金银花的有效成分及其提取工艺研究
赵 奇
（山东华鲁制药有限公司，山东 茌平 252100）
摘 要：本文通过对大量文献的总结，对金银花的分布、药用价值及化学成分作了详细的阐述；对金银花的有效成分绿原酸作了介绍，并对绿原酸的提取、分离、纯化方法作了描述和对比，为工业上绿原酸的制备提供了参考。
关键词：金银花 提取工艺 绿原酸 药用价值
金银花为忍冬科植物忍冬(Lonicera japonica Thunb)、红腺忍冬(Lonicera Lypoglauca Miq)、山银花(Lonicera confusa DC)或毛花柱忍冬 (Lonicera dasystyla Rehd) 的干燥花蕾或带初开的花。全世界忍冬植物大约200种，我国有98种，分布于全国各地，其中供药用的达47种。金银花为中医常用药，其味甘、寒，归肺、心、胃经，具有清热解毒、凉散风热之功效，主治痈肿疔疮、喉痹、丹毒、热毒血痢、风热感冒、温病发热等症，应用历史悠久。
1 理化成分
1.1 挥发油：挥发油是金银花的有效成分之一。目前在金银花挥发油中鉴定出的化学成分多达近70种。主要含芳樟醇、棕榈酸，其他化学成分为醇、醛、酯、酮、烷、烯、炔等有机化合物。
1.2 有机酸类：绿原酸类化合物也是金银花有效成分之一。包括绿原酸(Chlorogenic acid) 和异绿原酸(isochlorogenicacid)，其他有机酸还有咖啡酸(coffeic acid)和棕榈酸(Palmiticacid)。
1.3 黄酮类化合物：1949年冲七太郎首先从金银花中分离出木犀草素(luteolin)，后又得忍冬苷(lonicerin)，1995年高玉敏等首次从金银花中分离出四个黄酮类化合物；1996年黄丽瑛
等首次分离出corymbosin和5- 羟- 3’- 4’- 7- 三甲基黄酮(5-hydroxy- 3’- 4’- 7- t rimethoxyflavone)。
1.4 三萜类：娄红祥等从金银花水溶性部分中分离得到3种具有保肝活性的三萜皂苷；陈昌祥从金银花花蕾中分离得到了6个化合物，其中有一新化合物，命名为新长春皂苷F。
1.5 无机元素：金银花含微量元素共有15种：Fe，Mn，Cu，Zn，Sr，Ti，Mo，Ba，Ni，Cr，Pb，V，Co，Li，Ca。
1.6 醇类：金银花中鉴定出的醇类主要包括：β- 谷甾醇，肌醇，二十九烷醇等。
2 金银花的有效成分———绿原酸
金银花的主要有效成分之一为绿原酸。绿原酸是咖啡酸与奎宁酸（1- 羟基六氢没食子酸）的酯，分子中具有羧基、酯键以及多元醇和多酚结构，是一种苯丙素类化合物，化学名为3-O- 咖啡酰奎宁酸，结构式如图1所示。
图1 绿原酸结构式
绿原酸的药用历史悠久，具有抗菌、抗病毒等作用，对消化、血液系统和生殖系统疾病均有疗效。近年，绿原酸及其衍生物被确认是大鼠肝微粒体中葡萄糖- 6- 磷酸位移酶的特效性抑制剂，显示出其在治疗糖尿病方面的良好前景。绿原酸也是某些中药制剂质量控制的重要指标。
3 绿原酸的提取工艺正是由于绿原酸良好的药用价值以及良好的应用前景，国内外已有不少文献对金银花中绿原酸的分析、测定及提取工艺的研究，但提取方法各不相同。主要流程大致可以分为粗提、分离纯化、成品的制备等步骤，其中粗提方法很多。
3.1 绿原酸的提取方法
3.1.1 回流提取法：称取原料适量，在一定pH值和温度下，加入定量的提取溶剂，回流提取，过滤、滤渣，再用相同的提取溶剂在相同的条件下提取、过滤，将滤液合并并进行真空干燥至粉末。
3.1.2 超声提取法：称取原料适量，在一定pH值和温度下，加入定量的提取溶剂，超声波处理，过滤、滤渣，再用相同的提取溶剂在相同的条件下处理、过滤，将滤液合并并进行真空干燥至粉末。
3.1.3 微波提取法：称取原料适量，在一定pH值和温度下，加入定量的提取溶剂，置微波炉中处理一定的时间，取出冷却，再置微波炉中同样条件处理，如此重复6次，过滤，真空干燥至粉末。
3.1.4 渗漉法提取：称取原料适量，在一定pH值和温度下，加入定量的提取溶剂，置冰箱冷却，待结冰后取出，冰融化后装入渗漉筒，收集渗漉液真空干燥至粉末。3.1.5 煎煮法提取：称取原料适量，加入适量80%工业乙醇(pH值为
2.5)，煎煮一定的时间，过滤、滤渣，再用同样的方法煎煮相同时间，过滤，合并滤液真空干燥至粉末。
3.1.6 浸提法提取：称取原料适量，加入适量80%工业乙醇(pH值为2.5)，室温静置24h，过滤，滤液真空干燥至粉末。
4 绿原酸的分离、纯化工艺将提取液过滤，浓缩，拌入聚酰胺，真空烘干，研磨，过筛，得粗品，经聚酰胺柱层析分离，得产品得率和产品纯度(绿原酸含量)。另外可以绿原酸含量为指标，分别考察聚酰胺目数、洗脱剂、物料比、柱径与柱长比、流速、洗脱剂用量等影响因素，优化出最佳的分离工艺参数。对分离后的产品，选用不同的溶剂进行重结晶，从中选出最佳的溶剂进行精制，得到绿原酸精品。当然，分离纯化还有很多方法，比如利用大孔树脂也同样可以纯化绿原酸。
5 绿原酸的含量测定精确称取原料1.00g，加入30mL95%乙醇溶液，置于索氏提取器中回流提取，55℃回流提取4h，放置冷却至室温，过滤，定容至50 mL，
摇匀，精确吸取提取液0.1 mL，稀释至4 mL，以95 %乙醇作对空白，在紫外分光光度计331 nm处测定吸光度A值，按绿原酸的标准曲线计算其绿原酸的含量。
6 绿原酸的提取工艺对比
6.1 提取溶剂的选取：提取溶剂主要有两种，即水和乙醇（工业乙醇），不同的提取方法可以采用不同的提取溶剂。乙醇的提取效果明显好于水，但水作为溶剂，虽然提取率相对较低，但对环境无污染，生产成本相对较低，工业生产切实可行，所以目前仍然是大工业生产普遍采用的提取方法。
6.2 提取方法的选取：采用相同的溶剂、不同的提取方法对绿原酸进行提取，提取率最高的方法为超声波法，其次为煎煮法、微波法、浸提法等。
参考文献：
［1］张玲.山东金银花干花及鲜花挥发油成分研究.西北药学杂志，1998，13(6)：249- 250.
［2］刘祥兰，刘重芳，张英等.金银花中绿原酸提取工艺的比较和优化研究.中成药，2000，22(6)：402.
［3］黄丽瑛.中药金银花化学成分的研究.中草药，1996，27(11)：645- 647.
［4］娄红祥，郎伟君，吕木坚.金银花水溶性化合物的分离与结构确定.中草药，1996，27(4)：195.
［5］陈昌祥，王薇薇，倪伟等.金银花花蕾中三萜皂甙.云南植物研究，2000，22(2)：201- 208.
［6］吴二喜.忍冬与灰毡毛忍冬微量元素的分析.中草药，1998，19(6)：45- 47. ［7］李永梅，王天志，王志霄.细毡毛忍冬花蕾化学成分研究.中国中药杂志，2001，26(1)：45- 47.
［8］符史良，钟杰平，李海霞等.从金银花中提取绿原酸的工艺研究.广东海洋大学学报，2007，27(4)：70- 73.
［9］邓素兰，余继宏，邓芳琴.金银花中绿原酸提取工艺的对比.吉首大学学报(自然科学版)，2007，28(2)：109- 112.
金银花的有效成分及其提取工艺研究
赵 奇
（山东华鲁制药有限公司，山东 茌平 252100）
摘 要：本文通过对大量文献的总结，对金银花的分布、药用价值及化学成分作了详细的阐述；对金银花的有效成分绿原酸作了介绍，并对绿原酸的提取、分离、纯化方法作了描述和对比，为工业上绿原酸的制备提供了参考。
关键词：金银花 提取工艺 绿原酸 药用价值
金银花为忍冬科植物忍冬(Lonicera japonica Thunb)、红腺忍冬(Lonicera Lypoglauca Miq)、山银花(Lonicera confusa DC)或毛花柱忍冬 (Lonicera dasystyla Rehd) 的干燥花蕾或带初开的花。全世界忍冬植物大约200种，我国有98种，分布于全国各地，其中供药用的达47种。金银花为中医常用药，其味甘、寒，归肺、心、胃经，具有清热解毒、凉散风热之功效，主治痈肿疔疮、喉痹、丹毒、热毒血痢、风热感冒、温病发热等症，应用历史悠久。
1 理化成分
1.1 挥发油：挥发油是金银花的有效成分之一。目前在金银花挥发油中鉴定出的化学成分多达近70种。主要含芳樟醇、棕榈酸，其他化学成分为醇、醛、酯、酮、烷、烯、炔等有机化合物。
1.2 有机酸类：绿原酸类化合物也是金银花有效成分之一。包括绿原酸(Chlorogenic acid) 和异绿原酸(isochlorogenicacid)，其他有机酸还有咖啡酸(coffeic acid)和棕榈酸(Palmiticacid)。
1.3 黄酮类化合物：1949年冲七太郎首先从金银花中分离出木犀草素(luteolin)，后又得忍冬苷(lonicerin)，1995年高玉敏等首次从金银花中分离出四个黄酮类化合物；1996年黄丽瑛
等首次分离出corymbosin和5- 羟- 3’- 4’- 7- 三甲基黄酮(5-hydroxy- 3’- 4’- 7- t rimethoxyflavone)。
1.4 三萜类：娄红祥等从金银花水溶性部分中分离得到3种具有保肝活性的三萜皂苷；陈昌祥从金银花花蕾中分离得到了6个化合物，其中有一新化合物，命名为新长春皂苷F。
1.5 无机元素：金银花含微量元素共有15种：Fe，Mn，Cu，Zn，Sr，Ti，Mo，Ba，Ni，Cr，Pb，V，Co，Li，Ca。
1.6 醇类：金银花中鉴定出的醇类主要包括：β- 谷甾醇，肌醇，二十九烷醇等。
2 金银花的有效成分———绿原酸
金银花的主要有效成分之一为绿原酸。绿原酸是咖啡酸与奎宁酸（1- 羟基六氢没食子酸）的酯，分子中具有羧基、酯键以及多元醇和多酚结构，是一种苯丙素类化合物，化学名为3-O- 咖啡酰奎宁酸，结构式如图1所示。
图1 绿原酸结构式
绿原酸的药用历史悠久，具有抗菌、抗病毒等作用，对消化、血液系统和生殖系统疾病均有疗效。近年，绿原酸及其衍生物被确认是大鼠肝微粒体中葡萄糖- 6- 磷酸位移酶的特效性抑制剂，显示出其在治疗糖尿病方面的良好前景。绿原酸也是某些中药制剂质量控制的重要指标。
3 绿原酸的提取工艺正是由于绿原酸良好的药用价值以及良好的应用前景，国内外已有不少文献对金银花中绿原酸的分析、测定及提取工艺的研究，但提取方法各不相同。主要流程大致可以分为粗提、分离纯化、成品的制备等步骤，其中粗提方法很多。
3.1 绿原酸的提取方法
3.1.1 回流提取法：称取原料适量，在一定pH值和温度下，加入定量的提取溶剂，回流提取，过滤、滤渣，再用相同的提取溶剂在相同的条件下提取、过滤，将滤液合并并进行真空干燥至粉末。
3.1.2 超声提取法：称取原料适量，在一定pH值和温度下，加入定量的提取溶剂，超声波处理，过滤、滤渣，再用相同的提取溶剂在相同的条件下处理、过滤，将滤液合并并进行真空干燥至粉末。
3.1.3 微波提取法：称取原料适量，在一定pH值和温度下，加入定量的提取溶剂，置微波炉中处理一定的时间，取出冷却，再置微波炉中同样条件处理，如此重复6次，过滤，真空干燥至粉末。
3.1.4 渗漉法提取：称取原料适量，在一定pH值和温度下，加入定量的提取溶剂，置冰箱冷却，待结冰后取出，冰融化后装入渗漉筒，收集渗漉液真空干燥至粉末。3.1.5 煎煮法提取：称取原料适量，加入适量80%工业乙醇(pH值为
2.5)，煎煮一定的时间，过滤、滤渣，再用同样的方法煎煮相同时间，过滤，合并滤液真空干燥至粉末。
3.1.6 浸提法提取：称取原料适量，加入适量80%工业乙醇(pH值为2.5)，室温静置24h，过滤，滤液真空干燥至粉末。
4 绿原酸的分离、纯化工艺将提取液过滤，浓缩，拌入聚酰胺，真空烘干，研磨，过筛，得粗品，经聚酰胺柱层析分离，得产品得率和产品纯度(绿原酸含量)。另外可以绿原酸含量为指标，分别考察聚酰胺目数、洗脱剂、物料比、柱径与柱长比、流速、洗脱剂用量等影响因素，优化出最佳的分离工艺参数。对分离后的产品，选用不同的溶剂进行重结晶，从中选出最佳的溶剂进行精制，得到绿原酸精品。当然，分离纯化还有很多方法，比如利用大孔树脂也同样可以纯化绿原酸。
5 绿原酸的含量测定精确称取原料1.00g，加入30mL95%乙醇溶液，置于索氏提取器中回流提取，55℃回流提取4h，放置冷却至室温，过滤，定容至50 mL，
摇匀，精确吸取提取液0.1 mL，稀释至4 mL，以95 %乙醇作对空白，在紫外分光光度计331 nm处测定吸光度A值，按绿原酸的标准曲线计算其绿原酸的含量。
6 绿原酸的提取工艺对比
6.1 提取溶剂的选取：提取溶剂主要有两种，即水和乙醇（工业乙醇），不同的提取方法可以采用不同的提取溶剂。乙醇的提取效果明显好于水，但水作为溶剂，虽然提取率相对较低，但对环境无污染，生产成本相对较低，工业生产切实可行，所以目前仍然是大工业生产普遍采用的提取方法。
6.2 提取方法的选取：采用相同的溶剂、不同的提取方法对绿原酸进行提取，提取率最高的方法为超声波法，其次为煎煮法、微波法、浸提法等。
参考文献：
［1］张玲.山东金银花干花及鲜花挥发油成分研究.西北药学杂志，1998，13(6)：249- 250.
［2］刘祥兰，刘重芳，张英等.金银花中绿原酸提取工艺的比较和优化研究.中成药，2000，22(6)：402.
［3］黄丽瑛.中药金银花化学成分的研究.中草药，1996，27(11)：645- 647.
［4］娄红祥，郎伟君，吕木坚.金银花水溶性化合物的分离与结构确定.中草药，1996，27(4)：195.
［5］陈昌祥，王薇薇，倪伟等.金银花花蕾中三萜皂甙.云南植物研究，2000，22(2)：201- 208.
［6］吴二喜.忍冬与灰毡毛忍冬微量元素的分析.中草药，1998，19(6)：45- 47. ［7］李永梅，王天志，王志霄.细毡毛忍冬花蕾化学成分研究.中国中药杂志，2001，26(1)：45- 47.
［8］符史良，钟杰平，李海霞等.从金银花中提取绿原酸的工艺研究.广东海洋大学学报，2007，27(4)：70- 73.
［9］邓素兰，余继宏，邓芳琴.金银花中绿原酸提取工艺的对比.吉首大学学报(自然科学版)，2007，28(2)：109- 112.