实验四、种子生活力测定
一、实验目的
了解测定种子生活力的基本原理，并学会其操作程序。
二、测定原理
四唑：2,3,5－三苯基氯化四唑（C19H15N4Cl ）的简称，白色粉末，水溶液无色。
染色原理：种胚活细胞中的脱氢酶产生氢，与浸入种胚内的四唑发生作用，产生红色稳定而不扩散的三苯基甲潜（TPF ）。
判断标准：被染成红色的部位是有生命的部位；完全被染成红色的种子有生活力；完全未染色的种子无生活力；部分染色的种子，根据坏死组织出现的部位及其大小判断种子是否具有生活力。
三、材料及器具
材料：刺槐
器具及药品：烧杯、解剖刀、解剖针、镊子、培养皿、小烧杯、滤纸、取样匙、1%四唑。
四、方法与步骤
1. 测定样品的提取
从净度测定后的纯净种子中随机提取20粒种子（四分法）。4次重复。同时准备部分种子作为后备。
2. 种子预处理（浸种，同发芽测定）
3. 溶液配制
溶液A ：9.078g KH2PO4溶于1000mL 水；
溶液B ：11.876g Na2HPO4·2H2O 溶于1000mL 水；
缓冲液配制：溶液A:B=2:3比例混合;
1%的四唑溶液配制：称取四唑1g 溶于100mL 的缓冲溶液，现配现用。
4. 取种胚、染色处理
剥除外种皮和内种皮，取出种胚后放入盛有清水的玻璃皿；记录空粒、腐烂粒及病虫害感染种粒。如取胚时由于人为因素而破坏种胚，可从后备种子中补取； 种胚剥取结束后一起放入四唑溶液，使溶液淹没种仁，上浮者要压沉。置黑暗处，
保持30～35℃染色2～3h 。
5. 结果鉴定
经过染色的种子用清水冲洗后，分摊在潮湿的滤纸上，仔细观察染色情况，如果难以观察，可借助放大镜或显微镜。
有生活力：种胚和胚乳（子叶）完全着色；
无生活力：种胚和胚乳（子叶）完全不着色；
根据种胚或胚乳（子叶）上未着色的斑块的位置和大小判断种子有无生活力。
五、实验结果
六、数据分析
此次生活力测定结果显示，这批刺槐种子生活力低，两组测定结果平均30%左右，间接反应它的发芽率情况，给接下来的发芽率测定结果预测提供了依据。据了解这批种子为陈年的刺槐种子，也就能够理解为何生活力低。
实验四、种子生活力测定
一、实验目的
了解测定种子生活力的基本原理，并学会其操作程序。
二、测定原理
四唑：2,3,5－三苯基氯化四唑（C19H15N4Cl ）的简称，白色粉末，水溶液无色。
染色原理：种胚活细胞中的脱氢酶产生氢，与浸入种胚内的四唑发生作用，产生红色稳定而不扩散的三苯基甲潜（TPF ）。
判断标准：被染成红色的部位是有生命的部位；完全被染成红色的种子有生活力；完全未染色的种子无生活力；部分染色的种子，根据坏死组织出现的部位及其大小判断种子是否具有生活力。
三、材料及器具
材料：刺槐
器具及药品：烧杯、解剖刀、解剖针、镊子、培养皿、小烧杯、滤纸、取样匙、1%四唑。
四、方法与步骤
1. 测定样品的提取
从净度测定后的纯净种子中随机提取20粒种子（四分法）。4次重复。同时准备部分种子作为后备。
2. 种子预处理（浸种，同发芽测定）
3. 溶液配制
溶液A ：9.078g KH2PO4溶于1000mL 水；
溶液B ：11.876g Na2HPO4·2H2O 溶于1000mL 水；
缓冲液配制：溶液A:B=2:3比例混合;
1%的四唑溶液配制：称取四唑1g 溶于100mL 的缓冲溶液，现配现用。
4. 取种胚、染色处理
剥除外种皮和内种皮，取出种胚后放入盛有清水的玻璃皿；记录空粒、腐烂粒及病虫害感染种粒。如取胚时由于人为因素而破坏种胚，可从后备种子中补取； 种胚剥取结束后一起放入四唑溶液，使溶液淹没种仁，上浮者要压沉。置黑暗处，
保持30～35℃染色2～3h 。
5. 结果鉴定
经过染色的种子用清水冲洗后，分摊在潮湿的滤纸上，仔细观察染色情况，如果难以观察，可借助放大镜或显微镜。
有生活力：种胚和胚乳（子叶）完全着色；
无生活力：种胚和胚乳（子叶）完全不着色；
根据种胚或胚乳（子叶）上未着色的斑块的位置和大小判断种子有无生活力。
五、实验结果
六、数据分析
此次生活力测定结果显示，这批刺槐种子生活力低，两组测定结果平均30%左右，间接反应它的发芽率情况，给接下来的发芽率测定结果预测提供了依据。据了解这批种子为陈年的刺槐种子，也就能够理解为何生活力低。