单 克 隆抗 体 应用 的现 状 与发 展 趋势
陶 小华编译 唐 茂椿 谢
弘 审校
一
、
前言
! ∀ ! #∃ ∀ !
步纯 化
∗ & % ∋ ∀ ()
。
此 法 简 便 易 行 不 需 特殊设 备 巨抗
, 。
,
单 克 隆抗 体
+ !
)# ,
,
简
体 滴 度 较高
其它 产 物
,
缺 点是难 以 除 净产 品 中混 杂 的
3
、
称 单 抗 −是 一 类 由单 克 隆 的 . 淋 巴 细 胞 如 单
克 隆 的 . 淋 巴 细 胞 杂 交瘤 细 胞 − 分 泌 的 能针
,
如 1 2
,
热 原 物质 和 动物病 毒 等
。
,
且费 用 昂 贵
难 以大 规 模 生 产
,
对 单 一 抗 原 决 定 簇 的抗 体
,
。
近 几 年来
,
单抗
,
、
工 业 化 的 生 产方 法 有
− 4 大型 发 醉 罐 深
技 术获 得 了 飞 跃 发 展 并渗 入 到许 多领 域 可
以 认 为 单 抗 是 目前 唯一 具有近 期 效 益 和 开 发
层 搅 拌培 养法
、 、
发 酵 罐 配 有 自动 测 定 细 胞 密
。
度 温 度 5 6 和 氧 含 量 的设 备 以 及 自控 气 流 量 消泡 和 搅拌 速度 的 微 机 控 制 仪器
, ,
前 途 的 生 物技 术 产 品
二
、
。
− 7 微
基 本 原理 及 生 产 方 法
,
囊法 是 一 种较 精巧 的方 法 选 用 适 当 的包 衣 材 料 给 杂交 瘤 包 9 半 透 膜 脾脏 的 . 淋 巴
, ,
8
一 −基 本 原 理
,
该 膜 可 通 过细 胞
,
正 常 小 鼠用 抗 原 免 疫 后
的 营 养 物 和 代 谢 物 截 留大分 子 蛋 白质 经 破
壁 分 离 提 取单 抗
。
细 胞 浆细 胞 − 将产 生 特 异 性 抗 体
但 这些 细
,
使 用 后 的杂 交 瘤细 胞 可 重
,
, 、
胞 在 体 外 不能 长 期 存 活
,
。
为 了 能 使这 些 细 胞
、
复套 用
,
。
− : 中 空 纤 维培 养 法 利用 相 近 原 理
; 种
种
在 体外 长 期 生 存 并 利 用 其 产生 抗 体 可 将 免 疫 脾 细 胞 与能 无 限止地 培 养
的 小 鼠骨 髓 瘤细 胞 进 行 融 合
,
选 用直 径 约 7 ; 维 外包 = > ? ; =
具 半 透 膜性 质的 中 空 纤 厚 的 海棉 状 材 料
, ,
但不 分 泌 抗 原 形 成 既 具有 免
,
上千
根 长纤 维 整 齐 排 入 培养 筒
向 纤维 中 空 内腔
,
疫 脾 细胞 分 泌 特 异 性 抗 体 的 能 力 胞 杂交 瘤
,
又 有 使恶
和 纤 维 间 的 外 空 隙 灌 注 营养 液
杂 交瘤 细 胞
。
性 肿 瘤细 胞 迅 速 无 限制 繁殖 特 性 的 . 淋 巴细
经 筛 选后 克 隆 化
,
则生 长 于 纤 维外 的海 棉状 材 料上
半 透 膜 不 断 输入 新鲜 营养 物 质
,
通 过纤 维
。
然后 进 行 大量
,
并 排 出 代谢
最
。
培 养 或 接 种 到 同 系 小 鼠腹 腔 内
培养液
、
腹
,
产物
,
使 细 胞 始 终保 持 适 宜 的生 长 条件
水 或血 清 中 就会 产 生 大 量高 滴 度 的 特异性 抗
后 直接 从 培 养 筒 内收集 并 分 离单 抗
此外 还
体 这 就 是 小 鼠
单克 隆抗 体 也可 以生 产 人源 单 克 隆抗体
,
。
根据 其 原 理
有 利 用 乳 剂作 载 体 的 培养 法 以 及 体 内外 结 合
、
大 鼠 单克 隆抗
的方 法 等 抗
,
。
体 人 小 鼠 单克 隆抗 体 等
二 − 生 产 方 法 简介
、
一
。
目前 正 在 探索 用 基 因 工 程 技 术 生 产 单
即 用 / 0 ∋ 重 组技 术
,
。
该 法 比任 何 方法
目 前 大 规 模 生 产 单 抗的 方法 主 要 有 体 内
更优 越
更经 济
,
。
单抗 作 为 治 疗剂 或 纯 化药
。
接 种 法 体外 细 胞 培 养 的 发 酵 罐法 微 囊法
中 空 纤 维 培养 法 以 及 重 组 / 0 ∋ 法 等
。
、
、
、
物 的 前景 可 能 取 决 于 能 否 广 泛 采 用 重 组
/ 0 ∋ 技术
特 别是 生 产 人 源 单 抗
体 内接种 法是 实验 室 规 模最 普遍 采 用 的 方法
,
三
、
应 用 现 状 和 发展 趋 势
≅ Α 1 1 ∀ (# Β ∀
# %
即 接 种 杂 交 瘤 细 胞 至 鼠 或 其 它 动 物−
,
的 腹 腔 或其 它 脏 器 如 牛 羊 的 子 宫 −
时 间后 收集 腹 水 或其 它 体 液 即 得
玲川 年 第
吕卷 第 :
,
经 一段
亦可 进一
材料来 自
/
∃! 2 Ν Ι Η+
( )! ∀
,
%
Χ ∃
. )! ( # Ε ∀ Δ
!
如 2 )Δ ∃ %
Γ目
Φ #
#
∃
Η Γ
∀ ( 一Ι
一
Η
,
! (
Η
Ο
4ϑΚ=
Η: Κ > Λ Κ Μ . )! ( # Ε ∀ Δ
%
(# 4 ϑ Κ :
?4> Κϑ
—
编者
期
4Λ4
一 − 体外 诊断 试 荆
有 诊 断 支 原 体 的 单 体 试 剂 上市
,
。
目前 还 有 许
单 克 隆抗 体 具有 高 度 的 生 物 特 异性 作诊 断 试 剂 具 有 极 高 的 选 择性 和灵 敏 度
前 尚无 其 他 方 法 能 与其 匹 敌
它 不 但 可 以 无 限量 生 产
,
。 ,
用
目
多公 司在 大力 开 发性 病
、
.
型 肝 炎和 呼 吸 道
感染 的 单 抗 诊 断 试 剂
。
尤 其可 取 的 是
二 − 体 内 诊 断 试 荆 试 药−
而 且 产品 的 免 疫 化
,
单抗 可 以 引 导 同 位 素 至 体 内 特 定 部 位
据 此 有可 能 发 展 单抗 的 造影 诊 断
为 Ω 线 诊 断 的 辅 助方 法
,
、 ,
,
学性 质完 全 相 同
Π;
。
估计 可 戈
。
在采 用 单 抗 试 剂 的 免 疫 诊 断 方 法 中
,
,
或 与其 它 造 影 剂偶
务 是 放 射 免疫 分 析 法 Α 1∋ − : 外 是 酶 联 ;
3 1∋
,
联 用 于 心血 管疾 病 骨 髓 以及 肿 瘤 造 影 新 的造 影 技 术
,
免 疫 分 析法 疫分 析法
3 91 ∋ ,
−
,
; 4 多 是 荧光 免
,
用 单 抗 造 影 诊 断首 先遇 到 的 间 题 是 许 多 如核 磁 共 振 0
ΡΞ
,
Θ 1∋
−
。
从 发展 趋势 来看
采 用非
、
Α − 超声 及
、
放 射 性标 记 的 单 抗 诊 断 试 剂 更具 有工 业 化 生
产 的应 用 价 值 贵 的仪器
,
。
计算 机 断 层 扫 描
− 等 正 在 取代 传统 的 核
, ,
这 是 由于
.) !
1 Α
Ν ,
∋ 需
用复 杂 昂
子 造 影 技 术 Μ 其 次 使 用 单 抗 的放 射 性 造 影 术
还 要 处 理 和保 存 具 有潜在 危 险 的
。
在 处 理 固体肿 瘤 时 可 能 有 严 格的 限 制
。
核子
,
放 射 性物 质
∋ 5 Η∃ # )+
( ,
#
,
公司 已
。
照 相 机 灵 敏 度 太低 而 没 有 实 用 价值 此 外 如
开 发 了 一 种藻 类 的 衍 生 物荧 光 藻胆 色 素 蛋 白
何 能 获 得 对 组 织 具 有 高 度 特 异 性 的 各种人 源 单抗 也有 困 难
三 −治 疗
。
的天 然 染 料 用 作 Θ 1∋ 中 的高 敏 指 示 剂
,
粒
度 计数 免疫分 析
∋Β Δ
Η ∋ 一 Ρ1 ∋
− 是另 一 种 较 新
,
的 使用 乳胶 凝 集 的 非 同位 素技 术
由 比利 时
,
单抗 作 为 治 疗剂 的应 用 面 相 当 大
,
,
。
目前
+ %
#
≅∋
公司 推 出
! Β
,
具 有 较高 的灵 敏 度
,# % Β #
临 床 上 使 用 单 抗 治疗 白 血 病 和 淋 巴 瘤 已 有 相 当好 的 疗 效 将来 除 了治疗 癌 症 外 还 可 用 于
细菌
、
该 技术 可 能 成 为 一 套 完全 自动 分析 系统 的 基 础
。
Ρ ! ∃∃% ∗
Φ 缸) #
# Α
Ε
公 司 正 在开 发
1∋ −
,
病 毒 和真 菌 感 染
,
治 疗 自身 免疫 性疾
。
均 相 醉膜 免疫分 析 系 统 诊 断 试 剂 配套
。
3
可 与临 床
病
#
,
以 及 解 毒 和 清 除 各 种抗 原
Β Υ
目前 正 在 开
∃) Φ
#Β
发的是 药物 传 递 系统 /
,
。 ,
2
/
#
Ν ≅ Ν , (Ψ
使用 单抗 识 别 肿瘤 杭 原 是 各 国 科学 家 都
在进 行 研 究 的 重 点 之 一
希 望 能 直 接 从血 清
,
传 统的 癌 症 化 疗 药 物都 具 有 细 胞 毒 性作
用 严 重 限制 了 其 应 用
,
。
或组 织 中测出 癌 症 的迹 象 及程 度
・
而 以往 用
为 此 人 们 设 想 将这
,
。
病理 学 的方 法 只 能 鉴 别 癌 与 正 常 细 胞 的 差
异
。
些药 物 偶 联 于 诸 如抗 体 之 类 的 载 体 上
一
不久
要 检 测 肿 瘤专 一 性 的 细胞 表 面 抗 原 是 很
,
将来 单 抗 药 物 传递系 统将 首 先应 用 于 传 送 细胞 抑 制剂 以 治疗 白血 病
也是令 人 注 目 的
。 。
困难 的
而 且 绝 大部分 癌 的抗 原 在 正 常 细 胞
。
利用 这 一 系统 传
中也 有 表达
因而
。
,
癌症 的 单抗诊 断试 剂 的
递抗 生 素 直 接作 用 于 感 染 的 特 定 部 位 的设 想 然 而 长 远 目 标 是使用 单 流
,
商 品化 进 展缓 慢
家 庭 用 的 单抗 免疫 诊 断 试 剂 盒 已成 为 许
多公 司 的发 展 目标
,
,
。
传送 基 因 至 缺陷 细 胞 中
障碍 之 类 的疾 病
,
。
以 治疗 如 糖 原 贮 存
Σ% Β
∀
Β #
9
的人 绒 毛 膜促 性腺 激素 Ε
可 用 于 家 畜 的人 工 受 精
。
ΡΤ
−单 抗 妊 娠 试 剂
,
,
∗# ( 公司 Β
技 术 关键
在 于 需 要 一 个 载
, 。
体分 子 它 既 能 选 择 性 地 和靶 细胞 连 接 又 能
和 一 个 能 杀 死 靶细 胞 的药物 共价 结 合
、 、 。
盒 使用 方 便 可 测 定 排 卵 时 间 控 制生 育 还
载体
,
分 子 可 以 是 抗 体 植物凝 集 素 多肤 激 素 或 具
组 织 特 异性 的 分 子 曾进 行 这 方 面 的研 究 但
,
单 抗 用 于 微 生 物感 染 的诊 断 具 有 可直 接
从病理 组 织 或 痰 中快 速 进 行鉴 定 的优 点
很 有前 途
。
是
未获 成功
一
,
。
但 也 有二 个理 由使 信 心 增加
,
第
Ν ≅
Φ%
和 1
Υ ∃ !
ς
二家 公司 早
杂 交 瘤技 术 可无 限量 地 生 产 具 特 异 性 单
国 外药学
一 4Λ 一 7
— 合成药 生
、
化 药 制剂分 吸
、
Μ 杭 包 括 对 肿 瘤或 组 织 的 特 异性− 第 二 某 些
,
的人 源 单 抗 都 可能 被 病毒 所感 染
病 毒 还 有 致 癌性
主 要障 碍 是
4
Ο
,
另外 3.
细 菌 和 植物 毒 素 的毒性 极 大
,
有可 能 弥补 只
。
。
有 少 量到 达 靶 细胞 的 不足 之 处
一
白喉 毒素 和
大规 模 工 业 化 生 产 有治 疗 价 值 的 单 抗 的
Χ
蓖 麻 毒素是 迄今 该 系 统 单 抗 毒 素 − 在 体 内 外 研 究 中最 佳的 毒 素 合 以下 要 求 用Μ
Χ
。
因 为这 两 种毒 素 都 符
难 以 鉴 别 合 适 的 抗 原 决定 子 以 及 开
。
− ∃ 传送 至 靶 细 胞 表 面 后 能 起 作 − : 到 达 靶细
发相 应 的单 抗
7
Ο
− 7 结 合 到 抗 体后 特 别是分 离 的 毒 素 ∋
。
缺 乏 开 发人源 单抗 的能 力 以 减 少 对
。
链− 非 特 异 性 细 胞 毒 作 用 很 少 Μ
外 源 蛋 白的 不 良免疫 反 应
:
Ο
胞 后 作用 特 别强 应
Θ
。
抗 体 毒素 传 递 系 统 作 为
,
一
许 多 抗 原 决定 子 的特 异 性 在 各 种疾
,
,
治 疗 用 的最 大 限制 可 能 是 使 病 人 引起 免疫 反 由 单抗 本身 产 生 的 免 疫 反 应
,
病 间 甚 至 个体 间都 有差 异
抗 原不是 按 预 期
。
也许要
的方 式 表 达
Λ
Ο
,
而 以 简 便 方 式 和 单 抗 相结 合
。
用 能 识 别 靶细胞 上 不 同 决 定 簇 的 Θ % ∗
或 大学
用 大量 的细胞培 养 法 或 重 组 / 0 ∋ 法 新 治疗 方 法 和 药 剂 的 开 发 存 在 法 规
, 。
∗ %
7
抗 体 片 段 来 克服
一 ,
。
虽然
≅ ( % ∀ Ζ! Β
+
大 规 模 生 产 单 抗 的 技 术未 过关
=
Ο
已 使 用 人 鼠 单抗 能 暂 时 或 部 分 地 控 制 白 血
病 和 淋 巴瘤 但有 一 系 列 问 题 尚 待 研 究 例 如
单 独 用 单抗 治疗 某 些 恶 性 肿瘤 或 疾 病 的 可 能 性 Μ 是 否 需 要 其 他 免疫 活 性 细 胞 作 为 辅 佐 Μ 对
,
性 问 题 包 括 要 求 相 当长 时 间 的 临 床 试 验 等
四 − 免疫 亲和 层 析
亲 和层
析 的 作 用 是 利 用 抗休 抗 原 或酶
一
Ψ
抗 体 构 型 和 亲 和 性 的 要求 Μ 抗 体剂 量 和 对 正 常 免疫 系 统 的 影 响 等 从 而 建 立 用 单 抗 毒
,
抑 制剂 系 统 中的 不 同生 物特 异 性亲 和力 的 配 位 体 共 价 偶 合 于 固 体底 物 骨 架 上
,
一
应 用时 仅
,
素 ∋ 链 结 合 免 疫 毒 素 − 治 疗 人类 恶 性 肿 瘤 的 新理论
。
与 配 位 体有亲 和力 的成 份 才 被 吸 附
其它 成
研 究人 员 目前 还 正 在 研 究 脂质 体 与
。
份被 洗 脱
。
吸 附的 成 份 通 过 改 变 5 6 或 盐 浓
。
单 抗偶 联 的 药物 传 递 系 统
4ϑ Κ7
度 被 洗脱 下 来
年
≅ ( % ∀ Ζ! Β +
大 学 医 学 中 心首 次 报
利用 单 抗 的 亲 和 层 析 产 品 在许 多 方 面 都
道 用 单 克 隆 抗 基 因 型 抗 体 成 功地 治 疗 了 一 位 晚期 淋 巴 瘤 患 者
。
有 市 场 潜力
4
Ο
Χ
Ψ
虽 然 在 某 些 治 疗 中 单抗 似
。
制药 学
一 主 要用 于 干 扰 素
Ψ
、
生长 激
。
乎相 当 安全
,
,
没 有 常 规 抗 血 清 存 在 的 污 染抗
。
素 和尿 激 酶等 多 肤 成 份的分 离 或 纯 化
7
Ο
体 等 问题 但 也 有 不 期 望 的 交 叉 反应 发 生 非 人源 性 的 单抗 也 是 一 个 问 题
或预 防肝 炎
,
、
食 品 加工
。
将来
,
人源 单
、
化 合物
例 如 在 生 产 啤酒 和 白 酒 时去 除 有 害
化 学处理
一 去 除 毒性 物质 或 有 害
用于 酶 的纯 化
。
抗 的 主 要 用 途 可 能 是 取 代 抗 肝 炎 血清 来 治 疗
治疗 癌症 自身 免疫 性疾 病 破
。
的酶 等 −
: Λ
Ο Ο
伤 风 和 鉴 定 Α 6 血型
据 报道
,
通 过 病人 的
,
治 疗用 途
淋 巴 细 胞 与人亲本 骨 髓 瘤 细 胞 的 融 合
腺 肿 病 的 自身抗 体
,
经组
5
#Υ
。
( )Δ
Η %
Ε # Β # , ),
— 治疗 性 单 采 # % Β Ψ — 体外 血 液 和细胞 的解 − 即
ΞΕ
,
、
织 培 养 可 产 生 对 重 症肌无 力 症 和 突 眼 性 甲状 然 后 再 制 备 能 识 别 自身
,
毒
应 用 连 有 补 体 或偶 接 药物
。
毒素 的抗 体
可 增 加 此 疗 法 的疗 效
白血 病 也 可 用 自体移
抗 体 的 基 因 型 决 定 因子 的 抗 体 疗 上 述 疾病 是 有效 的
有用 的
,
。
。
这 种抗 体治
植 方 法 来治疗 保 存 部分 骨 髓 样 的杀 伤
,
,
即在 病 人病 情 缓解 时 收 集并 然 而用 大 剂 量 的化 疗 和放 疗
,
此外
,
,
单 抗 对于 检 测 除 了 技术 上 难度
一
,
多 态型 抗 原 如人 白细 胞 抗 原 6 9 ∋ − 也 是很
在生 产人 单 抗 时
杀死 所 有的癌 细 胞 时
正 常 细 胞 也受 到 了 同
。
最 后再 将 保 存 的 骨髓 经 单 抗等 处 单 抗 的作 用
4Λ:
外 无 论 从杂 交 瘤还 是 由
4 招?
3 .
转 化细 胞 产 生
理
去 除 白血 病 细胞 后 重 新植入
年第 Κ 卷第 : 期
主要 是在体 外特 异 性地 去 除癌 细胞
是
大
Χ
。
单杭 在 医药领 域 中的 应 用 具 有 以 下 三 个
特点
Χ
单抗 大 量 用 于 免疫 亲和层 析 的 主 要 障碍
4
,
Ο
4
Ο
高 度 专 一 性Μ
:
Ο
7
Ο
易 于 生 产 技 术 简单
。
,
,
用 于 免疫 亲 和 层 析需 要的 单 抗 量 很
。
重 演 性好 Μ
有大 规模 生 产 潜力
因 此 用 重组 / 0 ∋ 法 以 降低成 本 就 显 得
7
Ο
但是
同质 的
,
,
从 某 一 个 克 隆来 的 所 有 抗体 都 是 由 于 单 抗 结 合 于 抗 体的单 一
,
特 别 重要
因此 它 们 可 能均 具 有 弱 的亲 和 力 或
,
纯 化 条 件 苛 刻 要 求 吸 附在 柱 上 的 化
,
,
差 的生 物 活 性Μ
,
合 物 几 乎 以 纯 净 的 形 式 从 柱 上洗 脱 下 来
洗
部 位 因此 不 能形 成 晶 格 而 在 诊 断 用 途 中
晶 格对 于 凝 集 和 沉 淀 活 性 都 是 必 要 的 子 的 不 同 部位 来 加 以解 决
! 见表 4
。
脱 液的
56
或 盐 浓 度要 求很 高
,
。
,
这 可 通 过选
,
虽然
择 一 种不 会 形 成 强 键 的 抗 体 洗脱 下 来加 以 弥 补
一 种 切 换单 抗
:
Ο
使组份 较 易 被
这 也 可 以 通 过 几 个 抗 体 的棍 合物 导 向 同 一 分
) # 6 Ν ∗ Β ( 山 公司 开 发 了
“
”,
’
即 它 的 亲 和 系数 可 随 5 6
,
。
单 抗 在 医 药领 域 中 的 应 用及 商 品 化 情 况
表
7
的 微小 变 化而 变 化 洗脱 条 件 不 苛 刻 烦
。
用 于 人 体治 疗的 药 品 的批 准 手 续 麻 剂
4
Ο
为美 国 已批 准 生 产 的 单 抗 诊 断 试
。
表
用
4
Ο
单抗 在 医 药 中 应 用 及 商 品 化 情 况
应 用 方
法
途 …
4
+ !
.
、
体外 诊 断
− ∃ 免疫 分 析
肾上 腺 促 皮质 激 素 醛 固酮 血 管 紧 张肤
%∀
、
、
、
血 液贮 存 . ∃ !
Ψ
凝
集
ς )∀ 2
− 人 绒毛 膜 促 性 腺 激 素
、
、
Ε Ρ6
、
−
、
Τ
、
#,
( )∀
、
凝固
、
扩 电
Α 1∋
3 1∋
散 泳
因 子 皮 幽醇 雌 三 醇 铁 蛋 白 叶酸 盐 胰 岛素 澳大利 亚 抗 原 人生长 激 素 Ε
、
、
、
卵 泡刺 激 素
、
Τ 6
− 免疫 球蛋 白 促黄体 生成
、
激 素 甲状 旁 腺素 肾素 治 疗 药 物 监测 庆 大
、
、
、
、
妥布 以 及 其 它
氨 基 醋 试类 抗生素 地 高 辛等 − 促 甲状 腺素
、 、
Ξ ≅6
−
、
甲状 腺
Θ 1∋
3 1∋
素 几− 三 碘 甲状 腺原 氨 酸 幻 特异 性 免 疫 分 析 [ 血 清学 测 定 瘤
4−
、
、
Ξ:
−
、
Φ .
7 4
Η∋Η−
、
癌症 癌 胚 抗原 甲胎 蛋 白 前 列 腺 酸磷 酸醋 酶
、
、
人瘤 胎 神
、
经 抗原 遗 传型 抗 原 肺 癌 结 直肠 癌 人 乳房 癌 细 胞
、
、
、
、
黑色 素
.
7−
Β ) Υ ς ( 氏淋 巴 瘤
和其 它 淋 巴细胞 恶性 瘤
,
、
1
。
样 抗原
组 织相 容 抗 原多 晶 型测 定 和 组 织 排异 标 志 在 器 官移 植
中的 组 织 配型 遗 传 咨询 与 人 白 细胞 抗 原等位 基 因有 关 的 疾
病如 值 直 性脊 椎 炎 等 − , − 免 疫溯 节
Ξ
淋 巴 细胞 抗 原
、
.
淋 巴 细胞 抗 原 单 细 胞 抗原 核
、
、
Λ − 感染 性 疾 病 抗 葡 萄球菌抗 体 布鲁 氏杆 菌 狂 犬 病 毒 沙 门氏 菌 性传染
、
、
型 病 衣原体 淋病 皿 疤 疹 梅 毒 − 链 球菌抗 原
、
、
、
、
:−
细 胞内 分 析
Π − 类 风关 因 子 一 仁− 测 定 游 动 精 子 中 Ω ∴ 染 色体 鉴 别 胚 胎性 别
、
招 − 动情 及 排 卵 的检 测
:−
检 测 牛 奶 或其 它 食 品 中可 能 存在的霉 菌 或 其 它 污染物
’− 代替 土 壤 试 验检 测 病 毒 和 其它植物原 体 的 检测 农作 物 的 成 熟度
一
4ΛΛ
一
国 外 药学
—合成 药 生 化 药
、
、
制剂分 册
表
用
7
Ο
续−
途
]
− 4
应
肿 瘤 和 转 移 的放 射性造影 影
用
方
法
开 发情 况
研 究 与 开发 需: 年
,
体内 造影 诊 断 治序 剂
核造 影
上市
上市
:
Ο
识 别 淋 巴 细 胞 抗 原 的 单 抗 免疫 抑制 移植受 体 或处 理 受
无
无
研究 和 开发 需⊥
:年
Ο
− ∃ 免疫 治 字
穷 −
体 的 自体免疫 性
7
药 物 释 放系统
− 治 疗 细 菌或 病 毒 的 感 染
早期研究
: − 体 内 中毒 或药 物中毒 的 解救 幻 治疗癌 症 , − ∃ 单 抗 与 毒素 ∋ 链 的 结 合 抗毒素− 与 蓖 麻 毒 素和 白喉
毒素 结 合
7−
卜 与 月 质体 的结 合
,
− ∃ 抗 干 扰 素 的单 抗 − 用 于 蛋 白质 纯 化 的单 抗
、
、
亲 和层 析 无
,
, − 微生物 细 胞 产物 和 合成化 合物 的分 离 纯 化 及 浓 缩
侈 − 从 肿 瘤 细 胞中 分 离 出 正常 红 血 球生成 干 细 胞
组 骨 髓 的疗 法
用 于重
表
公
∋∗∗
〕(
7
美 国 已 批 准 生 产 的 单 抗 诊 断试 剂
诊 断项 目 分析 方 法
3 1∋
司
,
( 9
!
%
∗
Η∋ Η
前列 腺癌 的诊 断 −
12 3
∋ ∃∃# Β 2 # ∀ .
%_
!
( )Δ
, #∀ !
总 1 3 特 异性 2 ,
∃
卫 1∋
Α 1∋
(# Β
一
Ξ
. ) Τ
#∀ #_
一
Φ % Β
%
临 床 分 析−
1, 7= 12 3
Ε ΡΤ Ε ΡΤ
妊娠 −
乙肝 −
Ε ΡΤ
,
Α 1∋
仁% Β ( # Β Ρ#∀ ( !
Σ
∀
已 ∃∃ # #
免 疫放 射测 定
Α 1∋ Α 1∋
# ! Β
6 . ,∋Τ
/ )% 2 ∀ !
, 铁 蛋 白 维生 素 . 份 贫血 −
6
Ν∗
Β
)( # Ε Δ
铁蛋 白
,
,
12 3
,
Η∋Η
免 疫 放 射 测 定 [ 3 Β∋
Τ Ε
1
Υ
6
,
Ξ≅6
催 乳激 素 . [ Ξ 细 胞
免疫放射 测 定 [ Θ
Θ 1∋
1∋
∃ ς
∀
!
支原体
⎯
或免 疫过氧 化 酶
&
!
Ε∀
! ,
&
!
Ε∀
! ,
∀
Β Γ ( ! Ε −
抗
Ξ Ξ
Δ
:+
补 体
结合−
凝 集 作用
流 动 细胞 计
Α 1∋
细胞
‘
%
!
∃∃)∀ #
∀ ! #
ςΒ + ( !
%
∃∀
∃ ∋ ∀ ( ∃∗ Δ ,+ )# ,
Ε ΡΤ ΕΡ Τ
酶 连 免 疫吸 附法 试管
3 9 1≅ ∋
−
!
Β
2
%∀ ! ∀
#
≅
Ξ
Ν∀ (
# #
# _
.
Φ %
##
ς
压∀
茶
( )! ∀
%
碱
荧光 显 微 镜 家用−
≅Ν
# α ∃! ∀
−
%
支 原体
∃ Ε ΡΤ
Ε
∀
#
1 ∀ (# Β ∀
四
、
单 克 隆抗 体 的 开 发 情 况
。
试 剂 以 及 用 于 研 究 的 各 种 单抗 试 剂产 品
、 、
。
正
∋∗∗ ! ( 9 (
原 Ρ3
∗ % 已 上 市 前 列腺 癌 及 癌 胚 抗 ∋ − 单 抗 诊 断 试 剂 Ρ3 ∋ 可 用 来 监 测 肿
。
在 开 发癌 症 免 疫缺 陷 性疾 病 感 染 性 疾 病 以 及 细胞 表 面 抗 原 的诊 断 试 剂 用
. /
一
。
癌 症 和 免疫 缺
。
瘤 以 及 治疗 后的 情 况
.# ( ∀ / )ς Δ ! Ψ Δ
4 ϑΚ ?
目 前 正 从事 于监 测 药
。
陷 性疾病 的单 抗 治疗 剂 也 正 在 研 究 之 中
使
。
物 浓 度 和纯 化 单 抗 的 研 究工 作
单 抗治 疗 淋 巴 细 胞 瘤 已 初 告成 功 从
! , )
∀
上 市 了脑 膜 炎 的 诊 断
免疫 体 中 定 量 测 定 活 化的 Ξ 细 胞 的单 扰 正 在
4拐
年 第 Κ 卷第
:
期
申请 批 准
。
递 系 统 以 及免 疫 亲 和层 析 的 单 抗
# ,#
. Ζ (# Ε Α ! Δ
Β Ε % Δ
。
9% ∗
,
已 上 市 了 :;
ΒΒ
Γ
Δ ∀ 眼
#∀
与 ≅Ν ∀ ( # _ 公 司 目 前 正 在研 究
。
多 种 研 究 用 的 单抗 试 剂
细 胞 巨 大病 毒
∀
目前 正 在 开 发 用 于
∀ 3 Η, ( # ) . %
一 ,
癌 症 诊 断 试 剂 和 治疗 剂
Τ
# ∀ #( # )
Ρ
、
β −
、
病毒
≅ Ν , (#
,
,
和 ΡΥ
((#
Β
公 司正 在 用
,
卜 和 黄 曲霉 素 的诊 断 鉴 别 试 剂 该 公 司 与∋ α
单 抗 研 究 假 单胞 菌 前 一 公 司 用 于 诊断 后 一
公 司用于治 疗
6 Ν∗ ) Β (
, 。
Ο
( !
。
! ) 和 Θ Υ 泣 ς 公司 一起 开 发 用 于 人 α
。
体癌 症 的单 抗
还 与 上 海 肿瘤 研 究 所 共 同协
Μ
作 多 种 癌 症 的诊 断 和 治 疗研 究 工 作
并正 与
商之 一 上 市 品 种 有 乙 型 肝 炎 妊 娠 贫 血 甲 胎 蛋 白 ∋ Θ Η − 促 甲状 腺 素
、
Ε Δ #
。
是 生 产诊 断用 单 抗 的最 大 广
、 、 、
# Δ
∃Ζ ∃% Υ Β
Β + Δ Η! Υ
(,
, ( 公 司 共 同开 发 用 单 抗 纯
。
Ξ ≅6
− 和 癌症 等
,
化 . 细胞 生 长 因子
.
! !
的诊 断 试 剂
Ε
目前 正 在 开 发体 内 造 影 剂
、
主
和 # ∃
#
(# #
共 同开 发 上 市 的 有 分
。
要用 于 结 肠 癌
白血 病 和 黑 色 素瘤
”
。
开发 用
,
析 甲胎 和 干 扰素 的 单抗 试 剂 抗 的研 究 工 作 正 在 进 行
Ρ # ∀ (! ! Δ Β
。
监 控 繁殖 的单
于 放 射 性 同 位 素 或 细 胞 毒 素 的单 抗药
物 传 递
系统
Ξ
!
,
研 究 切 换抗 体 用 于 免 疫 亲 和 层 析
和 . % ς # Β 1∀ , (Β Υ
,
。
“
上市 了 乙 型 肝 炎 和 狂 犬 病 的
,
) ∀ 与 Ξ # )) 公 司达 成 关 于 免疫 毒 素的 协 议 Μ
Ν! ≅ ! + %
#∀
与
,
诊 断 试剂
。
目前 正 在 开 发 癌 症和标 记 免疫 反 测 定 心 肌梗 塞 和 干 扰 素水 平
。
(,
公司 分
∋Δ # ,
应 的诊 断 试 剂
别 达成 了 关 于 诊 断 试 剂的 协 议 和 与
#
的 体 内诊 断 试 剂 以 及肝癌 诊 断 试 剂
诊 断卵
+) % Δ ∃
,
达 成 单抗 试 剂 的协议
Δ ! ∃! ∀
%
巢 癌 和 胃肠 道 癌的 试 剂将 由
,
、
Α ! Δ
# Ε 公司上
Ρ 公 司 正合
! ∀
∃ ∋
∀
# ()∗ ! + α ,
公司 已 上 市 了
。
Ο
市 用 于 治疗 癌 症 细 菌 及病 毒感染 的单 抗产
品 也 正 在开 发
/
!
。
儿 种妊娠 诊断 试 剂 和 一 种排 卵 测 试 试 剂
在研 究治 疗 用 和 层 析 用的 单 抗
0#χ 3
∀
。
正
Ρ # (Γ ∀ Ρ
Β !
与
。
Θ
资 进 行癌 症造 影 方 面 的研 究
!∀
2 ∃%
∀
+ 0
# Υ#∃ % Β
是能 大量 提 供
。
. Ζ (# Ε ! Δ
公 司致 力 于 发 展 杂 交
。
层 析 和 诊 断 研 究 用单 抗 的 厂 家
,
产 品 可用 于
瘤 的 大 规 模培 养技 术 以 生 产 成 本 低 廉 的诊 断
用
、
# ! − 血 液 与组 织 的 配 型 试 验 区 别 髓 样
治 疗 用 和 传 送 药物 用 的单 抗
。
为 . 细胞 还 提供 用
与 . [ Ξ 细 胞 亚 细胞 蛋 白的 亚 类 种 单抗 试 剂
。
。
≅Υ ∗ , #
− ( 和 鉴 别 免疫 球
淋 巴瘤 的 病人 提供特 异 性 的单抗 于 纯 化 干 扰 素 的单 抗
Τ # ∀ # () Δ
。
目 前 已 上 市 可监 控 茶碱 量 的 一
,
勿
∀ ∀
, (#
,
与 ≅Ν ∀ (# _
公司 共 同
、
Γ Β Ε 。 已 上 市 风 疹的 诊 断 试 剂 (
用 来鉴
。
上市 了 9 # Ζ 2 ! 试剂
。
) # % Β 氏病 和 衣 原 体病 的 诊 断
Φ 以
别 淋 巴 细胞
,
并 生 产 衣 原 体诊断 试 剂
。
目前
正 在 研 究 呼 吸 道 疾 病病 原 体 Ρ
,
、
正 在 研 究 将 单 抗 用 于 诊 断 类 风 湿 关节 炎 和 用
及 性病 的诊 断试 剂 以 及用 于 治疗 剂 药物 传
作 免疫 抑制 剂
叶 绿素 衍 生 物 在 医 药 上 的应 用
胡龙 勤 综 述
许德余审
在过去 的 一 个 半世 纪 内
,
叶 绿 素及 其 在
,
。
叶 绿 素 及 其衍 生 物 治 疗 动 物 实 验 性 贫 血 取 得
植 物 生 命 中 的 作用 曾经 是 广 泛 研 究 的 课 题
满 意的 结 果 后
,
不 久 又 发 现 叶 绿 素衍 生 物 除
,
,
但 它在 医药 上 的应 用 则始 于 二十 年 代
4Λ Π
自用
能 促 进 造血 功 能 对 贫 皿 有 治疗 价值 外 还 具
国外 药 学
— 合 成 药 生化 药
、
、
制 剂 分册
单 克 隆抗 体 应用 的现 状 与发 展 趋势
陶 小华编译 唐 茂椿 谢
弘 审校
一
、
前言
! ∀ ! #∃ ∀ !
步纯 化
∗ & % ∋ ∀ ()
。
此 法 简 便 易 行 不 需 特殊设 备 巨抗
, 。
,
单 克 隆抗 体
+ !
)# ,
,
简
体 滴 度 较高
其它 产 物
,
缺 点是难 以 除 净产 品 中混 杂 的
3
、
称 单 抗 −是 一 类 由单 克 隆 的 . 淋 巴 细 胞 如 单
克 隆 的 . 淋 巴 细 胞 杂 交瘤 细 胞 − 分 泌 的 能针
,
如 1 2
,
热 原 物质 和 动物病 毒 等
。
,
且费 用 昂 贵
难 以大 规 模 生 产
,
对 单 一 抗 原 决 定 簇 的抗 体
,
。
近 几 年来
,
单抗
,
、
工 业 化 的 生 产方 法 有
− 4 大型 发 醉 罐 深
技 术获 得 了 飞 跃 发 展 并渗 入 到许 多领 域 可
以 认 为 单 抗 是 目前 唯一 具有近 期 效 益 和 开 发
层 搅 拌培 养法
、 、
发 酵 罐 配 有 自动 测 定 细 胞 密
。
度 温 度 5 6 和 氧 含 量 的设 备 以 及 自控 气 流 量 消泡 和 搅拌 速度 的 微 机 控 制 仪器
, ,
前 途 的 生 物技 术 产 品
二
、
。
− 7 微
基 本 原理 及 生 产 方 法
,
囊法 是 一 种较 精巧 的方 法 选 用 适 当 的包 衣 材 料 给 杂交 瘤 包 9 半 透 膜 脾脏 的 . 淋 巴
, ,
8
一 −基 本 原 理
,
该 膜 可 通 过细 胞
,
正 常 小 鼠用 抗 原 免 疫 后
的 营 养 物 和 代 谢 物 截 留大分 子 蛋 白质 经 破
壁 分 离 提 取单 抗
。
细 胞 浆细 胞 − 将产 生 特 异 性 抗 体
但 这些 细
,
使 用 后 的杂 交 瘤细 胞 可 重
,
, 、
胞 在 体 外 不能 长 期 存 活
,
。
为 了 能 使这 些 细 胞
、
复套 用
,
。
− : 中 空 纤 维培 养 法 利用 相 近 原 理
; 种
种
在 体外 长 期 生 存 并 利 用 其 产生 抗 体 可 将 免 疫 脾 细 胞 与能 无 限止地 培 养
的 小 鼠骨 髓 瘤细 胞 进 行 融 合
,
选 用直 径 约 7 ; 维 外包 = > ? ; =
具 半 透 膜性 质的 中 空 纤 厚 的 海棉 状 材 料
, ,
但不 分 泌 抗 原 形 成 既 具有 免
,
上千
根 长纤 维 整 齐 排 入 培养 筒
向 纤维 中 空 内腔
,
疫 脾 细胞 分 泌 特 异 性 抗 体 的 能 力 胞 杂交 瘤
,
又 有 使恶
和 纤 维 间 的 外 空 隙 灌 注 营养 液
杂 交瘤 细 胞
。
性 肿 瘤细 胞 迅 速 无 限制 繁殖 特 性 的 . 淋 巴细
经 筛 选后 克 隆 化
,
则生 长 于 纤 维外 的海 棉状 材 料上
半 透 膜 不 断 输入 新鲜 营养 物 质
,
通 过纤 维
。
然后 进 行 大量
,
并 排 出 代谢
最
。
培 养 或 接 种 到 同 系 小 鼠腹 腔 内
培养液
、
腹
,
产物
,
使 细 胞 始 终保 持 适 宜 的生 长 条件
水 或血 清 中 就会 产 生 大 量高 滴 度 的 特异性 抗
后 直接 从 培 养 筒 内收集 并 分 离单 抗
此外 还
体 这 就 是 小 鼠
单克 隆抗 体 也可 以生 产 人源 单 克 隆抗体
,
。
根据 其 原 理
有 利 用 乳 剂作 载 体 的 培养 法 以 及 体 内外 结 合
、
大 鼠 单克 隆抗
的方 法 等 抗
,
。
体 人 小 鼠 单克 隆抗 体 等
二 − 生 产 方 法 简介
、
一
。
目前 正 在 探索 用 基 因 工 程 技 术 生 产 单
即 用 / 0 ∋ 重 组技 术
,
。
该 法 比任 何 方法
目 前 大 规 模 生 产 单 抗的 方法 主 要 有 体 内
更优 越
更经 济
,
。
单抗 作 为 治 疗剂 或 纯 化药
。
接 种 法 体外 细 胞 培 养 的 发 酵 罐法 微 囊法
中 空 纤 维 培养 法 以 及 重 组 / 0 ∋ 法 等
。
、
、
、
物 的 前景 可 能 取 决 于 能 否 广 泛 采 用 重 组
/ 0 ∋ 技术
特 别是 生 产 人 源 单 抗
体 内接种 法是 实验 室 规 模最 普遍 采 用 的 方法
,
三
、
应 用 现 状 和 发展 趋 势
≅ Α 1 1 ∀ (# Β ∀
# %
即 接 种 杂 交 瘤 细 胞 至 鼠 或 其 它 动 物−
,
的 腹 腔 或其 它 脏 器 如 牛 羊 的 子 宫 −
时 间后 收集 腹 水 或其 它 体 液 即 得
玲川 年 第
吕卷 第 :
,
经 一段
亦可 进一
材料来 自
/
∃! 2 Ν Ι Η+
( )! ∀
,
%
Χ ∃
. )! ( # Ε ∀ Δ
!
如 2 )Δ ∃ %
Γ目
Φ #
#
∃
Η Γ
∀ ( 一Ι
一
Η
,
! (
Η
Ο
4ϑΚ=
Η: Κ > Λ Κ Μ . )! ( # Ε ∀ Δ
%
(# 4 ϑ Κ :
?4> Κϑ
—
编者
期
4Λ4
一 − 体外 诊断 试 荆
有 诊 断 支 原 体 的 单 体 试 剂 上市
,
。
目前 还 有 许
单 克 隆抗 体 具有 高 度 的 生 物 特 异性 作诊 断 试 剂 具 有 极 高 的 选 择性 和灵 敏 度
前 尚无 其 他 方 法 能 与其 匹 敌
它 不 但 可 以 无 限量 生 产
,
。 ,
用
目
多公 司在 大力 开 发性 病
、
.
型 肝 炎和 呼 吸 道
感染 的 单 抗 诊 断 试 剂
。
尤 其可 取 的 是
二 − 体 内 诊 断 试 荆 试 药−
而 且 产品 的 免 疫 化
,
单抗 可 以 引 导 同 位 素 至 体 内 特 定 部 位
据 此 有可 能 发 展 单抗 的 造影 诊 断
为 Ω 线 诊 断 的 辅 助方 法
,
、 ,
,
学性 质完 全 相 同
Π;
。
估计 可 戈
。
在采 用 单 抗 试 剂 的 免 疫 诊 断 方 法 中
,
,
或 与其 它 造 影 剂偶
务 是 放 射 免疫 分 析 法 Α 1∋ − : 外 是 酶 联 ;
3 1∋
,
联 用 于 心血 管疾 病 骨 髓 以及 肿 瘤 造 影 新 的造 影 技 术
,
免 疫 分 析法 疫分 析法
3 91 ∋ ,
−
,
; 4 多 是 荧光 免
,
用 单 抗 造 影 诊 断首 先遇 到 的 间 题 是 许 多 如核 磁 共 振 0
ΡΞ
,
Θ 1∋
−
。
从 发展 趋势 来看
采 用非
、
Α − 超声 及
、
放 射 性标 记 的 单 抗 诊 断 试 剂 更具 有工 业 化 生
产 的应 用 价 值 贵 的仪器
,
。
计算 机 断 层 扫 描
− 等 正 在 取代 传统 的 核
, ,
这 是 由于
.) !
1 Α
Ν ,
∋ 需
用复 杂 昂
子 造 影 技 术 Μ 其 次 使 用 单 抗 的放 射 性 造 影 术
还 要 处 理 和保 存 具 有潜在 危 险 的
。
在 处 理 固体肿 瘤 时 可 能 有 严 格的 限 制
。
核子
,
放 射 性物 质
∋ 5 Η∃ # )+
( ,
#
,
公司 已
。
照 相 机 灵 敏 度 太低 而 没 有 实 用 价值 此 外 如
开 发 了 一 种藻 类 的 衍 生 物荧 光 藻胆 色 素 蛋 白
何 能 获 得 对 组 织 具 有 高 度 特 异 性 的 各种人 源 单抗 也有 困 难
三 −治 疗
。
的天 然 染 料 用 作 Θ 1∋ 中 的高 敏 指 示 剂
,
粒
度 计数 免疫分 析
∋Β Δ
Η ∋ 一 Ρ1 ∋
− 是另 一 种 较 新
,
的 使用 乳胶 凝 集 的 非 同位 素技 术
由 比利 时
,
单抗 作 为 治 疗剂 的应 用 面 相 当 大
,
,
。
目前
+ %
#
≅∋
公司 推 出
! Β
,
具 有 较高 的灵 敏 度
,# % Β #
临 床 上 使 用 单 抗 治疗 白 血 病 和 淋 巴 瘤 已 有 相 当好 的 疗 效 将来 除 了治疗 癌 症 外 还 可 用 于
细菌
、
该 技术 可 能 成 为 一 套 完全 自动 分析 系统 的 基 础
。
Ρ ! ∃∃% ∗
Φ 缸) #
# Α
Ε
公 司 正 在开 发
1∋ −
,
病 毒 和真 菌 感 染
,
治 疗 自身 免疫 性疾
。
均 相 醉膜 免疫分 析 系 统 诊 断 试 剂 配套
。
3
可 与临 床
病
#
,
以 及 解 毒 和 清 除 各 种抗 原
Β Υ
目前 正 在 开
∃) Φ
#Β
发的是 药物 传 递 系统 /
,
。 ,
2
/
#
Ν ≅ Ν , (Ψ
使用 单抗 识 别 肿瘤 杭 原 是 各 国 科学 家 都
在进 行 研 究 的 重 点 之 一
希 望 能 直 接 从血 清
,
传 统的 癌 症 化 疗 药 物都 具 有 细 胞 毒 性作
用 严 重 限制 了 其 应 用
,
。
或组 织 中测出 癌 症 的迹 象 及程 度
・
而 以往 用
为 此 人 们 设 想 将这
,
。
病理 学 的方 法 只 能 鉴 别 癌 与 正 常 细 胞 的 差
异
。
些药 物 偶 联 于 诸 如抗 体 之 类 的 载 体 上
一
不久
要 检 测 肿 瘤专 一 性 的 细胞 表 面 抗 原 是 很
,
将来 单 抗 药 物 传递系 统将 首 先应 用 于 传 送 细胞 抑 制剂 以 治疗 白血 病
也是令 人 注 目 的
。 。
困难 的
而 且 绝 大部分 癌 的抗 原 在 正 常 细 胞
。
利用 这 一 系统 传
中也 有 表达
因而
。
,
癌症 的 单抗诊 断试 剂 的
递抗 生 素 直 接作 用 于 感 染 的 特 定 部 位 的设 想 然 而 长 远 目 标 是使用 单 流
,
商 品化 进 展缓 慢
家 庭 用 的 单抗 免疫 诊 断 试 剂 盒 已成 为 许
多公 司 的发 展 目标
,
,
。
传送 基 因 至 缺陷 细 胞 中
障碍 之 类 的疾 病
,
。
以 治疗 如 糖 原 贮 存
Σ% Β
∀
Β #
9
的人 绒 毛 膜促 性腺 激素 Ε
可 用 于 家 畜 的人 工 受 精
。
ΡΤ
−单 抗 妊 娠 试 剂
,
,
∗# ( 公司 Β
技 术 关键
在 于 需 要 一 个 载
, 。
体分 子 它 既 能 选 择 性 地 和靶 细胞 连 接 又 能
和 一 个 能 杀 死 靶细 胞 的药物 共价 结 合
、 、 。
盒 使用 方 便 可 测 定 排 卵 时 间 控 制生 育 还
载体
,
分 子 可 以 是 抗 体 植物凝 集 素 多肤 激 素 或 具
组 织 特 异性 的 分 子 曾进 行 这 方 面 的研 究 但
,
单 抗 用 于 微 生 物感 染 的诊 断 具 有 可直 接
从病理 组 织 或 痰 中快 速 进 行鉴 定 的优 点
很 有前 途
。
是
未获 成功
一
,
。
但 也 有二 个理 由使 信 心 增加
,
第
Ν ≅
Φ%
和 1
Υ ∃ !
ς
二家 公司 早
杂 交 瘤技 术 可无 限量 地 生 产 具 特 异 性 单
国 外药学
一 4Λ 一 7
— 合成药 生
、
化 药 制剂分 吸
、
Μ 杭 包 括 对 肿 瘤或 组 织 的 特 异性− 第 二 某 些
,
的人 源 单 抗 都 可能 被 病毒 所感 染
病 毒 还 有 致 癌性
主 要障 碍 是
4
Ο
,
另外 3.
细 菌 和 植物 毒 素 的毒性 极 大
,
有可 能 弥补 只
。
。
有 少 量到 达 靶 细胞 的 不足 之 处
一
白喉 毒素 和
大规 模 工 业 化 生 产 有治 疗 价 值 的 单 抗 的
Χ
蓖 麻 毒素是 迄今 该 系 统 单 抗 毒 素 − 在 体 内 外 研 究 中最 佳的 毒 素 合 以下 要 求 用Μ
Χ
。
因 为这 两 种毒 素 都 符
难 以 鉴 别 合 适 的 抗 原 决定 子 以 及 开
。
− ∃ 传送 至 靶 细 胞 表 面 后 能 起 作 − : 到 达 靶细
发相 应 的单 抗
7
Ο
− 7 结 合 到 抗 体后 特 别是分 离 的 毒 素 ∋
。
缺 乏 开 发人源 单抗 的能 力 以 减 少 对
。
链− 非 特 异 性 细 胞 毒 作 用 很 少 Μ
外 源 蛋 白的 不 良免疫 反 应
:
Ο
胞 后 作用 特 别强 应
Θ
。
抗 体 毒素 传 递 系 统 作 为
,
一
许 多 抗 原 决定 子 的特 异 性 在 各 种疾
,
,
治 疗 用 的最 大 限制 可 能 是 使 病 人 引起 免疫 反 由 单抗 本身 产 生 的 免 疫 反 应
,
病 间 甚 至 个体 间都 有差 异
抗 原不是 按 预 期
。
也许要
的方 式 表 达
Λ
Ο
,
而 以 简 便 方 式 和 单 抗 相结 合
。
用 能 识 别 靶细胞 上 不 同 决 定 簇 的 Θ % ∗
或 大学
用 大量 的细胞培 养 法 或 重 组 / 0 ∋ 法 新 治疗 方 法 和 药 剂 的 开 发 存 在 法 规
, 。
∗ %
7
抗 体 片 段 来 克服
一 ,
。
虽然
≅ ( % ∀ Ζ! Β
+
大 规 模 生 产 单 抗 的 技 术未 过关
=
Ο
已 使 用 人 鼠 单抗 能 暂 时 或 部 分 地 控 制 白 血
病 和 淋 巴瘤 但有 一 系 列 问 题 尚 待 研 究 例 如
单 独 用 单抗 治疗 某 些 恶 性 肿瘤 或 疾 病 的 可 能 性 Μ 是 否 需 要 其 他 免疫 活 性 细 胞 作 为 辅 佐 Μ 对
,
性 问 题 包 括 要 求 相 当长 时 间 的 临 床 试 验 等
四 − 免疫 亲和 层 析
亲 和层
析 的 作 用 是 利 用 抗休 抗 原 或酶
一
Ψ
抗 体 构 型 和 亲 和 性 的 要求 Μ 抗 体剂 量 和 对 正 常 免疫 系 统 的 影 响 等 从 而 建 立 用 单 抗 毒
,
抑 制剂 系 统 中的 不 同生 物特 异 性亲 和力 的 配 位 体 共 价 偶 合 于 固 体底 物 骨 架 上
,
一
应 用时 仅
,
素 ∋ 链 结 合 免 疫 毒 素 − 治 疗 人类 恶 性 肿 瘤 的 新理论
。
与 配 位 体有亲 和力 的成 份 才 被 吸 附
其它 成
研 究人 员 目前 还 正 在 研 究 脂质 体 与
。
份被 洗 脱
。
吸 附的 成 份 通 过 改 变 5 6 或 盐 浓
。
单 抗偶 联 的 药物 传 递 系 统
4ϑ Κ7
度 被 洗脱 下 来
年
≅ ( % ∀ Ζ! Β +
大 学 医 学 中 心首 次 报
利用 单 抗 的 亲 和 层 析 产 品 在许 多 方 面 都
道 用 单 克 隆 抗 基 因 型 抗 体 成 功地 治 疗 了 一 位 晚期 淋 巴 瘤 患 者
。
有 市 场 潜力
4
Ο
Χ
Ψ
虽 然 在 某 些 治 疗 中 单抗 似
。
制药 学
一 主 要用 于 干 扰 素
Ψ
、
生长 激
。
乎相 当 安全
,
,
没 有 常 规 抗 血 清 存 在 的 污 染抗
。
素 和尿 激 酶等 多 肤 成 份的分 离 或 纯 化
7
Ο
体 等 问题 但 也 有 不 期 望 的 交 叉 反应 发 生 非 人源 性 的 单抗 也 是 一 个 问 题
或预 防肝 炎
,
、
食 品 加工
。
将来
,
人源 单
、
化 合物
例 如 在 生 产 啤酒 和 白 酒 时去 除 有 害
化 学处理
一 去 除 毒性 物质 或 有 害
用于 酶 的纯 化
。
抗 的 主 要 用 途 可 能 是 取 代 抗 肝 炎 血清 来 治 疗
治疗 癌症 自身 免疫 性疾 病 破
。
的酶 等 −
: Λ
Ο Ο
伤 风 和 鉴 定 Α 6 血型
据 报道
,
通 过 病人 的
,
治 疗用 途
淋 巴 细 胞 与人亲本 骨 髓 瘤 细 胞 的 融 合
腺 肿 病 的 自身抗 体
,
经组
5
#Υ
。
( )Δ
Η %
Ε # Β # , ),
— 治疗 性 单 采 # % Β Ψ — 体外 血 液 和细胞 的解 − 即
ΞΕ
,
、
织 培 养 可 产 生 对 重 症肌无 力 症 和 突 眼 性 甲状 然 后 再 制 备 能 识 别 自身
,
毒
应 用 连 有 补 体 或偶 接 药物
。
毒素 的抗 体
可 增 加 此 疗 法 的疗 效
白血 病 也 可 用 自体移
抗 体 的 基 因 型 决 定 因子 的 抗 体 疗 上 述 疾病 是 有效 的
有用 的
,
。
。
这 种抗 体治
植 方 法 来治疗 保 存 部分 骨 髓 样 的杀 伤
,
,
即在 病 人病 情 缓解 时 收 集并 然 而用 大 剂 量 的化 疗 和放 疗
,
此外
,
,
单 抗 对于 检 测 除 了 技术 上 难度
一
,
多 态型 抗 原 如人 白细 胞 抗 原 6 9 ∋ − 也 是很
在生 产人 单 抗 时
杀死 所 有的癌 细 胞 时
正 常 细 胞 也受 到 了 同
。
最 后再 将 保 存 的 骨髓 经 单 抗等 处 单 抗 的作 用
4Λ:
外 无 论 从杂 交 瘤还 是 由
4 招?
3 .
转 化细 胞 产 生
理
去 除 白血 病 细胞 后 重 新植入
年第 Κ 卷第 : 期
主要 是在体 外特 异 性地 去 除癌 细胞
是
大
Χ
。
单杭 在 医药领 域 中的 应 用 具 有 以 下 三 个
特点
Χ
单抗 大 量 用 于 免疫 亲和层 析 的 主 要 障碍
4
,
Ο
4
Ο
高 度 专 一 性Μ
:
Ο
7
Ο
易 于 生 产 技 术 简单
。
,
,
用 于 免疫 亲 和 层 析需 要的 单 抗 量 很
。
重 演 性好 Μ
有大 规模 生 产 潜力
因 此 用 重组 / 0 ∋ 法 以 降低成 本 就 显 得
7
Ο
但是
同质 的
,
,
从 某 一 个 克 隆来 的 所 有 抗体 都 是 由 于 单 抗 结 合 于 抗 体的单 一
,
特 别 重要
因此 它 们 可 能均 具 有 弱 的亲 和 力 或
,
纯 化 条 件 苛 刻 要 求 吸 附在 柱 上 的 化
,
,
差 的生 物 活 性Μ
,
合 物 几 乎 以 纯 净 的 形 式 从 柱 上洗 脱 下 来
洗
部 位 因此 不 能形 成 晶 格 而 在 诊 断 用 途 中
晶 格对 于 凝 集 和 沉 淀 活 性 都 是 必 要 的 子 的 不 同 部位 来 加 以解 决
! 见表 4
。
脱 液的
56
或 盐 浓 度要 求很 高
,
。
,
这 可 通 过选
,
虽然
择 一 种不 会 形 成 强 键 的 抗 体 洗脱 下 来加 以 弥 补
一 种 切 换单 抗
:
Ο
使组份 较 易 被
这 也 可 以 通 过 几 个 抗 体 的棍 合物 导 向 同 一 分
) # 6 Ν ∗ Β ( 山 公司 开 发 了
“
”,
’
即 它 的 亲 和 系数 可 随 5 6
,
。
单 抗 在 医 药领 域 中 的 应 用及 商 品 化 情 况
表
7
的 微小 变 化而 变 化 洗脱 条 件 不 苛 刻 烦
。
用 于 人 体治 疗的 药 品 的批 准 手 续 麻 剂
4
Ο
为美 国 已批 准 生 产 的 单 抗 诊 断 试
。
表
用
4
Ο
单抗 在 医 药 中 应 用 及 商 品 化 情 况
应 用 方
法
途 …
4
+ !
.
、
体外 诊 断
− ∃ 免疫 分 析
肾上 腺 促 皮质 激 素 醛 固酮 血 管 紧 张肤
%∀
、
、
、
血 液贮 存 . ∃ !
Ψ
凝
集
ς )∀ 2
− 人 绒毛 膜 促 性 腺 激 素
、
、
Ε Ρ6
、
−
、
Τ
、
#,
( )∀
、
凝固
、
扩 电
Α 1∋
3 1∋
散 泳
因 子 皮 幽醇 雌 三 醇 铁 蛋 白 叶酸 盐 胰 岛素 澳大利 亚 抗 原 人生长 激 素 Ε
、
、
、
卵 泡刺 激 素
、
Τ 6
− 免疫 球蛋 白 促黄体 生成
、
激 素 甲状 旁 腺素 肾素 治 疗 药 物 监测 庆 大
、
、
、
、
妥布 以 及 其 它
氨 基 醋 试类 抗生素 地 高 辛等 − 促 甲状 腺素
、 、
Ξ ≅6
−
、
甲状 腺
Θ 1∋
3 1∋
素 几− 三 碘 甲状 腺原 氨 酸 幻 特异 性 免 疫 分 析 [ 血 清学 测 定 瘤
4−
、
、
Ξ:
−
、
Φ .
7 4
Η∋Η−
、
癌症 癌 胚 抗原 甲胎 蛋 白 前 列 腺 酸磷 酸醋 酶
、
、
人瘤 胎 神
、
经 抗原 遗 传型 抗 原 肺 癌 结 直肠 癌 人 乳房 癌 细 胞
、
、
、
、
黑色 素
.
7−
Β ) Υ ς ( 氏淋 巴 瘤
和其 它 淋 巴细胞 恶性 瘤
,
、
1
。
样 抗原
组 织相 容 抗 原多 晶 型测 定 和 组 织 排异 标 志 在 器 官移 植
中的 组 织 配型 遗 传 咨询 与 人 白 细胞 抗 原等位 基 因有 关 的 疾
病如 值 直 性脊 椎 炎 等 − , − 免 疫溯 节
Ξ
淋 巴 细胞 抗 原
、
.
淋 巴 细胞 抗 原 单 细 胞 抗原 核
、
、
Λ − 感染 性 疾 病 抗 葡 萄球菌抗 体 布鲁 氏杆 菌 狂 犬 病 毒 沙 门氏 菌 性传染
、
、
型 病 衣原体 淋病 皿 疤 疹 梅 毒 − 链 球菌抗 原
、
、
、
、
:−
细 胞内 分 析
Π − 类 风关 因 子 一 仁− 测 定 游 动 精 子 中 Ω ∴ 染 色体 鉴 别 胚 胎性 别
、
招 − 动情 及 排 卵 的检 测
:−
检 测 牛 奶 或其 它 食 品 中可 能 存在的霉 菌 或 其 它 污染物
’− 代替 土 壤 试 验检 测 病 毒 和 其它植物原 体 的 检测 农作 物 的 成 熟度
一
4ΛΛ
一
国 外 药学
—合成 药 生 化 药
、
、
制剂分 册
表
用
7
Ο
续−
途
]
− 4
应
肿 瘤 和 转 移 的放 射性造影 影
用
方
法
开 发情 况
研 究 与 开发 需: 年
,
体内 造影 诊 断 治序 剂
核造 影
上市
上市
:
Ο
识 别 淋 巴 细 胞 抗 原 的 单 抗 免疫 抑制 移植受 体 或处 理 受
无
无
研究 和 开发 需⊥
:年
Ο
− ∃ 免疫 治 字
穷 −
体 的 自体免疫 性
7
药 物 释 放系统
− 治 疗 细 菌或 病 毒 的 感 染
早期研究
: − 体 内 中毒 或药 物中毒 的 解救 幻 治疗癌 症 , − ∃ 单 抗 与 毒素 ∋ 链 的 结 合 抗毒素− 与 蓖 麻 毒 素和 白喉
毒素 结 合
7−
卜 与 月 质体 的结 合
,
− ∃ 抗 干 扰 素 的单 抗 − 用 于 蛋 白质 纯 化 的单 抗
、
、
亲 和层 析 无
,
, − 微生物 细 胞 产物 和 合成化 合物 的分 离 纯 化 及 浓 缩
侈 − 从 肿 瘤 细 胞中 分 离 出 正常 红 血 球生成 干 细 胞
组 骨 髓 的疗 法
用 于重
表
公
∋∗∗
〕(
7
美 国 已 批 准 生 产 的 单 抗 诊 断试 剂
诊 断项 目 分析 方 法
3 1∋
司
,
( 9
!
%
∗
Η∋ Η
前列 腺癌 的诊 断 −
12 3
∋ ∃∃# Β 2 # ∀ .
%_
!
( )Δ
, #∀ !
总 1 3 特 异性 2 ,
∃
卫 1∋
Α 1∋
(# Β
一
Ξ
. ) Τ
#∀ #_
一
Φ % Β
%
临 床 分 析−
1, 7= 12 3
Ε ΡΤ Ε ΡΤ
妊娠 −
乙肝 −
Ε ΡΤ
,
Α 1∋
仁% Β ( # Β Ρ#∀ ( !
Σ
∀
已 ∃∃ # #
免 疫放 射测 定
Α 1∋ Α 1∋
# ! Β
6 . ,∋Τ
/ )% 2 ∀ !
, 铁 蛋 白 维生 素 . 份 贫血 −
6
Ν∗
Β
)( # Ε Δ
铁蛋 白
,
,
12 3
,
Η∋Η
免 疫 放 射 测 定 [ 3 Β∋
Τ Ε
1
Υ
6
,
Ξ≅6
催 乳激 素 . [ Ξ 细 胞
免疫放射 测 定 [ Θ
Θ 1∋
1∋
∃ ς
∀
!
支原体
⎯
或免 疫过氧 化 酶
&
!
Ε∀
! ,
&
!
Ε∀
! ,
∀
Β Γ ( ! Ε −
抗
Ξ Ξ
Δ
:+
补 体
结合−
凝 集 作用
流 动 细胞 计
Α 1∋
细胞
‘
%
!
∃∃)∀ #
∀ ! #
ςΒ + ( !
%
∃∀
∃ ∋ ∀ ( ∃∗ Δ ,+ )# ,
Ε ΡΤ ΕΡ Τ
酶 连 免 疫吸 附法 试管
3 9 1≅ ∋
−
!
Β
2
%∀ ! ∀
#
≅
Ξ
Ν∀ (
# #
# _
.
Φ %
##
ς
压∀
茶
( )! ∀
%
碱
荧光 显 微 镜 家用−
≅Ν
# α ∃! ∀
−
%
支 原体
∃ Ε ΡΤ
Ε
∀
#
1 ∀ (# Β ∀
四
、
单 克 隆抗 体 的 开 发 情 况
。
试 剂 以 及 用 于 研 究 的 各 种 单抗 试 剂产 品
、 、
。
正
∋∗∗ ! ( 9 (
原 Ρ3
∗ % 已 上 市 前 列腺 癌 及 癌 胚 抗 ∋ − 单 抗 诊 断 试 剂 Ρ3 ∋ 可 用 来 监 测 肿
。
在 开 发癌 症 免 疫缺 陷 性疾 病 感 染 性 疾 病 以 及 细胞 表 面 抗 原 的诊 断 试 剂 用
. /
一
。
癌 症 和 免疫 缺
。
瘤 以 及 治疗 后的 情 况
.# ( ∀ / )ς Δ ! Ψ Δ
4 ϑΚ ?
目 前 正 从事 于监 测 药
。
陷 性疾病 的单 抗 治疗 剂 也 正 在 研 究 之 中
使
。
物 浓 度 和纯 化 单 抗 的 研 究工 作
单 抗治 疗 淋 巴 细 胞 瘤 已 初 告成 功 从
! , )
∀
上 市 了脑 膜 炎 的 诊 断
免疫 体 中 定 量 测 定 活 化的 Ξ 细 胞 的单 扰 正 在
4拐
年 第 Κ 卷第
:
期
申请 批 准
。
递 系 统 以 及免 疫 亲 和层 析 的 单 抗
# ,#
. Ζ (# Ε Α ! Δ
Β Ε % Δ
。
9% ∗
,
已 上 市 了 :;
ΒΒ
Γ
Δ ∀ 眼
#∀
与 ≅Ν ∀ ( # _ 公 司 目 前 正 在研 究
。
多 种 研 究 用 的 单抗 试 剂
细 胞 巨 大病 毒
∀
目前 正 在 开 发 用 于
∀ 3 Η, ( # ) . %
一 ,
癌 症 诊 断 试 剂 和 治疗 剂
Τ
# ∀ #( # )
Ρ
、
β −
、
病毒
≅ Ν , (#
,
,
和 ΡΥ
((#
Β
公 司正 在 用
,
卜 和 黄 曲霉 素 的诊 断 鉴 别 试 剂 该 公 司 与∋ α
单 抗 研 究 假 单胞 菌 前 一 公 司 用 于 诊断 后 一
公 司用于治 疗
6 Ν∗ ) Β (
, 。
Ο
( !
。
! ) 和 Θ Υ 泣 ς 公司 一起 开 发 用 于 人 α
。
体癌 症 的单 抗
还 与 上 海 肿瘤 研 究 所 共 同协
Μ
作 多 种 癌 症 的诊 断 和 治 疗研 究 工 作
并正 与
商之 一 上 市 品 种 有 乙 型 肝 炎 妊 娠 贫 血 甲 胎 蛋 白 ∋ Θ Η − 促 甲状 腺 素
、
Ε Δ #
。
是 生 产诊 断用 单 抗 的最 大 广
、 、 、
# Δ
∃Ζ ∃% Υ Β
Β + Δ Η! Υ
(,
, ( 公 司 共 同开 发 用 单 抗 纯
。
Ξ ≅6
− 和 癌症 等
,
化 . 细胞 生 长 因子
.
! !
的诊 断 试 剂
Ε
目前 正 在 开 发体 内 造 影 剂
、
主
和 # ∃
#
(# #
共 同开 发 上 市 的 有 分
。
要用 于 结 肠 癌
白血 病 和 黑 色 素瘤
”
。
开发 用
,
析 甲胎 和 干 扰素 的 单抗 试 剂 抗 的研 究 工 作 正 在 进 行
Ρ # ∀ (! ! Δ Β
。
监 控 繁殖 的单
于 放 射 性 同 位 素 或 细 胞 毒 素 的单 抗药
物 传 递
系统
Ξ
!
,
研 究 切 换抗 体 用 于 免 疫 亲 和 层 析
和 . % ς # Β 1∀ , (Β Υ
,
。
“
上市 了 乙 型 肝 炎 和 狂 犬 病 的
,
) ∀ 与 Ξ # )) 公 司达 成 关 于 免疫 毒 素的 协 议 Μ
Ν! ≅ ! + %
#∀
与
,
诊 断 试剂
。
目前 正 在 开 发 癌 症和标 记 免疫 反 测 定 心 肌梗 塞 和 干 扰 素水 平
。
(,
公司 分
∋Δ # ,
应 的诊 断 试 剂
别 达成 了 关 于 诊 断 试 剂的 协 议 和 与
#
的 体 内诊 断 试 剂 以 及肝癌 诊 断 试 剂
诊 断卵
+) % Δ ∃
,
达 成 单抗 试 剂 的协议
Δ ! ∃! ∀
%
巢 癌 和 胃肠 道 癌的 试 剂将 由
,
、
Α ! Δ
# Ε 公司上
Ρ 公 司 正合
! ∀
∃ ∋
∀
# ()∗ ! + α ,
公司 已 上 市 了
。
Ο
市 用 于 治疗 癌 症 细 菌 及病 毒感染 的单 抗产
品 也 正 在开 发
/
!
。
儿 种妊娠 诊断 试 剂 和 一 种排 卵 测 试 试 剂
在研 究治 疗 用 和 层 析 用的 单 抗
0#χ 3
∀
。
正
Ρ # (Γ ∀ Ρ
Β !
与
。
Θ
资 进 行癌 症造 影 方 面 的研 究
!∀
2 ∃%
∀
+ 0
# Υ#∃ % Β
是能 大量 提 供
。
. Ζ (# Ε ! Δ
公 司致 力 于 发 展 杂 交
。
层 析 和 诊 断 研 究 用单 抗 的 厂 家
,
产 品 可用 于
瘤 的 大 规 模培 养技 术 以 生 产 成 本 低 廉 的诊 断
用
、
# ! − 血 液 与组 织 的 配 型 试 验 区 别 髓 样
治 疗 用 和 传 送 药物 用 的单 抗
。
为 . 细胞 还 提供 用
与 . [ Ξ 细 胞 亚 细胞 蛋 白的 亚 类 种 单抗 试 剂
。
。
≅Υ ∗ , #
− ( 和 鉴 别 免疫 球
淋 巴瘤 的 病人 提供特 异 性 的单抗 于 纯 化 干 扰 素 的单 抗
Τ # ∀ # () Δ
。
目 前 已 上 市 可监 控 茶碱 量 的 一
,
勿
∀ ∀
, (#
,
与 ≅Ν ∀ (# _
公司 共 同
、
Γ Β Ε 。 已 上 市 风 疹的 诊 断 试 剂 (
用 来鉴
。
上市 了 9 # Ζ 2 ! 试剂
。
) # % Β 氏病 和 衣 原 体病 的 诊 断
Φ 以
别 淋 巴 细胞
,
并 生 产 衣 原 体诊断 试 剂
。
目前
正 在 研 究 呼 吸 道 疾 病病 原 体 Ρ
,
、
正 在 研 究 将 单 抗 用 于 诊 断 类 风 湿 关节 炎 和 用
及 性病 的诊 断试 剂 以 及用 于 治疗 剂 药物 传
作 免疫 抑制 剂
叶 绿素 衍 生 物 在 医 药 上 的应 用
胡龙 勤 综 述
许德余审
在过去 的 一 个 半世 纪 内
,
叶 绿 素及 其 在
,
。
叶 绿 素 及 其衍 生 物 治 疗 动 物 实 验 性 贫 血 取 得
植 物 生 命 中 的 作用 曾经 是 广 泛 研 究 的 课 题
满 意的 结 果 后
,
不 久 又 发 现 叶 绿 素衍 生 物 除
,
,
但 它在 医药 上 的应 用 则始 于 二十 年 代
4Λ Π
自用
能 促 进 造血 功 能 对 贫 皿 有 治疗 价值 外 还 具
国外 药 学
— 合 成 药 生化 药
、
、
制 剂 分册