
吸取待测液10mL 置于50mL 容量瓶中，加2，6一二硝基酚指示剂2滴，用6 moL 氢氧化钠调至微黄色（大概2—3吸管左右）准确加入10mL 钒钼酸铵溶液，用水定溶。同时做空白试验。15分钟后，在分光光度计上波长450nm 处和1cm 光径的比色杯进行比色测定，以空白溶液调节吸收值的零点。 三．工作曲线绘制：
-1
准确吸取100µg.mL 磷标准溶液 0 1 1.5 2 2.5 3 4mL分别吸入50mL
-1
容量瓶再加2，6一二硝基酚指示剂2滴，用6 moL氢氧化钠调至微黄色，分别准确加入10mL 钒钼酸铵溶液，用水定溶。 四．仪器：
分光光度计 50mL 容量瓶 五．分光光度计的使用方法：
1. 插上电源，开机。
2. 调节波长450nm （如果是钼锑抗比色法用700nm ）。 3. 比较比色杯的差别：
在三个比色皿中装上蒸馏水，用第一个比色皿调节满度，使A 值为0.000, 然后，测定第二个、第三个比色皿的吸光值。注意：打开盖子调零上, 关盖子调 100 . 4. 标准溶液的测定；方法如下： I，在第一个比色皿中装上“0”，在第二个比色皿中装上“1”，在第三个比色皿中装上 “1.5”.
Ⅱ, 将上部的选择旋钮置于“丁”档，打开盖子调“0” ,关盖子调“ 100”（将装有“0”的比色皿推入光路），然后，将上部的选择旋钮置于“A ”档，此时读数应为0.000。
Ⅲ，将装有“1”的比色皿推入光路，读取“A ”置。
Ⅳ，注意，每测几个样品，应把将装有“0” 的比色皿推入光路，调零和调“100”，以免减小误差。
Ⅴ，如此测定样品的“A ”置。 六．计算：
测得显色液中磷质量浓度×显色液体积×分取倍数×100 植株全磷（%）= 烘干样品重×106
= 测得显色液浓度×50×10×100 风干样品重×106
= 测得显色液浓度×0.05
风干样品重
-1
1.4 植株全磷的测定（钼锑抗比色法）
一. 试剂：
-10
1. 100µg.mL 磷标准溶液：准确称取经0.4390g 磷酸二氢钾（105C 烘干2小时）溶于
200mL 蒸馏水中，加入5mL 浓硫酸，转入1L 容量瓶中，用水定溶。（母液）
5PPm 磷标准溶液：吸取100µg.mL 磷标准溶液50mL 置于1L 容量瓶中，用水定溶。 2N 硫酸：6mL 浓硫酸加水定容至100mL 。（装滴瓶）。 4N 氢氧化钠：16g 氢氧化钠溶于100mL 水中。（装滴瓶）。
2，6一二硝基酚指示剂：0.25g 2，6一二硝基酚溶于100mL 水中。（或者2，4一二硝基酚也可以）（装滴瓶）。
6. 钼锑溶液：①称1g 酒石酸氧锑钾，溶于200mL 水中。②称20g 钼酸铵在另一个烧
杯中溶于900mL 水中，缓慢地加入306mL 浓硫酸边加边搅，把①溶液加入到②溶液中。最后加水定容至2000mL 。注意：装棕色瓶里。临用时每100mL 钼锑溶液加1.5g 抗坏血酸。
二. 操作步骤：
吸取待测液1mL 置于50mL 容量瓶中，加水稀释至约30 mL，再加2，6一二硝基酚指示剂2滴，用4N 氢氧化钠和2N 硫酸调至微黄色，加钼锑抗溶液5mL ，用水定容。摇匀，
同时做空白试验。在30C 的条件下放置半小时后，在分光光度计上波长700nm 处和1cm 光径的比色杯进行比色测定。
（在用4N 氢氧化钠和2N 硫酸调色时，最好调至变色点，即“加1滴氢氧化钠变黄色，再加2滴硫酸变无色”，最后溶液的颜色为无色，因为此时pH 为3.3, 显色后蓝色最稳定。）
三 .工作曲线绘制：
准确吸取5PPm 磷标准溶液 0 0.5 1 2 3 4 5mL分别吸入50mL 容量瓶里，再各加空白溶液1mL, 加少量水, 加2，6一二硝基酚指示剂2滴，用4N 氢氧化钠和2N 硫酸调至微黄色，加钼锑抗溶液5mL ，用水定溶。 四．注意：工作曲线的零应该没有颜色。 五．仪器：
分光光度计 50mL 容量瓶 七．计算：
测得显色液中磷质量浓度×显色液体积×分取倍数×100 烘干样品重×106
测得显色液浓度×0.5×水分系数
风干样品重
2. 3. 4. 5.
-1
1.5 植株全钾的测定（火焰光度法）
一．试剂：
1. 100PPm 钾标准溶液：0.1907g KCI（在1100C 烘2h ）溶于水中，定溶至1L 。 二．操作步骤：
吸取待测液5mL 置于50mL 容量瓶中，用水定溶，直接在火焰光度计上测定。 三．工作曲线的绘制：
准确吸取100PPm 钾标准溶液2 4 6 8 12 16 20mL 分别吸入50mL 容量瓶中，再分别加上空白待测液5mL ，用水定溶。 四．仪器：
50mL 容量瓶 火焰光度计 五．火焰光度计的使用方法：
1. 插上电源，打开主机开关，打开空压机开关。
2. 打开液化气开关，按住点火开关，旋转点火旋钮，旋动然气旋钮（增大），直到火
点上，用然气旋钮调节火焰高度，直到火焰高度为3—4cm 。（如火很难点上，可用点火旋钮配合）。
3. 测定时量程应为“1”档。 4. 用三个烧杯分别装水、0、20、（标准曲线）。
5. 把火焰光度计白色的进样管放到装水的烧杯里看是否进样，进好之后用“0”调“0”。 6. 用“20”调满度，然后用水、0、20反复调节，三到四次，使仪器稳定。
7. 先测标准曲线溶液由小到大，读数。再测样品，每测7—8个样品，用水、0、20
调节一次。
8. 关机，旋动然气旋钮至最小，关掉空压机、主机、煤气、关电源。 六．计算：
样品质量×10
测得试液中钾的质量浓度×50×
(100/5)×
100
样品质量×106