试题
一、名词解释（每小题4分，共20分）
1、启动子
2、增强子
3、RNA干扰
4、原位杂交技术
5、负转录调控
二、论述题（每小题20分，共80分）
1、试述乳糖操纵子的调控模式。
2、详述Wstson和Crick提出的DNA右手双螺旋结构模型的特点。
3、论述PCR的原理并举例说明在分子生物学中的应用
4、简述Southern杂交的原理及其在分子生物学中的应用
参考答案
一、名词解释（每小题4分，共20分）
1、启动子（promotor）：是RNA聚合酶起始RNA合成所特异结合的DNA序列，是一段位于结构基因的5′端上游区的DNA序列，能够活化RNA聚合酶，使之与模板DNA准确地相结合，并具有转录起始的特异性。
2、增强子(Enhancer)：是一个顺式作用元件，能够提高一些真核生物启动子的利用，并能够在启动子任何方向以及任何位置(上游或者下游)起作用。
3、RNA干扰（RNA interference，RNAi）是指内源性或外源性双链RNA（dsRNA）介导的细胞内mRNA发生特异性降解，从而导致靶基因的表达沉默，产生相应的功能表型的缺失现象。
4、原位杂交技术：用标记的核酸探针，在组织、细胞、间期核及染色体上对核酸进行定位和相对定量研究的一种手段。
5、负转录调控：当调节蛋白存在，结构基因不转录的调控系统。
二、论述题（每小题20分，共80分）
1、试述乳糖操纵子的调控模式。
（1）当大肠杆菌的培养基中无葡萄糖，也无乳糖时，但由于存在本底组成型合成，RNA聚合酶就会转录出一个或几个lacZ,Y,a的mRNA，翻译出几个lacZ,Y,a的产物，即半乳糖苷酶，透性酶，转乙酰酶（5分）。当培养基中没有葡萄糖而只有乳糖存在时，细胞会利用本底合成产生的透性酶将膜外的乳糖转运到膜内，由半乳糖苷酶将之分解，产生的别乳糖（诱导物）与结合在操作子上的阻遏蛋白相结合，使阻遏蛋白离开操作子结合区，现在RNA聚合酶可以与启动子相结合，从而具备了转录的条件。这样lacZ,Y,a可以大量转录，合成大量的酶来分解利用乳糖。（8分）
（2）而当培养基中只有葡萄糖存在时，由于葡萄糖的一个代谢产物可以抑制AMP环化酶的作用，同时促进磷酸酯酶的作用，使cAMP的浓度下降，CAP—cAMP复合物不能形成，则启动子不能正常开启，基因表达被关闭。（7分）
2、 详述Wstson和Crick提出的DNA右手双螺旋结构模型的特点。
DNA二级结构模型中，最著名的是1953年Wstson和Crick提出的右手双螺旋结构模型。其涵义为DNA是由两条平行互补的多核苷酸链组成的，构成DNA的两条核苷酸链的方向是相反的（即一条是3’－5’，另一条是5’－3’），两条链以右手的方向相互缠绕呈螺旋状，因此叫右手双螺旋结构模型（5分）。B型结构的特点：
右手双股螺旋；（5分）每圈螺旋10个碱基对，螺旋扭角为36°；螺距34埃，每个碱基对的螺旋上升值为3.4埃（5分）；碱基倾角 - 2°，碱基平面基本上与螺旋轴垂直；螺旋轴穿过碱基对，大沟宽而略深，小沟窄而略浅（5分）。
3、论述PCR的原理并举例说明在分子生物学中的应用
是体外快速扩增特定基因或DNA序列的一种技术。（3分）通过变性与引物退火（5分），在DNA聚合酶作用下使DNA延伸的循 环技术，能大量扩增目标DNA 的数量（5分）。RAPD；RT-PCR；兼并引物PCR；反向PCR；不对称PCR；原位PCR；RACE-PCR；AFLP等等。举出一种即可（7分）。
4、简述Southern杂交的原理及其在分子生物学中的应用
原理是DNA双链中的碱基互补的原则（3分）。将DNA酶切、电泳、转移、固定在膜上（5分），用放射性同位素和非放射性同位素标记探针，和膜进行杂交，显影和显色（5分）。该技术在分子生物学中的用途非常广泛，如检测DNA时用到该技术，基因的拷贝数检测，外源基因是否进入了受体的检测等，举出一种即可（7分）
试题
一、名词解释（每小题4分，共20分）
1、启动子
2、增强子
3、RNA干扰
4、原位杂交技术
5、负转录调控
二、论述题（每小题20分，共80分）
1、试述乳糖操纵子的调控模式。
2、详述Wstson和Crick提出的DNA右手双螺旋结构模型的特点。
3、论述PCR的原理并举例说明在分子生物学中的应用
4、简述Southern杂交的原理及其在分子生物学中的应用
参考答案
一、名词解释（每小题4分，共20分）
1、启动子（promotor）：是RNA聚合酶起始RNA合成所特异结合的DNA序列，是一段位于结构基因的5′端上游区的DNA序列，能够活化RNA聚合酶，使之与模板DNA准确地相结合，并具有转录起始的特异性。
2、增强子(Enhancer)：是一个顺式作用元件，能够提高一些真核生物启动子的利用，并能够在启动子任何方向以及任何位置(上游或者下游)起作用。
3、RNA干扰（RNA interference，RNAi）是指内源性或外源性双链RNA（dsRNA）介导的细胞内mRNA发生特异性降解，从而导致靶基因的表达沉默，产生相应的功能表型的缺失现象。
4、原位杂交技术：用标记的核酸探针，在组织、细胞、间期核及染色体上对核酸进行定位和相对定量研究的一种手段。
5、负转录调控：当调节蛋白存在，结构基因不转录的调控系统。
二、论述题（每小题20分，共80分）
1、试述乳糖操纵子的调控模式。
（1）当大肠杆菌的培养基中无葡萄糖，也无乳糖时，但由于存在本底组成型合成，RNA聚合酶就会转录出一个或几个lacZ,Y,a的mRNA，翻译出几个lacZ,Y,a的产物，即半乳糖苷酶，透性酶，转乙酰酶（5分）。当培养基中没有葡萄糖而只有乳糖存在时，细胞会利用本底合成产生的透性酶将膜外的乳糖转运到膜内，由半乳糖苷酶将之分解，产生的别乳糖（诱导物）与结合在操作子上的阻遏蛋白相结合，使阻遏蛋白离开操作子结合区，现在RNA聚合酶可以与启动子相结合，从而具备了转录的条件。这样lacZ,Y,a可以大量转录，合成大量的酶来分解利用乳糖。（8分）
（2）而当培养基中只有葡萄糖存在时，由于葡萄糖的一个代谢产物可以抑制AMP环化酶的作用，同时促进磷酸酯酶的作用，使cAMP的浓度下降，CAP—cAMP复合物不能形成，则启动子不能正常开启，基因表达被关闭。（7分）
2、 详述Wstson和Crick提出的DNA右手双螺旋结构模型的特点。
DNA二级结构模型中，最著名的是1953年Wstson和Crick提出的右手双螺旋结构模型。其涵义为DNA是由两条平行互补的多核苷酸链组成的，构成DNA的两条核苷酸链的方向是相反的（即一条是3’－5’，另一条是5’－3’），两条链以右手的方向相互缠绕呈螺旋状，因此叫右手双螺旋结构模型（5分）。B型结构的特点：
右手双股螺旋；（5分）每圈螺旋10个碱基对，螺旋扭角为36°；螺距34埃，每个碱基对的螺旋上升值为3.4埃（5分）；碱基倾角 - 2°，碱基平面基本上与螺旋轴垂直；螺旋轴穿过碱基对，大沟宽而略深，小沟窄而略浅（5分）。
3、论述PCR的原理并举例说明在分子生物学中的应用
是体外快速扩增特定基因或DNA序列的一种技术。（3分）通过变性与引物退火（5分），在DNA聚合酶作用下使DNA延伸的循 环技术，能大量扩增目标DNA 的数量（5分）。RAPD；RT-PCR；兼并引物PCR；反向PCR；不对称PCR；原位PCR；RACE-PCR；AFLP等等。举出一种即可（7分）。
4、简述Southern杂交的原理及其在分子生物学中的应用
原理是DNA双链中的碱基互补的原则（3分）。将DNA酶切、电泳、转移、固定在膜上（5分），用放射性同位素和非放射性同位素标记探针，和膜进行杂交，显影和显色（5分）。该技术在分子生物学中的用途非常广泛，如检测DNA时用到该技术，基因的拷贝数检测，外源基因是否进入了受体的检测等，举出一种即可（7分）